vigilancia de Streptococcuspneumoniae en enfermedad invasora

Instituto de Salud Pública de ChileSección Bacteriología-Subdepto Enf. Infecciosas

Departamento Biomédico

Dr. Juan Carlos Hormazábal

Marco operativo la vigilancia en Chile

• Minsal

• SEREMI: Departamento o Unidades de Epidemiología en las 15 Regiones del país

• Red de Laboratorios

- Laboratorios locales

- Laboratorio Nacional y de Referencia (ISP)

RED DE VIGILANCIA ENFERMEDADES TRANSMISIBLES CHILE.

SUB SISTEMAS DE VIGILANCIA

Vigilancia Universal

VIGILANCIA ENFERMEDADES TRANSMISIBLES

Vigilancia de Morbilidad

Vigilancia

de Laboratorio

Vigilancia Ambiental

Vigilancia Basada en Centinela Vigilancia de Brotes de EnfermedadesTransmisibles

Vigilancia de Agentes Etiológicos Vigilancia de Resistencia Antimicrobiana

Control de Animales Vigilancia de Vectores Monitoreo Ambiental. Control de Alimentos

Vigilancia de Laboratorio

Agentes definidos (DS 158) que se detecten en laboratorios públicos o privados.

Objetivos:

• Detectar la circulación de agentes etiológicos, sus características y patrones de presentación

• Caracterizar brotes y epidemias

Responsable:

Instituto de Salud Pública (ISP)

Agentes Bajo Vigilancia de Laboratorio (Decreto N °°°°158).

ARTICULO 9º. Se les considerará objeto de vigilancia de laboratorio a los siguientes agentes microbiológicos causales de enfermedad (22 agentes)

Escherichia coli productor de Toxina de Shiga ( 0157 y otros) Chlamydia psittaciLeptospira spp. Coxiella burnetiiTrypanosoma cruziTreponema pallidumStreptococcus pyogenes (enfermedad invasora) Streptococcus pneumoniae (enfermedad invasora ) Enteropatógenos: V. parahaemolyticus, V. cholerae,C ampylobacter spp, Yersinia spp.,Salmonella spp., Shigella spp.Virus Hepatitis B Virus Hepatitis CVIHLegionella spp.Ehrlichia spp.Listeria monocytogenesStreptococcus agalactiae (enfermedad invasora)

Enfermedades de notificación obligatoria decreto 158, 2004

Articulo Nº 11 Vigilancia de resistencia de los antimicrobianos

- Streptococcus pneumoniae

- Mycobacterium tuberculosis

--Shigella spp.

- Salmonella spp.

- Haemophilus influenzae tipo b

- Staphylococcus aureus (VISA- VRSA)

- Neisseria meningitidis

- Neisseria gonorrhoeae

Agentes aislados de infección nosocomial, según disposiciones de la norma técnica existente en la materia.

Flujograma Vigilancia de Laboratorio

RED DE LABORATORIOS

ISP

Retroalimentación

Laboratorio LaboratorioPrivado Público

Retroalimentación

MINSAL Epidemiología

SEREMI de Salud U. de Vigilancia

Establecimiento Asistencial

Vigilancia Meningitis BacterianaMarco Regulatorio

•Neisseria meningitidis

•Streptococcus pneumoniae

•Haemophilus influenzae

•Cultivo e identificación

•Serotipificación

•Estudio de susceptiblidad

•PCR en tiempo Real

•Subtipificación por Electroforesis de Campo Pulsado (PFGE)

•MLST

LaboratorioISP

Vigilancia Meningitis Bacteriana

Vigilancia Laboratorio de S.

pneumoniae Invasor, Componentes

• Confirmación de cepas y estudio de susceptibilidad

• Estudio molecular de LCR por PCR en tiempo real

Meningitis Bacteriana

• Citoquímico/Citológico del LCR

• Tinción de Gram: es imprescindible realizarla, para orientar tratamiento.

• Cultivo: debe realizarse siempre considerado “gold estandar” .

• PCR en tiempo real (RT-PCR)

• Líquido de aspecto turbio • Proteínas: > 100 mg/dl• Recuento de leucocitos: > 100 células/mm3 • Glucosa : < 40mg/dl

• Técnica de látex en LCR es un método accesorio, que solamente puede orientar sobre el agente etiológico.

• PCR en tiempo real multiplex utilizado sondas especificas

ctrA : gen de superficie celular, forma parte del locus de la biosíntesis de la cápsula, está altamente conservada entre los aislados responsables de las infecciones invasivas por meningococo. Neisseria meningitidis

phy (pneumolisina): toxina formara de grandes poros, se une al colesterol de la membrana de las células eucarióticas. Streptococcuspneumoniae

bexA : gen que está implicado en la exportación del polisacárido capsular, se conserva en los seis tipos capsulares. H. influenzae

Diagnostico molecular y Vigilancia

Extracción de ADN Biorobot Qiagen (Control de extracción)

PCR en tiempo real (duplicado muestra)

Resultados

Protocolo Instituto Adolfo Lutz-OPS, Capacitación en Meningitis Bacteriana por PCR en tiempo Real Dic 2012

Diagnostico molecular y Vigilancia

Acciones a Nivel Local (Laboratorios de Microbiología)

Los laboratorios de hospitales públicos y privados del país que aíslen cepas de S. pneumoniae procedentes de enfermedad invasora y cultivados desde sitios o líquidos estériles.

Los laboratorios de microbiología deberán enviar estos aislamientos al Laboratorio de Referencia del ISP para su confirmación microbiológica y caracterización.

Vigilancia S. pneumoniae Invasor, Confirmación y caracterización de cepas

En Suma:

Acciones a Nivel Central (ISP - Laboratorio de Referencia)

En las cepas enviadas por el nivel local el ISP realizará la confirmación de la identificación microbiológica reportada y efectuará estudios de caracterizacion que incluyen serotipificación capsular y estudio de susceptibilidad antimicrobiana.

Confirmación microbiológica:Reacciones bioquímicasEspectrometría de masaSecuenciación genética

Serotipificación Capsular:Técnica de Quellung modificada, de acuerdo a los protocolos estandarizados de la red Latino Americana SIREVA OPS.

Estudio de susceptibilidad antimicrobiana:

El estudio de susceptibilidad se realizará por medio de la técnica de difusión (Kirby Bauer) según estándar CLSI (Clinical Laboratory Standards Institute) vigente, incluyendo al menos los siguientes antimicrobianos:

OxacilinaVancomicina EritromicinaLevofloxacino

Se realizará estudio de susceptibilidad por concentración inhibitoria mínima (CIM) según estándar CLSI vigente, a todos los aislamientos que presenten en el estudio de Oxacilina un halo de inhibición ≤ 20 mm en la prueba de difusión.

PenicilinaCefotaxima

INFORMES Y COMUNICACIÓN DE RESULTADOS.

� El Laboratorio de Referencia del ISP informará de los resultados de confirmación de identificación bacteriana y estudio de susceptibilidad al laboratorio local .

� El Laboratorio de Referencia del ISP enviará un informe consolidado al Departamento de Epidemiología del Ministerio de Salud. Este informe incluirá cepas confirmadas, serotipos identificados y estudio de susceptibilidad antimicrobiana.

� Anualmente el ISP publicará en su página WEB los resultados consolidados nacionales de este sistema de vigilancia.

� El ISP informará al Departamento de Epidemiología del Ministerio de Salud, cualquier hallazgo de importancia en Salud Pública producto de esta vigilancia.

GRACIAS