DETERMINACION DE PROTEINA(Mtodo micro Kjeldahl)Facultad de ciencias pecuariasPrograma de zootecnia

NUTRICIN ANIMAL

EL MTODO KJELDAHL:Comment by pc: Citar fuentesEl contenido de protena de los alimentos puede determinarse por medio de diversos mtodos. Entre ellos el mtodo Kjeldahl que se basa en la determinacin del nitrgeno en muestras de naturaleza orgnica, que es importante en muchos campos de anlisis, como los relacionados con las industrias agroalimentaria o farmacolgica o con el medio ambiente, entre otros. Desde hace ms de 100 aos se est utilizando el mtodo Kjeldahl para la determinacin del nitrgeno en una amplia gama de muestras alimentos y bebidas, piensos, forrajes, fertilizantes; para el clculo del contenido en protena. La forma ms frecuente es su cuantificacin de forma indirecta y aproximada, bien a partir del contenido en nitrgeno de la muestra, o bien deduciendo su cantidad a partir del contenido de uno o dos aminocidos particulares que conforman la protena, fciles de identificar y de cuantificar por su reactividad qumica especfica. Este segundo procedimiento conlleva una mayor inexactitud. La totalidad del nitrgeno de la muestra est en forma proteica, aun cuando la realidad es que, segn la naturaleza del producto, una fraccin considerable del nitrgeno procede de otros compuestos nitrogenados como creatina y creatinina, urea, amoniaco, etc., por ello se denomina protena bruta o protena total a la obtenida por este mtodo.

DETERMINACION DE PROTEINA(Mtodo micro Kjeldahl)MUESTRA UTILIZADA: pasto kikuyo (Pennisetum clandestinum)+ pasto saboya (Holcus lanatus L).

PROCEDIMIENTODISGESTION:Se pes 0.2 g de muestra y se transfiri al baln kjeldahl agregamos 2 gramos de mezcla cataltica luego se adiciono cuidadosamente 5 ml de cido sulfrico concentrado, se coloc el baln en el digestor y se puso a temperatura baja hasta observar la aparicin de humo blanco (toxico), despus se aumento la temperatura hasta que el lquido quedo totalmente claro y de un color azul verdoso, luego se dej enfriar.

DESTILACION POR ARRASTRE CON VAPOR Se midi 5 ml de cido brico al 4% en un Erlenmeyer, se adiciono 3 gotas de indicador mixto; a continuacin se encendi el destilador y se abri el suministro de agua , verificando el nivel del agua en el baln, posteriormente se coloc el Erlenmeyer que contiene el cido brico en el terminal de salida del equipo de destilacin, de modo que el terminal quede inmerso en el lquido; luego se transfiri el contenido del baln kjeldahl al destilador, luego se adiciono aproximadamente 50 ml de hidrxido de sodio al 32 % hasta neutralizar la solucin, este quedo con un color azul . Despus se destilo por un tiempo aproximado de 6 minutos y se comprob la destilacin de amoniaco con un indicador de PH.Finalmente se titul el destilado con cido sulfrico 0.1 N y se anot el volumen de cido sulfrico gastado y se observ que la coloracin cambio a rosado.EQUIPOS Y MATERIALES: balanza analtica digestor kjeldahl destilador de nitrgeno labconco bureta balones kjeldahl 50 ml Erlenmeyer 50 ml Papel indicador de PHREACTIVOS: cido sulfrico concentrado. Hidrxido de sodio al 32% cido brico al 4% cido sulfrico 0.1 N. Indicador mixto Rojo de metilo 0.05 g. Verde de bromocresol 0.25 gr. Etanol al 96%. Mezcla cataltica Sulfato de potasio anhidro 96.05 gr Sulfato de cobre penta hidratado 2.41gr Selenio 1.54 gr CALCULOS % protena= = V: Volumen (ml) de cido sulfrico gastado en la titulacin N: normalidad del cido sulfrico 14: peso mili equivalente de nitrgeno 6.25: factor para conversin de nitrgeno a protena Peso de muestra: peso (mg) de muestra

DISCUSIN DE RESULTADOS

Al realizar los clculos correspondientes para la determinacin de protena se obtuvo un valor de (7.847 %), que al compararlo con los datos que otros autores mencionan como lo es con el contenido promedio de PC (20.5%) reportado en Antioquia (Osorio 1999, Naranjo 2002) y el reportado por Aprez y Moncayo (2000) en el departamento de Nario (11.4 a 15.8%) y el reportado por Len et (2007) en el departamento de Cundinamarca (22.9%). Se puede decir que uno de los factores que incurren en este resultado, es el manejo agronmico que se le da al cultivo, como lo es en el inadecuado manejo de la fertilizacin, incremento de la carga animal, sobrepastoreo, factores ambientales presentados en cada regin del pas entre otros; que traen consigo aspectos negativos hacia las pasturas, modificando la calidad nutricional que a simple vista no se observan, pero que generan efectos negativos a nivel productivo, reproductivo, econmico, y ambiental. Comment by pc: Y lo de ustedes a que obedeci

Bibliografa: Determinacin de protenas de un alimento por el mtodo Kjeldahl. Valoracin con un cido fuerte. EM Garca Martnez - 2012 Valor nutricional del pasto kikuyo (Pennisetum clandestinum Hoechst Ex Chiov.) para la produccin de leche en Colombia (Una revisin): I - Composicin qumica y digestibilidad ruminal y posruminal - H J Correa C, M L Pabn R* y J E Carulla F(2008). lvarez, Jorge, L. 2001.- bioqumica nutricional y metablica del bovino en el trpico