quimica sanguinea

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se explican como realizar cada un de los parametros de una quimica sanguinea comunes, como glucosa, creatinina, urea, acido urico, colesterol trigliceridos

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GLUCOSA

FUNDAMENTO DEL MTODO La glucosa presente en la muestra origina, segn las reacciones acopladas descritas a continuacin, un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra.

Glucosa + O2 + H2O

glucosa oxidasa

Glucnico + H2O2peroxidasa

2 H2O2 + 4 Aminoantipirina + Fenol

Quinonaimina + 4 H2O

COMPOSICIN A. Reactivo: 10 x 50 mL. Fosfatos 100 mmol/L, fenol 5 mmol/L, glucosa oxidasa > 10 U/mL., peroxidasa > 1 U/mL., 4-aminoantipirina 0,4 mmol/L, pH 7,5 S. Patrn de Glucosa/Urea/Creatinina. Glucosa 100 mg/dL (5,55 mol/L), urea 50 mg/dL, Creatinina 2 mg/dL. Patrn primario acuoso.

CONSERVACIN Conservar a 2-8C. El Reactivo es estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserve bien cerrado y se evite la contaminacin durante su uso. Indicaciones de deterioro: Reactivo: Presencia de partculas, turbidez, absorbancia del blanco superior a 0,150 a 500nm (cubeta de 1 cm). Patrn: Presencia de partculas o turbidez. MUESTRAS Suero o plasma recogidos mediante procedimientos estndar. El suero o plasma deben separarse de los elementos celulares lo antes posible para evitar la glucolisis. La adicin de fluoruro sdico a la muestra de sangre previene la glucolisis. La glucosa en suero o plasma es estable 5 das a 2-8C. Los anticoagulantes como la heparina, EDTA, oxalato o fluoruro no interfieren.

MATERIAL Bao mara. Espectrofotmetro. Pipetas automtica 10 100 L. Pipetas automticas 100 1000 L. Puntillas amarillas y azules. Cubetas para espectrofotmetro. Tubos de ensayo. Cronometro.

PROCEDIMIENTO 1. Atemperar el Reactivo a temperatura ambiente. 2. Pipetear en tubos de ensayo (Nota 1):

Blanco. Patrn. Muestra. Patrn (S) 10 L. Muestra 10 L. Reactivo (A) 1 mL. 1 mL. 1 mL. 3. Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente (16-25C) o durante 5 minutos a 37C.

4. Leer la absorbancia (A) del Patrn y de la Muestra a 500 nm frente al Blanco. El color es estable durante al menos 2 horas.

CLCULOS La concentracin de glucosa en la muestra se calcula a partir de la siguiente frmula general:

A Muestra A Patrn

x C Patrn = C Muestra

Si se utiliza para calibrar el Patrn de Glucosa suministrado

A Muestra A Patrn

X 100 = mg/dL. Glucosa. X 5.55 = mmol/L. Glucosa.

VALORES DE REFERENCIA Suero y plasma:

Neonato, prematuro Neonato, a termino Nios, adultos.

25-80 mg/dL. = 1.39-4.44 mmol/L. 30-90 mg/dL. = 1.67-5.00 mmol/L. 70-105 mg/dL. = 3.89-5.83 mmol/L.

Estos valores se dan nicamente a ttulo orientativo; es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios intervalos de referencia. Segn el National Diabetes Data Group (US), valores de glucosa plasmtica en ayunas superiores a 140 mg/dL (7,77 mmol/L) obtenidos en ms de una ocasin, permiten el diagnstico de diabetes mellitus.

CONTROL DE CALIDAD Se recomienda el uso de los Sueros Control Bioqumica niveles I (cd. 18005, 18009 y 18042) y II (cd. 18007, 18010 y 18043), para verificar la funcionalidad del procedimiento de medida. Cada laboratorio debe establecer su propio programa de Control de Calidad interno, as como procedimientos de correccin en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias aceptables.

CARACTERSTICAS METROLGICAS Lmite de deteccin: 0,23 mg/dL = 0,0126 mmol/L. Lmite de linealidad: 500 mg/dL = 27,5 mmol/L. Cuando se obtengan valores superiores, diluir la muestra 1/4 con agua destilada y repetir la medicin. Repetibilidad (intraserie):

Concentracin media. 88 mg/dL. =4.84mmol/L. 326 mg/dL. =17.93mmol/L. Reproducibilidad (interserie):

CV 1.2% 0.9%

n 20 20

Concentracin media. 88 mg/dL. =4.84mmol/L. 326 mg/dL. =17.93mmol/L

CV 2.7% 1.9%

n 25 25

Sensibilidad: 4 mAdL/mg = 0,22 mAL/mmol Veracidad: Los resultados obtenidos con estos reactivos no muestran diferencias sistemticas significativas al ser comparados con reactivos de referencia (Nota 2). Los detalles del estudio comparativo estn disponibles bajo solicitud. Interferencias: la hemoglobina (> 3 g/L), la lipemia (triglicridos >1,25 g/L) y la bilirrubina (10 mg/dL) interfieren. Otros medicamentos y sustancias pueden interferir4. Estos datos han sido obtenidos utilizando un analizador. Los resultados pueden variar al cambiar de instrumento o realizar el procedimiento manualmente.

CARACTERSTICAS DIAGNSTICAS La glucosa es la principal fuente de energa del organismo. La insulina, producida en las clulas de los islotes del pncreas, facilita la entrada de glucosa en las clulas de los tejidos. Una deficiencia de insulina o una disminucin de su actividad ocasionan un aumento de la glucosa en sangre. Se encuentran concentraciones elevadas de glucosa en suero o plasma en pacientes con diabetes mellitus (dependiente de insulina o no dependiente de insulina) y con otras condiciones o sndromes. La hipoglucemia puede darse como respuesta al ayuno, o bien puede ser debida a frmacos, venenos, errores congnitos del metabolismo o gastrectoma previa. El diagnstico clnico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un nico ensayo, sino que debe integrar los datos clnicos y de laboratorio. NOTAS 1. Estos reactivos pueden utilizarse en la mayora de analizadores automticos. Solicite informacin a su distribuidor. 2. La calibracin con el patrn acuoso suministrado puede causar sesgos, especialmente en algunos analizadores. En estos casos, se recomienda calibrar usando un patrn de base srica (Calibrador Bioqumica, cd. 18011 y 18044).

UREA /BUN COLOR

Fundamento del mtodo: La urea presente en la muestra origina, segn las reacciones descritas a continuacin un indofenol coloreado que se cuantifica espectrofotomtricamente. Urea + H20 ureasa 2NH4 + CO2 NH4 + Salicilato + NaCIO nitropusiato Indofenol Composicin: A1. Reactivo: Salicilato sdico 62mmol/L, nitropusiato sdico 3.4mmol/L, tampn fosfatos 20 mmol/L, pH6.9. A2. Reactivo: ureasa > 500U/mL. A. Reactivo: hipoclorito sdico 7mmol/L, hidrxido sdico 150mmol/L. Irritante (Xi): R36/38: irrita los ojos y la piel, S26: En caso de contacto con los ojos, lvense inmediata y abundantemente con agua y acdase a un mdico, S37/39: sese guantes adecuados y proteccin para los ojos /la cara. s. patrn de Glucosa/Urea/Creatinina: Glucosa 100mg/dL, urea 50mg/dL (8.3mmol/L, BUN 23.3 mg/dL), creatinina 2mg/dL. Patrn primario acuoso. Conservacin: Conservar 2-8C, Los reactivos y el patrn son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminacin durante su uso. Indicaciones de deterioro: Reactivos: presencia de partculas, turbidez absorbancia del blanco superior a 0.250 a 600nm (cubeta de 1cm). Patrn: presencia de partculas y turbidez.

Preparacin de los reactivos: Reactivo (B) y patrn (S): estn listos para su uso. Reactivo (A): Vaciar el contenido de un vial de reactivo A2 en un frasco de reactivo A1 (nota 1) homogenizar. Si se desea preparar otros volmenes, mezclar en la proporcin: 1mL de reactivo A2 + 24mL reactivo A1. Estable dos meses de 2-8C (nota 2). Equipo adicional: Bao de agua a 37C. Analizador, espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 600 20nm. Muestras: Suero u plasma recogidos mediante procedimientos estndar. Diluir la orina 1/50 con agua destilada antes del ensayo. La urea en suero o plasma es estable 7 das de 2-8C. Se recomienda la heparina como anticoagulante. A urea en orina es estable 3 das a temperatura ambiente si no se produce crecimiento bacteriano. Procedimiento: 1. Atemperar los reactivos a temperatura ambiente. 2. Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Patrn Patrn de urea (S) _ 10L Muestra _ _ Reactivo (A) 1.0mL 1.0mL

Muestra _ 10L 1.0mL

3. Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente (16-25C) o durante 5 minutos a 37C. 4. Pipetear:

5. Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente (16-25C) o durante 5 minutos a 37C.

6. Leer la absorbancia (A) del patrn y de la muestra a 600nm frente al blanco. El color es estable durante al menos de 2 horas.

Clculos: La concentracin de urea en la muestra se calcula a partir de la siguiente formula general: Si se utiliza para calibrar el Patrn de Urea suministrado (Nota 3): Suero o plasma orina x 50 = mg/dL urea x 2500 = mg/dL urea x 23.3 =mg/dL BUN x 1165 =mg/dL BUN x 8.3 = mmol/L urea x 415 = mmol/L acido rico Valores de referencia: Suero y plasma: 15-39mg/dL urea = 7-18mg/dL BUN = 2.5-6.5mmol/L urea. En el periodo neonatal las concentraciones son inferiores mientras que en personas mayores de 60 aos se encuentran valores superiores en hombre que mujeres. Orina: 26-43g/24h urea =12-20g/24h BUN = 428-714mmol/24h urea. Estos valores se dan nicamente a ttulo orientativo; es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios intervalos de referencia.

Control de calidad: Se recomienda el uso de los Sueros Control Bioqumica Niveles I (cod. 18005, 18009 y 18042) y II (cod. 18007, 18010 y 18043), para verificar la funcionalidad del procedimiento de medida. Cada laboratorio debe establecer su propio programa de Control de Calidad interno, as como procedimientos de correccin en el caso de los controles no cumplan con las tolerancias aceptables. Caractersticas diagnosticas:

La urea se sintetiza en el hgado como un producto en la desaminacin de los aminocidos. Su eliminacin en la orina representa la principal va de excrecin de nitrgeno. Se encuentran concentraciones elevadas de urea en plasma como consecuencia de una dieta hiperproteica, aumento del catabolismo proteico, despus de una hemorragia gastrointestinal, ligera deshidratacin, shock e insuficiencia cardiaca o tratamiento de glucocorticoides (uremia prerrenal). La uremia postrenal est causada por condiciones que obstruyen el flujo urinario: nefrolitias