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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS EN

QUIMICA SANGUINEA

Vigencia:2018

Cód.: GMLCMA-120.11 Versión: 1

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

HOSPITAL DE LA VEGA – PUESTO

DE SALUD DE NOCAIMA

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Elaborado Por :

Francia L. Contreras

Revisado Por : Molchizu Arango

Aprobado Por :

Hernán Duran

Cargo: Líder laboratorio clínico Cargo: Asesora de Calidad planeacion

Cargo: Gerente

Fecha: Enero 26 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019 Fecha: Enero 29 de 2019

E.S.E HOSPITAL LA VEGA

MANUAL DE QUIMICA SANGUINEA

LABORATORIO CLINICO


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Cargo: Gerente


1-OBJETIVO:

Estandarizar los procedimientos en química sanguínea, para garantizar que la realización de los análisis cumpla con los parámetros establecidos en cada técnica, y por consiguiente se obtengan resultados confiables, con precisión y calidad.

2. ALCANCE

Este documento está dirigido a los profesionales que laboran en el área de química del Laboratorio Clínico.

3- RESPONSABILIDAD

La responsabilidad es de los profesionales que realiza los exámenes quien debe desarrollar los procedimientos acorde a lo establecido en los insertos y manuales y procedimientos de la institución.


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4. TECNICA DE GLICEMIA

FUNDAMENTO

Técnica enzimática líquida donde la glucosa de la muestras se oxida por la acción de la glucosa-oxidasa formándose peróxido de hidrógeno y gluconato. Se produce un compuesto de color rojo cuya intensidad de color es proporcional a la cantidad de glucosa presente en la muestra. La determinación enzimática de la glucosa se basa en la siguiente reacción GOD Glucosa + O2 +H2O--------------- ácido glucónico +H2O2 POD 2 H2O2 + 4AF +4 hidroxibenzoato------------ quinomina roja. CONDICIONES GENERALES

- Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja-tubo tapa amarillo) para obtener suero.

- Orina obtenida por micción simple y líquido cefalorraquídeo obtenido por punción.

-

CONDICIONES DEL PACIENTE

El paciente debe estar en ayunas o haber ingerido la última comida por lo menos 8 horas antes de la prueba no más de 12 horas.

CONDICIONES DE LAS MUESTRAS

Suero, plasma, sangre entera o líquido cefalorraquídeo


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a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual o plasma recolectado con anticoagulante comunes. También es posible realizar la determinación en otros líquidos biológicos tales como líquido cefalorraquídeo (LCR), líquido Pleural, etc. Cuando no es posible extraer sangre venosa o en caso de urgencia, la prueba se puede realizar en sangre capilar. b) Aditivos: En caso de que la muestra a emplear sea plasma, se recomienda el uso de anticoagulante G para su obtención (el mismo contiene fluoruro como conservador) o heparina. c) Sustancias interferentes conocidas: Los sueros o plasmas con hemólisis visible o intensa deben ser desproteinizados, como se indica en la técnica para sangre total. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente método. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: La destrucción enzimática de la glucosa sanguínea (glucólisis) por hematíes y leucocitos es proporcional a la temperatura a la que se conserva la sangre, siendo máxima a 37ºC. Este proceso no se inhibe aún en estado de congelación, por lo que la sangre debe centrifugarse dentro de las 2 horas de la extracción. El sobrenadante límpido se transfiere a otro tubo para su conservación. De esta forma la glucosa es estable 4 horas a temperatura ambiente o 24 horas refrigerada. En caso de no poder procesarse la muestra de la forma indicada, deberá adicionarse un conservador en el momento de la extracción.

CONDICIONES DE LOS REACTIVOS

Reactivos Provistos: Son estables en refrigerador (2 a 10ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.


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Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: Durante el uso, el Reactivo puede colorearse ligeramente no afectando su funcionamiento siempre que se procese un Blanco con cada lote de determinaciones y un Standard periódicamente. Desechar cuando las lecturas del Blanco sean superiores a 0,160 D.O. o las lecturas del Standard sean anormalmente bajas. CONDICIONES DE LA PRUEBA

- Temperatura de reacción: 37ºC CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD

Utilizar los elementos de protección para evitar el contacto directo con las muestras. Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual de Bioseguridad del Laboratorio. Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA

Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la funcionabilidad del procedimiento de medida. Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el numeral 5. GLOSARIO La Glucosa es un carbohidrato que se altera, en enfermedades metabólicas dando luego a Hiperglicemia, Diabetes Mellitus. La hiperglicemia crónica de la diabetes está asociada con daño a largo plazo, disfunción y falla de varios órganos, especialmente los ojos, riñones, nervios, corazón, y vasos sanguíneos. Existen


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múltiples factores causales de hiper o hipoglicemia, debe considerarse en cada caso la condición fisiológica y/o la patología presente en el paciente. DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

Metodo automatizado con equipo Mindray BS-240.

INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS

La determinación de glicemia en ayunas y la prueba de tolerancia a una carga de glucosa sirven para establecer el diagnóstico de DM y los trastornos del metabolismo de los carbohidratos. También sirven para controlar el tratamiento en los diabéticos y en pacientes con deshidratación, coma, hipoglicemia, insulinoma, acidosis y cetoacidosis. De acuerdo al comité de Expertos los criterios para establecer el diagnóstico de DM son: 1. Síntomas de diabetes (poliuria, polidipsia, pérdida de peso) más un hallazgo casual de niveles de glicemia mayor o igual a 200 mg/dl. Se define como casual al valor de glicemia encontrado en cualquier momento sin tener en cuenta ayuno o tiempo de la última comida. 2. Glicemia en ayunas mayor o igual a 126 mg/dl. Se define como ayuno la NO ingestión de calorías por lo menos 8 horas antes de la prueba. Si la glicemia post prandial está entre 140 mg/dl y 200 mg/dl. En este caso la prueba debe repetirse en un día diferente y si el resultado es el mismo hacer controles periódicos porque estos niveles pueden representar un factor de riesgo para Diabetes y enfermedad cardiovascular en un futuro. VALORES DE REFERENCIA

Glicemia en ayunas: 75 a 110 mg/dl


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Glicemia 2 hrs. post carga: < 140 mg/dl SIGNIFICADO CLINICO

La patología más común relacionada con el metabolismo de los hidratos de carbono es la diabetes mellitus. El diagnóstico precoz y el control de los pacientes diabéticos, tiene por objeto evitar la cetoacidosis y las complicaciones resultantes de la hiperglicemia, mediante el tratamiento adecuado.La diabetes mellitus (DM) se define como un grupo de enfermedades metabólicas caracterizadas por hiperglicemia crónica que resulta de defectos en la secreción de insulina, en su acción o en ambos. 5. TECNICA DE COLESTEROL

FUNDAMENTO

Técnica enzimática espectrofotométrica por química líquida donde el surfactante Triton X-100 disocia el colesterol y sus ésteres de los complejos lipoprotéicos presentes en la muestra. La enzima colesterol-ester-hidrolasa cataliza la hidrólisis de los ésteres de colesterol a colesterol. Luego el colesterol libre es oxidado en presencia de colesterol oxidasa formándose colestenona y peróxido de hidrógeno (H2O2). Finalmente el H2O2 junto con un leucocolorante genera un compuesto coloreado cuya densidad es proporcional a la concentración de colesterol presente en la muestra. La concentración de LDL/BD se calcula teniendo en cuenta el valor de los triglicéridos de acuerdo a la siguiente formula de Friedewald: LDL/BD = colesterol total – HDL – Triglicéridos/5 La secuencia reaccional es la siguiente: CHE Esteres del colesterol ---------------- colesterol + ácidos grasos


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CHOD Colesterol + O2 --------------------------- colesten-3-ona + H2O2 POD H2O2 + 4-AF + aceptor ----------------------- quinonimina roja

CONDICIONES GENERALES

Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja-tubo tapa amarilla) para obtener suero. CONDICIONES DEL PACIENTE

Para determinar el colesterol de alta/baja densidad requiere ayuno de 12 a 14 horas y no haber ingerido alcohol en las últimas 48 horas previas a la toma de la muestra. No es posible calcular los niveles de colesterol LDL/BD cuando el nivel de triglicéridos del paciente está por encima de 400 mg/dl.


Suero o plasma. a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual. b) Aditivos: En caso de que la muestra a emplear sea plasma, se recomienda únicamente el uso de heparina como anticoagulante para su obtención. c) Sustancias interferentes conocidas: - Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfieren en la determinación. - Los sueros o plasmas con hemólisis visible o intensa producen valores falsamente aumentados por lo que no deben ser usados.


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Cargo: Gerente


- No se observan interferencias por bilirrubinas hasta 80 mg/l, ácido ascórbico hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l, ni hemólisis ligera. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente método. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: El colesterol en suero es estable por lo menos 1 semana en refrigerador y 2 meses en congelador, sin agregado de conservantes. CONDICIONES DE LOS REACTIVOS

Reactivos Provistos: Son estables en refrigerador (2 a 10ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados. Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. son indicio de deterioro de los reactivos. En tal caso desechar. CONDICIONES DE LA PRUEBA

- Temperatura de reacción: 37ºC

CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD

Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las muestras. Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual de Bioseguridad del Laboratorio. Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.

GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA

· Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la funcionabilidad del procedimiento de medida.


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Cargo: Gerente


· Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el numeral 5.

GLOSARIO

El colesterol es un esteroide alcohólico no saturado y componente estructural muy importante de las membranas celulares y precursor de la síntesis de los ácidos biliares y las hormonas esteroides. Las 2/3 partes del colesterol están esterificadas y 1/3 está libre. DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO Metodo automatizado con equipo mindray Bs-240.


Sirve para evaluar pacientes con riesgo de enfermedad cardiovascular arterioesclerótica, para determinar colestásis hepática y para definir evidencia de abetalipoproteinemia. El colesterol sérico se eleva en hiperlipoproteinemias hereditarias, síndrome nefrótico, ictericia obstructiva con colestásis, cirrosis biliar primaria, embarazo, hipotiroidismo y otros desórdenes metabólicos. Niveles bajos de colesterol se encuentran en hipertiroidismo, mala absorción, hepatitis severa, desnutrición y deficiencias de apolipoproteínas. Existe una relación inversa entre el riesgo de enfermedad coronaria y la concentración de colesterol HDL, pues entre más baja sea hay mayor riesgo y viceversa. VALORES DE REFERENCIA

El panel de experto del Nacional Colesterol Educación programa (NCEP) provee los siguientes valores de colesterol: Deseable: Menor 200 mgr%


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Cargo: Gerente


Moderadamente alto 200 – 239 mgr% Elevado 240 mgr% Hay mucha variabilidad de los valores con relación a sexo, edad, dieta y riesgo coronario por lo cual es difícil establecer valores de referencia para la población general. En niños, adultos jóvenes y mujeres los valores son más bajos que en adultos mayores de 30 años. SIGNIFICADO CLINICO

La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad diagnóstica limitada. Sin embargo, su concentración varía de maneras más o menos predecible en un gran número de condiciones clínicas. Se ha visto que el colesterol es uno de los factores contribuyentes a la formación de ateromas dado que las complicaciones arterioscleróticas prevalecen en individuos hipercolesterolémicos. Diversos estudios epidemiológicos han permitido observar además, que el riesgo de contraer enfermedad cardiaca coronaria (ECC) para los individuos varones de más de 40 años con colesterolemia menor o igual a 210 mgr% es 3 veces menor entre individuos con más de 230 mgr% y 6 veces menor que entre individuos con más de 260 mgr%.

6. TECNICA DE TRIGLICERIDOS

FUNDAMENTO

Técnica colorimétrica basada en el método enzimático. Los triglicéridos se disocian de los complejos lipoprotéicos por la acción del triton X-100 y se hidrolizan por la lipasa a glicerol y ácidos grasos. Los triglicéridos incubados con lipoproteinlipasa (LPL) liberan glicerol y ácidos grasos libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato deshidrogenasa (GPO) y


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ATP en presencia de glicerol quinasa (GK) para producir glicerol-3-fosfato (G3P) y adenosina-5-difosfato (ADP). El G3P es entonces convertido a dihidroxiacetona fosfato (DAP) y peróxido de hidrogeno (H2O2) por GPO. Al final, el peróxido de hidrogeno (H2O2) reacciona con 4-aminofenazona (4-AF) y p-clorofenol, reacción catalizada por la peroxidasa (POD) dando una coloración roja: LPL Triglicéridos + H2O2 ------------------ Glicerol + Acidos grasos libres Glicerol quinaza Glicerol + ATP -------------------------- G3P + ADP GPO G3P + O2 ------------------------- DAP + H2O2 POD H2O2 + 4-AF + p-Clorofenol ----------------- Quinona + H2O La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de triglicéridos presentes en la muestra ensayada.


Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja- tubo tapa amarilla) para obtener suero.

CONDICIONES DEL PACIENTE

El paciente debe estar en ayunas durante por lo menos 13 horas y haber ingerido la noche anterior una comida liviana sin grasa.


Suero y plasma heparinizado o EDTA. Estabilidad de la muestra 5 días a 2-8ºC.


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No se han observado interferencias con bilirrubinas hasta 170 umol/L y hemoglobina hasta 10 g/L Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación de los triglicéridos. CONDICIONES DE LOS REACTIVOS

Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Indicadores de deterioro de los reactivos: - Presencia de partículas y turbidez. - Absorbancia (A) del Blanco a 505 nm mayor o igual 0,14. CONDICIONES DE LA PRUEBA

- Temperatura de reacción: 37ºC/ 15-25ºC


Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las muestras. Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual de Bioseguridad del Laboratorio. Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: Normal y Patológico.


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Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador.

GLOSARIO:

Los triglicéridos son lípidos absorbidos en la dieta y también producidos en forma endógena o a partir de los carbohidratos. Los triglicéridos, ésteres de ácidos grasos, representan la principal forma de la grasa corporal; su función principales el de almacenar y proveer la energía celular La concentración plasmática de los triglicéridos representa el balance entre la velocidad de entrada y de remoción de la grasa corporal, varía con la edad y con el sexo ..

REFERENCIAS

labtest Vademecum. DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

Metodo automatizado con equipo mindray Bs-240. INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS

Las principales razones para la determinación de los triglicéridos son: · Evaluar el perfil lipídico de un paciente con riesgo de enfermedad cardíaca coronaria Calcular el colesterol de baja densidad (BD,LDL) cuando no se dispone de medición directa utilizando la fórmula: LDL colesterol = colesterol total – (Tg/5 + colesterol HDL). Esta fórmula solo es válida para concentraciones de triglicéridos menores a 400 mg/dl. Determinar si la disminución del colesterol de alta densidad (HDL,AD) es el resultado de una hipertrigliceridemia para desarrollar la estrategia de tratamiento más adecuada.


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Cargo: Gerente


Evaluar riego de pancreatitis por hipertrigliceridemia cundo los niveles están por encima de 1000 mg/dl. Determinar etiología en caso de xantomas eruptivos o plantares y de lipemia retinalis. Confirmar si la hipertrigliceridemia secundaria es producida como un efecto colateral del tratamiento con antihipertensores, hipocolesterolémicos y otras drogas como isotretionina, estrógenos, etc. Hacer seguimiento de la efectividad de dieta, ejercicio y terapia con drogas en pacientes con altos niveles de Triglicéridos.

VALORES DE REFERENCIA

Hombres: 40 a 160 mgr% Mujeres : 35 a 135 mgr% Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia. SIGNIFICADO CLINICO

Su medición es importante en el diagnóstico y manejo de las hiperlipedemias, Estas enfermedades pueden tener origen genético o ser secundaria a otras tales como nefrosis, diabetes mellitus y disfunciones endocrinas. El aumento de triglicéridos se ha identificado como un factor de riesgo en enfermedades arterioscleróticas. Los triglicéridos son insolubles en la sangre y por esto no circulan libremente en el suero sino que son transportados como quilomicrones (80%) y lipoproteínas pre-beta (55%); se elevan marcadamente después de una comida y hay una demora de 10-12 horas para que se depuren de la circulación después de haber comido y persiste por otras 6-8 horas. Hay hipertrigliceridemia en muestras de pacientes sin ayuno y en hiperlipoproteinemia primaria (tipos I, II, III, IV, V). En hiperlipoproteinemias secundarias debidas a infusión de lípidos parenterales en pacientes


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Cargo: Gerente


hospitalizados, diabetes mellitus, isquemia cardiaca, cetoacidosis diabética, alcoholismo agudo, anticonceptivos orales, síndrome nefrótico, insuficiencia renal crónica, esteroides, pancreatitis aguda, gota, hipotiroidismo, embarazo, infecciones por Gram (-) y enfermedad de depósito de glicógeno. Hay hipotrigliceridemia en dieta restrictiva de grasas, hipertiroidismo, drogas hipolipidicas, síndromes de malabsorción, desnutrición severa y en abeta o hipobetalipoproteinemia hereditaria.

7. TECNICA DE COLESTEROL HDL

FUNDAMENTO

Las HDL (lipoproteínas de alta densidad) se separan de los quilomicrones, las VLDL (lipoproteínas de densidad muy baja) y LDL (lipoproteínas de baja densidad) por la adición de un reactivo precipitante (ácido fosfotúngstico - cloruro de magnesio) a suero o plasma. Tras la centrifugación, el contenido de colesterol de la fracción HDL, que permanece en el sobrenadante, se determina mediante el método colorimétrico enzimático que utiliza colesterol esterasa, colesterol oxidasa, peroxidasa y 4- aminoantipirina/fenol (cromógeno).


Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja) para obtener suero. CONDICIONES DEL PACIENTE


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Para determinar el colesterol de alta/baja densidad requiere ayuno de 12 a 14 horas y no haber ingerido alcohol en las últimas 48 horas previas a la toma de la muestra. No es posible calcular los niveles de colesterol LDL/BD cuando el nivel de triglicéridos del paciente esta por encima de 400 mg/dl.


Suero o plasma. a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual. b) Aditivos: En caso de que la muestra a emplear sea plasma, se recomienda únicamente el uso de heparina como anticoagulante para su obtención. c) Sustancias interferentes conocidas: -Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfieren en la determinación. - Los sueros o plasmas con hemólisis visible o intensa producen valores falsamente aumentados por lo que no deben ser usados. - No se observan interferencias por bilirrubinas hasta 80 mg/l, ácido ascórbico hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l, ni hemólisis ligera. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente método. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: El colesterol HDL en suero es estable por lo menos 1 semana en refrigerador y 2 meses en congelador, sin agregado de conservantes.


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Reactivos Provistos: Son estables en refrigerador (2 a 10ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados. Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. son indicio de deterioro de los reactivos. En tal caso desechar. CONDICIONES DE LA PRUEBA

- Temperatura de reacción: 37ºC.




Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la funcionabilidad del procedimiento de medida. Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el numeral 5.


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GLOSARIO

Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) son partículas de origen no bien establecido, estrechamente relacionadas con el transporte reverso del colesterol y con una comprobada función antiaterogénica que se debe sólo en parte a este transporte reverso, y en parte a otras múltiples propiedades relacionadas con inflamación, función endotelial y mecanismos de aterotrombosis y fibrinólisis.

DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO


Es sabido que tener colesterol HDL (C-HDL) bajo es un factor de riesgo independiente para enfermedad coronaria y eventos cardiocerebrovasculares y por muchos años se recomendó elevar el C-HDL por medios nofarmacológicos, como dejar de fumar, perder el exceso de peso, combatir el sedentarismo y controlar la diabetes, en pacientes con LDL en valores normales. 9.3- VALORES DE REFERENCIA Hasta 35 mg/dl= 0.91 mmol/L Riesgo Elevado Mayor de 60 mg/dl = mayor a 1.56 mmol/L Riesgo bajo SIGNIFICADO CLINICO

Un valor de Colesterol-HDL bajo es un indicador independiente y firme de

enfermedad coronaria. En ATP III4, el valor bajo de Colesterol-HDL quedó

categóricamente definido como un nivel < 40 mg/dL (1,04 mmol/L). Un valor bajo de Colesterol-HDL se emplea como un estimador de riesgo a 10 años, de padecer la enfermedad cardíaca coronaria debiéndose ésta a diversas causas: triglicéridos elevados, sobrepeso y obesidad, inactividad física, tabaco,


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ingestas muy altas de carbohidratos (> 60% de calorías) y ciertas drogas como los esteroides, anabolizantes y los agentes progestionales.

8. TECNICA DE ACIDO URICO

FUNDAMENTO

El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno (2H2O2) que en presencia de peroxidasa (POD), 4-aminofenazona (4-AF) y 2-4 Diclorofenol Sulfonato (DCPS) forma un compuesto rosáceo: Uricasa Ácido úrico + 2H2O + O2 ---------------- Alantoína + CO2 + 2H2O2 POD 2H2O2 + 4-AF + DCPS ------------------ Quinonaimina + 4H2O La intensidad de quinonaimina roja formada es proporcional a la concentración de ácido úrico presente en la muestra ensayada. CONDICIONES GENERALES

Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja-tubo tapa amarilla) para obtener suero. 5.1- CONDICIONES DEL PACIENTE El paciente debe estar en ayunas.


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Suero o plasma. Estabilidad 3-5 días a 2-8ºC y 6 meses a -20ºC. No se han observado interferencias con bilirrubina hasta 170 umol/L, hemoglobina hasta 130 mg/dL y ácido ascórbico hasta 570 umol/L. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la determinación del ácido úrico.


Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Una vez abierto es estable 1 mes si se mantiene los viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación. Indicadores de deterioro de los reactivos: -Presencia de partículas y turbidez. - Absorbancia (A) del Blanco a 520 nm mayor o igual 0,16. CONDICIONES DE LA PRUEBA



Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las muestras.


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Cargo: Gerente


Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual de Bioseguridad del Laboratorio. Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. GARANTIA DE CALIDAD DE LA PRUEBA

Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados: Normal y Patológico. Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, los reactivos y el calibrador. Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias. GLOSARIO El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nucleicos y nucleoproteínas .Los uratos son sintetizados por el organismo y también se obtienen de la dieta. El 75% se elimina por vía renal y el 25% por vía intestinal. Los uratos se filtran libremente por el glomérulo y aproximadamente el 98% es absorbido por el túbulo proximal. Aproximadamente el 8% de la carga filtrada se excreta en la orina. El ácido úrico es el producto final del metabolismo de las purinas. DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO

Metodo automatizado con equipomindray Bs-240.


Los niveles elevados en suero o plasma se acompañan generalmente de niveles elevados en orina. La principal indicación de la prueba es el diagnóstico de hiperuricemia (gota) como resultado del aumento en la síntesis de las purinas. Hay aumento fisiológico por el uso de drogas tales como: agentes antineoplásicos, ácido etacrinico, adrenocorticosteroides, hidroclorotiazida, ciclosporina,


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Cargo: Gerente


pirazinamida, espironolactona, teofilina, indapamide, prednisona, propanolol, triamterene, warfarina, espironolactona y ácido acetilsalicílico. VALORES DE REFERENCIA

Mujeres : 2.5 a 6.8 mgr% = 149 a 405 umol/L Hombres: 3.6 a 7.7 mgr% = 214 a 458 umol/L SIGNIFICADO CLINICO

El ácido úrico y sus sales son el producto final del metabolismo de las purinas. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico.Habitualmente la concentración de ácido úrico en suero varía de un individuo a otro de acuerdo a diversos factores tales como: sexo, dieta, origen étnico, constitución genética, embarazo. Niveles altos de ácido úrico son indicativos de patología renal y generalmente se asocian con la gota. Y son indicio de desorden en el metabolismo de las sustancias que lo originan o de defectos en su eliminación. Los niveles altos en suero o plasma se acompañan generalmente de niveles elevados en orina.También hay niveles altos en leucemias y policitemias por aumento del metabolismo de las nucleoproteínas, por ingestión de alimentos ricos en nucleoproteínas , en pacientes con disminución de la función renal, en ciegos y alcohólicos. El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio. 9. TECNICA DE CREATININA

FUNDAMENTO

La creatinina y otros compuestos de la muestra reaccionan con el ácido pícrico en medio alcalino dando un complejo color rojo que se cuantifica mediante lectura


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fotométrica. La determinación de creatinina puede llevarse a cabo por medio de una técnica de punto final, o por una técnica cinética eliminándose en ambas el color que se debe a los cromógenos no creatinina. En el primer caso, la adición de ácido al medio, destruye el picrato de creatinina pero no el color formado por los demás compuestos. Por lo tanto la diferencia entre la lectura fotométrica antes y después del agregado de ácido, permite cuantificar la creatinina en forma específica. En la técnica cinética, los cromógenos no creatinina, reaccionan dentro de los primeros 30 segundos de iniciada la reacción, que se comporta como cinética de primer orden para la creatinina. De manera que entre los 30 segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la reacción, el incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina. CONDICIONES GENERALES

Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja –tubo tapa amarilla) para obtener suero. Para depuración de creatinina se requiere muestra de orina. CONDICIONES DEL PACIENTE

No es necesario ayuno previo. CONDICIONES DE LAS MUESTRAS

Suero u orina a) Recolección: Obtener suero de la manera usual. En el caso de orina, obtener orina de 2 horas o de 24 hs empleando un recipiente perfectamente limpio y manteniendo en el refrigerador (2-10ºC) durante la recolección. Medir la diuresis, tomar una alícuota y efectuar una dilución 1:50 de la misma. En caso que la diuresis sea 2 hs, multiplicar el volumen medido por 12 para calcular la cantidad de creatinina eliminada durante 24 hs. b) Aditivos: No se requieren.


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c) Sustancias interferentes conocidas: Sueros con concentraciones de bilirrubina mayores a 50 mg/l producen valores erróneos. No interfieren: hemólisis ligera o moderada, hiperlipemia, disproteinemia ni cromógenos no-creatinina (tales como glucosa, ácido ascórbico, cetoácidos, glutatión o ergotionina). d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: La creatinina en suero es estable hasta 24 horas y en orina hasta 4 días, en refrigerador sin agregado de conservadores. CONDICIONES DE LOS REACTIVOS

Reactivos provistos: estables a temperatura ambiente hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Reactivo de Trabajo: a temperatura ambiente y protegido de la luz es estable una semana a partir de la fecha de su preparación. CONDICIONES DE LA PRUEBA

- Temperatura de reacción: 25ºC El control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar entre 22 y 30ºC. CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD

Utilice los elementos de protección para evitar el contacto directo con las muestras. Tenga en cuenta las normas universales de bioseguridad descritas en el manual de Bioseguridad del Laboratorio.

Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.


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Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la funcionabilidad del procedimiento de medida. Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el numeral 5. GLOSARIO

La creatinina es importante en metabolismo del músculo porque sirve de almacenamiento de fosfatos de alta energía a través de la síntesis de fosfocreatina. La creatinina es un anhídrido de creatinina y se forma, de una manera constante, por una reacción espontánea e irreversible de la creatinina perdiéndose una molécula de agua. La creatinina libre no es reutilizada por el organismo y funciona solamente como producto de desecho de la creatinina. La excreción urinaria es directamente proporcional a la masa muscular; aproximadamente se excretan 0.5 mmol de creatinina por kilogramo de masa muscular.



La determinación de creatinina sérica se utiliza principalmente para evaluar la función renal pero se considera que para éste propósito es más sensible determinar la depuración de creatinina corregida para la superficie corporal.


SUERO Y PLASMA Hombres: 0.9 - 1.3 mg/dl Mujeres: 0.6 - 1.1 mg/dl


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ORINA Hombres: 14 – 26 mg/dl/ 24h Mujeres: 11- 20 mg/dl /24 h SIGNIFICADO CLINICO

La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina del organismo casi exclusivamente por filtración renal. Su determinación en suero, así como el clearance de creatinina endógena constituyen parámetros importantes para el diagnóstico de diversas afecciones renales. Sin embargo, debido a los problemas prácticos inherentes a la determinación del clearance (recolección de orina en niños, etc), la determinación de creatinina sérica es más utilizada como índice de funcionalismo renal. Su concentración se eleva en daño renal y es un indicador más específico que el nitrógeno ureico. También se puede elevar en necrosis músculo esquelética, trauma, distrofia muscular progresiva, esclerosis lateral amiotrofia, amiotonia congénita dermatomiositis, miastenia gravis, ayuno prolongado, hipertiroidismo y acidosis diabética. Hay aumento en el suero por interferencia analítica con algunos métodos por las siguientes drogas o constituyentes: acetaminofén, acetoacetato, acetona, ácido amino y beta hidroxihipúrico, ácidos linoléico, nalidíxico, oxaloacético, úrico, ASA, ampicilina, bilirrubina, cefalosporinas, alanina, cafeína, creatina, citrato, clofibrato, dipirona, EDTA, espironolactona, estreptomicina, etanol, fenitoína, glucosa, hemoglobina, heparina, hidantoína, hidroclorotiazida, lactato,tobramicina, triglicéridos y warfarina. Hay disminución por interferencia analítica por: ácido ascórbico, bilirrubina, oxalato de sodio y fenacemide. La depuración de creatinina mide simultáneamente concentraciones de la sustancia en sangre y orina y sirve para evaluar la función renal total porque es un buen indicador de la rata de filtración glomerular (GFR).


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10. TECNICA DE BUN

FUNDAMENTO

La urea presente en la muestra origina, según las reacciones descritas a continuación, un indofenol coloreado que se cuantifica espectrofotométricamente. ureasa Urea+H20 --------------------- 2NH4+C02 nitroprusiato NH4+ salicilato+NACLO --------------------------------- Indofenol CONDICIONES GENERALES

Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja –tubo tapa amarilla) para obtener suero. Para depuración de creatinina se requiere muestra de orina. CONDICIONES DEL PACIENTE

No es necesario ayuno previo. CONDICIONES DE LAS MUESTRAS

Suero u orina a) Recolección: suero plasma u orina recogidos mediante procedimientos estándar. Diluir la orina1/50 con agua destilada antes del ensayo. b) Aditivos: No se requieren. c) Sustancias interferentes conocidas: Sueros con concentraciones de bilirrubina mayores a 50 mg/l producen valores erróneos. No interfieren: hemólisis ligera o moderada, hiperlipemia, disproteinemia ni cromógenos no-creatinina (tales como glucosa, ácido ascórbico, cetoácidos, glutatión o ergotionina). d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:


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La urea en suero o plasma es estable 7 días a 2 a 8 C. Se recomienda la heparina como anticoagulante. La urea en orina es estable 3 días a temperatura ambiente si no se produce crecimiento bacteriano.


Reactivos provistos: Conservar a 2 a8 C Los reactivos y el patrón son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso. Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco superior a 0.250 a 600 nm (cubeta de 1 cm). Patrón: presencia de partículas y turbidez. CONDICIONES DE LA PRUEBA

Temperatura de reacción: temperatura ambiente: 16 a 25 ºC o durante 5 minutos a 37 ºC. CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD




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Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la funcionabilidad del procedimiento de medida. Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas anteriormente. GLOSARIO

La urea representa el producto final en el metabolismo proteico realizado por el hígado, presente en el torrente circulatorio y eliminado por el riñón. Toda perturbación renal en la capacidad de eliminar desechos orgánicos, se refleja en un aumento de la urea, que hoy en día se expresa por medio de su nitrógeno ureico, con el que indirectamente se correlaciona y expresa el nivel de urea sanguínea. DESCRIPCION DEL PROCEDIMIENTO


La determinación de urea se utiliza principalmente para evaluar la función renal pero se considera que para éste propósito es más sensible determinar la depuración de creatinina corregida para la superficie corporal. VALORES DE REFERENCIA

7 a 20 mg/dl SIGNIFICADO CLINICO

La urea se sintetiza en el hígado como un producto de la desanimación de los aminoácidos. Su eliminación en la orina representa la principal via de excreción del nitrógeno.


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Se encuentran concentraciones elevadas de urea en plasma como consecuencia de una dieta hiperproteica, aumento del catabolismo proteico, después de una hemorragia gastrointestinal, ligera deshidratación, shock e insuficiencia cardiaca o tratamiento con glucorticoides(uremia prerrenal). La uremia posrrenal esta causada por condiciones que obstruyen el flujo urinario: nefrolitiasis, tumor o hipertrofia prostática. La utilidad de la urea como indicador de la función renal esta limitada por la variabilidad de su concentración plasmática como consecuencia de factores no renales. El diagnostico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio. 11. TECNICA DE BILIRRUBINA TOTAL

FUNDAMENTO

Técnica enzimática líquida donde la Bilirrubina reacciona específicamente con el acido sulfanilico diazotado produciendo un pigmento color rojo violáceo (azobilirrubina) que se mide fotocolorimetricamente a 530 nm. CONDICIONES GENERALES

Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja-tubo tapa amarillo) para obtener suero. CONDICIONES DEL PACIENTE

El paciente debe estar en ayunas o haber ingerido la última comida por lo menos 8 horas antes de la prueba no mas de 12 horas. Evitar el consumo de medicamentos que alteran los resultados y elevan los valores de la bilirrubina como son: Alopurinol, esteroides, antibióticos, antimalaricos , entre otros.


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Suero, plasma, sangre entera o líquido cefalorraquídeo a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual o plasma recolectado con anticoagulante comunes. También es posible realizar la determinación en otros líquidos biológicos tales como líquido cefalorraquídeo (LCR), líquido Pleural, etc. b) Aditivos: No se requiere de ningún aditivo especial o preservativo. c) Sustancias interferentes conocidas: la hemolisis abundante puede causar disminución en los valores de hemoglobina debido a la inhibición de la oxihemoglobina. Sueros lipemicos pueden producir resultados elevados falsos. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente método. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la bilirrubina sérica es estable hasta 7 días a 2-8 C, Puede ser congelada por 3 meses protegida de la luz.. CONDICIONES DE LOS REACTIVOS

Reactivos Provistos: Conservar a 15-30 C. Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso. Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco superior a 0.05 a 540 nm (cubeta de 1 cm). CONDICIONES DE LA PRUEBA




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Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la funcionabilidad del procedimiento de medida. Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el numeral 5. GLOSARIO

La bilirrubina es un producto derivado del metabolismo de la hemoglobina. Los hematíes al degradarse liberan la hemoglobina que es metabolizada a dos moléculas del grupo hem y el grupo globina, el grupo hem se transforma en biliverdina y esta en bilirrubina a la cual se le llama no conjugada o indirecta. Al pasar por el hígado esta bilirrubina se conjuga con acido glucoronido transformándose en bilirrubina conjugada o directa.



El aumento de la bilirrubina indirecta o bilirrubina total puede indicar:

- Síndrome de Crigler-Najjar

- Eritroblastosis fetal


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- Enfermedad de Gilbert

- Cicatrización de un hematoma grande (sangrado bajo la piel)

- Anemia hemolítica

- Enfermedad hemolítica del recién nacido

- Ictericia fisiológica(normal en los recién nacidos)

- Anemia depranocitica

- Reacción a una transfusión

- Anemia perniciosa


Bilirrubina total: hasta 1.0 mg/dl SIGNIFICADO CLINICO

La determinación de bilirrubina sirve para determinar si el paciente tiene una enfermedad hepática o una obstrucción en vías biliares. La ictericia de la decoloración de la piel y de la esclerótica del ojo que ocurre cuando la bilirrubina se acumula en la sangre a un nivel mayor de 2.5 mg/dl aproximadamente. La ictericia se presenta porque los glóbulos rojos son descompuestos demasiado rápido para que el hígado los procese, lo cual podría suceder debido a una enfermedad hepática o a una obstrucción en vías biliares. 12. TECNICA DE BILIRRUBINA DIRECTA


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FUNDAMENTO

La bilirrubina directa reacciona con acido sulfanilico diazotizado en una solución acuosa acida para formar azobilirrubina un cromófilo purpureo con absorbancia máxima aproximadamente 550nn. La intensidad del color resultante es directamente proporcional a la concentración de bilirrubina directa.


Sangre total tomada en tubo sin anticoagulante (tubo tapa roja-tubo tapa amarillo) para obtener suero. CONDICIONES DEL PACIENTE

El paciente debe estar en ayunas o haber ingerido la última comida por lo menos 8 horas antes de la prueba no mas de 12 horas. Evitar el consumo de medicamentos que alteran los resultados y elevan los valores de la bilirrubina como son: Alopurinol, esteroides, antibióticos, antimalaricos , entre otros. CONDICIONES DE LAS MUESTRAS

Suero, plasma, sangre entera o líquido cefalorraquídeo a) Recolección: Se debe obtener suero de la manera usual o plasma recolectado con anticoagulante comunes. También es posible realizar la determinación en otros líquidos biológicos tales como líquido cefalorraquídeo (LCR), líquido Pleural, etc.


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b) Aditivos: No se requiere de ningún aditivo especial o preservativo. c) Sustancias interferentes conocidas: la hemolisis abundante puede causar disminución en los valores de hemoglobina debido a la inhibición de la oxihemoglobina. Sueros lipemicos pueden producir resultados elevados falsos. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente método. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la bilirrubina sérica es estable hasta 7 días a 2-8 C, Puede ser congelada por 3 meses protegida de la luz. CONDICIONES DE LOS REACTIVOS

Reactivos Provistos: Conservar a 15-30 C. Los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminación durante su uso. Indicios de inestabilidad o deterioro de los Reactivos: presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco superior a 0.05 a 540 nm (cubeta de 1 cm). CONDICIONES DE LA PRUEBA

- Temperatura de reacción: 37ºC CONDICIONES DE BIOSEGURIDAD


· Se recomienda el uso de sueros control niveles I y II para verificar la funcionabilidad del procedimiento de medida.


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· Para obtener resultados confiables se deben tener en cuenta todas las condiciones en cuanto a las muestras, los reactivos y la prueba descritas en el numeral 5. GLOSARIO

La bilirrubina es un producto derivado del metabolismo de la hemoglobina. Los hematíes al degradarse liberan la hemoglobina que es metabolizada a dos moléculas del grupo hem y el grupo globina, el grupo hem se transforma en biliverdina y esta en bilirrubina a la cual se le llama no conjugada o indirecta. Al pasar por el hígado esta bilirrubina se conjuga con acido glucoronido transformándose en bilirrubina conjugada o directa.


Método automatizado con equipo mindray Bs-240.


La determinación de bilirrubina sirve para determinar si el paciente tiene una enfermedad hepática o una obstrucción en vías biliares. Si hay una obstrucción de las vías biliares, la bilirrubina directa se acumula, escapa del hígado y termina en la sangre. Si los niveles son lo suficientemente altos, una parte aparecerá en la orina. Solo la bilirrubina directa aparece en la orina. El aumento de la bilirrubina directa generalmente significa que las vías biliares están obstruidas. El aumento de la bilirrubina directa puede indicar:

- Obstrucción de las vías biliares

- Cirrosis

- Síndrome de dubin-Johson


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- Hepatitis

- Colestasis intrahepatica


Bilirrubina Directa 0.1 a 0.3 mg/dl

SIGNIFICADO CLINICO

La bilirrubina directa es la bilirrubina conjugada por el hígado, principalmente con el acido glucuronico y en pequeños porcentajes con glucosa, Xilosa, proteínas y sulfatos, obteniendo así solubilidad en agua. Los adultos normales tienen muy bajos niveles de bilirrubina conjugada, usualmente menor a 0.1 mg/dl. La bilirrubina directa esta aumentada cuando existe una obstrucción del árbol biliar intrahepatico o extrahepatico (colanginitis, colelitiasis, colecistitis, tumores de vías hepáticas, tumores de cabeza,de páncreas, pelotón de Ascaris), en el daño hepatocelular(sobretodo en el periodo tardio del proceso patológico), en la colestasis, en el síndrome de Dubin-Johson, en el síndrome de Rotor. También esta aumentada en la ictericia hapetocelular o parenquimatosa. Es decir en las enfermedades que cursan con insuficiencia hepática: hepatitis vírica o toxica, cirrosis hepática, necrosis hepática aguda, tumores de hígado y abscesos.

14. TECNICA DE LA FOSFATASA ALCALINA

FUNDAMENTOS DEL METODO

La fosfatasa alcalina (ALP o monoéster ortofosfórico fosfohidrolasa, EC. 3.1.3.1.) hidroliza al p-nitrofenilfosfato (p-NFF), que es incoloro, produciendo fosfato y p-nitrofenol a pH alcalino. La velocidad de aparición del anión p-nitrofenolato


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(amarillo) a 405 nm, es proporcional a la actividad enzimática de la muestra. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solución de buffer DEA (dietanolamina), conteniendo sales de magnesio. B. Reactivo B: solución conteniendo p-nitrofenil fosfato (p-NFF). Concentraciones finales DE.......................................................................1,0mol/l Mg.......................................................................0,5 mmol/l p-NFF ..................................................................10 mmol/l

INSTRUCCIONES PARA SU USO

Reactivos Provistos: listos para usar. Estos pueden usarse separados o como Reactivo único, mezclando 4 partes de Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A + 1 ml Reactivo B).

INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Cuando el espectrofotómetro es llevado a cero con agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo único (premezclado) superiores a 0.900 D.O. son indicio de deterioro del mismo.

PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de química clínica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.

ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10o C) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abiertos, no deben permanecer destapados y fuera del refrigerador por períodos prolongados. Evitar contaminaciones. Reactivo único (premezclado): estable 1 mes en refrigerador (2-10o C) a partir de la fecha de su preparación.


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MUESTRA Suero o plasma heparinizado a) Recolección: se debe obtener suero de la manera usual. b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma, debe usarse heparina como anticoagulante. c) Sustancias interferentes conocidas: - No se observan interferencias por bilirrubina hasta 16 mg/dl, lípidos hasta 1000 mg/dl de triglicéridos, ni heparina hasta 50 UI/ml. - Hemólisis moderadas (hasta 200 mg/dl) no producen interferencias pero hemólisis muy intensas pueden producir variaciones en los resultados. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el presente método. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: emplear suero preferentemente fresco. En caso de no efectuarse el ensayo dentro de las 6 horas posteriores a su obtención, la muestra debe conservarse en el congelador. MATERIAL REQUERIDO (no provisto) - Espectrofotómetro. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. GLOSARIO

La fosfatasa alcalina es una enzima ampliamente distribuida en el organismo. Hidroliza los monoésteres del ácido ortofosfórico en medio alcalino. En el adulto proviene en parte del hígado (fracción termoestable) y en parte del hueso, sistema reticuloendotelial y vascular (fracción termolábil), dando lugar a distintas isoenzimas. La actividad sérica de fosfatasa alcalina ósea, en condiciones normales, alcanza su mayor actividad en los niños en edad de crecimiento (llegando a triplicar los niveles del adulto) debido a que esta isoenzima se localiza en los osteoblastos (relacionados con la calcificación y formación de estructuras óseas). También es fisiológico el aumento que se produce al final del primer trimestre del embarazo, a expensas de la isoenzima placentaria que en este período alcanza niveles máximos (aproximadamente el doble de los valores normales). Entre las patologías que afectan la actividad sérica de fosfatasa alcalina, se pueden citar: carcinomas metastásicos en hígado y en hueso (productores de enzima), colestasis biliar, fenómenos osteoblásticos, trastornos de malabsorción acompañados de lesiones ulcerosas (donde la deficiencia de


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vitamina D produce osteomalacia con el consecuente aumento de fosfatasa alcalina ósea) e incluso lesiones en vías de reparación tales como infarto agudo de miocardio, infarto pulmonar o renal.


En adultos normales (edades entre 20 y 60 años) se observan los siguientes rangos: Temperatura 37o C Valores en adultos (U/l) 65-300 Debido al proceso osteoclástico, la isoenzima ósea se encuentra aumentada en la niñez y adolescencia (hasta los 18 años, aproximadamente) proporcionando valores de fosfatasa alcalina más elevados que en los adultos. En condiciones normales se consideran los siguientes valores límites: Temperatura 37o C Valores en niños y adolescentes (U/l) hasta 400 hasta 450 hasta 645. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. Los anticoagulantes comunes (tales como EDTA disódico, oxalato, citrato o fluoruro) producen inhibición de la actividad de fosfatasa alcalina. El reactivo puede colorearse en presencia de trazas de soluciones de limpieza a base de hipoclorito. Asegurarse de enjuagar abundantemente con agua desmineralizada todo el material que pueda estar en contacto con hipoclorito, incluyendo las agujas y conexiones de los analizadores, cuando se emplea la técnica automática


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BIBLIOGRAFIA

LABTEST REACTIVOS DE DIAGNOSTICO Group. Vademecum: reactivos, consumibles y accesorios. http://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/resultados-de-un-analisis-bioquimico-12160

e.s.e hospital la vega manual de quimica...

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