album quimica sanguinea

7/27/2019 ALBUM Quimica Sanguinea

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Qumica sanguneaINTRODUCCIN:

Es un grupo de exmenes de sangre que suministran informacin acerca del metabolismo delcuerpo. El examen se denomina comnmente anlisis metablico bsico. Tambin llamado CHEM-20 es un grupo de 20 pruebas qumicas realizadas en el suero, la porcin de la sangre sin clulas.

Estas pruebas abarcan colesterol total, protena total y diversos electrolitos en el cuerpo, comosodio, potasio, cloro y muchos otros.El resto de las pruebas examina los qumicos que ayudan a que el hgado y el rin descompongandiversas sustancias.

Significado de los valores anormales:

Los resultados anormales pueden deberse a una variedad de afecciones diferentes, incluyendoinsuficiencia renal, problemas respiratorios y complicaciones relacionadas con la diabetes.

Parmetros a estudiar

Glucosa Bilirrubina total y directa

Urea Fosfatasa alcalina y acida

Creatinina Asparto aminotransferasa (GOT)

cido rico Alanina aminotransferasa (GPT)

Colesterol

Triglicridos

GLUCOSA
http://www.shands.org/health/Spanish%20HIE%20multimedia/5/002257.htmhttp://www.shands.org/health/Spanish%20HIE%20multimedia/5/002350.htmhttp://www.shands.org/health/Spanish%20HIE%20multimedia/5/002350.htmhttp://www.shands.org/health/Spanish%20HIE%20multimedia/5/002257.htm


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INTRODUCCIN:

La glucosa es una fuente importante de energa para la mayora de las clulas del cuerpo,incluyendo las del cerebro. Los carbohidratos se encuentran en las frutas, los cereales, el pan, lapasta y el arroz. Estos se transforman rpidamente en glucosa en el cuerpo, lo que eleva el nivel dedicho azcar en la sangre.

FUNDAMENTO DEL MTODO:

La glucosa presente en la muestra origina, segn las reacciones acopladas descritas a continuacin,un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra.

Glucosa + O2 + H2O Glucnico +H2O2

2H2O2 + 4 Aminoantipirina + Fenol Quinonaimina + 4H2O

COMPOSICIN

A. Reactivo: 10 x 50 mL. Fosfatos 100 mmol/L, fenol 5 mmol/L, glucosa oxidasa > 10 U/mL.,peroxidasa > 1 U/mL., 4-aminoantipirina 0,4 mmol/L, pH 7,5

S. Patrn de Glucosa/Urea/Creatinina. Glucosa 100 mg/dL (5,55 mol/L), urea 50 mg/dL, Creatinina2 mg/dL. Patrn primario acuoso.

MUESTRAS

Suero o plasma recogidos mediante procedimientos estndar. El suero o plasma deben separarsede los elementos celulares lo antes posible para evitar la glucolisis. La adicin de fluoruro sdico ala muestra de sangre previene la glucolisis.

La glucosa en suero o plasma es estable 5 das a 2-8C. Los anticoagulantes como la heparina,EDTA, oxalato o fluoruro no interfieren.

MATERIAL

Bao mara. Espectrofotmetro. Pipetas automtica 10 1000L Puntillas amarillas y azules.

Peroxidasa

Glucosa oxidasa
http://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3genohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3geno


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Cubetas para espectrofotmetro. Tubos de ensayo. Cronometro.

PROCEDIMIENTO

1. Atemperar el Reactivo a temperatura ambiente.

2. Pipetear:Blanco. Patrn. Muestra.

Patrn (S)MuestraReactivo (A)

--

1 mL.

10 L.-

1 mL.

-10 L.1 mL.

3. Agitar bien e incubar durante 10 minutos a temperatura ambiente (16-25C) o durante 5minutos a 37C.


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4. Leer la absorbancia (A) del Patrn y de la Muestra a 500 nm frente al Blanco. El color esestable durante al menos 2 horas.

CLCULOS

La concentracin de glucosa en la muestra se calcula a partir de la siguiente frmula general:

A Muestra

A Patrn

Si se utiliza para calibrar el Patrn de Glucosa suministrado.

A MuestraA Patrn

X 100 = mg/dL. Glucosa.X 5.55 = mmol/L. Glucosa.

x C Patrn = C Muestra


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VALORES DE REFERENCIA

Suero y plasma:

Neonato, prematuroNeonato, a terminoNios, adultos.

25-80 mg/dL. = 1.39-4.44 mmol/L.30-90 mg/dL. = 1.67-5.00 mmol/L.70-105 mg/dL. = 3.89-5.83 mmol/L.

Estos valores se dan nicamente a ttulo orientativo; es recomendable que cada laboratorioestablezca sus propios intervalos de referencia.

Segn el National Diabetes Data Group (US), valores de glucosa plasmtica en ayunas superiores a140 mg/dL (7,77 mmol/L) obtenidos en ms de una ocasin, permiten el diagnstico de diabetes

mellitus.

CARACTERSTICAS METROLGICAS

Lmite de deteccin: 0,23 mg/dL = 0,0126 mmol/L.

Lmite de linealidad: 500 mg/dL = 27,5 mmol/L. Cuando se obtengan valores superiores, diluir lamuestra 1/4 con agua destilada y repetir la medicin.

Repetibilidad (intraserie):

Concentracin media. CV n

88 mg/dL. =4.84mmol/L.326 mg/dL. =17.93mmol/L.

1.2%0.9%

2020

Reproducibilidad (interserie):

Concentracin media. CV n88 mg/dL. =4.84mmol/L.326 mg/dL. =17.93mmol/L

2.7%1.9%

2525

Sensibilidad: 4 mAdL/mg = 0,22 mAL/mmol

Veracidad: Los resultados obtenidos con estos reactivos no muestran diferencias sistemticassignificativas al ser comparados con reactivos de referencia (Nota 2). Los detalles del estudiocomparativo estn disponibles bajo solicitud.


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Interferencias: la hemoglobina (> 3 g/L), la lipemia (triglicridos >1,25 g/L) y la bilirrubina (10mg/dL) interfieren. Otros medicamentos y sustancias pueden interferir4.

Estos datos han sido obtenidos utilizando un analizador. Los resultados pueden variar al cambiarde instrumento o realizar el procedimiento manualmente.

CARACTERSTICAS DIAGNSTICAS

La glucosa es la principal fuente de energa del organismo. La insulina, producida en las clulas delos islotes del pncreas, facilita la entrada de glucosa en las clulas de los tejidos. Una deficienciade insulina o una disminucin de su actividad ocasionan un aumento de la glucosa en sangre.

Se encuentran concentraciones elevadas de glucosa en suero o plasma en pacientes con diabetesmellitus (dependiente de insulina o no dependiente de insulina) y con otras condiciones osndromes.

La hipoglucemia puede darse como respuesta al ayuno, o bien puede ser debida a frmacos,

venenos, errores congnitos del metabolismo o gastrectoma previa.

El diagnstico clnico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un nico ensayo, sinoque debe integrar los datos clnicos y de laboratorio.

NOTAS

1. Estos reactivos pueden utilizarse en la mayora de analizadores automticos. Soliciteinformacin a su distribuidor.

2. La calibracin con el patrn acuoso suministrado puede causar sesgos, especialmente enalgunos analizadores. En estos casos, se recomienda calibrar usando un patrn de base srica

(Calibrador Bioqumica, cd. 18011 y 18044).

UREA /BUN COLOR


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Fundamento del mtodo:La urea presente en la muestra origina, segn las reacciones descritas a continuacin un indofenolcoloreado que se cuantifica espectrofotomtricamente.

Urea + H20 ureasa 2NH4 + CO2

NH4 + Salicilato + NaCIO nitropusiato Indofenol

Composicin:A1. Reactivo: Salicilato sdico 62mmol/L, nitropusiato sdico 3.4mmol/L, tampn fosfatos20 mmol/L, pH6.9.A2. Reactivo: ureasa > 500U/mL.A3. Reactivo: hipoclorito sdico 7mmol/L, hidrxido sdico 150mmol/L.

Preparacin de los reactivos:Reactivo (B) y patrn (S): estn listos para su uso.

Reactivo (A): Vaciar el contenido de un vial de reactivo A2 en un frasco de reactivo A1 (nota 1)homogenizar. Si se desea preparar otros volmenes, mezclar en la proporcin: 1mL de reactivo A2+ 24mL reactivo A1. Estable dos meses de 2-8C (nota 2).

Equipo adicional: Bao de agua a 37C. Analizador, espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 600 20nm.

Muestras:Suero u plasma recogidos mediante procedimientos estndar. Diluir la orina 1/50 con aguadestilada antes del ensayo.La urea en suero o plasma es estable 7 das de 2-8C. Se recomienda la heparina comoanticoagulante.A urea en orina es estable 3 das a temperatura ambiente si no se produce crecimiento bacteriano.

Procedimiento:1. Atemperar los reactivos a temperatura ambiente.


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2. Pipetear en tubos de ensayo:Blanco Patrn Muestra

Patrn de urea (S)

MuestraReactivo (A)

-

-1.0mL

10L

-1.0mL

-

10L1.0mL

3. Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente (16-25C) odurante 5 minutos a 37C.

4. Leer la absorbancia (A) del patrn y de la muestra a 600nm frente al blanco. El color esestable durante al menos de 2 horas.


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Clculos:La concentracin de urea en la muestra se calcula a partir de la siguiente formula general:

Si se utiliza para calibrar el Patrn de Urea suministrado (Nota 3):

Suero o plasma Orina

x 50 = mg/dL ureax 23.3 =mg/dL BUNx 8.3 = mmol/L urea

x 2500 = mg/dL ureax 1165 =mg/dL BUN

x 415 = mmol/L acido rico

Valores de referencia:Suero y plasma : 15-39mg/dL urea = 7-18mg/dL BUN = 2.5-6.5mmol/L urea. En el periodo neonatallas concentraciones son inferiores mientras que en personas mayores de 60 aos se encuentranvalores superiores en hombre que mujeres.

Orina: 26-43g/24h urea =12-20g/24h BUN = 428-714mmol/24h urea.Estos valores se dan nicamente a ttulo orientativo; es recomendable que cada laboratorioestablezca sus propios intervalos de referencia.

Caractersticas diagnosticas:La urea se sintetiza en el hgado como un producto en la desaminacin de los aminocidos. Sueliminacin en la orina representa la principal va de excrecin de nitrgeno.Se encuentran concentraciones elevadas de urea en plasma como consecuencia de una dietahiperproteica, aumento del catabolismo proteico, despus de una hemorragia gastrointestinal,ligera deshidratacin, shock e insuficiencia cardiaca o tratamiento de glucocorticoides (uremiaprerrenal).La uremia postrenal est causada por condiciones que obstruyen el flujo urinario: nefrolitiasis,tumor o hipertrofia prosttica. La utilidad de la urea como indicador de la funcin renal est


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limitada por la variabilidad de su concentracin plasmtica como consecuencia de factores norenales.El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un nico ensayo, sino quedebe integrar los datos clnicos y de laboratorio.

Notas:

1. Es conveniente lavar bien el vial de reactivo (A2) con una pequea cantidad de la mezclapreparada, con el fin de arrastrar los restos que mojan las paredes del frasco.

2. El reactivo A liquido es muy sensible a la temperatura, por lo que se recomienda consrvaloestrictamente a 2-8C. La estabilidad indica que se reduce si se mantiene durante periodosprolongados a temperatura ambiente.

3. La calibracin con el patrn acuoso suministrado puede causar sesgos, especialmente enalgunos analizadores. En estos casos, se recomienda calibrar usando un patrn de base srica(Calibrador Bioqumica, cod. 18011 y 18044).

CREATININA


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FUNDAMENTO DEL METODO

La creatinina presente en la muestra reacciona con el picrato en el medio ralcalino originando uncomplejo coloreado. Se mide la velocidad de formacin de dicho complejo en periodos inicialescortos, evitndose as la interferencia de otros compuestos.

PREPARACION DEL REACTIVO

Patrn (S): Esta listo para su usoReactivo de trabajo: Mezclar volmenes iguales de reactivo A y de reactivo B homogenizar. Estableun mes a 2 8C.

MUESTRAS

Suero, plasma y orina, recogidos por los mtodos estndar. Diluir la orina fresca 1/50 con aguadestilada antes de medir. Los anticoagulantes como la heparina, EDTA, oxalato o fluoruro nointerfieren.

La creatinina en las muestras es estable 24 hrs a 2 8C

PROCEDIMIENTO

1. Precalentar el reactivo de trabajo e instrumento a 37C


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2. Pipetear en una cubetaReactivo de trabajo 1.0ml

Patrn (S) o muestra 0.5um

3. Incubar durante 5 minutos a 37 C una vez pasado este tiempo inmediatamente colocar0.5um de la muestra problema

4. Inmediatamente insertar la cubeta en el fotmetro. Poner el cronometro en marcha. Leer laabsorbancia a 500nm despus de 30 seg. (A1) y de 90 seg (A2).

CALCULOS

La concentracin de creatinina en la muestra se calcula a partir de la siguiente formula:

(A2 A1) muestra X C patrn X Factor de dilucin muestra = C muestra(A2 A1) patrn


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Si se utiliza para calibrar el patrn de cratinina suministrado

Suero y plasma Orina(A2 A1) muestra X 2=mg/dl X 100= mg/dl

(A2

A1) patrn X 177= mmol/L X 8840=mmol/L


Suero y plasmaHombres: 0.9 1.3 mg/dl

Mujeres: 0.6 1.1 mg/dl

OrinaHombres: 14 26 mg/kg/24 -h

Mujeres: 11 20 mg/kg/24 - h


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ACIDO URICO

Fundamento del mtodo:El acido rico presente en la muestra origina, segn las reacciones acopladas descritas a

continuacin, un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra.

Acido rico + O2 + 2H2O uricasa Alatoina + CO2 + H2O2

2H2O2 + 4 Aminoantipirina + DCFS peroxidasa Quinoaimina

Composicin:A. Reactivo: fosfatos 100mmol/L, detergente 1,5g/L, diclorofenolsulfonato 4mmol/L, uricasa >0,12

U/mL, ascorbato oxidasa >5 U/mL, peroxidasa > 1 U/mL, 4Aminoantipirina 0,5mmol/L, pH7,8.

S. Patrn de cido rico: cido rico 6 mg/dL (357 mol/L). Patrn primario acuoso

Preparacin de los reactivos:Tanto el reactivo como el Patrn estn listos para su uso.

Equipo adicional: Bao de agua a 37C. Analizador, espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 520 20nm.Muestras:Suero, plasma u orina recogidos mediante procedimientos estndar. Diluir la orina 1/10 con aguadestilada antes del ensayo.El acido rico en suero plasma es estable 7 das a 2-8C. Los anticoagulantes como la heparina,EDTA, oxalato o fluoruro no interfieren.El acido rico en orina es estable 4 das a temperatura ambiente si se ajusta el pH >8 con NaOH.No refrigerar.

Procedimiento:1. Atemperar el Reactivo a temperatura ambiente.


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2. Pipetear: (Nota 1)Blanco Patrn Muestra

Agua DestiladaPatrn Acido rico(S)

MuestraReactivo (A)

25L__

1,0mL

_25L_

1,0mL

__

25L1,0mL



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4. Leer la absorbancia (A) del Patrn y de la muestra a 520nm frente al blanco. El color esestable durante 30 minutos.

ClculosLa concentracin de acid rico en la muestra se calcula a partir de la siguiente formula general:

Si se utiliza para calibrar el Patrn de Acido rico suministrado (Nota 2).

Suero o plasma orina

x 6 = mg/dL acido rico

x 357 = mol/L acido rico

x 60 = mg/dL acido rico

x 3570 = mol/L acido rico

Valores de referencia

Suero y plasma:Hombre: 3.5-7.2mg/dL = 210-420mol/LMujeres: 2.6-6.0mg/dL = 150-350mol/L


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Orina:250-750mg/24 horas = 1.5-4.5mmol/24 horas

Estos valores se dan nicamente a ttulo orientativo; es recomendable que cada laboratorioestablezca sus propios intervalos de referencia.

Caractersticas diagnosticas:En el hombre el acido rico, es el principal producto de catabolismo de las bases puricas, lascuales se obtienen en la parte de la dieta y en la parte de la sntesis in vivo.Concentraciones elevadas de acido rico en suero u orina pueden ser atribuibles a una sobreproduccin de urato (sntesis incrementada de purinas) o una eliminacin defectuosa de urato.La hiperuricemia se asocia generalmente con la gota, disminucin de la funcin renal,deshidratacin, alteraciones mieloproliferativas y otras condiciones en las que no se conoce bien lacausa.El diagnostico clnico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un nico ensayo, sinoque debe integrar los datos clnicos y de laboratorio.

Notas

1. Estos reactivos pueden utilizarse en la mayora de analizadores automticos. Soliciteinformacin a su distribuidor.

2. La calibracin con el patrn acuoso suministrado pude causar sesgos, especialmente enalgunos analizadores. En estos casos, se recomienda calibrar usando un patrn de basesrica (Calibrador Bioqumica cod. 18011 y 18044).


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COLESTEROL

FUNDAMENTO DEL METODO

Tanto el colesterol libre como el esterificado presente en la muestra originan, segn las reaccionesacopladas descritas a continuacin, un complejo coloreado que se cuantifica porespectrofotometra.

Indicaciones de deterioro

Reactivo: Presencia de partculas, turbidez, absorbencia del blanco superior a 0,200 a 500nm.

Patrn: Presencia de partculas o turbidez.PREPARACION DE LOS REACTIVOS

Tanto el Reactivo como el Patrn estn listos para su uso.

EQUIPO ADICIONAL

Bao de agua a 37C. Analizador, espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 500 20 nm.

MUESTRAS

Suero o plasma recogidos mediante procedimientos estndar.El colesterol en suero o plasma es estable 7 das a 2-8C. Pueden utilizarse como anticoagulantes laheparina, EDTA, oxalato o fluoruro.

PROCEDIMIENTO


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1. Atemperar el Reactivo a temperatura ambiente.

2. Pipetear: (Nota 1).BLANCO PATRN MUESTRA

Patrn Colesterol(S)MuestraReactivo (A)

----

1,0 ml

10 l--

1,0 ml

--10 l1,0 ml

3. Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente (16-25C) odurante 5 minutos a 37C.

4. Leer la absorbancia (A) del Patrn y de la Muestra a 500 nm frente al Blanco. El color esestable durante al menos 2 horas.


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CALCULOS

La concentracin de colesterol en la muestra se calcula a partir de la siguiente frmula general:

Si se utiliza para calibrar el Patrn de Colesterol suministrado (Nota 2).

X 200 = mg/dl colesterolX 5,18 = mmol/l colesterol.

VALORES DE REFERENCIALos siguientes valores discriminantes universales han sido establecidos por la US NationalCholesterol Education Program y tambin aceptados en otros pases para la evaluacin del riesgode enfermedad de las arterias coronarias.

Hasta 200 mg/dl = 5,2 mmol/l200-239 mg/dl = 5,2-6,21 mmol/l>240 mg/dl = >6,24 mmol/l

OptimoModeradoElevado

CARACTERISTICAS DIAGNOSTICAS


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El colesterol es un esteroide de alto peso molecular que contiene una estructuraciclopentanofenantreno. El colesterol se transporta en el plasma en las lipoprotenas, Se excreta ala bilis como tal o tras su transformacin en cidos biliares.Las concentraciones elevadas de colesterol se asocian con un riesgo progresivamente creciente deateroesclerosis y enfermedad de las arterias coronarias.

El diagnostico clnico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un nico ensayo, sinoque debe integrar los datos clnicos y de laboratorio.

NOTAS

1. Este reactivo puede utilizarse en la mayora de analizadores automticos.2. La calibracin con el Patrn acuoso suministrado puede causar sesgos, especialmente en

algunos analizadores. En estos casos, se recomienda calibrar usando un patrn de basesrica.

TRIGLICERIDOS


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FUNDAMENTO DEL METODOLos triglicridos presentes en la muestra original, segn las reacciones acopladas descritas acontinuacin, un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra.

Triglicridos + H2o---lipasa-------- Glicerol + cidos grasos

Glicerol + ATP --------glicerol quinasa--- Glicerol -3-P + ADP

Glicerol -3-P + O2 --G-3-P-oxidasa--- Dihidroxiacetona P + H2O2

2H2O2 + 4-Aminoantipirina + 4-Clorofenol----peroxidasa-- Quinoaimina + 4 H2O

MUESTRAS

Suero o plasma recogidos mediante procedimientos estndar.Los triglicridos en suero o plasma son estables 5 das a 2-8 C. Los anticoagulantes como laheparina, EDTA, oxalato o fluoruro no interfieren.

MATERIAL

Bao mara Espectrofotmetro Pipetas automtica 10 100 l Pipetas automticas 100 1000 l Puntillas Cubetas para espectrofotmetro Tubos de ensayo Cronometro.

PROCEDIMIENTO1. Atemperar el reactivo a temperatura ambiente.


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2. Pipetear: Blanco Patrn MuestraPatrn triglicridos (S) ---- 10 l ----Muestra ---- ---- 10 lReactivo (A) 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml


4. Leer la absorbancia (A) del patrn y de la muestra a 500 nm frente al blanco. El color esestable durante al menos 2 horas.


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CALCULOSLa concentracin de triglicridos en la muestra se calcula a partir de la siguiente formula general:

A Muestra x C Patrn = C MuestraA Patrn


Los siguientes valores discriminantes universales han sido establecidos por el US National Institutesof Health y tambin aceptados en otros pases para la evaluacin del riesgo.

Hasta 150 mg/dl = 1,7 mmol/l Bajo150 199 mg/dl = 1,70 2,25 mmol/l Dudoso200 499 mg/dl = 2,26 5,64 mmol/l Alto

> 500 mg/dl = > 5,65 mmol/l Muy alto

A Muestra

A Patrn

X 200 = mg/dltriglicridos.

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