Cuestionario1. Para qu pueden ser usados los gallos en inmunologa?

Pueden ser utilizados para el desarrollo se vacunas. El desarrollo de la vacuna de fiebre amarilla (17D), fue posible gracias al aislamiento de las cepas Aisibi y Francesa de la fiebre amarilla en 1927, obtenida mediante repetidos pases en ratones y embriones de pollos. Luego de esto sigui la obtencin, mediante mtodos parecidos, de cepas atenuadas de los virus de la polio, el sarampin, la rubeola y la parotiditis. La disminucin de la incidencia de la polio, la rubeola, la parotiditis y el sarampin en el perodo de tiempo comprendido entre 1950 y 1980 pone de manifiesto el xito de la vacunas para estas 4 enfermedades.2. En que vaso se realiza la sangra en las aves?Se puede efectuar la sangra en cara interna de las alas, cerca de la articulacin del carpo con el metacarpo. Se sujeta al animal por el dorso, se extiende el ala que se va a sangrar, se arrancan las plumas que cubren la vena; se hace una ligadura en la parte superior del carpo, se deja el ala por un rato para que llegue la sangre al vaso; se vuelve a coger el ala y se abre el vaso con la lanceta. Cuando ha salido bastante sangre e quita la ligadura y se coge la sangra con uno o dos puntos de sutura.3. Qu es un esquema de inmunizacin?

Un esquema de inmunizacin es un sistema usado universalmente por todos los pases en comn acuerdo, para la aplicacin de las vacunas a los nios, con el fin de evitar diversas enfermedades. El esquema de vacunacin usado es:-La vacuna BCG contra la tuberculosis, se aplica al nacer por medio de una inyeccin en el brazo derecho. - La de Poliomielitis o parlisis infantil, se aplica al nacer y con refuerzos a los 2-4 y 6 meses de edad. Se toman dos gotas de la vacuna en cada aplicacin. - La vacuna Triple o DPT contra Difteria, Tos ferina y Ttanos se aplica a los 2, 4 y 6 meses con refuerzos a los 2 y 4 aos por medio de una inyeccin en el glteo o nalga. - La vacuna Triple Viral, contra Sarampin, Rubeola y Parotiditis o paperas se aplica al ao de vida y con un refuerzo a los 6 aos por medio de una inyeccin en el brazo izquierdo. - La vacuna Td, contra ttanos y difteria, se aplica a los 12 aos o al ingresar a 6 de primaria.

4. Cul es el mecanismo por la cual una inyeccin subcutnea o intraperitoneal desensibiliza un animal que se encuentra en estado de anafilaxia?

En el caso de un shock anafilctico se debe inyectar adrenalina o hidrocortisona por va subcutnea o intraperitoneal: esto siguiendo los lineamiento globales de ACLS (Advanced Cardiac Life Suport) y ATLS (Advanced Trauma Life Suport): Es decir, buscar en primera intencin preservar y reanimar las funciones orgnicas indispensables para la vida siguiendo la metodologa A (airway-vas areas)B (breathing-respiracin) C (circulation).Cuestionario1. Defina: a) Inmunidad Celular, b) Opsonizacin

a) Inmunidad celular: es una forma de respuesta inmunolgica adaptativa mediada por clulas de linfocitos T. Acta como mecanismo de defensa en contra de los microorganismos intracelulares, tales como virus y algunas bacterias, capaces de sobrevivir y proliferar en el interior de los fagocitos y otras clulas del husped, lugar al que no tienen acceso los anticuerpos circulantes. La defensa frente a este tipo de infecciones depende de la inmunidad celular, que induce la destruccin del microorganismo residentes en los fagocitos o de las clulas infectadas.b) Opsonizacin: Es el proceso por el que se marca a un patgeno para su ingestin y destruccin por un fagocito. La opsonizacin implica la unin de una opsonina, en especial, un anticuerpo a un receptor en la membrana celular del patgeno.[] Tras la unin de la opsonina a la membrana, los fagocitos son atrados hacia el patgeno.2. Se realizar fagocitosis si inocula a un ratn con toxina tetnica?

Emil von Behring (1854-1917) y Shibasaburo Kitasato (1852-1931) demostraron que la inyeccin de dosis crecientes pero no letales de toxina tetnica en conejos y ratones los haca resistentes a dosis 300 veces mayores que las letales, y que adems, el suero de estos animales, en ausencia de clulas, era capaz de neutralizar la toxina tetnica en vista de que mezclas de ese suero con toxina se podan inyectar en animales susceptibles sin que sufrieran dao alguno. Behring y Kitasato bautizaron a esta propiedad del suero como antitxica.

3. Qu papel cumple el complemento en la fagocitosis?

El sistema del complemento es un conjunto de protenas plasmticas y de la superficie celular, permanecen naturalmente inactivas y slo se activan ante la presencia de un antgeno unido a LT o LB en forma de cascada destruyendo al agente invasor. El complemento cumple las funciones de opsonizacin, citolisis e interviene en la inflamacin.Cuestionario1. Defina: a) Ttulo, b) Hemlisis

a) Ttulo: es el proceso por el cual se va agregando gota a gota un cido a una base, o viceversa, para averiguar cual es la cantidad de cido o base que contiene dicha sustancia de acuerdo a una cantidad de cis o base conocida.b) Hemlisis: es el fenmeno de la desintegracin de los eritrocitos (glbulos rojos o hemates). El eritrocito carece de ncleo y orgnulos, por lo que no puede repararse y muere cuando se desgasta. Este proceso est muy influido por la tonicidad del medio en el que se encuentran los eritrocitos.2. Qu colorante vital puede ser empleado para tener antgenos para aglutinacin y cuales son sus ventajas frente a los colorantes comunes?La ventaja de los colorantes vitales es que mata a las clulas lentamente, ya que estas absorben al colorante y continan con sus funciones vitales por algn tiempo, lo que permite la observacin de las partes de cilios, flagelos o estructuras intracelulares.

3. Puede una reaccin de aglutinacin dar resultados positivos cuando no hay infeccin aparente?

S, debido a que este resultado positivo en algunos casos no confirma la infeccin y requiere repetir la prueba a fin de realizar una prueba comprobatoria.4. Dnde estn localizados los isoantgenos hemticos?

Loa eritrocitos poseen antgenos (sustancia que provoca la formacin de anticuerpos) determinados genticamente llamados aglutingenos o isoantgenos (que al entrar en contacto con otros tipos sanguneos no causan aglutinacin), esto hace posible la clasificacin de los grupos sanguneos y el factor Rh, que son independientes uno del otro .

5. Puede cambiar durante su vida el grupo sanguneo de una persona?

El grupo sanguneo de una persona no puede cambiar. Sin embargo unos investigadores de la Universidad de Copenhague (Dinamarca) aseguran haber desarrollado un sistema que convierte los grupos A, B y AB en el tipo O, en el cual convierten la sangre utilizando enzimas recin descubiertas. As tambin han ocurrido casos inditos como el de una chica australiana cambi de grupo sanguneo despus de un trasplante de hgado. Demi-Lee Brennan, actualmente de 15 aos, hizo historia en la medicina al pasar espontneamente al sistema inmunolgico de su donante. Se trata de un hecho que nunca antes haba sido descripto en el mundo.6. Qu factores pueden explicar las reacciones falsas positivas o negativas en la clasificacin de los grupos sanguneos?

Estos pueden ocasionarse debido a errores tcnicos como:

Identificacin incorrecta de la muestra, registro incorrecto.

Presencia de polvo o particulas en la vidrieria a utilizar

Caducidad de los antigenos puede generar resultados negativos.

Resultados positivos inesperados a causa de: pseudoaglutinacin, autoaglutinacion

Actividad reducida del reactivo puede ocasionar resultados negativos.

Cuestionario1. Cul es la composicin qumica de la cardiolipina?

La cardiolipina es un fosfolpido muy cido (carga -2), est compuesto por dos molculas de cido fosfatdico unidas covalentemente a travs de una molcula de glicerol. Dichas molculas son los componentes estructurales fundamentales de las membranas biolgicas, donde se distribuyen en una doble capa con actividad anfiptica (o sea, la propiedad fsica de estas molculas de poseer un extremo hidroflico y otro hidrofbico), lo que permite a la clula mantenerse aislada del medio externo, pero tener movimiento a travs de su membrana de distintas sustancias como agua, iones, protenas, etc. Se encuentra fundamentalmente en la membrana interna de la mitocondria y en las membranas bacterianas.

2. A qu cree Ud. que se debe el que la emulsin final del antgeno sea turbio, mientras que la solucin madre es totalmente transparente?La emulsin final de un antgeno es turbio debido a las partculas coloidales cubiertos con anticuerpos macizos que junto con la presencia del antgeno ocasionan esta turbidez, que tienen gran eficiencia en la exactitud de la medicin. La solucin madre es totalmente transparente por a solucin de fragmentos de la membrana eritrocitaria til para el antgeno insolubilizado.

3. Puede presentarse en el V.D.R.L. una reaccin de zona y como podra ser evitada?

Si puede presentarse ya que es un requisito para poder descartar enfermedades de transmisin sexual, los resultados de VDRL en lmina son comunicados como no reactivos (no hay floculacin, dbilmente reactivos (ligera floculacin, y reactivos floculacin definitiva. Todos los sueros reactivos se diluyen seriadamente, a cada dilucin se le realiza la prueba de VDRL y se registra el titulo mximo obtenido. Rara vez se tiene un paciente con ttulo elevado en las diluciones y con VDRL no reactivo en la muestra sin diluir (fenmeno de prozona), si ocurriera es ms frecuente en la sfilis secundaria1,10.

4. Por qu razn cuando un suero precipitante se diluye pierde rpidamente su ttulo?Pierde rpidamente su titulo porque inhibe la hemoaglutinacin.Cuestionario1. Qu es la properdina y el complemento?

Properdina: La properdina es una de las protenas reguladoras de la va alternativa del sistema del complemento liberada por los monocitos.Complemento: Globulina presente en el suero sanguneo reciente; se destruye con una temperatura de 55-56 centgrados mantenida durante una media hora. El complemento est compuesto de 11 fracciones (que constituyen el sistema complementario) numeradas de C'1 a C'9 - estando el C'1 dividido en 3 subfracciones C'lq, C1r y C'1. La fraccin C'3 es la ms importante. El complemento es un factor no especfico que interviene en las reacciones inmunolgicas por las propiedades neutralizadoras o destructoras, solamente cuando un anticuerpo especfico, el sensibilizante, se fija sobre el antgeno.

2. Qu factores intervienen en la lisis de un microorganismo por fenmenos inmunolgicos?

Lisis.- Uno de los productos mas importantes de la cascada del complemento es el complejo ltico, que es una combinacin de mltiples factores del complemento y se llama C5b6789. tiene un efecto directo de la rotura de las membranas celulares de las bacterias y otros microorganismos invasores.

La presencia de macrfagos.- Los macrfagos poseen capacidad de lisis de microorganismos produciendo citocinas esenciales para el inicio de la respuesta inmune. Entre ellos destacan ciertas metaloprotenas, lisozima, lactoferritina y otras. Tanto los macrfagos como los neutrfilos, pueden producir y secretar tambin TNF-alfa de gran capacidad ltica.

3. Puede usarse la sangre nitratada u oxalatada para observar fenmenos de lisis?No puede utilizarse la sangre oxalatada u nitrada para observar los fenmenos de lisis celular, debido a que a la sangre completa se le ha agregado un ster soluble del cido oxlico, lo que impide la coagulacin de la misma y por tanto no hay lisis.Cuestionario1. Qu microorganismos se pueden aislar de una herida supurante?Se pueden aislar los siguientes microorganismos:

Corynebacterium, Staphylococcus aureus, Streptococcus, Pseudomonas aeruginosa, proteus

2. Qu microorganismos se pueden aislar de una quemadura?Staphylococcus epidermidis, Klebsiella spp., Serratia marcescens, Escherichia coli, Enterobacter spp., Enterococo, Pseudomona aeruginosa, Staphylococcus aureus3. Qu microorganismos se pueden aislar de un tejido en putrefaccin?La mas importante es Clostridium prefringens, pero tambin se pueden presentar otros microorganismos en la putrefaccin como son: Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Bacillus mesentericus y Micrococcus albus

4. Cmo se realiza la Prueba de Catalasa, Coagulasa y de Pigmento?

CATALASA: Se utiliza para comprobar la presencia del enzima catalasa que se encuentra el la mayora de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas que contienen citocromo. La principal excepcin es Streptococcus.

Originariamente, esta prueba era utilizada para diferenciar entre los siguientes gneros:

Streptococcus (-) de Micrococcus (+) y/o Staphylococcus (+).

Bacillus (+) de Clostridium (-).

Lysteria monocytogenes (+) y/o Corynebacterium (+, con las excepciones de C.pyogenes y C.haemolyticum, ambos -) de Erysipelothrix (-)

Una prueba de rutina de la catalasa a temperatura ambiente puede hacerse siguiendo dos tcnicas:

1. Mtodo del portaobjetos (recomendado):

Con el asa de siembra recoger el centro de una colonia pura de 18-24 horas y colocar sobre un portaobjetos limpio de vidrio.

Agregar con gotero o pipeta Pasteur una gota de H2O2 al 30% sobre el microorganismo sin mezclarlo con el cultivo.

Observar la formacin inmediata de burbujas (resultado positivo).

Desechar el portaobjetos en un recipiente con desinfectante.

Si se invierte el orden del mtodo (extender la colonia sobre el agua oxigenada) pueden producirse falsos positivos.

1. Mtodo del tubo de ensayo:

Agregar 1ml de H2O2 al 3% directamente a un cultivo puro de agar en slant densamente inoculado.

Observar la formacin inmediata de burbujas (resultado positivo).

Precauciones: Si se utilizan para esta prueba cultivos procedentes de agar sangre, se debe tener la precaucin de no retirar algo de agar con el asa al retirar la colonia ya que los eritrocitos del medio contienen catalasa y su presencia dar un falso resultado positivo.

COAGULASA: La prueba de la coagulasa es usada especficamente para diferenciar las especies del gnero staphylococccus:

S. aureus Positiva

S. epidermidis Negativa

Tcnica en portaobjetos

Prepare una suspensin gruesa y bien homognea de cada microorganismo en una solucin salina estril.

Ponga una gota de la suspensin y una gota de plasma humano o de conejo sobre un portaobjetos, mezclar suavemente con el asa y despus por rotacin.

Observe si hay aglutinacin microscpica lo que indica una prueba positiva

Observe si hay aglutinacin microscpica lo que indica una prueba positiva

Interpretacion:

Una prueba positiva, usualmente ocurre entre 5-20 segundos.

La prueba negativa si la aglutinacin no ocurre dentro de 3-4 minutos.

Tcnica en tubo:

En un tubo de 13 x 100 esteril mezclar 0.5 ml de plasma humano o de conejo y una asada grande de la bacteria aprobar. Rotar suavemente el tubo sin sacudir.

Incubar a 35 grados C de 4-6 horas, observe cada 30 minutos.

Precaucin: cuando este checando no sacude el tubo, inclnelo suavemente para ver el coagulo, si este no es visible al final de las 6 horas, djelo en la incubadora por 24 hrs.

Interpretacin:Prueba positiva:

Coagulo completo

Coagulo parcial, el coagulo no abarca completamente la columna del fluido.

Prueba negativa:

No hay formacin de coagulo, la suspensin permanece homogneaPRUEBA DE PIGMENTOEsta se utiliza mayormente para la identificacin de especies de Pseudomonas, su capacidad para producir pigmentos como pioverdina (fluorescena) y piocianina es una caracterstica importante Algunas de ellas elaboran slo fluorescena (ej. Ps. fluorescens) y otras ambos pigmentos (ej. Ps. aeruginosa). La piocianina solamente es producida por Ps. aeruginosa aunque no todas las cepas de esta especie la producen. Se han diseado medios de cultivo que potencian la elaboracin de uno de los pigmentos e inhiben la formacin del otro.

PRINCIPIO

El medio King A (o Pseudomonas Agar P) potencia la elaboracin de piocianina mientras que el King B (o Pseudomonas Agar F) potencia la elaboracin de fluorescena e inhibe parcialmente la de piocianina. Estos pigmentos son solubles en agua y difunden al medio. La piocianina es un pigmento azul-verde mientras que la fluorescena es amarillo-verdoso y fluoresce cuando es expuesto a la luz UV (l=254 nm). Existen pigmentos amarillo-verdosos producidos por algunas especies de Pseudomonas que no fluorescen.

MEDIOS Y REACTIVOS

King AKing B

Peptona20 gProteosa Peptona20 g

Glicerol10 gGlicerol10 g

K2SO410 gK2HPO41,5 g

MgCl21,4 gMgSO4.7H2O1,5 g

Agar15 gAgar15 g

Agua1 LAgua1 L

Los medios se reparten en tubos, se esterilizan a 121C durante 15 minutos y se dejan solidificar inclinados.

PROCEDIMIENTO

Inocular los tubos por estras. Incubar a 35C durante 24 hs.

INTERPRETACIN

Observar al UV, la produccin de pigmento azul-verdoso en el medio King A y la de pigmento amarillo-verdoso, en el King B

Cuestionario1. Describa como se realiza una prueba de produccin de coagulasa para estafilococos

Permite diferenciar Staphylococcus aureus (coagulasa positivo) del resto de especies de Staphylococcus (coagulasas negativos). La tcnica en tubo detecta coagulasa libre y ligada. Mecanismo de accin de la coagulasa libre: procoagulasa (enzima extracelular bacteriana) reacciona con un factor activador presente en el plasma sanguneo similar a la protrombina, dando lugar a un complejo anlogo a la trombina (coagulasa propiamente dicha) que reacciona con fibringeno formando un cogulo de fibrina en ausencia de Ca2+. La coagulasa ligada o factor de agregacin acta directamente sobre el fibringeno y lo convierte en fibrina. No requiere la presencia de activadores plasmticos.

2. Qu otros microorganismos aparte de los estafilococos pueden desarrollar en el agar manitol hipertnico?El agar manitol hipertnico sirve adems para aislar el cultivo de especies halfilas de Vibrio.

3. En el agar ADN puede desarrollar Staphylococcus epidermidis?

Staphylococcus epidermidis si puede crecer en el agar ADN, y en este se realiza la prueba de la ADNasa, que resulta positiva en el caso de esta bacteria.

4. Cules son los pasos para las pruebas de produccin de hemolisinas y fibrinolisinas?Prueba de hemolisinas: esta prueba se realiza en agar sangre y detecta la presencia de hemolisina, enzima que permite la clasificacin de los Streptococcus en alfa (hemlisis parcial, incompleta que torna color verdoso), beta (hemlisis total) y gamma hemolticos (no existe hemlisis) .Muchas otras bacterias, aparte de los Streptococcus, pueden tener esta enzima como B. megaterium; se usa el cultivo para demostrar el grado de hemlisis (hemlisis beta) en la cual se puede observar claramente por detrs de la siembra.

Cuestionario1. De una muestra de orina se podra aislar gonococos?

Si es posible aislar gonococos de una muestra de orina, una de las principales pruebas para determinar su presencia es el uso de la tincin de Gram.

2. Cmo estn localizados los gonococos en los polimorfonucleares en un proceso agudo y crnico?

Los gonococos se encuentran dentro de los polimorfonucleares, la bacteria ms frecuentemente aislada en las infecciones urinarias es la Escherichia coli, encontrndose en un porcentaje de 75 al 95% de los casos segn el tipo de paciente. Esta proporcin se favorece ms en las cisitis y pielonefritis de la edad media de la mujer, que consultan en policlnicos generales.

3. Cmo se realiza la Prueba de Oxidasa?

Esta prueba sirve para determinar la presencia de enzimas oxidasas. La reaccin de la oxidasa se debe a la presencia de un sistema citocromooxidasa que activa la oxidacin del citocromo que es reducido por el oxgeno molecular que produce agua o perxido de hidrgeno segn la especie bacteriana. El oxgeno acta por tanto como aceptor final de electrones en la cadena transportadora de electrones. Por lo general, el sistema citocromooxidasa slo se encuentra en los organismos aerobios, algunos anaerobios facultativos y, excepcionalmente, en algn microaerfilo (Vibrio fetus), pero los anaerobios estrictos carecen de actividad oxidasa. Asmismo, la presencia de oxidasa va ligada a la produccin de catalasa, ya que sta degrada el perxido de que se produce como consecuencia de la reduccin del oxgeno y cuya acumulacin es txica.

La prueba de la oxidasa se usa sobre todo para

Identificar todas las especies de Neisseria (+)

Diferenciar Pseudomonas de los miembros oxidasa negativos de las enterobacterias.

El reactivo de la oxidasa ms recomendado es la solucin acuosa al 1% de diclorhidrato de tetrametil-p-fenilendiamina (reactivo de Kovacs). Es menos txico y mucho ms sensible que el correspondiente compuesto dimetilo (reactivo de Gordon y McLeod), pero es ms caro. Este reactivo tie las colonias oxidasa positivas de color lavanda que vira gradualmente a prpura-negruzco intenso.

Realizacin de la prueba:

1. Mtodo en placa directa

Agregar directamente 2-3 gotas de reactivo a algunas colonias. No inundar toda la placa y no invertirla.

Observar los cambios de color. Con el reactivo de Kovacs la reaccin se produce en unos 10-15 segundos, mientras que con el de Gordon y McLeod es dentro de los 10-30 minutos.

1. Mtodo indirecto sobre papel

Colocar un trozo de papel de filtro de 3x3cm aproximadamente en una placa de Petri.

Agregar 2-3 gotas del reactivo de Kovacs en el centro del papel.

Extender con el asa de siembra una colonia sobre el papel impregnado.

La reaccin de color positiva se produce a los 5-10 segundos.

Cuestionario1. En que porcentaje aproximado las enterobacterias producen infecciones urinarias?

Del 90 al 95% de las infecciones urinarias son producidas por las enterobacterias (Klebsiella, Proteus, E. coli, aerobacter, Pseudomona aeuroginosa y Acitenobacter). El porcentaje aumenta sensiblemente en hombre debido a la uretritis y prostatitis en que tambin hay este tipo de bacterias.

La bacteria ms frecuentemente aislada en las infecciones urinarias es la Escherichia coli, encontrndose en un porcentaje de 75 al 95% de los casos segn el tipo de paciente. Esta proporcin se favorece ms en las cisitis y pielonefritis de la edad media de la mujer, que consultan en policlnicos generales.2. Hay hongos y virus que causan infecciones en el sistema genitourinario?. Si es as mencione algunos de ellos.

Si pueden causar infecciones genitourinarias, entre los hongos se encuentra Candida albicans; entre los virus se encuentra el virus herpes simple tipo 2 (VHS-2), citomegalovirus humano (CMVH).