trabajo de investigaciÓn ii bioquimica
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
TRABAJO DE INVESTIGACIÓN II
CUANTIFICACIÓN DE METANOL POR CROMATOGRAFÍA DE GASES
EN VINOS TINTOS EXPENDIDOS EN LA CIUDAD DE TRUJILLO
PARA OPTAR EL GRADO ACADÉMICO DE:
BACHILLER
EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA
AUTORAS:
CIEZA VALLEJOS, Joselyne Aurora.
ZAVALETA ARAUJO, Liz Romeli.
ASESOR:
Mg. SEGUNDO MANUEL MIRANDA LEYVA
CO-ASESOR:
Mg. ROGER ANTONIO RENGIFO PENADILLO
Trujillo – Perú
2010
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Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/
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DEDICATORIA
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Joselyne
A nuestro señor Dios por darnos la vida,
guiarnos e iluminarnos a lo largo de nuestra
vida, porque todo lo que tengo y todo lo que
poseo es tuyo.
A mi madre y a mi hermano por creer en mí y
por su incondicional apoyo e invalorable
sacrificio por hacer que se cumplan todas mis
metas y sueños.
A mi padre quien siempre confió en mí y que
desde el cielo guía mis pasos y que es la
fuerza que me empuja a salir a delante cada
día
A mis amigos que me apoyaron en todo el
transcurso de la carrera de los cuales siempre
llevare los mejores recuerdos
Y en especial
A Fredy por su amor, paciencia y apoyo
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Liz
Con infinito respeto y gratitud a mis amados
padres: GUADALUPE y JUSTO, por su amor
incondicional y apoyo constante.
A mi hermano WILDER, mi abuelita NAZARIA y
mi tía EPIFANIA, por estar siempre conmigo en
los momentos más importantes de mi vida.
A mis amigos y profesores, con los que
compartí bellos momentos y de quienes
guardo gratos recuerdos.
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AGRADECIMIENTO
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A NUESTRO ASESOR:
Mg. SEGUNDO MANUEL MIRANDA LEYVA
Quien nos brindó su valiosa orientación e incondicional apoyo para el
desarrollo y culminación del presente trabajo.
Y A NUESTRO CO-ASESOR:
Mg. ROGER ANTONIO RENGIFO PENADILLO
Por su apoyo, conocimiento y experiencia hizo posible la culminación de
este trabajo.
Para Uds. nuestro más sincero agradecimiento.
Joselyne y Liz
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PRESENTACIÓN
SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO:
De conformidad con las disposiciones del reglamento interno referente a grados y títulos de
la facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, nos es grato
someter a vuestra consideración y elevado criterio el presente Informe de Investigación tipo
II.
“Cuantificación de Metanol por Cromatografía de Gases en vinos tintos expendidos
en la Ciudad de Trujillo”
Es propia la oportunidad para manifestar nuestro más sincero reconocimiento y gratitud a
nuestra Alma Mater y toda su plana docente y administrativa que con su capacidad y
buena voluntad han contribuido decididamente a nuestra formación profesional.
Dejamos a vuestra consideración Señores Miembros del Jurado la calificación del Presente
trabajo.
Trujillo, 25 de Agosto del 2010.
Cieza Vallejos, Joselyne Aurora Zavaleta Araujo, Liz Romeli
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JURADO DICTAMINADOR
PRESIDENTE : Dr. EDUARDO IVAÑEZ.
MIEMBRO : Mg. SEGUNDO MANUEL MIRANDA LEYVA
MIEMBRO : Mg. ROGER ANTONIO RENGIFO PENADILLOS.
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ÍNDICE
Página
RESUMEN.................................................................................................................. i
ABSTRACT………………………………………………………………………… ii
INTRODUCCIÓN..................................................................................................... 1
MATERIAL Y MÉTODO………………………………..…………………………. 5
RESULTADOS………………………………………………..……………..………. 8
DISCUSIÓN………………………………………………………….......................... 12
CONCLUSIONES…………………………………………………...………….......... 15
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………………………………. 16
ANEXOS…………………………………………………………………………......... 20
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RESUMEN
El vino tinto ha sido reconocido como un alimento funcional con beneficios
fisiológicos para la salud humana. Las propiedades medicinales atribuidas a los
vinos son: actúa como antioxidante, reduce el riesgo de cáncer, previene la
formación de aterosclerosis, tiene acción antiséptica y antiviral. Entre los alcoholes
presentes en el vino son: etanol, metanol e isopropanol. La presencia de metanol en
el vino ha llamado la atención y controversia. Esta es la resultante de la degradación
de las sustancias pécticas presentes en la uva por las enzimas. El metanol no es
perceptible cuando se analizan las características organolépticas, sin embargo,
cuando se ingiere en grandes cantidades puede causar graves daños a la salud de los
consumidores, que van desde náuseas, vómitos y dolor de cabeza a la ceguera y la
muerte. El límite máximo de metanol en vinos tintos establecido es 400 mg/L
(40,00% P/V) mediante resolución enológica 19/2004 de la Organización
Internacional de la Viña y el Vino (OIV). El objetivo fue cuantificar el contenido de
metanol en los vinos tintos expendidos en la ciudad de Trujillo, por medio de
cromatografía de gases, se analizaron 20 muestras, por triplicado. La técnica
utilizada fue la cromatografía de gases con columna capilar HP-FFAP
(Polietilenglicol) de 50 m x 0,20 mm x 0,33 µm y detector de ionización de llama
con He como gas portador. En cuanto a los resultados, se encontró metanol en las
muestras 5, 11 y 16, cuyos porcentajes son: 4.95%, 9.18% y 8.11% respectivamente.
Palabras Claves: Vinos, metanol, cromatografía de gases.
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ABSTRACT
Red wine has been recognized as a functional food with physiological benefits for
human health. The medicinal properties attributed to wines are: acts as an
antioxidant, reduces the risk of cancer, prevents the formation of atherosclerosis,
has antiseptic and antiviral. Among the alcohols present in wine are: ethanol,
methanol and isopropanol. The presence of methanol in wine has drawn attention
and controversy. This is the result of the degradation of pectic substances present in
grapes by enzymes. Methanol is not perceptible organoleptic characteristics are,
however, when ingested in large amounts can cause serious damage to the health of
consumers, ranging from nausea, vomiting and headache to blindness and death.
The ceiling established methanol in red wines is 400 mg / L (40,00% P/V) by order
oenological 19/2004 of the International Organization of Vine and Wine (OIV). The
objective was to quantify the methanol content in red wines sold at the city of
Trujillo, through gas chromatography, 20 samples were analyzed in triplicate. The
technique used was gas chromatography with capillary column HP-FFAP
(polyethylene glycol) of 50 m x 0.20 mm x 0.33 μm and a flame ionization detector
with helium as carrier gas. In terms of results, methanol was found in samples 5, 11
and 16, whose shares are 4.95%, 9.18% and 8.11% respectively.
Key words: Wine, methanol, gas chromatography.
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INTRODUCCIÓN
El vino es la bebida que resulta de la fermentación alcohólica del zumo de
uvas y por extensión la obtenida a partir de otros frutos o materiales vegetales. Su
elaboración consta de 3 fases principales: obtención del mosto, su fermentación y
por último su conservación y envejecimiento. Para producir vino tinto la uva sufre
una fermentación previa, antes de ser procesada, lo que diferencia al proceso de
fabricación del vino blanco, para lo cual se lo procesa directamente. Modificando la
fermentación se puede hacer variar la composición del vino, obteniéndose otros
tipos además del tinto y blanco (vinos secos) como los vinos dulces o los vinos
espumosos (Champaña). El vino se compone principalmente de agua (85%), y de
otros elementos como azúcares, polifenoles, fenoles, proteínas y vitaminas. La
principal fuente de calorías del vino es, sobre todo, su grado alcohólico. Como regla
general, una copa de vino contendría entre 80 y 100 calorías. En cuanto a las
vitaminas, a menudo olvidamos que el vino, al provenir de las uvas, conserva las
características de esta fruta 1, 2, 3, 4.
El vino tinto es reconocido como un alimento funcional por tener beneficio
fisiológico para la salud humana. Son muchos los estudios que se han llevado a cabo
para demostrar que el consumo moderado de vino tiene un efecto beneficioso para
nuestra salud, desde la antigüedad se relacionaban vino con salud y longevidad. Es
importante recordar, sin embargo, que estos beneficios surgen sólo si esta bebida se
consume con moderación, el vino puede actuar como equilibrante nervioso, ya que
tiene propiedades euforizantes muy útiles a la hora de combatir la depresión
nerviosa; además cuenta con propiedades digestivas, es rico en vitamina B2, lo que
permite eliminar las toxinas y la regeneración del hígado; efectos laxantes, por los
taninos, que actúan directamente sobre la fibra intestinal y evitan el estreñimiento;
actúan como antioxidante, disminuye el riesgo de cáncer, impide la formación de
arteriosclerosis, tiene acción antiséptica y antivírica. Estos efectos profilácticos y
protectores se deben a la presencia de componentes fenólicos, oligoelementos y
alcohol 2, 3, 5, 6.
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El proceso para convertir el mosto o zumo de uva en vino es la fermentación.
Este es un proceso químico que consiste básicamente en que las levaduras
transforman el azúcar del mosto en alcohol y otros compuestos. Los vinos pueden
tener también otros componentes como consecuencia de la maduración en madera
de roble y de su envejecimiento en botellas de vidrio, donde el vino sigue
transformándose. Entre los alcoholes presentes en los vinos tenemos: etanol,
metanol e isopropanol. La presencia del metanol en el vino ha despertado interés y
polémica. Este es resultado de la hidrólisis y desmetilación de la pectina por la
enzima pectina metilesterasa. Su presencia y cantidad están relacionadas con tiempo
de reposo, es decir, el momento en que la pectina de la película entra en contacto
con pectina metilesterasa, liberando metanol. Debido a este factor, los vinos tintos
tienen una mayor concentración de metanol que los vinos blancos, producto de la
degradación de sustancias pécticas presentes en la uva por la acción de la enzima,
siendo la cantidad liberada relacionada con la variedad, la cantidad de sustancias
pécticas en la uva y el tiempo de maceración 5, 7, 8.
La vía más frecuente de absorción de metanol en una intoxicación aguda es
la digestiva. La dosis letal varía entre 20 y 100 mL aunque algunos autores informan
dosis letales de 240 mL. La muerte por metanol va siempre precedida de ceguera.
Se sabe que incluso 15 mL de metanol han causado ceguera y el responsable de ello
es el formaldehido. El metanol no presenta características organolépticas
perceptibles cuando está presente, pero cuando es ingerido en grandes cantidades
podrá ocasionar serios daños a la salud. De acuerdo a la dosis absorbida, los
síntomas que se presentan son los siguientes: en forma leve, sensación de nauseas,
molestias epigástricas y cefaleas; si el tiempo de absorción es de algunas horas se
presenta visión borrosa; en forma moderada, se producen vómitos, taquicardia y
depresión del sistema nervioso central, si se produce el cuadro de embriaguez, es
poco intenso y corto en su duración, la piel está fría y sudorosa, la visión es borrosa
y hay taquipnea; en forma grave, el paciente está en coma y presenta acidosis
metabólica, la respiración es superficial y rápida, el color de la piel y las mucosas
es cianótico. Las dificultades para respirar pueden llegar al edema agudo de pulmón,
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la orina y el aliento tienen olor a formaldehido, se presenta edema cerebral; coma y
a veces convulsiones, las intoxicaciones graves presentan insuficiencia renal aguda
5, 7, 9.
En los vinos, la determinación de metanol rara vez es necesaria, porque está
presente en pequeñas cantidades. El límite máximo de metanol en vinos tintos era
de 300 mg/L y actualmente es de 400 mg/L mediante resolución enológica 19/2004
de la Organización Internacional de la Viña y el Vino (OIV). Este incremento se
justificó porque la autorización del uso del dimetilbicarbonato (DMDC) puede
conllevar un aumento del nivel de metanol en los vinos. Sin embargo en los países
tradicionales en la viticultura y enología, los niveles de metanol tienen entre 0.036 y
0.35 g/L 7, 10.
Las intoxicaciones por bebidas alcohólicas adulteradas con metanol, son
graves debido a que produce alta mortalidad y secuelas invalidantes. Las secuelas
suelen ocurrir como brotes de tipo epidémico en “forma masiva”; algunos casos
reportados fueron Atlanta (1951) con whisky mezclado con metanol se presentaron
323 casos de los cuales 41 murieron¸ Bombay (1998): 97 casos, Estonia (2001): 147
pacientes, San Salvador (2000-2001) más de 100 muertos, Nicaragua (2009) se
registró un muerto y uno los casos más sonados fue el escándalo del vino adulterado
con metanol en Italia que provocó una auténtica psicosis en todo el país, cuando por
su causa se contabilizaron once muertes y varias decenas de personas gravemente
intoxicadas en Roma en 1986. En el Perú se presentaron 3 casos de intoxicación en
Huaral registrándose dos muertos en el 2009, también en el Callao murieron ocho
personas, luego de ingerir bebidas preparadas a base de alcohol industrial en
diversas cantinas en Marzo del 201011, 12, 13.
Las bebidas alcohólicas son las de mayor demanda y consumo a nivel
mundial, ya que cada día aumentan los consumidores de estas bebidas de todo tipo,
donde el contenido alcohólico es elevado. El intenso consumo y generación de
ingresos que este tipo de industria genera, ha provocado que en muchos lugares del
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mundo, se manejen de forma casera para producir bebidas con alto grado alcohólico
a bajo precio. Esto como toda obra fuera de las normas establecidas, crea una serie
de complicaciones que van desde financieras y legales, hasta las de salud, ya que al
no producirse dentro de compañías confiables que cuentan con estándares de
calidad, se elaboran productos que atentan contra la salud y la vida de las personas
que las consumen, por la presencia de metanol, como producto de la fermentación o
como producto adulterante.
En este trabajo se dio respuesta a la siguiente interrogante: ¿Cuál es la
concentración de Metanol determinada por Cromatografía de Gases en Vinos Tintos
expendidos en la ciudad de Trujillo?
En el presente trabajo de investigación se cuantificó metanol en los vinos tintos
expendidos en la ciudad de Trujillo, por medio de cromatografía de gases. Se
encontró que el 15% del producto expendido en el Mercado Zonal Palermo de la
ciudad de Trujillo tiene metanol, a la concentración promedio de 7.27% P/V
(mg/100 mL).
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MATERIAL Y MÉTODO
1. MATERIAL
1.1. Muestra:
Constituida por 20 botellas de vinos tintos adquiridas en el Mercado Zonal Palermo:
1. Vino Vencendores (Vino Oporto).
2. Vino Bailetti (Vino Borgoña).
3. Vino San Eusebio (Vino Oporto).
4. Vino Cataluña (Vino Borgoña Especial semi seco).
5. Vino Don Pancho (Vino Dulce).
6. Vino Bailetti (Vino Borgoña Cartavio).
7. Vino Bailetti (Vino Borgoña).
8. Vino Di Barolo (Vino Borgoña Semi seco).
9. Vino Don Salvattore (Vino Tinto Semi seco).
10. Vino Bernina ( Vino oporto generoso).
11. Vino Malbec (Viñas Lindero).
12. Vino Sol de Oro (Vino Borgoña).
13. Vino Venecia (Vino Borgoña semi-seco).
14. Vino Continental (Vino Tinto).
15. Vino San Alfredo (Vino Borgoña).
16. Vino Uvita (Vino tinto).
17. Vino Sol de Oro (Vino Borgoña de Cascas).
18. Vino Cataluña (Vino Borgoña Afrutado).
19. Vino Don Francisco de Carbajal (Vino tinto semi seco).
20. Vino San Alfredo (Vino Borgoña).
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1.2. Material de laboratorio:
Material de vidrio de uso común en el laboratorio.
1.3. Equipos:
Cromatógrafo de gases “Agilent Technologies 7890A” equipado con horno de
temperatura programable, con columna capilar HP-FFAP (Polietilenglicol) de
50m x 0,20 mm x 0,33 µm y detector FID.
Equipo de Micro destilación simple “Marca Pyrex”.
1.4. Reactivos:
Metanol grado HPLC.
2. MÉTODO 8
Destilación Simple.
Fundamento:
La destilación simple es una operación en la cual se produce la vaporización de un
material por la aplicación de calor; el método es empleado en la industria para llevar a
cabo separaciones parciales de los componentes más volátiles de mezclas de líquidos
miscibles.
Determinación de Metanol por Cromatografía de Gases
Fundamento: Es un proceso mediante el cual una mezcla es separada en sus
componentes por medio de una fase gaseosa móvil que pasa a través de material
adsorbente sólido fijo. El movimiento cinético molecular continuamente intercambia
las moléculas del soluto entre las dos fases. Si para un soluto en particular, la
distribución favorece a la fase móvil, las moléculas gastarían la mayor parte de su
tiempo migrando con el fluido, y podrían ser transportadas lejos de las otras moléculas
que son mas retenidas por la fase estacionaria.
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2.1. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
Se destiló 1 mL de muestra a 90°C y el destilado obtenido se llevó a volumen de
1 mL con agua destilada, luego se filtró a través de filtros de nylon de 0.45µm de
diámetro de poro y se colocó el filtrado en viales y se procedió al análisis
cromatográfico. Cada una de las muestras se analizó por triplicado.
2.2. PREPARACIÓN DEL ESTANDÁR
Se midió 1 mL de metanol grado HPLC depositándolo en una fiola de 25 mL y se
llevó a volumen con agua destilada, de esta solución se midió 3 mL y se aforó a 25
mL con agua destilada, luego se filtró a través de filtros de nylon de 0.45 µm de
diámetro de poro y se colocó el filtrado en viales para su análisis.
2.3. CONDICIONES CROMATOGRAFICAS
Gas de arrastre nitrógeno 25 mL/min, temperatura inicial 50ºC, rampa de
temperatura 10ºC/min hasta 80ºC, temperatura del inyector y del detector 300ºC.
2.4. CALCULO
%100)/(% xFdMxmLmgxCcSTDándarÁreadelEst
estraÁreadelaMuMETANOL
Donde:
Cc STD: Concentración del estándar.
FdM: Factor de dilución de la muestra.
3. ANÁLISIS ESTADISTICO 14
Se aplicó la estadística descriptiva, para reportar valores promedios.
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RESULTADOS
Tabla 1: Área del Estándar de Metanol grado HPLC
Estándar
Tiempo
de
retención
Área
Metanol grado HPLC
6,361 117,98612
6,369 118,93008
6,370 116,87705
Promedio 6,3667 117,93108
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Tabla 2: Tiempos de retención, Áreas y % de Metanol obtenido en las muestras
Muestras
Tiempo
de
Retención
Área
Tiempo
de
Retención
Área
Tiempo
de
Retención
Área
% de
Metanol en
la muestra
M01 6,241 3,44455 - - 6,909 1622,29980
M02 6,240 3,01877 - - 6,918 2590,08162
M03 6,241 0,96930 - - 6,923 3204,59155
M04 6,240 2,34891 - - 6,914 2198,92797
M05 6,240 7,12683 6,386 1,54073 6,920 2780,29183 4,95
M06 6,240 2,25608 - - 6,910 1589,95150
M07 6,240 0,95562 - - 6,918 2362,72400
M08 6,240 2,33318 - - 6,914 2021,65332
M09 6,240 7,35832 - - 6,926 3311,83325
M10 6,240 1,52700 - - 6,911 1647,39897
M11 6,243 2,57250 6,396 2,85625 6,922 3028,38261 9,18
M12 - - - - 6,916 2566,14608
M13 6,240 1,52886 - - 6,926 3427,31454
M14 6,239 1,28541 - - 6,913 1947,82210
M15 6,240 1,00705 - - 6,908 1319,10417
M16 6,241 2,24422 6,390 2,62705 6,924 3071,42570 8,44
M17 - - - - 6,903 757,40890
M18 6,241 1,63339 - - 6,906 1148,40731
M19 6,241 1,87006 - - 6,906 1098,22795
M20 6,241 2,26110 - - 6,907 1220,32092
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Gráfico 1: Porcentaje de Muestras que presentan Metanol.
Con Metanol
15%
Sin Metanol
85%
Porcentaje de Muestras que presentan
Metanol
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Gráfico 2: Porcentaje (%) de Metanol obtenido en las muestras.
0
5
10
15
20
25
30
35
40
Límite Máximo
permitido de
Metanol
M05 M11 M16
40,00 %
4,95 %
9,17 %7,68 %
Po
rcen
taje
( %
)
Muestras
Porcentaje de Metanol presente en las
Muestras
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DISCUSIÓN
El consumo de vino ha formado parte de la cultura humana desde sus
albores. A lo largo de sus diversas etapas evolutivas, el hombre lo ha considerado
un placer para su paladar, una ayuda para la convivencia y también un elemento con
propiedades que benefician su salud. El vino por ser producto de la fermentación
presenta una gran cantidad de componentes entre ellos, metanol 1, 3, 8.
El metanol se debe a la degradación de la pectina, un polisacárido presente en la
película de la uva. La pectina es una macromolécula formada por la asociación de
cientos de moléculas de ácido galacturónico, durante el proceso de fermentación la
enzima pectina metilesterasa actúa sobre la pectina liberando metanol 5, 7, 15, 16.
En este trabajo la determinación de metanol en las muestras se realizó
mediante análisis cromatográfico que nos permitió obtener una amplia información
cualitativa y cuantitativa con detector de ionización a la llama (FID), adecuado para
determinar los analitos, la única información cualitativa que nos puede ofrecer este
sistema es el tiempo de retención del analito, el cual, sólo puede ser estable
controlando bien las condiciones cromatográficas como: flujo, temperatura, tipo de
fase estacionaria en el caso de gases o composición química de la fase móvil; y esto
hace más sencillos los cálculos, ya que se puede realizar relaciones directas de peso
de muestra, lo cual contribuye a que este sea el detector ideal para el análisis
cuantitativo 17, 18.
Se determinó la concentración de metanol de las muestras utilizando una
solución estándar de Metanol grado HPLC, se obtuvieron el tiempo de retención (tR)
y área que se muestran en la Tabla 1, lo cual nos permitió identificar la presencia de
metanol y su cuantificación. En la Tabla 2 presenta los resultados obtenidos de las
20 muestras analizadas, de las cuales la muestra 05, presenta un tR de 6,386 y un
Área de 1,54073; la muestra 11, presenta un tR de 6,396 y un Área de 2,85821 y la
muestra 16, presenta un tR de 6,390 y un Área de 2,62702; los que se corresponde
con el tR del estándar de metanol: 6,367 (Tabla 1), lo que nos indica que dichas
muestras contienen metanol. El límite máximo de metanol en vinos tintos
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establecido mediante resolución enológica 19/2004 de la Organización Internacional
de la Viña y el Vino (OIV) es de 400 mg/L que equivale al 40,00% (mg/100 mL).
En el grafico 1 se muestra el porcentaje de las muestras en las que se encontró
presencia de metanol, mientras que el gráfico 2 se muestra una comparación entre
el límite máximo permitido y el porcentaje de metanol que se obtuvo en las
muestras 5, 11 y 16, cuyos porcentajes son: 4.95%, 9.18% y 8.11% respectivamente.
Las intoxicaciones producidas por metanol son consecuencia de la
adulteración de bebidas alcohólicas o por deficiencias en el proceso de destilación,
lo que ha dado lugar a intoxicaciones masivas. A su vez, la intoxicación se puede
dar con fines suicidas y en los alcohólicos crónicos que se ven obligados a consumir
esta sustancia por falta de dinero. Su amplio uso en la industria aumenta el riesgo de
exposición ocupacional por inhalación de sus vapores o la absorción por piel. La
principal causa de intoxicación aguda en la población general adulta ocurre
principalmente por el consumo de licor adulterado; no obstante, su venta libre, fácil
acceso, bajo costo (es tres veces más económico que el alcohol etílico) y capacidad
de producir similares efectos embriagantes al etanol, hacen de él una sustancia ideal
para la adulteración de las bebidas alcohólicas 12, 19, 20, 21.
Debido a la alta solubilidad en agua y afinidad a los lípidos, el metanol se
absorbe rápidamente por el tracto gastrointestinal y también puede hacerlo por piel
y vía respiratoria. Una vez absorbido se distribuye rápidamente por los tejidos. Se
pueden encontrar niveles de metanol en sangre 30 a 90 minutos después de ser
ingerido y su vida media se ha calculado en promedio de 2 a 24 horas, pero en
presencia de etanol puede prolongarse hasta 30 o 52 horas. El metanol es eliminado
en un 3 a 10% sin modificación por orina y en menor proporción por el aire
espirado. Las reacciones metabólicas de metanol son catalizadas por la enzima
alcohol deshidrogenasa del hígado 19, 22.
La mayor parte del metanol que ingresa al organismo es metabolizado en el hígado
en un 90 a 95%, es oxidado por la enzima alcohol deshidrogenasa para ser
transformado en formaldehido, el cual es rápidamente convertido en ácido fórmico
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por la enzima aldehído deshidrogenasa. Éste último se convertirá en anhídrido
carbónico (C02) y agua mediante una oxidación. El formaldehído y el ácido fórmico
son los metabolitos causantes del cuadro clínico presente en la intoxicación. La
administración de folatos durante el tratamiento ejerce una acción protectora,
estimulando la transformación del ácido fórmico en C02. Se ha identificado al ácido
fórmico como el metabolito responsable de los efectos tóxicos del metanol, el cual
inhibe la citocromo oxidasa, interfiriendo así directamente con el transporte de
electrones en la cadena respiratoria. Existe evidencia de que este ácido inhibe la
función mitocondrial en la retina y aumenta el estrés oxidativo 19, 21, 23.
En el proceso metabólico del metanol se produce formaldehido y ácido
fórmico. Estos compuestos pueden producir acidosis metabólica, lesiones oculares,
la degeneración del parénquima del hígado, los riñones y el corazón, cambios en la
piel, el enfisema y la disfunción cerebral progresiva, y necrosis pancreática. Los
síntomas de la intoxicación por metanol en el ser humano dependen de la cantidad
ingerida y oscila entre el dolor de cabeza, náuseas y vómitos e incluso la ceguera y
la muerte 19, 21, 22, 23.
La susceptibilidad a los efectos tóxicos del metanol es variable, pero la ingesta de
una pequeña cantidad (15 a 30 mL al 100%), puede dar lugar a una intoxicación
grave. La dosis tóxica de metanol presenta variaciones individuales; para un adulto
es de 60-250 mL de metanol al 40%, aunque se ha reportado sobrevida con 500-600
mL y muerte con tan sólo 15 mL. El etanol, cuando se consume al mismo tiempo
con metanol, reduce los efectos tóxicos de éste. El mecanismo de esta protección se
explica por la capacidad del etanol para inhibir la oxidación metabólica de metanol.
Además del daño a la salud causado por el consumo de alcohol, también hay que
considerar la posibilidad de adulteración y/o contaminación de estas bebidas 19, 20, 23.
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CONCLUSIÓN
Se encontró que el 15% de muestras de vino tinto expendidas en la Ciudad de
Trujillo (Mercado Zonal Palermo); contienen metanol en concentraciones menores
al límite máximo permitido, que es 400 mg/L (40,00% P/V).
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GILANCIA+Y+CONTROL+DE+INTOXICACIONES+POR+METANOL+CO
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ANEXOS
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ANEXO 1. CÁLCULOS
Concentración del estándar
𝐶𝑐 𝑆𝑇𝐷 = 𝜌𝐶𝐻3𝑂𝐻𝑥 𝑉𝑆𝑇𝐷 𝑥 𝐷𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 𝑆𝑇𝐷 𝑥 % 𝑃𝑢𝑟𝑒𝑧𝑎
𝐶𝑐 𝑆𝑇𝐷 = 790 𝑥1
25𝑥
3
25𝑥 0.999 = 3.788208 𝑚𝑔/𝑚𝐿
Donde:
Cc STD: Concentración del estándar.
ρCH3OH: Densidad de Metanol (790mg/mL).
VSTD: Volumen tomado del estándar.
% Pureza: 99.9%
Concentración de la Muestra
%100)/(% xFdMxmLmgxCcSTDándarÁreadelEst
estraÁreadelaMuMETANOL
Donde:
Cc STD: Concentración del estándar.
FdM: Factor de dilución de la muestra.
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Promedio ( X ):
𝑿 =𝒙𝟏 + 𝒙𝟐 + ⋯ + 𝒙𝒏
𝒏
Donde:
n = número de muestras
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Anexo 2: Tablas de Tiempos de retención (tR) y áreas
obtenidas en cada una de las muestras.
Muestra 01 tR Área tR Área
Vino
Vencedores
M1a 6,241 3,04686 6,909 1602,91455
M1b 6,241 3,04570 6,909 1605,14990
M1c 6,240 4,24108 6,909 1658,83496
M promedio 6,241 3,44455 6,909 1622,29980
Muestra 02 tR Área tR Área
Vino
Borgoña
Bailetti
M2a 6,240 2,80034 6,917 2493,45264
M2b 6,241 3,06542 6,918 2615,90234
M2c 6,240 3,19056 6,919 2660,88989
M promedio 6,240 3,01877 6,918 2590,08162
Muestra 03 tR Área tR Área
Vino
Oporto
San
Eusebio
M3a 6,242 0,87174 6,923 3156,02124
M3b 6,240 1,08339 6,925 3428,21973
M3c 6,240 0,95276 6,922 3029,53369
M promedio 6,241 0,96930 6,923 3204,59155
Muestra 04 tR Área tR Área
Vino
Borgoña
Especial
Cataluña
M4a 6,240 1,91473 6,913 2058,03856
M4b 6,240 2,55185 6,915 2244,02319
M4c 6,240 2,58015 6,915 2294,72217
M promedio 6,240 2,34891 6,914 2198,92797
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Muestra 05 tR Área tR Área tR Área
Vino
Tinto
dulce Don
Pancho
M5a 6,240 7,47101 6,386 1,47619 6,921 2949,73730
M5b 6,240 6,94993 6,386 1,62056 6,920 2780,13062
M5c 6,240 6,95954 6,385 1,52543 6,918 2611,00757
M promedio 6,240 7,12683 6,386 1,54073 6,920 2780,29183
Muestra 06 tR Área tR Área
Vino
Borgoña
Cartavio
Bailetti
M6a 6,241 2,44327 6,913 1791,55664
M6b 6,240 2,03964 6,908 1414,62427
M6c 6,240 2,28532 6,910 1563.67358
M promedio 6.240 2.25608 6.910 1589.95150
Muestra 07 tR Área tR Área
Vino
Borgoña
Bailetti
M7a 6,239 0,84622 6,914 1988,84875
M7b 6,240 1,07999 6,921 2724,40186
M7c 6,240 0,94066 6,918 2374,92139
M promedio 6,240 0,95562 6,918 2362,72400
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Muestra 08 tR Área tR Área tR Área
Vino
Borgoña
Di Barolo
M8a 4,689 1,14913 6,241 2,38612 6,915 2069,30835
M8b 4,691 1,04033 6,241 2,30815 6,915 2062,55615
M8c 4,687 1,05426 6,239 2,30527 6,913 1933,09546
M promedio 4,689 1,08124 6,240 2,33318 6,914 2021,65332
Muestra 09 tR Área tR Área
Vino Semi
seco
Don
Salvattore
M9a 6,240 7,53252 6,925 3267,08618
M9b 6,240 7,34684 6,927 3401,32739
M9c 6,240 7,19560 6,927 3267,08618
M promedio 6,240 7,35832 6,926 3311,83325
Muestra 10 tR Área tR Área
Vino
Oporto
Bernina
M10a 6,240 1,91106 6,911 1678,50208
M10b 6,240 1,34222 6,909 1474,96350
M10c 6,240 1,32771 6,912 1788,73132
M promedio 6,240 1,52700 6,911 1647,39897
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Muestra 11 tR Área tR Área tR Área
Vino
Malbec
M11a 6,243 2,57022 6,396 2,85804 6,922 3028,38257
M11b 6,243 2,57288 6,396 2,85273 6,922 3028,38380
M11c 6,243 2,57439 6,396 2,85799 6,922 3028,38145
M promedio 6,243 2,57250 6,396 2,85625 6,922 3028,38261
Muestra 12 tR Área
Vino Borgoña
semi seco Sol de
Oro
M12a 6,911 1702,63013
M12b 6,924 3125,10254
M12c 6,922 2870,70557
M promedio 6,919 2566,14608
Muestra 13 tR Área tR Área
Vino
Borgoña
Venecia
M13a 6,240 1,51807 6,926 3405,28345
M13b 6,240 1,49856 6,928 3604,41431
M13c 6,240 1,56994 6,925 3272,24585
M promedio 6,240 1,52886 6,926 3427,31454
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BIBLIO
TECA D
E FARMACIA
Y B
IOQUIM
ICA
Muestra 14 tR Área tR Área
Vino semi
seco
Continental
M14a 6,239 1,25078 6,914 2085,88892
M14b 6,240 1,30382 6,913 1897,64526
M14c 6,239 1,30164 6,912 1859,93213
M promedio 6,239 1,28541 6,913 1947,82210
Muestra 15 tR Área tR Área
Vino
Borgoña
San
Alfredo
M15a 6,240 0,98001 6,907 1214,78796
M15b 6,240 0,97564 6,909 1340,27478
M15c 6,240 1,06550 6,909 1402,24976
M promedio 6,240 1,00705 6,908 1319,10417
Muestra 16 tR Área tR Área tR Área
Vino
Uvita
M16a 6,240 1,98146 6,391 2,15288 6,926 2591,60783
M16b 6,241 2,37213 6,391 2,86549 6,926 3311,33423
M16c 6,240 1,98841 6,389 2,15017 6,919 2591,60864
M promedio 6,240 2,11400 6,390 2,38951 6,924 2831,51690
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E FARMACIA
Y B
IOQUIM
ICA
Muestra 17 tR Área
Vino
Borgoña
dulce Sol
de Oro
M17a 6,902 664,51703
M17b 6,903 793,31049
M17c 6,903 814,39917
M promedio 6,903 757,40890
Muestra 18 tR Área tR Área
Vino
Cataluña
Borgoña
Afrutado
M18a 6,242 1,44018 6,905 1072,56860
M18b 6,240 1,71441 6,905 1106,65637
M18c 6,241 1,74559 6,907 1265,99695
M promedio 6,241 1,63339 6,906 1148,40731
Muestra 19 tR Área tR Área
Vino Don
Francisco
de
Carbajal
M19a 6,240 1,99667 6,906 1175,08936
M19b 6,242 1,81917 6,906 1038,82874
M19c 6,241 1,79433 6,906 1080,76575
M promedio 6,241 1,87006 6,906 1098,22795
Muestra 20 tR Área tR Área
Vino
Borgoña
San
Alfredo
M20a 6,242 1,95643 6,907 1124,80139
M20b 6,240 2,31583 6,906 1195,65942
M20c 6,240 2,51103 6,908 1340,50195
M promedio 6,241 2,26110 6,907 1220,32092
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Anexo 3: CROMATOGRAMAS DELAS
MUESTRAS
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Anexo 4
Equipo de Microdestilación Simple.
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Cromatógrafo de Gases.
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