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TIPIFICACION GRUPOS SANGUINEOS MR Fredy Gonzales Ordinola

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  • TIPIFICACION GRUPOS SANGUINEOSMR Fredy Gonzales Ordinola

  • Globulos RojosAg expresados genticamente

    Deteccin mediante Ac especficos

    Grupo sanguneo: clasificacin de sangre segn caractersticas de superficie de GR.

    Sistemas mas importantesABORh

    Otros:DuffyDiegoLewisFisher

  • Sistema ABO

    Descubierto en 1901 por Landsteiner.

    Su nombre proviene de los 3 tipos de grupos que se presentanGrupo A Grupo BGrupo O

    Importacia clnica: Posiblidad de aloanticuepos que puedan originar destruccin de los hematies transfundidosHemlisisAnemiaMuerte

  • D- Galactosa

  • Glicosil fosfatidil inositol

  • SISTEMA RH

    Rh: Rhesus (Griego: Mono)1940 Landsteiner y Salomon Wiener descubrieron Ag en GR hallado en suero de conejos inmunizados con sangre de mono (Macacus Rhesus)

    El factor Rh es una protena integral de membrana de los GR.Rh positivas: expresan sta protena en su GRRh negativa: no expresan estas protenas en sus GR.

    Antgenos del sistema Rh: Fisher y Race

    D Rh(+) : D(+)C Rh (-) : D(-) Ece

    AloanticuerposAc anti Rh aparecen despus que individuo Rh negativo se expuso a eritrocitos Rh +

  • D dbil:Eritrocitos D positivos tienen menor concentracin de Ag DIncubar con Anti D o agregar despus suero de coombs (antiglobulina humana) DU

    D parcial: Perdida de una parte del gen D. (deleciones mutaciones)Expresion gentica no es total (perdidas o deleciones parciales)

    Rh dbiles deben considerarse Rh negativos para fines obsttricos o transfusionalesDonantes Rh dbil se consideran como Rh positivos.

  • Aglutingenos: Protenas de la membrana plasmtica de los glbulos rojos y que determinan el grupo sanguneo. Aglutininas: Protenas presentes en el plasma sanguneo.

  • La sangre desarrollara aglutininas para su tipo de sangre antagnico.

    Ac anti Ag eritrocitarios: IgG, IgM, IgA

    Ac naturales IgM Ac adquiridos IgG

  • TIPIFICACIONLaminaTarjeta GelTubo

  • Tipificacin ABO de globulos rojos en portaobjeto

    Reactivo anti AReactivo anti BReactivo anti D

    Anti A / Anti B: Preparados a partir de Ac monoclonales tipo IgM , secretado por lneas celulares de hibridoma de ratn .

    Anti D:Mezcla de Ac monoclonales tipo IgM/IgG.

    Unanticuerpo monoclonal: Achomogneo producido por clula hibrida Linfocito B + Clula tumoral una clula madre hematopoyetica

    IgM: Aglutinacin con GR con D normal

    IgG anti D: detecta variantes dbiles (prueba indirecta de anti globulina)

  • Observar aglutinacin mximo hasta en 2 minutos

  • Anti ACel ACel BSF + GR centrifugado

    Centrifugar tubo lila.1 gota de cada reactivo en su respectivo tuboAgregar PLASMA a CEL A y CEL BAgregar GR (centrifugado) al tubo con suero fisiologico (SF)

    Anti BAnti ABAnti DInversa (plasma)Grupo sanguineo en tubo1234

  • Anti ACel ACel BSF + GR centrifugado

    5.- Agregar una gota de suspension (GR + SF) en tubos con anti A, anti B , anti AB y anti D6.- Centrifugar y leer.

    Anti BAnti ABAnti DInversa (plasma)Grupo sanguineo en tubo5

  • AB no expresa Anti A ni Anti B(receptor univesal)INVERSATubo con reactivo

    ANTI AANTI BANTI ABCEL ACEL BA+-+-+B-+++-O---++AB+++--

  • TARJETA GEL

    Se basa en la deteccin de las reacciones de aglutinacin de hematesAglutinacin se da al entrar el GR en contacto con los Ac correspondientes.

    Anti A mnoclonalAnti B monoclonalAnti AB monoclonalAnti D monoclonalFenotipo de RhControl

  • Se incorpora dentro de la columna de Gel el Reactivo:Un Ac especificoSuero antiglobulina humanaNaclCamara de reaccionColumnaFondo (aspecto conico)

  • Composicin del GelNeutro sin antisuero especfico (NACl)Mezcla de gel y antisuero especificoMezcla de gel y antiglobulina humana

  • Hemates NO sensibilizados quedaran en fondo del tubo (boton)

    Hemates aglutinados quedaran aglutinados en la columna gel.

    4+ : GR aglutinados en parte superior

    3+: GR aglutinados comienzan a dispersarse por la comuna de gel

    2+: GR aglutinados dispersas por columna de gel

    1+: GR aglutinados en parte inferior de columna gel

    O: GR formando botn bien definido en parte inferior de columna

    Doble poblacin: Banda de GR aglutinados en parte superior de columna y no aglutinadas en el fondo.

  • Diluyente LISS 2Dilucion de Hematies interpretacionDispensar hematies en cada uno de los microtubosGRUPO SANGUINEO TARJETA GEL

  • ANTIGENO D DEBIL : Variante DU

    DU : expresin dbil del Ag D normal.Menor concentracin de Ag D por el GR.DU positivo: Rh positivoSe utiliza anti D en prueba antiglobulinica directa

  • 1.- Lavar y centrifugar2.- SF +GR lavados3.- Suspension + Anti D

    Variante DU Tubo4.- Centrifugar y leer5.- Albumina (potenciador) Incubar Centrifugar y leer.Lectura (-)6.-Lavar y centrifugarLectura (-)CoombsInti IgGAnti RhInti IgGAnti RhAnti D

  • Ac completos ( ocurrencia natural)Ac incompletos

    Termino utilizado para indicar anticuerpos IgM capaces de producir aglutinacin visible de glbulos rojos suspendidos en solucin salina.

    son producidos por estimulacin antignica

    Ejm. Suero anti-A, anti-B

    Usualmente IgG son capaces de adherirse al antgeno pero son incapaces de aglutinar GR suspendidos en salina .

    Solo aparecen con estimulacin antignica

    Anticuerpos completos e incompletos

  • GRACIAS

    **El antgeno H es una molcula que est presente en los glbulos rojos humanos. Se trata de una molcula a partir de la cual se forman los antgenos A y B. El antgeno A se produce por una enzima que aade una molcula de N-acetil galactosamina en el antgeno H, mientras que el antgeno B se produce por una enzima que aade una D-galactosa en el antgeno H.Fenotipo bombay no tiene ni Ag A, ni B ni H (Ojo no confundirlo con grupo O, q s expresa Ag H)**

    .*********Cel A y Cel B es para hacer el grupo en inversa se usa plasma dond hay ANTICUERPOS*****Dilucion al 5% (500ul Diluyente liss 2 + 25 ul GR)Dispensar 10ul d GR al 5% en microtubosCentrifugarLectura

    Diluyente 1: ID-Diluent 1 es una solucin de bromelina modificada, con actividad enzimtica estabilizada por un prolongado perodo. Se la utiliza para preparar suspensiones de hemates destinadas a la determinacin de grupos sanguneos en tarjetas de gel con reactivo de origen humano y como aditivo para pruebas enzimticas con hemates no tratados para deteccin de anticuerpos y pruebas de compatibilidad. Las enzimas proteolticas modifican los antgenos eritrocitarios con lo que aumentan la reactividad de algunos sistemas de grupo sanguneo (en especial los del sistema Rh), aunque suprimen otros como los antgenos de los sistemas MNSs, Duffy y Xg. Las enzimas ms utilizadas en la serologa de grupos sanguneos son la papana y la bromelina. 22 La papana suele emplearse para el tratamiento enzimtico de los hemates antes de su uso, en tanto que la bromelina se utiliza adems como reactivo aditivo.

    Diluyente 2: Liss modificada para suspensiones de hemates. La solucin de baja fuerza inica (Liss) aumenta la tasa de asociacin de anticuerpos, con lo que potencia las reacciones antgeno anticuerpo. ID-Diluent 2 es una solucin modificada de baja fuerza inica destinada a preparar suspensiones de hemates al 5% para determinacin de grupos sanguneos en tarjetas de gel con reactivo de origen monoclonal as como suspensiones de hemates al 0,8% para pruebas de compatibilidad, pruebas de la antiglobulina humana, y hemates de prueba preparados en el laboratorio.******