informe 10 de microv

INFORME DE LABORATORIO N10

Ttulo:

Numeracin de Mohos y Levaduras: HONGOS.

Docente:

MSc. Martn Martnez Vila

Integrantes:

Vsquez Pea Julian Gustavo 20132141E

Flores Crdenas Karen Kimberly 20123502I

2015

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERA

Facultad de Ingeniera Ambiental

MICROBIOLOGA SANITARIA I

INFORME DE LABORATORIO N10 2015

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I. OBJETIVOS

Conocer la importancia de la presencia de mohos y levaduras en muestras

ambientales.

II. MARCO TEORICO

SABOURAUD GLUCOSADO AGAR

Medio utilizado para el aislamiento, identificacin y conservacin de hongos

patgenos y saprfitos. Tambin es til para el cultivo de levaduras. Medio de cultivo

recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos, particularmente los

asociados con infecciones cutneas (piel, pelo, etc.).

En el medio de cultivo, la pluripeptona y la glucosa, son los nutrientes para el

desarrollo de microorganismos. El alto contenido de glucosa, la presencia de

cloranfenicol y el pH cido, favorecen el crecimiento de hongos por sobre el de

bacterias.

Adems, al medio de cultivo, pueden agregarse otros agentes selectivos de

crecimiento.

Fungi

El trmino Fungi (latn, literalmente "hongos") designa a un grupo de organismos

eucariotas entre los que se encuentran los mohos, las levaduras y las setas. Se

clasifican en un reino distinto al de las plantas, animales y protistas. Esta

diferenciacin se debe, entre otras cosas, a que poseen paredes celulares compuestas

por quitina, a diferencia de las plantas, que contienen celulosa. Se ha descubierto que

organismos que parecan hongos en realidad no lo eran, y que organismos que no lo

parecan en realidad s lo eran, si llamamos "hongo" a todos los organismos derivados

del que ancestralmente adquiri la capacidad de formar una pared celular de quitina.

Debido a ello, si bien este taxn est bien delimitado desde el punto de vista

evolutivo, an se estn estudiando las relaciones filogenticas de los grupos menos

conocidos, y su lista de subtaxones cambi mucho con el tiempo en lo que respecta a

grupos muy derivados o muy basales.

Los hongos se presentan bajo dos formas principales: hongos filamentosos

(antiguamente llamados "mohos") y hongos levaduriformes. El cuerpo de un hongo

filamentoso tiene dos porciones, una reproductiva y otra vegetativa. La parte


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vegetativa, que es haploide y generalmente no presenta coloracin, est compuesta

por filamentos llamados hifas (usualmente microscpicas); un conjunto de hifas

conforma el micelio (usualmente visible). A menudo las hifas estn divididas por

tabiques llamados septos.

Los hongos levaduriformes o simplemente levaduras son siempre unicelulares, de

forma casi esfrica. No existen en ellos una distincin entre cuerpo vegetativo y

reproductivo.

Los hongos tienen una gran importancia econmica: las levaduras son las

responsables de la fermentacin de la cerveza y el pan, y se da la recoleccin y el

cultivo de setas como las trufas. Desde 1940 se han empleado para producir

industrialmente antibiticos, as como enzimas (especialmente proteasas). Algunas

especies son agentes de biocontrol de plagas. Otras producen micotoxinas,

compuestos bioactivos (como los alcaloides) que son txicos para humanos y otros

animales. Las enfermedades fngicas afectan a humanos, otros animales y plantas;

en estas ltimas, afecta a la seguridad alimentaria y al rendimiento de los cultivos.

Moho

El moho es un hongo que se encuentra tanto al aire libre

como en lugares hmedos y con baja luminosidad. Existen

muchas especies de mohos que son especies microscpicas

del reino fungi, que crecen en formas de filamentos

pluricelulares o unicelulares. El moho crece mejor en

condiciones clidas y hmedas; se reproducen y propagan

mediante esporas. Las esporas del moho pueden sobrevivir

en variadas condiciones ambientales, incluso en extrema

sequedad, si bien sta no favorece su crecimiento normal.

Los tipos de mohos ms comunes son:

o Cladosporium Penicillium

o Alternaria

o Aspergillus

o Mucor

La penicilina (cuyo nombre deriva del hongo Penicillium) es un antibitico. Fue

descubierto por Alexander Fleming.

Mohos en el Ambiente:


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Los mohos se encuentran prcticamente en cada ambiente y pueden ser detectados,

tanto en interiores como al aire libre, durante todo el ao. Las condiciones hmedas y

clidas favorecen el crecimiento del moho. Al aire libre pueden encontrarse en reas o

lugares hmedos sombreados donde hay descomposicin de hojas o de otro tipo de

vegetacin. En los interiores pueden encontrarse en lugares donde los niveles de

humedad son altos como los alrededores del lavavajillas.

Mohos como causantes de infecciones

Algunas personas son sensibles a los mohos. La exposicin a los mohos en estas

personas puede causarles sntomas como congestin nasal, irritacin de los ojos o

resuello. Otras personas que tienen graves alergias a los mohos pueden experimentar

reacciones ms severas. Las reacciones severas pueden ocurrir entre trabajadores

expuestos a grandes cantidades de mohos en los lugares de trabajo, como en el caso

de los granjeros que trabajan todo el da alrededor del heno mohoso. Algunas

reacciones severas pueden incluir fiebre y dificultad para respirar. Las personas con

enfermedades crnicas, como enfermedad obstructiva de los pulmones, pueden

presentar infecciones de moho en los pulmones. Algunos mohos son txicos porque

producen micotoxinas que pueden afectar gravemente a humanos y animales.

Las personas sensibles deben evitar reas que tienen ms probabilidad de tener moho

como los lugares donde se apila el abono, el prado cortado y las zonas boscosas. Al

interior de las casas, el crecimiento del moho puede disminuirse manteniendo los

niveles de humedad por debajo del 50% y ventilando las duchas y los lugares donde se

cocina. Los crecimientos de moho pueden eliminarse de las superficies duras con

productos comerciales, agua y jabn, o con una solucin de blanqueador preparada

con una mezcla de no ms de 1 taza de cloro y 1 galn de agua. Las personas sensibles

deben ponerse una mscara ajustada en la cara en los casos en que no pueda evitarse

la exposicin de s mismo al moho.

El consumo del moho del pan en pequeas cantidades es altamente txico para el

organismo. El cuadro aparece lentamente y consiste inicialmente en manifestaciones

prodrmicas (nuseas, cefalea, vmitos), y alcanza su pico a las 20 horas, cuando se

presentan: disfuncin erctil irreversible, hipogonadismo progresivo, convulsiones,

alucinaciones y sndrome de Cushing.

Levadura

Se denomina levadura a cualquiera de los diversos hongos microscpicos unicelulares

que son importantes por su capacidad para realizar la descomposicin mediante


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fermentacin de diversos cuerpos orgnicos, principalmente los azcares o hidratos

de carbono, produciendo distintas sustancias.

Aunque en algunos textos de botnica se considera que las levaduras verdaderas

pertenecen slo a la clase Ascomycota, desde una perspectiva microbiolgica se ha

denominado levadura a todos los hongos con predominio de una fase unicelular en su

ciclo de vida, incluyendo a los hongos basidiomicetes.

A veces suelen estar unidos entre s formando cadenas. Producen enzimas capaces de

descomponer diversos sustratos, principalmente los azcares.

Una de las levaduras ms conocidas es la especie Saccharomyces

cerevisiae. Esta levadura tiene la facultad de crecer en forma

anaerobia1 realizando fermentacin alcohlica. Por esta razn se

emplea en muchos procesos de fermentacin industrial, de forma

similar a la levadura qumica, por ejemplo en la produccin de

cerveza, vino, hidromiel, aguol, pan, antibiticos, etc.

Las levaduras se reproducen asexualmente por gemacin o

brotacin y sexualmente mediante ascosporas o basidioesporas.

Durante la reproduccin asexual, una nueva yema surge de la levadura madre cuando

se dan las condiciones adecuadas, tras lo cual la yema se separa de la madre al

alcanzar un tamao adulto. En condiciones de escasez de nutrientes las levaduras que

son capaces de reproducirse sexualmente formarn ascosporas. Las levaduras que no

son capaces de recorrer el ciclo sexual completo se clasifican dentro del gnero

Candida.

La levadura es la primera clula eucariota en la que se ha intentado expresar protenas

recombinantes debido a que es de fcil uso industrial: es barata, cultivarla es sencillo y

se duplica cada 90 minutos en condiciones nutritivas favorables. Adems, es un

organismo fcil de modificar genticamente, lo que permite realizar experimentos en

varios das o semanas. Sin embargo, las levaduras poseen un mecanismo de

glicosilacin diferente al que se encuentra en clulas humanas, por lo que los

productos son inmunognicos.

III. MATERIALES Y EQUIPOS


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Tubos de ensayo 16 x 150mm con 10ml de agua peptonada (0.1%) ms tween

80 (1%).

Tubos de ensayo 15 x 150mm con 10ml de agua peptonada (0.1%).

Torundas estriles con vstego de madera.

Plantillas de hojalata o aluminio de 10cm x 10cm (100cm2).

Esptula Drigalsky.

Incubadora 35oC.

Pipetas bacteriolgicas 1ml.

Refrigeradora.

Bao Mara a 46oC.

Agar TSA en placa Petri estril (recuento de hetertrofos).

Agar Endo en placa Petri estril.

Agar Manitol Salado en placa Petri estril. (para aislar estafilococos).

Agar sabourand glucosado en placa Petri estril.

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Preparacin de la muestra

Colocar 10 gramos de muestra de avena en el vaso de la licuadora (15mil

revoluciones x minuto)

Agregar 90 ml de diluyente (agua peptonada al 0.1%) licuar y obtener una

dilucin de 10-1. Homogenizar por 2 minutos.

Preparacin de Diluciones

Luego extraer 1 ml de muestra con una pipeta correctamente esterilizada y

vaciar en un tubo de ensayo esterilizado que posee un tapn que contiene

9 ml de agua peptonada (En el proceso utilizar un mechero para que no

haya una contaminacin externa, siempre vaciar la pipeta al tubo de

ensayo en presencia del mechero).

Tapar inmediatamente el tubo de ensayo con algodn o tapa rosca

despus de haberle echado 1 ml de muestra.

Etiquetar este tubo de ensayo con 10-1 lo cual me indica que esta es su

concentracin.

Extraer 1 ml del tubo de ensayo de 10-1 con otra pipeta correctamente

esterilizada y vaciarlo en otro tubo de ensayo correctamente esterilizado

que contiene 9 ml de agua peptonada y etiquetarlo con 10-2.

As seguir sucesivamente con instrumentos correctamente esterilizados

hasta llegar a una concentracin de 10-5.


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Recuento por Difusin

Primero se coloca el inoculo (1 ml) en la placa Petri estril con la ayuda de

una pipeta estril, luego aadir 15 -18 ml del Agar Sabourand Glucosado (a

46C) (Esto se realiza en la proximidad de las llamas del mechero), ir

homogeneizando con movimientos de arriba hacia abajo y luego de

derecha izquierda hacer esto muy suavemente.

Se echa 1 ml de cada tipo de concentracin a las placas Petri y se repite el

movimiento mencionado anteriormente, realizar este proceso con todas

las concentraciones preparadas.

Dejar enfriar las placas e incubar sin invertir a una temperatura de 20-24C

x 4das.

Despus de estos das hacer un conteo de colonias en placas que

contengan 20-200 colonias de mohos y levaduras por separado.

Reportar UFC / ml.

V. RESULTADOS

DILUCIONES OBSERVACION

10-1 Incontable

10-2 15 levaduras. 2 Mohos

10-3 18 levaduras, 1 moho

10-4 1 moho

10-5 1 moho


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VI. CONCLUSIONES

- Se pudo observar presencia de hongos en los cereales ya que en ellos ha crecido

levadura y moho indicando que hay presencia de hongos.

- Los hongos y las levaduras tienen sus propios medios de cultivacion

VII. RECOMENDACIONES

- Los hongos tiene sus condiciones de crecimiento por eso no se lo introducir a la

incubadora y se lo dejara al aire libre

- Licuar bien el cereal para que al momento de usar la pipeta esta no se atasque.

VIII. BIBLIOGRAFA

o http://es.wikipedia.org/wiki/Fungi

o http://es.wikipedia.org/wiki/Levadura

o Manual Prctico de Microbiologa. R. Daz, y colaboradores, 2a edicin. Ed.

Masson.

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