Comenzar bien no es poco, pero tampoco mucho (Sócrates)

MÉRIDA SILES CARLOS GABRIEL

UMSS ODONTOLOGIA

Presentación:

Docente:

Dra. SILES ROCIÓ INES

MICROBIOLOGÍAEl mundo oculto de los

microbios

Condiciones para el crecimiento microbiano

Nutrientes

agua

fuente de energía

fuentes de C, N, otros elementos

micronutrientes, factores de crecimiento

Condiciones de cultivo

temperatura

pH

luz

aireación

actividad de agua

potencial redox

Crecimiento

Medios de cultivo

DIAGNOSTICO DE MICOBACTERIAS POR EL

LABORATORIO

Cochabamba-Bolivia

Diagnóstico

Clínico

Investigaciones

No microbiológicas

Tomar correctamente

Rotular y embalar adecuadamente

Almacenar y transportar correctamente

No teñidos o teñidos con Gram u

otra tinción

Serología Tecnologíasde DNA

Por difusión en discos

o MIC

Característica de colonia, morfología, hemólisis, pigmento,

etc.

Cochabamba-Bolivia

CARACTERISTICAS

MORFOLÓGICAS

Características Morfológicas

Se logra por diferentes métodos, siendo los mas comunes: examen en fresco y las tinciones.

EXAMEN EN FRESCO:GOTA PENDIENTE

TINCIONES TINCION GRAM:

Tinción GRAM: Bacterias GRAM positivas

Cocos gram positivos:

Bacilos Gram positivos:

Tinción GRAM: Bacterias GRAM negativas

Cocos GRAM-negativos:

Bacilos GRAM-negativos:

Cochabamba-Bolivia

CaracTERISTICAS

De Cultivo

CARACTERISTICAS DE CULTIVO

Medio de Cultivo Líquido

Formación de una película en la superficie, sedimento y olor

Streptococcus mutans. Tinción de Gram. Cultivo en caldo de tioglicolato. Su morfología es parecida al Bacillus y forma cadenas cuando se cultiva en caldo, puede causar endocaditits sub aguda bacteriana y caries dental.  

Cultivo de placa bacteriana subgingival en el que se aprecia la gran

diversidad microbiana de esta microflora.

Periodontitis. Se aprecia inflamación de la encía y presencia de bolsas periodontales

Medios de Cultivo Sólido

El AGAR es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él.

Streptococcus mutans. Tinción de gram.  El cultivo en placa de agar sangre produce una morfologia cocoide sin formar cadenas. Este microorganismo puede causar endocarditis  bacteriana subaguda y caries dental.

Cultivos en placas de  bicarbonato y  agar sangre de Bacillus anthracis. Colonias lisas en bicarbonato (izquierdo) y colonias rugosas en el agar sangre (derecho).

                       En un estudio bacteriológico in-vitro se demostró que con una sola aplicación de campos magnéticos naturales a través de la mano del Doctor Wilhelm "Willy" Frinta durante 10 minutos y a una distancia de 1 1/2 pulgada sobre un recipiente de petri con agar sangre, hubo una inibición de crecimiento de gérmenes, (estreptococo, estafilococos)

CONTROL ESTUDIO  

Cochabamba-Bolivia

ACTIVIDAD

BIOQUÍMICA

ACTIVIDAD BIOQUIMICA

BACTERIAS PROTEOLÍTICAS

Constituyen un grupo heterogéneo de bacterias fuertemente proteolíticas que forman proteinasas extracelulares , así

llamadas porque se difunden fuera de las células. Todas las bacterias poseen proteinasas intracelulares , pero sólo unas

cuantas las tienen en forma que puedan ser difundidas extracelularmente. Las Bacterias proteolíticas pueden

dividirse en aerobias o facultativas , que pueden ser esporógenas o no y anaerobias productoras de esporas.

Caracteristicas fermentativas sobre azucares

TEMPERATURA : Tiene una gran influencia en la fermentación del mosto, en la fermentación alcohólico no hay actividad de levaduras por debajo de 3ºC, siendo esta muy esta muy lenta hasta los 6 ó 7 ºC. Los cambios bruscos de temperatura actúan de forma muy negativa en la fermentación, a tal extremo que puede llegar a paralizarla. En general, para todo tipo de actividad microbiana, las temperaturas más favorables son alrededor de 30 ºC, sin embargo, para evitar competencia de cepas bacterianas no deseables, la temperatura más adecuadas para la fermentación alcohólica y maloláctica es la que ronda entre 12-18 ºC.

Fermentación de azucares por diferentes bacterias

SINTESIS DE UREASA

El HP sintetiza la enzima ureasa que cataliza la hidrólisis de la urea del jugo gástrico, formando bicarbonato y amonio. El bicarbonato aumenta el pH alrededor de la bacteria, protegiéndola del medio ácido. El amonio puede producir directamente daño celular, también se ha reportado que aumenta la retrodifusión de los iones H+, e inactiva el complemento (1-4).

El Helicobacter pylori sintetiza la enzima ureasa, que cataliza la hidrólisis de la urea del jugo gástrico, formando bicarbonato y amonio. El bicarbonato aumenta el pH alrededor de la bacteria, protegiéndola del medio ambiente ácido. El amonio puede producir directamente daño celular

METODO DE VACIADO EN PLACA

FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO

Factores externos

Condiciones ambientales o culturales: pH, T°, Aw, O2, CO2 Condiciones nutricionales: Tasa C/N 10:1, 12:1

Factores internos

Capacidad metabólica

QUIMIOSTATO Es el dispositivo más comúnmente usado para cultivo

continuo. Su diseño y manejo permite el control de la densidad de la población nutrientes en el medio. Si la tasa de dilución se incrementa y la concentración de nutrientes es constante, la densidad de la población es constante y la tasa de crecimiento. Cuando el sistema está en equilibrio, el número de células (densidad de la población) y el estado nutricional permanecen constantes, a esto se le conoce como “estado estable” o “estado sostenido”.

Propiedad

Metabólica

CARACTERES

seROLÓGICOS

Acción

Patógena

ACCION PATOGENA

ACCION PATOGENA

VIA INTRADERMICA

VIAS DE INOCULACION

VIA SUBCUTANEA

VIA INTRAMUSCULAR

VIA ENDOVENOSA

VIA INTRAPERITONEAL

VIA INTRANASAL

VIA BUCAL

Cochabamba-Bolivia

tIPIFICACIÓN FÁGICA

Cochabamba-Bolivia

Medios de cultivoMedios de cultivo

-Los medios de cultivo son mezclas de -Los medios de cultivo son mezclas de substancias nutritivas que se combinan para substancias nutritivas que se combinan para favorecer el crecimiento, aislamiento e favorecer el crecimiento, aislamiento e identificación de microorganismos. identificación de microorganismos.

-material alimenticio en el que crecen-material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el los microorganismos es el Medio deMedio de CultivoCultivo y el crecimiento de los y el crecimiento de los microorganismos es el microorganismos es el CultivoCultivo. .

Cultivo•Infecciones por bacterias viables•Infecciones polimicrobianas•Microorganismos anaerobios

Periodontitisperiimplantitis

PulpitisAbscesos periapicalesosteomielitis

Cultivo

Transporte de muestras IdentificaciónRecuento

RápidoCondiciones de anaerobiosis

Antibiograma

Crecimiento lento

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conscistencia

-Un medio de cultivo es una preparación-Un medio de cultivo es una preparaciónartificial liquida, sólida o semisólida, artificial liquida, sólida o semisólida, compuesta por nutrientes y utilizada para compuesta por nutrientes y utilizada para hacer crecer microorganismos.hacer crecer microorganismos.

Clasificacion de los medios de Clasificacion de los medios de cultivocultivo

Por su consistencia:Por su consistencia:

1-liquidos:1-liquidos: son soluciones preparadas a base de son soluciones preparadas a base de sustancias que satisfagan los requisitos nutritivos sustancias que satisfagan los requisitos nutritivos de los microorganismos,contienen nutrientes que de los microorganismos,contienen nutrientes que son capaces de mantenes un pH adecuado.son capaces de mantenes un pH adecuado.

-se clasifican : -se clasifican :

*sintéticos: tienen ingredientes de una *sintéticos: tienen ingredientes de una

composición perfectamente definida (sales, composición perfectamente definida (sales, azucares, aminoácidos, etc.) azucares, aminoácidos, etc.)

*no sintéticos:compuestos de origen natural *no sintéticos:compuestos de origen natural (peptonas, extractos de carne, de levadura(peptonas, extractos de carne, de levadura

-medios de cultivo mas empleados:-medios de cultivo mas empleados:

a)caldo tioglicolato a)caldo tioglicolato de sodio : medio de cultvo de sodio : medio de cultvo de bacterias anaerobicas ,que contiene de bacterias anaerobicas ,que contiene sustancias reductoras del potencial de óxido sustancias reductoras del potencial de óxido reducción y está contenido en un tubo o frasco reducción y está contenido en un tubo o frasco herméticohermético

Cultivo de caldo de tioglicolatoCultivo de caldo de tioglicolato

Cultivo Cultivo in-vitroin-vitro de de Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus

b)Caldo nutritivob)Caldo nutritivo

2.-2.-medios de cultivo solidosmedios de cultivo solidos

Son medios de cultivo liquidos adicionados Son medios de cultivo liquidos adicionados de una sustancia gelificante :el agar agar de una sustancia gelificante :el agar agar que gelifica por debajo de 45 .C o gelosa.que gelifica por debajo de 45 .C o gelosa.

Los medios de cultivo nos permite observar Los medios de cultivo nos permite observar colonias separadas ,donde cada colonia es colonias separadas ,donde cada colonia es el resultado de la multiplicacion de cada el resultado de la multiplicacion de cada bacteria.bacteria.

Cultivo de agarCultivo de agar

Cultivos de agar Cultivos de agar

Agar de tiosulfato,citrato,sales de Agar de tiosulfato,citrato,sales de bilis y sacarosa(vibrio).TCBSbilis y sacarosa(vibrio).TCBS

AGAR DE TCBS AGAR DE TCBS VIBRIOVIBRIO

Agar marino y soya tripticasa Agar marino y soya tripticasa (TSA)(TSA)

Colonias en agar TCBSColonias en agar TCBS

Colonias de agar marinoColonias de agar marino

Purificación de VibriosPurificación de Vibrios

Vibrios en TSAVibrios en TSA

Colonias aerobicasColonias aerobicas

Colonias termofilas en cultivoColonias termofilas en cultivo

Colonias macroscopicas de Colonias macroscopicas de hongoshongos

Colonias de bacterias en cultivoColonias de bacterias en cultivo

Crecimiento bacteriano en agar de Crecimiento bacteriano en agar de schaedlerschaedler

Agar Agar

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Origen

Medio Sintéticos

Medio Naturales

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Composición

MEDIOS DE CULTIVOS COMUNES

Fermentadores de lactosa en agar Hektoen

Crecimiento de un no fermentador de la lactosa en agar Mac Conkey

Crecimiento de bacterias Gram. negativas que no son capaces de fermentar la lactosa en agar de eosina

MEDIOS DE CULTIVOS ENRIQUECIDOS

Medios de cultivo enriquecidos: Agar Chocolate

Agar chocolate

Agar sangre

Agar chocolate y sangre

Liquido ascitico

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mEDIOS DE enriquecimiento

C.- Medios de enriquecimiento. Son medios complejos (normalmente) con aditivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados microorganismos (particularmente heterótrofos exigentes). Ejemplo: adicción de sangre, suero o extractos de tejidos de animales y plantas.

D.- Medios selectivos. Son aquellos que favorecen por su diseño el crecimiento específico de un microorganismo particular (o grupo de microorganismos). Es de gran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de una población microbiana mixta. Ejemplo: CO2 como fuente de carbono es selectivo para autotrofos; adiccionando cristal violeta se inhibe el crecimiento de los Gram (+); utilizando maltosa como única fuente de carbono sólo crecerán los que usen maltosa.

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mEDIOS sELECTIVOS

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mEDIOS eSPECIALES

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mEDIOS DIFERENCIALES

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mEDIOS DE TRANSPORTE

Cochabamba-Bolivia

mEDIOS DE TRANSPORTE

MEDIOS DE TRANSPORTE

INCUBACIÓN EN ANAEROBIOSIS

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mEDIOS DE CONSERVACIÓN

Medios de conservación

Los principales métodos de conservación que se aplican a los cultivos microbianos abarcan la refrigeración, liofilización, aceite mineral, gel de sílice, suelo estéril, agua destilada estéril.

Medios de conservacion

Métodos tradicionales de conservación:

Mantienen la viabilidad, propiedades morfológicas,

fisiológicas