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Diagnóstico Microbiológico
Toma de muestras clínicas representativas
Esputo
Orina(micción espontánea o
al acecho)
Material fecal
Sangre/LCR
Biopsia de tejidos
Sitios no contaminados con Flora Normal
Sitios contaminados con Flora Normal
Orina(punción suprapúbica)
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Diagnóstico microbiológicoMuestra clínica
TRANSPORTE
Material necesario
Medio semisólido: Medio StuartMedio AmiesMedio Cary & Blair
Medio líquido: Agua peptonada (Vibrio cholerae)PRAS/TAB (anaerobios)
Medio
Frasco estéril: orina, materia fecal.
Hisopo en medio semisólido: fauces, recto, endocervix, uretra.
Frasco con medio para anaerobios: anaerobios
Frasco de hemocultivo: sangre
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Conservación de las muestrasTIPO DE MUESTRA TEMPERATURA AMBIENTE HELADERA (4ºc)
SANGRE X
ORINA X
EXUDADOS FARINGEOS X
ESPUTO Y MUESTRAS RESPIRATORIAS X
EXUDADOS GENITALES X ( hisopo en medio Amies o Stuart
para Neisseria gonorrhoeae)
LCR X
Punciones o biopsias de PIEL Y TEJ. BLANDOS
X
EXUDADOS OCULARES X
MUESTRAS PARA ANAEROBIOS X
MATERIA FECAL X
Diagnóstico microbiológico
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Observación microscópica
CultivoDetección de antígenos bacterianos
Métodos moleculares
Pruebas Bioquímicas
Identificación
Sensibilidad antibiótica
Medios Selectivos
Medios diferenciales
Medios de enriquecimiento
Diagnóstico Microbiológico
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Microscopia
Cultivo
TinciónFresco
Aislar
Identificar
Conocer el patrón de susceptibilidad antibiótica
Presencia o no de bacterias
Morfología
Movilidad
Células epiteliales
Leucocitos
Hematíes
Candidas (hongo)
GRAM
ZIEHL NIELSEN
GIEMSA
OTROS
Procesamiento de la muestraDiagnóstico microbiológico
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Exámen en fresco
Candida spp. (hongo)
Células epitelialesHematíes
Leucocitos
Diagnóstico microbiológico
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Cocos Gram positivos
Tinción de Gram
En cadena Ej: Streptococcus spp
Microscopio óptico
En racimo Ej: Staphylococcus aureus
Diagnóstico microbiológico
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Bacilos gram-positivos
Bastones o cilindros
Microscopio óptico
Diagnóstico microbiológico
Corynebacterium diphteriae(agrupamiento como letras chinas)
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Tinción de Ziehl-Neelsen
Microscopio óptico
Diagnóstico microbiológico
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CultivoMedio sólido
(aislar)
Medio líquido
(enriquecer)
Diagnóstico microbiológico
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Medios Selectivos y Diferenciales
Chapman
Levine
o EMB
CultivoDiagnóstico microbiológico
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Identificación bacteriana
Pruebas bioquímicas Identificación de antígenos bacterianos
API E
Serotipificación
Diagnóstico microbiológico
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Serotipificación
Se utilizan anticuerpos
específicos para detectar antígenos
en la superficie de la envoltura bacteriana
1 gota de
Ac
1
colonia
aislada
Aglutinación = positivo
Diagnóstico microbiológico
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Cultivo
Microorganismo patógeno
Diagnóstico microbiológico
Repaso
Pruebas de susceptibilidad antibiótica
Aislamiento- identificación-
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OBJETIVOS
Determinar la sensibilidad de una cepa
bacteriana a un determinado antibiótico
Determinar la eficacia de un antibiótico
Pruebas de susceptibilidad antibiótica
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Antibiograma de difusión o método de
Kirby & Bauer
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Significado clínico de la prueba de Kirby & Bauer
•Bacterias sensibles•Bacterias de susceptibilidad intermedia•Bacterias resistentes
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E-Test
Gradientede concentracionesen la tira (µg/ml)
La diferencia con el disco, es que el disco contiene una únicaconcentración del antibiótico
Esta es la CIM
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![Page 41: Diapositiva 1 - Ingreso Medicina UBA · 2019-04-22 · o EMB Cultivo Diagnóstico microbiológico. Identificación bacteriana Pruebas bioquímicas Identificación de antígenos bacterianos](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022042023/5e7b241922149b2872788727/html5/thumbnails/41.jpg)
Agente etiológico Método diagnóstico serológico
Treponema pallidum IF (FTA-abs)/ HA (MHA-Tp)VDRL
Brucella spp. Aglutinación/ ELISA
Chlamydia trachomatis IFD/ELISA
Leptospira interrogans Aglutinación
Coxiella burnetti IFIFC: Fijación de complemento IF: inmunofluorescencia HA: hemoaglutinación
FTA-abs: Fluorescent Treponemal Antibody with absorption.
MHA-Tp: Microhemaglutinación del Treponema pallidum
Diagnóstico Microbiológico Indirecto:
detección de anticuerpos séricos
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![Page 43: Diapositiva 1 - Ingreso Medicina UBA · 2019-04-22 · o EMB Cultivo Diagnóstico microbiológico. Identificación bacteriana Pruebas bioquímicas Identificación de antígenos bacterianos](https://reader034.vdocuments.co/reader034/viewer/2022042023/5e7b241922149b2872788727/html5/thumbnails/43.jpg)
EJEMPLO
NIÑO DE 3 AÑOS LLEGA A LA GUARDIA CON LOS SIGUIENTES SINTOMAS:
FIEBRE ALTA (38 a400C)
VOMITOS FUERTE DOLOR DE CABEZA
…Y FOTOFOBIA
RIGIDEZ DE NUCA
AL DIA CON EL CALENDARIO DE VACUNACION
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Diagnóstico microbiológico de meningitis
Líquido cefalorraquídeo (2 tubos de ensayo)
Fisicoquímico
Cultivo
PROCESAMIENTO INMEDIATO
TRANSPORTE SIN REFRIGERAR (N.meningitidis)
X 3HEMOCULTIVO
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Resiembra a ciegas
menos de 24 h de incubación
y a intervalos hasta 7 días de incubación, sin
esperar la observación del desarrollo en el
frasco
S
Detección Visual: Turbidez ,
Formación de gas, de películas,
coágulos o pequeñas colonias en
los frasco
SUBCULTIVOS
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SUBCULTIVO sólo
de hemocultvos positivos
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DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO
LCR
Sin centrifugar Centrifugado
Observación en fresco
(móvil)-Giemsa-Tricrómico
sobrenadante
sedimentoDiagnostico
directoVirus
Aislamiento
Búsqueda ácidos nucleicos
LATEX
CIEF
ELISA
PCR
ZN
Gram
Tinta china
Cultivo
Identificación por pruebas bioquímicas
Antibiograma