desde la costa hasta el talud continental en ambos...
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Condición nutricional de
larvas de anchoíta
marzo, 2014
Marina Vera Diaz
Marcelo Pájaro
Desde la costa hasta el
talud continental en
ambos laterales de la ZCP
Estudio del estado nutricional o “condición”
• Evaluación individual del estado fisiológico de las larvas • Detección de áreas de crianza favorables para la supervivencia y el
crecimiento larval
Objetivos • Determinar la condición nutricional de las larvas de
la anchoíta (Engraulis anchoita) provenientes del stock norte de la especie empleando el índice ARN/ADN.
• Comparar la condición nutricional de las larvas de anchoíta en ambos laterales de la ZCP
• Estudiar el comportamiento del índice ARN/ADN a
lo largo del desarrollo ontogénico de larvas de E. anchoita.
• Sus huevos y larvas se encuentran en el mar todo el año, con un máximo de abundancia durante la primavera y verano
• Durante su pico reproductivo habita aguas básicamente costeras, encontrándose sus huevos en aguas con temperaturas entre 9 y 23°C, y salinidades mayores a 23 ups.
• Se ha demostrado que la población bonaerense encuentra en esa zona, y principalmente durante la primavera, condiciones apropiadas para su reproducción, relacionadas con la estabilidad de la columna de agua y el enriquecimiento trófico
El estudio de la relación ARN/ADN permite inferir funciones relacionadas con la formación de los tejidos y por ende la condición fisiológica de los individuos.
Ruptura de la larva
Ácidos nucleicos totales
DNA total
Total – DNA = RNA
Digestión ARNsas
Extracción ac nucleicos
A partir de las concentraciones de ADN y ARN obtenidas para cada larva se realizó el cociente ARN/ADN (RD) para cada una de ellas y se estandarizaron (RDs) de acuerdo a Caldarone et al. (2006)
Independiente de la condición
nutricional
Dependiente de la condición nutricional
Una mayor tasa ARN/ADN refleja una
mejor condición nutricional
se estimó la tasa de crecimiento (G) para cada larva, utilizando el modelo RDs – T – G desarrollado por Buckley et al. (2008):
G= 0,0254 x RDs + 0,0037 x T x RDs – 0,0873
Donde G es la tasa de crecimiento instantáneo y T es la temperatura medida en el sitio de muestreo.
La performance de crecimiento (Gpf), fue obtenida a partir del cociente entre G y una tasa de crecimiento de referencia (Gref) calculada a partir del modelo multiespecífico de Houde y Zastrow (1993).
Gref = 0,0106 x T – 0,0203 (Tasa de crecimiento en condiciones óptimas)
Gpf=G/Gref
Gpf>1 crecimiento mayor al observado bajo condiciones óptimas
Red BONGO 300 µm
Congelación N2
Medición LS (um)
Liofilizado
Peso seco (ug)
Centrifugado (con detergente)
Fluorescencia (Bromuro de Etidio)
2,93 3,00
COSTAL II
0,43 3,18 0,07
1,16 1,20
Larvas anchoíta/m3
RDs
Gpf
2,70 1,98 2,77 3,17
COSTAL I
4,92 Larvas anchoíta/m3 1,33 6,53 1,55 0,02
1, 03 0,64 1,06 1,28 RDs
Gpf
Correlación RDs vs LS Coeficiente de Pearson = 0,29 P<0.05
Publicación Estudio RD Especie Población
Est. Desarrollo
Kono et al. 2003 Laboratorio 0,5 Engraulis japonicus INANICIÓN
Pre-flexión
Clemmesen et al. 1997
Wild Fin de
PRIMAVERA
2-3 E. anchoita (Brasil) Flexión
2-3 E. anchoita (Patagonia) Pre-flexión
Kanstinger & Peck 2009
Wild 3 E. encrasicolus Pre-flexión
Diaz et al. 2011 Wild PRIMAVERA
4,5 E. anchoita (Bonaerense)
Pre-flexión
Do Souto et al. (sin publicar)
Wild VERANO
2,4 E. anchoita (Patagonia)
Pre-flexión
Este trabajo Wild VERANO
2,6 E. anchoita (ZCP) Pre-flexión
2,93 3,00
COSTAL II
3604
1,16 1,20
RDs PREFLEXIÓN
Gpf PREFLEXIÓN
1,03 1,19 Gpf FLEXIÓN
1236 Larvas nauplii de copépodos/m3
2,00 1,98 2,74 2,85
COSTAL I
Larvas nauplii de copépodos/m3
4301
0,65 0,64 1,05 1,09
RDs PREFLEXIÓN
Gpf PREFLEXIÓN
1,42 1,50 1,41 Gpf FLEXIÓN
1532 66 485
Ctenóforos + + +
En teoría…
En la realidad puede suceder…
Pocos individuos presentaron índices de condición bajos. Esto podría indicar que las larvas de anchoíta encuentran en el área de estudio condiciones favorables para el crecimiento y la supervivencia.
No se observaron diferencias en la condición nutricional de las larvas entre ambos laterales de la ZCP.
La condición nutricional presentó una correlación con la talla de los ejemplares. Por consiguiente, es importante considerar el estadio de desarrollo de los ejemplares al momento de realizar comparaciones.
La performance de crecimiento (Gpf) permite hacer inferencias sobre la condición de los ejemplares teniendo en consideración la temperatura del sitio donde fueron recolectadas, factor que podría tener influencia sobre sus tasas metabólicas.
La condición nutricional presenta una reducción en las transiciones entre estadios de desarrollo, lo que podría indicar que representan momentos de alta mortalidad larval.
Extracción de ácidos nucleicos
Sarcosil Tris EDTA (TES) 1% y agitación durante 1 hora
Centrifugación durante 15 min a 13400
rpm.
Protocolo Índice ARN/ADN
100 µL del sobrenadante se llevaron a un volumen de 1000 µL (850 µL de Tris
EDTA Buffer + 50 µL de Bromuro de Etidio a
0,1mg/mL)
Espectrofluorómetro λEx 360 nm
λ Em 590 nm
Protocolo Índice ARN/ADN
Se registraron dos lecturas para cada larva: una inicial
correspondiente a los ácidos nucleicos totales
(ANT) y una segunda correspondiente al ADN
luego del agregado e incubación durante 30 min a 42°C con 50 µL de enzima
ARNasa (20µL/mL)
Curva de calibración con patrones de ADN y
ARN ultrapuros
(ARN+ADN) ADN (ARN+ADN)-ADN = ARN
ARNasa
Publicación Estudio RD Especie Población
Est. Desarrollo
Clemmesen 1994 Laboratorio
1 Clupea harengus INANICIÓN
Pre-flexión
1,7 Clupea harengus INANICIÓN
Post-flexión
Chícharo 1997 Laboratorio 1,3 Sardina pilchardus INANICIÓN
Pre-flexión
Kono et al. 2003 Laboratorio 0,5 Engraulis japonicus INANICIÓN
Pre-flexión
Clemmesen et al. 1997
Wild Fin de
PRIMAVERA
2-3 E. anchoita (Brasil) Flexión
2-3 E. anchoita (Patagonia) Pre-flexión
Kanstinger & Peck 2009
Wild 2 Sprattus sprattus Pre-flexión
2.5 Sardina pilchardus Pre-flexión
3 E. encrasicolus Pre-flexión
Diaz et al. 2011 Wild PRIMAVERA
4,5 E. anchoita (Bonaerense)
Pre-flexión
Do Souto et al. (sin publicar)
Wild VERANO
2,4 E. anchoita (Patagonia)
Pre-flexión
Este trabajo Wild VERANO
2,6 E. anchoita (ZCP) Pre-flexión
Las densidades de larvas nauplii fueron altas en todas las estaciones estudiadas. Zenitani et al. (2007) indicaron que concentraciones de nauplii mayores a 5000 ind/m3 garantizarían una supervivencia del 89% para larvas de E. japonicus. El alimento parece no ser un factor limitante en el área estudiada.
Los nauplios de las especies pequeñas de copépodos Paracalanus parvus, Oithona sp., Acartia tonsa, Microsetella norvegica y Euterpina acutifrons constituyen los ítems más frecuentemente ingeridos, seguidos por los huevos de copépodos. También predan sobre tintínidos, dinoflagelados, larvas de moluscos y diatomeas, aunque en menor proporción.
Factores que afectan la supervivencia de los primeros estadios de desarrollo abióticos: hidrográficos e hidrodinámicos bióticos: inanición, predación y factores denso-dependientes
El éxito de una clase anual estaría determinado en los primeros estadios de desarrollo (Hjort, 1914).
El estudio de la importancia de cada uno estos en la supervivencia de una especie es muy complejo ya que probablemente actúan en forma simultánea, solapándose sus efectos.
es considerado una de las mayores causas de mortalidad en muchas especies de peces marinos
A pesar de la alta fecundidad de muchas especies de peces de interés comercial, solo una porción de los huevos desovados llegarán a las pesquerías como adultos capturables
“período crítico”