COPROCULTIVODiagnostico microbiolgico de infeccin Gastrointestinal

INFECCION GASTROINTESTINALLas infecciones del tracto digestivo se caracterizan por su gran uniformidad en cuanto a los sntomas y signos que provocan, independientemente del agente responsable. Casi siempre se presentan simultneamente diarrea y/o vmitos as como fiebre. Con sntomas tan generales el diagnstico etiolgico slo se alcanza mediante el estudio microbiolgico.

INFECCION GASTROINTESTINALLo ms importante en el diagnstico de laboratorio es diferenciar entre infeccin gastrointestinal e intoxicacin. En el primer caso los microorganismos acceden al hospedador y desarrollan dentro de l su accin patgena. En las intoxicaciones las responsables del dao son toxinas preformadas por los patgenos en el exterior del hospedador y que son ingeridas por este posteriormente.

INFECCION GASTROINTESTINALEn las intoxicaciones los sntomas digestivos comienzan muy rpidamente, casi inmediatamente tras la ingestin. Sin embargo en las infecciones las bacteria debe fijarse a la mucosa intestinal y multiplicarse antes de provocar dao tisular, por eso los sntomas aunque similares se desarrollan ms tarde.

INFECCION GASTROINTESTINALMicroorganismos que producen toxinas que provocan diarrea sin provocar inflamacin.Pertenecen a este grupo Staphyllococcus aureus, Bacillus cereus, Escherichia coli enterotoxignica, Vibrio cholerae y Clostridium perfringens. Todas son capaces de producir toxinas pero slo los dos primeros pueden hacerlo fuera del hospedador, es decir provocar intoxicaciones.

INFECCION GASTROINTESTINALMicroorganismos que adems de diarrea inducen inflamacin. Aparecen leucocitos polimorfonucleares en heces. No producen toxinas. Los ms importantes son E.coli enteroinvasiva, Salmonella, Shigella, Campylobacter jejuni y Clostridium difficile.

INFECCION GASTROINTESTINALMicroorganismos que perforan y penetran en la mucosa intestinal produciendo diarreas sanguinolentas. Provocan reacciones inflamatorias muy fuertes y fiebre elevada. Es lo que se conoce como disentera bacilar. Cabe destacar a Shigella, Salmonella typhi y Yersinia.

INFECCION GASTROINTESTINALLos factores que determinan en mayor medida la gravedad de la infeccin gastrointestinal son la dosis infectiva y el estado de salud del hospedador.Yersinia y Shigella pueden producir sntomas con inculos muy pequeos (102-104 clulas), E.coli y Salmonella sin embargo requieren 107-108 clulas.

INFECCION GASTROINTESTINALEl estado de la flora habitual en el intestino determina tambin el desarrollo de infecciones. La flora normal compite con las patgenos y los mantiene en nmero lo suficientemente bajo como para que no causen problemas.

COPROCULTIVO

Qu es?Es el cultivo de la materia fecalPara que sirve?Se utiliza para el aislamiento e identificacin de bacterias que puedan causar sntomas y enfermedad gastrointestinal.

Qu buscamos? SalmonellaShigellaCampylobacterYersiniaVibrioAeromonasPlesiomonasEPECEIECEHEC

Qu no encontraremos?Staphylococcus aureusBacillus cereusClostridium difficileClostridium perfringensLo que se busca en estas es la toxina, mayormente se detecta por mtodos inmunolgicos

Recoleccin de la muestraLa muestra debe ser fresca No contaminada2 a 5 ml/ 3 a 5 grEn nios pequeos se puede colectar colocando el paal al revs y un colector de orina para no contaminar la muestra.

Primer paso:Recepcin de la muestra: si no se procesa inmediatamente colocar en CBDatos completos: Nombre, edad, sexo, procedencia, tto previo, tiempo de enfermedad.

Examen macroscpico

Caractersticas de la muestraMocoSangreColor

Examen microscpico Reaccin inflamatoriaColoracin vago Gram interrumpido

1 da: Siembra primariaMc ConkeySSXLDTCBSCampylobacter (selectivo - filtrado)Selenito F

2 da: Lectura de placas

MEDIOVIRARONSOSPECHOSASCRECIMIENTOMC100 %0 %3 +++XLD90 %10 %3 +++SS95 %5 %2 ++F - SSTCBSNo huboCrecimiento-Campy24h NEG

CRECIMIENTO3 +++2 ++

CRECIMIENTO+/-1 +

Colonias sospechosasAgar SSTCBS

SELECTIVOFILTRADOCampylobacter

2 da: ResiembraMc Conkey : 3 seriesTSI LIA TSAMc Conkey SorbitolUna serie de cada tipo de colonia sospechosa: TSI LIASiembra en SS a partir del Selenito FTSI-LIA-TSA

Pruebas bioqumicas TSI y LIADr. Grados - 1982

E coliEIECIdentificacin

P. shigelloidesAeromonas

YersiniaSalmonellaShigellaProteus

3 da: lectura de diferenciales

ProcedTSILIAOxiBacteriaSeroSPGH2SSPIndMC1AA--KA+-E coliMC2KA+-KK+-E coli MC3KA+-KK++Aeromonas XLDKA--KA--Shigella XLDKA--RA--ProteusSSKA--KK++PlesiomonasSSAA--AA--YersiniaTCBSKA--KK++Vibrio

SerologaEPEC: hacer un pool en SF a partir del TSA, si es +, probar con cada una. A, B y CEIEC: probar las K/A en LIA. A y BEHEC: probar las Sorbitol negativo. O:157Shigella: B, D, C y ASalmonella: antisuero somtico polivalente D, B, C..YersiniaVibrio

Identificacin FinalConfirmar con serie completa y pruebas adicionales si as lo requieren.Antibiograma segn muestra y especieSalmonella spp

Identificacin oxidasa positivos:Oxidasa y Movilidad +Aeromonas y V. cholerae ONPG +O129 10ug/ml R: Aeromonas, PlesiomonasO129 150 ug/ml R: Aeromonas

Hoja1

LACMOVINDESCCITSORGASLDCVPGEL

A. hydrophila

A. veronii bv sobria

A. caviae

P. shigelloides

Hoja2

Vibrio & related genera. J Appl Bact 1986, 61, 469-480 Bryant et alMOVLDCOXIGASINDONPGVPO129 10O129 150ESCDNAaseGELHEM - SHHEM - SCSOR

Aeromonas sobria96989984989576999112989681492

Aeromonas hydrophila979499809799999984969999982538

Aeromonas caviae825997769919999799993675

Vibrio cholerae9999991999993121199991851

Vibrio parahaemolyticus9999991998199849999881

Plesiomonas shigelloides99999914861186115711133

EnteropatogenoLACLDCGASINDVPESCGELSORHSHHSC

Aeromonas sobria3098849876129628149

Aeromonas hydrophila23948097999699389825

Aeromonas caviae55577617993567

Vibrio cholerae199199931991185

Vibrio parahaemolyticus1991991499188

Plesiomonas shigelloides19914861113311

Hoja3

Antibiograma

AntibiogramaCampylobacterCiprofloxacinaEritromicinaVibrioAmpicilinaCloranfenicolCotrimoxazolTetraciclina

AntibiogramaAeromonas PlesiomonasCiprofloxacionaCotrimozaxolCloranfenicolNitrofurantoinaCeftriaxonaE. coli productor de diarreas: no se realiza de rutina, pero si es solicitado por el medico usar los mismos discos que en Shigella

ReporteCultivo positivo:Shigella flexneri grupo BSalmonella grupo DCampylobacter spp.Aeromanas hydrophilaETCCultivo negativo a:Salmonella, Shigella, Campylobacter, Vibrio y EPEC

Gracias por la atencin

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