tipificacion grupo

TIPIFICACION GRUPOS SANGUINEOS

MR Fredy Gonzales Ordinola

Globulos RojosAg expresados genéticamente

Detección mediante Ac específicos

Grupo sanguíneo: clasificación de sangre según características de superficie de GR.

Sistemas mas importantes ABO Rh

Otros: Duffy Diego Lewis Fisher

Sistema ABO

Descubierto en 1901 por Landsteiner.

Su nombre proviene de los 3 tipos de grupos que se presentanGrupo A Grupo BGrupo O

Importacia clínica: Posiblidad de aloanticuepos que puedan originar destrucción de los hematies transfundidos

• Hemólisis• Anemia• Muerte

D- Galactosa

Glicosil fosfatidil inositol

SISTEMA RH

o Rh: Rhesus (Griego: Mono)o 1940 Landsteiner y Salomon Wiener descubrieron Ag en GR hallado en suero de conejos inmunizados con sangre de mono (Macacus Rhesus)

El factor Rh es una proteína integral de membrana de los GR. Rh positivas: expresan ésta proteína en su GR Rh negativa: no expresan estas proteínas en sus GR.

Antígenos del sistema Rh: Fisher y Race

1. D Rh(+) : D(+)2. C Rh (-) : D(-) 3. E4. c5. e

Aloanticuerpos

Ac anti Rh aparecen después que individuo Rh negativo se expuso a eritrocitos Rh +

D débil:1.Eritrocitos D positivos tienen menor concentración de Ag D2.Incubar con Anti D o agregar después suero de coombs (antiglobulina humana) DU

D parcial: 1.Perdida de una parte del gen D. (deleciones mutaciones)2.Expresion genética no es total (perdidas o deleciones parciales)

Rh débiles deben considerarse Rh negativos para fines obstétricos o transfusionalesDonantes Rh débil se consideran como Rh positivos.

Aglutinógenos: Proteínas de la membrana plasmática de los glóbulos rojos y que determinan el grupo sanguíneo.

Aglutininas: Proteínas presentes en el plasma sanguíneo.

La sangre desarrollara aglutininas para su tipo de sangre antagónico.

Ac anti Ag eritrocitarios: IgG, IgM, IgA

Ac naturales IgM Ac adquiridos IgG

TIPIFICACION

Lamina

Tarjeta Gel Tubo

Tipificación ABO de globulos rojos en portaobjeto

1.Reactivo anti A2.Reactivo anti B3.Reactivo anti D

Anti A / Anti B: Preparados a partir de Ac monoclonales tipo IgM , secretado por líneas celulares de hibridoma de ratón .

Anti D:Mezcla de Ac monoclonales tipo IgM/IgG.

Un anticuerpo monoclonal: Ac homogéneo producido por célula hibrida Linfocito B + Célula tumoral una célula madre hematopoyetica

IgM: Aglutinación con GR con D normal

IgG anti D: detecta variantes débiles (prueba indirecta de anti globulina)

Observar aglutinación máximo hasta en 2 minutos

Anti A

Cel A

Cel B

SF + GR centrifugado

1. Centrifugar tubo lila.2. 1 gota de cada reactivo en su respectivo tubo3. Agregar PLASMA a CEL A y CEL B4. Agregar GR (centrifugado) al tubo con suero fisiologico (SF)

Anti B

Anti AB

Anti D

Inversa (plasma)

Grupo sanguineo en tubo 1

2

3

4

Anti A

Cel A

Cel B

SF + GR centrifugado

5.- Agregar una gota de suspension (GR + SF) en tubos con anti A, anti B , anti AB y anti D6.- Centrifugar y leer.

Anti B

Anti AB

Anti D

Inversa (plasma)

Grupo sanguineo en tubo

5

ANTI A ANTI B ANTI AB CEL A CEL BA + - + - +

B - + + + -

O - - - + +

AB + + + - -

AB no expresa Anti A ni Anti B(receptor univesal)

INVERSA

Tubo con reactivo…

TARJETA GEL

Se basa en la detección de las reacciones de aglutinación de hematíesAglutinación se da al entrar el GR en contacto con los Ac correspondientes.

Anti A mnoclonalAnti B monoclonalAnti AB monoclonalAnti D monoclonalFenotipo de RhControl

Se incorpora dentro de la columna de Gel el Reactivo:1.Un Ac especifico2.Suero antiglobulina humana3.Nacl

Camara de reaccion

Columna

Fondo (aspecto conico)

Composición del Gel

Neutro sin antisuero específico (NACl)

Mezcla de gel y antisuero especifico

Mezcla de gel y antiglobulina humana

Hematíes NO sensibilizados quedaran en fondo del tubo (boton)

Hematíes aglutinados quedaran aglutinados en la columna gel.

4+ : GR aglutinados en parte superior

3+: GR aglutinados comienzan a dispersarse por la comuna de gel

2+: GR aglutinados dispersas por columna de gel

1+: GR aglutinados en parte inferior de columna gel

O: GR formando botón bien definido en parte inferior de columna

Doble población: Banda de GR aglutinados en parte superior de columna y no aglutinadas en el fondo.

Diluyente LISS 2

Dilucion de Hematies

interpretacion

Dispensar hematies en cada uno de los microtubos

GRUPO SANGUINEO TARJETA GEL

ANTIGENO D DEBIL : Variante DU

o DU : expresión débil del Ag D normal.o Menor concentración de Ag D por el GR.o DU positivo: Rh positivoo Se utiliza anti D en prueba antiglobulinica directa

1.- Lavar y centrifugar

2.- SF +GR lavados

3.- Suspension + Anti D

Variante DU Tubo

4.- Centrifugar y leer

5.- Albumina (potenciador) Incubar Centrifugar y leer.

Lectura (-)

6.-Lavar y centrifugar

Lectura (-)

Coombs

Inti IgGAnti Rh

Inti IgG

Anti Rh

Anti D

Ac completos ( ocurrencia natural) Ac incompletos

• Termino utilizado para indicar anticuerpos IgM capaces de producir aglutinación visible de glóbulos rojos suspendidos en solución salina.

• son producidos por estimulación antigénica

• Ejm. Suero anti-A, anti-B

• Usualmente IgG son capaces de adherirse al antígeno pero son incapaces de aglutinar GR suspendidos en salina .

• Solo aparecen con estimulación antigénica

Anticuerpos completos e incompletos

GRACIAS