Alteraciones cromosómicas diagnosticadas en sangre periférica

 Irenia Blanco Pérez1, María del Carmen Mitjans Torres2, Sahily Miñoso Pérez3, Ada Socarrás Gómez4

INTRODUCCIÓN

En la actualidad son numerosos los trabajos publicados acerca del papel que representan las anomalías cromosómicas como indicadores diagnósticos de muchas de las enfermedades de origen genético.1, 2,3

Las anomalías cromosómicas se clasifican en numéricas y estructurales, la primera supone la pérdida o ganancia de alguno de los cromosomas y en la segunda se afecta la estructura de los mismos.1, 2, 3,4

Estas anomalías, se presentan en aproximadamente 1 de cada 200 recién nacidos vivos, así como en el 5 al 10 % de las muertes perinatales, y son responsables del 50 al 60 % de los abortos espontáneos tempranos.3, 5,6

Con la aparición de las técnicas de bandeo cromosómico, la citogenética clásica ocupó un lugar fundamental dentro del campo de la genética clínica y se ha ido desarrollando con la aplicación in situ de las técnicas de la genética molecular como la reacción en cadena con polimerasa ( PCR), la hibridación In Situ fluorescente (FISH), entre otras, las cuales han permitido detectar un número creciente de anomalías cromosómicas crípticas no detectados por la citogenética clásica, constituyéndose así el «cariotipo molecular» como una estrategia complementaria que aporta mayor resolución al análisis del cariotipo convencional. 5, 7, 8, 9, 10, 11,12

Las enfermedades cromosómicas son relativamente frecuentes en poblaciones humanas; su incidencia al

nacimiento es de 0,6 por cada 100 nacidos vivos, y de ellas, la más frecuente es el síndrome de Down (SD), que representa 1 en 800 nacidos vivos. 13

En Cuba, las enfermedades cromosómicas constituyen el 25,2% del total de causas genéticas de retraso mental (síndrome de Down 22 % y no Down 13,1 %). 13

Las anomalías más frecuentes son los rearreglos estructurales balanceados (4.3 en donde no existe pérdida o ganancia del material genético, entre ellas encontramos las translocaciones e inversiones.10, 14

En la actualidad, a pesar de contar con herramientas diagnósticas moleculares, el cariotipo en sangre periférica sigue siendo la primera línea de estudio para detectar alteraciones cromosómicas en pacientes con manifestaciones clínicas, por ejemplo, síndrome de Down, malformaciones congénitas múltiples, alteraciones en la diferenciación sexual, talla baja, retardo psicomotor mental y dismorfias.10

En el año 2005, se inaugura el Laboratorio de Citogenética de la Provincia de Pinar del Río, ya en el 2007 el centro contaba con el personal especializado (formado en el Centro Nacional de Genética Médica (CNGM) por un período de 9 meses), consolidándose el diagnóstico citogenético en la Provincia.

Después de cinco años de funcionamiento del Laboratorio y teniendo en cuenta el desarrollo que ha alcanzado la Genética Médica en el país en los últimos años, se realizó esta investigación con el objetivo de describir las principales alteraciones cromosómicas diagnosticadas en sangre periférica en la Provincia de Pinar del Río a partir de enero del año 2007 hasta diciembre del 2011.

MATERIAL Y MÉTODO

Se realizó un estudio descriptivo de tipo retrospectivo de pacientes con aberraciones cromosómicas numéricas y estructurales, detectadas por estudio citogenético realizado en linfocitos de sangre periférica, utilizando la giemsa como método de tinción, con una resolución mínima de 450 bandas.

Se estudiaron 831 pacientes en el Laboratorio de Citogenética del Centro Provincial de Genética Médica de Pinar del Río, procedentes de la consulta de Genética Clínica, durante el periodo comprendido desde enero del 2007 a diciembre del 2011.

La muestra la conformaron 117 pacientes que mostraron en su cariotipo hallazgos de cromosomopatías. Los datos fueron tomados de los registros del Laboratorio de Citogenética; los pacientes con riesgo de padecer alteraciones genéticas u otras enfermedades cromosómicas, fueron detectados al nivel primario por los médicos de familia en las áreas Municipales de salud y evaluados por los especialistas en Genética Clínica del Centro Provincial Genética Médica. Posteriormente, los pacientes fueron atendidos en la Consulta de Asesoramiento, donde se les informó el resultado del cariotipo.

A pesar que los motivos de indicación de todos los casos que llegaron al laboratorio fueron muy heterogéneos, estos se clasificaron en cinco grupos:

1) Fenotipo down (FD).

2) Retardo del desarrollo psicomotor, retraso

Mental (RM) y dismorfias de cráneo, cara, extremidades y genitales.

3) Portadores de reordenamientos cromosómicos balanceados (ACB).

4) Aberraciones de los cromosomas sexuales (ACS).

5) Abortadora habitual.

Procedimiento técnico

Para la realización de los estudios cromosómicos se tomaron 5 ml de sangre periférica por paciente en jeringuillas previamente heparinizadas. Se cultivó en medio RPMI-1640 (Gibco-BRL) con el 10 % de suero fetal bovino (Gibco-BRL), y se utilizó la fitohemaglutinina (PHA) 0,04 mg/ml (Gibco-BRL) como agente mitogénico. Se incubaron durante 72 horas a 37 oC. Media hora antes se detuvo la división celular con colcemid (0,05 mg/mL) para obtener las células en metafase. Se realizó un tratamiento hipotónico con cloruro de potasio (0,074) por 25 min a 37 oC.

Para el diagnóstico microscópico de los casos se contaron como mínimo 15 metafases por paciente, ampliando el conteo de 30 a 100 en los casos de mosaicismo. Se siguieron las reglas de la nomenclatura internacional ISMCN (2005). 10

RESULTADOS

A los 831 casos remitidos se les realizó el estudio citogenético en sangre periférica, y se encontró alteración del cariotipo en 117 casos (14 %), que correspondieron a 63 pacientes del sexo masculino (54 %) y a 54 del sexo femenino (46 %), y de ellos 68 resultaron casos positivos para un 6.85% de positividad.

El año 2007 fue el de mayor número de reordenamientos diagnosticados con un total de 46 casos, a los cuales, se le realizó el cultivo y el proceso de la muestra en el Centro Nacional Genética Médica, le sigue el 2008 con 22, el 2009 con 12, el 2010 con 21 y el 2011 con 16. A partir del año

2008, el laboratorio comienza a funcionar en paralelo con el centro nacional con el objetivo de estandarizar estas técnicas, meta que se logra complementar hasta finales del año 2009.

La principal indicación para el estudio citogenético fue la de descartar la presencia de síndrome de Down, pues en 31 pacientes se observaron rasgos fenotípicos asociados a esta etiología, seguido de retraso mental, rasgos dismórficos, aberración de los cromosomas sexuales, antecedentes de reordenamientos cromosómicos balanceados, abortos espontáneos, entre otros.

De las aberraciones cromosómicas encontradas, las estructurales fueron las más frecuentes 71/117 (60.6 %), seguidas de las numéricas 27/117 (23.0 %), las aberraciones de los cromosomas sexuales 13/117 (11.1 %) y por último, los mosaicos 6/117 (5.1 %). Tabla 1

En el grupo de las aberraciones estructurales, se encontraron 17 translocaciones, de ellas 11 balanceadas y 6 desbalanceadas, 2 pacientes con isocromosomas del X, una inserción del brazo largo del cromosoma X en el 13, una deleción del brazo corto del cromosoma 18 y una adición en el brazo corto del cromosoma 14. Tabla 2

En el grupo de las aberraciones numéricas, se encontraron 27 casos con trisomía del cromosoma 21 (síndrome de Down), que correspondieron a 14 pacientes del sexo femenino (52 %) y 13 del sexo masculino (48 %), existiendo correlación entre el diagnóstico y el motivo de indicación.

En cuanto a las alteraciones de los cromosomas sexuales, se diagnosticaron 13 casos; 5 casos con el Síndrome de Turner (45, X), 4 con síndrome de Klinefelter (47, XXY) siendo los más frecuentes, seguido de 2 casos con cariotipo 48, XXXY; uno con cariotipo 47, XXX y uno con 47, XYY. En el caso de

estos pacientes con más de una X en su dotación genética se observó retraso mental y dismórfias. Tabla 3

Los resultados demuestran variantes polimórficas en 49/831(5.8%), y el cromosoma 9 fue el más involucrado con (26/49) con dos variables: la primera la inversión pericéntrica del cromosoma 9 con 14 pacientes, siendo más frecuente en varones que en mujeres, este dato concuerda con lo publicado por otros autores 12,13,14 , quienes reportan que este polimorfismo se encuentra en pacientes con antecedentes de infertilidad y pérdida repetida de la gestación12,13; y la segunda 9qh+ que se presentó en 12 pacientes.

Se encontró una inversión del cromosoma 1, una del cromosoma Y que se considera una variante rara (aquellas que se presentan de forma inusual, generalmente involucran zonas de DNA altamente repetitivo y no codificante que están aumentadas, y/o ubicadas en sitios cromosómicos donde no suelen observarse o disminuidas/ausentes. Es muy recomendable el estudio de los padres para determinar si la variante observada es resultado de un evento heredado o de novo.

Es necesario utilizar las técnicas de bandeo específico para determinar la composición del material en cuestión. En el caso de un evento de novo el riesgo de que se presente un desbalance del material genético del individuo portador se incrementa y resulta difícil pronosticar la repercusión fenotípica de este material no heredado aún cuando aparentemente la aplicación de bandas C o NOR nos sugiera la presencia de ADN no codificante).11 Se encontraron otras variantes en la zona de heterocromatina de los cromosomas 1,16, Y y en los satélites de los cromosomas acrocéntricos 14 y15.

El estudio pone de manifiesto las principales alteraciones cromosómicas presentes en la población de Pinar del Río,

donde las alteraciones estructurales fueron las de mayor frecuencia, seguida de las numéricas, donde el 87.1 % de los casos con rasgos dismorficos de Síndrome de Down presentaban trisomía libre del cromosoma 21. La alta prevalencia de polimorfismos, sobre todo del cromosoma 9, sugiere un probable factor implicado en la infertilidad y en los abortos espontáneos, ya que algunos pacientes remitidos a este tipo de estudios y con este motivo de indicación precisamente presentaron esta variante polimórfica.

Materiales y Métodos

MaterialesPortaobjetos: Es una fina placa de cristal sobre el cual se disponen objetos para su examen microscópico .

Cubre Objetos: Se coloca sobre un objeto que va a ser observado bajo microscopio, el cual se suele encontrar sobre un portaobjetos. Sirve para: cubrir los objetos que estén en el portaobjetos.

Micropipetas: Empleado para succionar y transferir pequeños volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas analíticas.

Microscopio: Permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista.

Viales: Se puede utilizar como recipientes de muestras.

Gradillas: Es utilizada para sostener y almacenar gran cantidad de tubos de ensayo o tubos eppendorf, de todos los diámetros y formas.

Pipetas Pasteur de plástico: También se hace referencia como pipetas de transferencia, tienen sus tallos y bulbos en la forma de una sola pieza de plástico. Hay diferentes tamaños. (Espina Cepeda,2013)

Reactivos

La 8-hidroxiquinoleina:

Pertenece a las quinolonas que son un grupo de antibióticos de amplio espectro. Entonces para la reproducción bacteriana y para la replicación del ácido ribonucleico, se necesita que estén separados los dos cordones de la doble hélice del ADN.

5ml de agua destilada 5 ml de etanol absoluto 0.03g de 8- hidroquinoleina

Fijador de Carnoy

Es un fijador que contiene cloroformo. Penetra en tejidos extremadamente rápido y puede fijar piezas de tejido de pequeño tamaño en minutos en vez de las horas requeridas con otros fijadores. Los tejidos delicados pueden ser dañados cuando se transfieren de soluciones acuosas a este fijador, debido a la extrema hidrofobicidad del cloroformo y resultando en una deshidratación rápida de los tejidos. Reservar el fijador de Carnoy para muestras más fuertes. Este fijador ha sido usado tradicionalmente para estructuras citológicas.

10ml ácido acético: Ácido acético.- Conserva la cromatina. retrae los tejidos. es más un conservante que un fijador.

30ml de etanol absoluto

Reactivo de schiff:

Es un compuesto que se utiliza en combinación con otros productos químicos como en el método de Feulgen, este es un método específico para la determinación histoquímica del ADN, donde la hidrolisis acido débil con cloruro de hidrogeno (HCL) se separan los grupos puricos del ADN. De este modo se abre el anillo de desoxirribosa, y se forma un grupo aldehído que reacciona con el reactivo de schiff se obtiene un color magenta o rojo.

100mg fushina básica en 75ml de agua destilada a 80ºc Enfriar Agregar 2.5 g bisulfito de sodioEl bisulfito sódico (también llamado sulfito ácido de sodio, sal monosódica de ácido sulfuroso o hidrógeno sulfito sódico) es un compuesto químico de fórmula química NaHSO3. Se trata de una sal ácida muy inestable que al reaccionar con el oxígeno se convierte en sulfato de sodio. Es empleado en la industria alimentaria como conservante y figura

como E-222. Se suele emplear como conservante en el desecado de alimentos

Agregar 45ml de HCL 1M Aforar con agua destilada hasta 100ml Usar dos semanas después de hacerlo

Carmín acético al 1%

El ácido carmínico, E-120, C.I. 75470, Natural Red 004, es una sustancia química compleja utilizada como colorante rojo extraído de la cochinilla (Dactylopius coccus) u otros insectos. Se utiliza como colorante en cosméticos (pintalabios, etc.) y como E-120 en la industria alimenticia para dar un color rojo a los alimentos o a bebidas, aunque se sustituye cada vez más por colorantes sintéticos más baratos.

50ml de ácido acético al 45% 0.5g carmín Calentar hasta que tenga un color oscuro Enfriar a temperatura ambiente Filtrar en papel filtro waltman.

Método

1) Germinación de las semillas de frijol: Las semillas se pusieron a germinar aproximadamente unas 72 horas.

2) Acumulación de células en Metafase Mitótica: Se cortaron las raíces primarias y secundarias de cada una de las semillas y se colocaron en viales que contenían 8-hidroxiquinoleina, lo suficiente para que cubra la raíz.

3) Fijación: Las raíces se transfirieron a otro vial que contenía el fijador Carnoy (etanol absoluto: ácido acético 3:1) conservándolas así hasta su utilización.

4) Tinción: Para visualizar las células al microscopio, estas se tiñeron por el método de Feulgen que consistía en:

a. Lavar con agua destilada 3 veces cada 5 minutos cada vez las raíces.

b. Hidrolizar las raíces con HCL 5N durante 10 minutos a temperatura ambiente.

c. Lavar con agua destilada 3 veces por 5 min cada vez las raíces.

d. Teñir con el reactivo de Shiff durante 30 minutos

e. Después de la tinción de las raíces se conservaron en ácido acético al 45% hasta su observación (15-20 min).

5) Aplastamiento de raíces tras los 30 min de tinción, las raíces tratadas y teñidas fueron aplastadas sobre el portaobjetos con una gota de carmín acético al 1%

Se agregó aceite de inmersión para darle nitidez a la muestra que vamos a

observar.

6) Se observó al microscopio la muestra.

FLUJOGRAMA:

ABERRACIONES CROMOSOMICAS:

SÍNDROME DE PATAU, TRISOMÍA DEL PAR 13

SÍNDROME DE EDWARDS, TRISONOMIA DEL PAR 18

SÍNDROME DE DOWN, TRISONOMIA DEL PAR 21

Cuestionario

1. Función de los reactivos utilizados en la práctica- Hidroxiquinoleina:

Es un fármaco antimitótico que detiene o inhibe la división celular en metafase o en anafase. Es un compuesto que evita la distribución de las cromátidas de un cromosoma durante la mitosis, provocando la poliploidía de la célula filial, ya que aunque no haya separación, sí hubo duplicación previa del material genético.

- Fijador Carnoy: El fijador de Carnoy es un fijador que contiene cloroformo. Penetra en tejidos extremadamente rápido y pude fijar piezas de tejido de pequeño tamaño en minutos en vez de las horas requeridas con otros fijadores.

- Reactivo de Schiff: Se usa para teñir las células y así poder visualizarlas en el microscopio.

- Carmin acético: Se trata de un fijador y colorante al mismo tiempo para la tinción de protalos de helechos.

2. ¿Qué aplicación tienen los cariotipos?a) Para estudios fundamentales de cromosomopatías: Variaciones cromosómicas estructurales: afectan a la estructura del

cromosoma en cuanto a la ordenación lineal de los genes. Aquí se incluyen deleciones, duplicaciones, inversiones y translocaciones.

Variaciones cromosómicas numéricas: afectan al número de cromosomas. Incluyen las poliploidías (triploidía: 3n; tetraploidía: 4n) y los diversos tipos de aneuploidía (trisomías: 2n+1; monosomías: 2n-1).

Por otra parte, las anomalías cromosómicas pueden afectar a los

autosomas o a los cromosomas sexuales.

b) Para el estudio sobre alteraciones cromosómicas más frecuentes en humanos:

Anomalías autosómicas: - Síndrome de Down , por trisomía del cromosoma 21, translocación 21/21

o translocación 14/21.

- Síndrome de Patau, por trisomía del par 13. - Síndrome de Edwards , por trisomía del par 18.- Síndrome Cri du Chat, por deleción parcial del brazo corto del

cromosoma 5 (5p). - Síndrome de DiGeorge, por deleción parcial del brazo largo del

cromosoma 22 (22q11).- Cromosoma Filadelfia , formado por una translocación entre los

cromosomas 9 y 22.

Anomalías de los cromosomas sexuales: - Síndrome de Klinefelter , por una constitución XXY, XXXY, XXXXY. - Síndrome XYY , cromosoma Y extra en varones. - Síndrome de Turner , constitución X0. - Síndrome XXX , cromosoma X extra en mujeres.

3. ¿Cuál es la composición genética de las semillas que utilizo para el montaje?

Phaseolus vulgaris ;Son ricos en proteínas y muy nutritivo. Semillas maduras contienen proteína de aproximadamente 20-25%. Las semillas también contienen inhibidores de tripsina y quimotripsina. Estos pueden ser tóxico si el grano se consume cruda, pero se destruyen con la cocción. P. vulgaris tiene un genoma relativamente pequeño de unos 630 Mb con 11 cromosomas haploides. Los estudios genómicos han iniciado en esta planta, debido a su valor social y económico.

Organismo

Bioproject MontajeEstado

Chrs

Orgánulos

Tamaño

(MB)

GC%

Gene

Proteína

Phaseolus vulgaris

PRJNA240798 , PRJNA41439

PhaVulg1_0

11 - 521.08

35 138 146

Phaseolus vulgaris

PRJNA201998 - - - - - -

5.¿Por qué se utilizan las raíces para hacer cariotipo? ¿Qué otros tejidos se pueden utilizar (diferentes organismos)?

R/ Por la facilidad que tienen los cromosomas en la raíz de la planta del frijol a la hora teñirse con el reactivo de schiff.

También se pueden utilizar otros tejidos de diferentes organismos como:

Líquido amniótico Sangre Médula ósea Tejido de un órgano que se desarrolla durante el embarazo para alimentar

al bebé en crecimiento (placenta)

CUESTIONARIO

CARIOTIPO #2

1. ¿A qué tipo pertenecen los cromosomas X y Y?R/ el cromosoma x pertenece al grupo C (cromosomas medianos submetacentricos) y el croo soma Y pertenece al grupo G (cromosomas pequeños acrocentricos)

2. Explique cómo se originan las anecuploidias, mencione la característica s de cada una de ellas? R/ en un cambio en el número cromosómico, que pueden dar lugar a enfermedades genéticas. Un individuo que presenta esta aberración en los cromosomas difiere del tipo silvestre o euploide, debido a un cromosoma extra o ausente.CARACTERISTICAS:

Según el tipo de cromosomas afectados (sexuales o autosómicos): aneuploidia de los cromosomas sexuales: la aneuploidia de los cromosomas sexuales se

tolera mejor que la de los cromosomas autosómicos aneuploidia autosómica: la mayoría de la aneuploidia autosómica aborta en forma

espontánea con excepción de los aneuploides de algunos autosomas pequeños como el cromosoma 21.

Según el número de cromosomas ganados o perdidos: Nulisomia: aquella en la que falta un par de cromosomas homólogos donde no se refiere al

número haploide de cromosomas. Monosomia: es la pérdida de un solo cromosoma, una persona monosomica tiene 45

cromosomas Disomia : (2- n cromosoma) Trisomía : es la ganancia de un solo cromosoma ,una persona trisomía posee 47 cromosomas,

existen 3 copias homologas de un cromosoma Tetrasomia : es la ganancia de dos cromosomas homólogos presentadas como ( 2-n +2

cromosomas) una persona tetrasomica posee 48 cromosomas Pentasomia: (2-n +3 cromosomas )

(coarasa & Uson Ferrando,2009)

3. ¿Que son nilisomias cuáles son sus efectos?

R/ falta de los dos cromosomas del mismo par. En general tienen efectos letales porque el individuo carece por completo de esos genes.

4. ¿mencione 3 trisomías viables en humanos con su número haploide e incidencia a nivel mundial?

1. EL SINDROME DE DAWN: su número haploide 47 xx +21 o 47xy +21 su incidencia entre una de cada 1.000 y uno de cada 1.100recien nacidos

2. SINDROME DE KLINEFELTER. Su número haploide 47xxy su incidencia a 1 de cada 2.000 para unos recién nacidos

3. SINDROME DE SUPER HEMBRA: su número haploide 47xxx y su incidencia es de uno de cada 1.000 (Fernando A.2005)

4. ¿mencione las diferencias entre anomalías estructurales y numéricas?

R / las anomalías numéricas: estas implican la pérdida o ganancia de uno o varios cromosomas completos que puede incluir tanto a autosomas como cromosomas sexuales. Generalmente, la perdida de cromosomas tiene mayor repercusión en un individuo que la ganancia, aunque esta puede tener consecuencias serias, las células que han perdido un cromosoma presentan monosomia pare ese cromosoma, mientras que aquellas con un cromosoma extra muestran trisomía para el cromosoma implicado

Anomalías estructurales: implican cambios en la estructura de uno o varios cromosomas. Pueden ser muy complejas pero para el propósito de esta discusión nos centramos en cuatro d estos tipós más comunes.

Las delaciones implican la perdida de materia de un solo cromosoma. Los efectos son típicamente graves, puesto que hay pérdida de material genético.

Inversiones tienen lugar cuando se dan dos cortes dentro de un mismo cromosoma y el segmento intermedio gira a 180º y se vuelve a unir formando un cromosoma estructuralmente tiene la secuencia cambiada.

Las translocaciones se encuentran el intercambio de material entre dos o mas cromosomas. Si una translocación se reciproca el riesgo de problemas para el individuo es similar al de las inversiones: normalmente nulo si es familiar o ligeramente mayor si es de nov.

Duplicaciones: se presentan cuando un segmento cromosómico es duplicado en un cromosoma.

(Morales, 2005)

6. ¿de las enfermedades cromosómicas estructurales mencione cuales y porque son equilibradas y desequilibradas?

R/ equilibradas: inversiones y translocaciones porque la reorganización no produce ni perdida ni ganancia de material cromosómico, normalmenmte no hay efectos genoticos , existen riesgos de gametos desequilibrados.

Desequilibrados: delecion y duplicaciones, porque la reorganización provoca una pérdida o ganancia de material cromosómico normalmente hay efectos genotípicos severos.

(strachan, Tom & P.Andrew,2004)

7. ¿esquematice una de las enfermedades cromosómicas?

R/Síndrome de angelman: deleción en el cromosoma 15 de origen materno

Conclusiones

Entendemos entonces que un Cariotipo es un conjunto cromosómico de la célula de un individuo. Un error en el paso de información puede producir variantes alélicas que surgen por mutación y que son transmitidas de generación en generación; las mutaciones que se producen en líneas terminales son las más importantes porque pueden ser transmitidas a la descendencia.

Las mutaciones que sufre un cromosoma es un proceso aleatorio (estocástico) en el sentido de que la ocurrencia de una mutación particular no está determinada por la presencia o ausencia del organismo que la sufre en un ambiente. Que la mutación sea un proceso estocástico no significa que todos los sitios en el ADN se alteren con igual frecuencia o que el ambiente no afecte las tasas mutacionales; en efecto, sabemos que la exposición a varias clases de radiación, a ciertas sustancias químicas, o aun la desnutrición ayudan al incremento de las tasas de mutación en Humanos.

La citogenética proporciona las bases de la variación inherente y es esencial para determinar la constitución cromosómica y la naturaleza de la variación genética de las especies arbóreas. El análisis de Cariotipo del frijol mediante la cual se ha constatado que el genoma de la especie evoluciona debido a la ocurrencia de inversiones peri y paracéntricas, translocaciones y a la pérdida o ganancia de cromatina así como aneuploidía. Desafortunadamente los estudios citogenéticas en frijol común no son consistentes y se necesita estudiar un poco más de ellos.

Bibliografía

ORRACA CASTILLO, Miladys; LANTIGUA CRUZ, Araceli  y  LICOURT OTERO, Deysi. Cariotipo de

alta resolución en sangre periférica en la Neurofibromatosis 1. Rev Ciencias Médicas [online]. 2009,

vol.13, n.2 [citado  2014-04-03], pp. 135-145 . Disponible en: <http://scielo.sld.cu/scielo.php?

script=sci_arttext&pid=S1561-31942009000200015&lng=es&nrm=iso>. ISSN 1561-3194.

DORIA, Jessica. GENERALIDADES SOBRE LAS SEMILLAS: SU PRODUCCIÓN, CONSERVACIÓN

Y ALMACENAMIENTO. cultrop [online]. 2010, vol.31, n.1 [citado  2014-04-03], pp. 00-00 . Disponible

en: <http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0258-

59362010000100011&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0258-5936.

MEDLINE PLUS. (22 de 08 de 2013). Recuperado el viernes 24 de julio de 2015, de http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/001669.htm

salud.doctissimo. (martes de enero de 2013). salud.doctissimo.es. Recuperado el 25 de julio de 2015, de salud.doctissimo.es: http://salud.doctissimo.es/diccionario-medico/cariotipo.html

DISCUSIÓN

En este estudio la prevalencia de aberraciones cromosomicas es de un 14%, con 6.85 de positividad; estas cifras pueden ser diferentes a lo reportado por otros estudios, lo que depende de la población estudiada, los criterios de selección así como los tipos de alteraciones reportadas. En este caso se reportó todas las alteraciones cromosómicas encontradas, incluidos los polimorfismos, considerados variantes normales pero que merecen destacarse y contemplar su posible repercusión en el proceso reproductivo, como lo señalaron otros autores.15, 16

Por lo que se refiere a las alteraciones estructurales, éstas se encontraron en 60.6 % donde se incluyeron los polimorfismos cromosómicos. Las translocaciones implicaron varios cromosomas autosómicos, encontrándose en 22 pacientes. Se diagnosticaron un total de 10 reordenamientos desbalanceados incluyendo 4 síndrome de Down por translocación, todos de novo, 1 por t(13;21), 1 por t(21;21) y 2 por t(14;21), 2 casos de isocromosomas del X con dismórfias y retraso del desarrollo puberal, 2 casos con trisomía parcial del 20, derivada de una t(6;20) de origen paterno, 1 caso de deleción del brazo corto del cromosoma 18 que presentaba dismórfias y paladar amplio y un caso de adición de material genético en el brazo corto del cromosoma 14 que presentaba abortos espontáneos.

En cuanto a las aberraciones numéricas se diagnosticaron 27 SD por trisomía 21 libre, el defecto de este síndrome se relaciona con la defectuosa distribución de los cromosomas 21, de manera que estos casos presentan 3 copias del mismo; estos resultados se asemejan con otros reportes 17; en cuanto a las aberraciones de los cromosomas sexuales, se diagnosticaron 13 casos, el síndrome Turner y Klinefelter son los que mas prevalecen coincidiendo con otros estudios.12

Es muy extensa la gama de alteraciones genéticas relacionadas con insuficiencia ovárica, la baja talla, el retraso del desarrollo puberal, entre otras, sobre todo las vinculadas con el cromosoma X, básicamente mosaicos de Turner, en este sentido nosotros encontramos 3/6 (50%).

El hecho de haber reportado el total de alteraciones cromosómicas, incluidos los polimorfismos, explica la mayor prevalencia de aberraciones estructurales encontradas; se destacan, los polimorfismos, principalmente del cromosoma 9, presente en 26 pacientes de 49, lo que representa el 53 % dato que concuerda con lo publicado por otros autores, quienes reportan que este polimorfismo se encuentra en pacientes con antecedentes de infertilidad y pérdida repetida de la gestación. Los resultados obtenidos en el estudio, confirma la alta prevalencia de alteraciones cromosómicas en la población de Pinar del Río, donde cabe destacar, la importancia del estudio citogenetico en sangre periférica a las personas con abortos espontáneos, infertilidad, dismórfias, reordenamientos cromosómicos balanceados, entre otros motivos de indicación, con el fin de establecer un diagnóstico certero, oportuno y proporcionar un buen asesoramiento genético.

Universidad Nacional Autónoma

De Honduras

Facultad De Ciencias

Escuela De Microbiología

Laboratorio De Genética Para Microbiología(MB-640)

Practica Nº 6: Cariotipo

Integrantes De Grupo:

Roger David Thompson 20131016545

Andrea Sanchez Amaya 20123000160

Alejandra Maria Amador 20121004831

Instructor: Claudio Mejia

Sección: Jueves 4-6 Pm

Cuidad Universitaria, 30 de Julio 2015

Tegucigalpa M.D.C Honduras