Mesotelina

Donostia, 4 de Septiembre, 2012Dra. María Caballero RuizJefe C. Laboratorio Clínico

PATOLOGÍA CAUSADA POR ASBESTO

Inhalación de fibras de amianto

Benignas:

Placas pleurales Asbestosis Fibrosis pleural Derrame pleural

benigno

Pleuro-Pulmonar

Malignas:

Mesotelioma pleural

Mesotelioma de peritoneo

Cáncer de pulmón

DIAGNÓSTICO Mesotelioma Maligno (MM)

Se basa en tres factores:

El conocimiento de la exposición

La manifestación en el paciente de un cuadro clínico compatible

La exclusión de otra enfermedad que lo justifique

Diagnóstico del MPM

Complejo

30-40-50 años

DOLOR persistente y progresivo / DISNEA

DERRAME pleural

Alarma (pacientes riesgo) por historia laboral

Crecimiento en el grosor o aspecto festoneado de las placas pleurales

Dolor en pacientes con placas asintomáticasprevias

Diagnostico Diferencial en biopsia pleuralMPME.Pleural Benigna

especialmente complejo el Metástasis pleurales adenocarcinoma

Iº Histoquímica

PLACAS ASBESTÓSICAS “SOSPECHOSAS”:

¿MESOTELIOMA?

LAS MUCHAS CARAS DEL MESOTELIOMA

AFECTACIÓN PERICÁRDICA:10 meses SUPERVIVENCIA

TALCO + QUIMOTERAPIA: >2 años SUPERVIVENCIA

AFECTACIÓN PERICÁRDICA:7 meses SUPERVIVENCIA

MESOTELIOMA: ¿TRATAMIENTO?

CIRUGÍA:-Pleurectomía-Pleuroneumonectomía (resección en bloque)

CONSERVADOR:- Pleurodesis- Quimiotrapia

TERAPIA MULTIMODAL: Cirugía+Quimio+Radioterapia

¿Otras terapias?

Necesidad MULTISECTORIAL

Mejora en Diagnóstico y Ttº

Tendencia a la cronicidad

Historia Natural de Cáncer

Cáncer sin Ttº es mortal Diagnosticados y tratados oportunamente existe un alto grado de curación:Melanoma, útero, mama, leucemias

Objetivos en Oncología

Diagnóstico tempranoNuevos tratamientos

33% de los muertes por Cáncer podría evitarse

¿Marcadores Tumorales?

Sustancia producida o inducida por la Célula Tumoral cuya detección es de interés para:

Diagnóstico PrecozDiagnóstico del TumorPronósticoDiagnóstico Precoz de recidivaValorar Respuesta Ttº

Mesotelioma: Retos

Expuestos con P. benigna

Mesiotelioma

IDEAL TEST

Expuestos sin patología

Marcadores del mesotelioma

Mesotelina

Osteopontina

Factor potenciador de megacariocitos (MPF) producido por escisión de la proteína precursora

Ac hialurónico

MESOTELINA:

PRECURSOR DE 71 KDA:N-terminal 31 kDa (MPF): SUERO

C-terminal 40 kDa: unido a la membrana celular: mesotelina

FUNCIÓN?? Adhesión

ReconocimientoSeñalización celular

Chang K, Pastan I.Molecular cloning of mesothelin, a differentiation antigen present on mesothelium, mesotheliomas, and ovarian cancers. Proc Natl Acad Sci US A1996;93:136^40.).

UBICACIÓN

Normal.Superficie de células mesoteliales:PleuraPeritoneoPericardioTúnica vaginalis testicular [ ]

Tumores:Mesotelioma, Ovario, páncreas y pulmón

(Liping Yu, Mingqian Feng, Heungnam Kim , Yen Phung , David E. Kleiner, Gregory J. Gores, Min Qian, Xin Wei Wang, Mitchell Ho. Mesothelin as a Potential Therapeutic Target in Human Cholangiocarcinoma . J Cancer 2010; 1:141-149 .Argani P, Iacobuzio-Donahue C, Ryu B, Rosty C, Goggins M, Wilentz RE, Murugesan SR, Leach SD, Jaffee E, Yeo CJ, Cameron JL, Kern SE, Hruban RH: Mesothelin is overexpressed in the vast majority of ductal adenocarcinomas of the pancreas: identification of a new pancreatic cancer marker by serial analysis of gene expression (SAGE). Clin Cancer Res 2001, 7:3862-3868.

SMRP

HIPÓTESIS:??? ADHESIÓN.

Ensamble anormalIncapaz de permanecer unida a la superficie celular.

Otras hipótesis….

VENTAJAPéptidos solubles los podemos medir en la sangre

MESOTELINA

AUTORES REFERENTES

Robinson

Robinson (2003).1ªpublicación.. Secreción aumentada de mesotelina y mesotelioma pleural maligno (MPM)

Robinson et al.(2005). Retrospectivo . 84% MPM.. Monitorizar [SMRP]s en la población de riesgo. A mayor concentración de Mesotelina mayor tamaño tumoral y extensión

de la enfermedad.

Robinson BWS, Creaney J, Lake R, Nowak A, Musk AW, Klerk ND, Winzell P, Hellstrom KE, Hellstrom I. Mesothelin-family proteins and diagnosis of mesothelioma. Lancet 2003;362:1612–1616). Robinson BW, Creaney J, Lake R, Nowak A, Musk AW, de Klerk N, Winzell P, Hellstrom KE, Hellstrom I. Soluble mesothelin-related protein--a blood test for mesothelioma. Lung Cancer. 2005 Jul;49 Suppl 1:S109-11.

Hassan 2006Utilidad de la mesotelina

Diagnóstica

Seguimiento la respuesta al tratamiento

Hassan R, Remaley AT, Sampson ML, Zhang J, Cox DD, Pingpank J, et al. Detection and quantitation of serum mesothelin, a tumor marker for patients with mesothelioma and ovarian cancer. Clin Cancer Res 2006 ; 12 : 447-53.

Creany 2008Estudio comparativo: Mesotelina-MPF-Osteopontina

Sensibilidad para detectar mesotelioma :Mesotelina: 73%MPF: 34% Osteopontina: 47%

Especificidad del 95%Combinación de todos: no > sensibilidad.

Creaney J, Yeoman D, Demelker Y, et al. Comparison of osteopontin, megakaryocyte potentiating factor, and mesothelin proteins as markers in the serum of patients with malignant mesothlelioma. J Thorac Oncol 2008; 3:851–857

Grigoriu. 2009

ACIDO HIALURÓNICO

Mesotelina sérica > SENSIBILIDAD

Ac. Hialurónico y Mesotelina. No > sensibilidad

Grigoriu et al ( Grigoriu B, Chahine B, Zerimech F, Grégoire M, Balduyck M, Copin MC, Devos P, Lassalle P, Scherpereel A. Serum mesothelin has a higher diagnostic utility than hyaluronic acid in malignant mesothelioma. Clin Biochem. 2009 Jul;42(10-11):1046-50. Epub 2009 Mar 18.)

V. HeuvelPanel: CYFRA 21-1 CEA SMRP

ROC: discriminar MM y sujetos sanos

Mejoran ligeramente el rendimiento en comparación con los biomarcadores sólos

Van den Heuvel, M.M.; Korse, C.M.; Bonfrer, J.M.; Baas, P. Non-invasive diagnosis of pleural malignancies: the role of tumour markers. Lung Cancer 2008, 59, 350–354.

Rodríguez Portal JA 2009

Mesotelina. Más elevada en los mesoteliomas

Diferencia significativa no expuestos / expuestos con o sin patología

Sensibilidad y Especificidad (72% de ambas)

Rodríguez Portal JA, Rodríguez Becerra E, Rodríguez Rodríguez D, Alfageme Michavila I, Quero Martínez A, Diego Roza C, León Jiménez A, Isidro Montes I, Cebollero Rivas P. Serum levels of soluble mesothelin-related peptides in malignant and nonmalignant asbestos-related pleural disease: relation with past asbestos exposure. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2009 Feb;18(2):646-50

Rodriguez-Portal JA et al. 2010

Valor Pronóstico: Supervivencia SMRP independientemente del tipo histológico

Diferencia de (SMRP) Diagnóstico MesoteliomaSujetos expuestos sin patología pleural

Rodríguez-Portal JA, Asensio Cruz M, Arellano Orden E,Díaz Baquero A, León Jiménez A,Isidro Montes I, Cebollero Rivas P, Diego Roza C, Rodríguez Panadero F, Rodríguez Becerra E. Niveles séricos de mesotelina. Valor pronóstico en mesotelioma pleural maligno. Rev Esp Patol Torac 2010; 22 (4): 240-244.

Food and Drug Administration (FDA)

Enero del 2007 en Estados Unidos MesomarkTM de Fujirebio Diagnostics (Malvern, USA)

Marcador de seguimiento en los pacientes que presentan mesotelioma

Proyecto 2011

No expuestos:Control: 71 muestras de sujetos no expuestos

< 40 años: Cohorte poblacional Riesgo Exposición AmiantoResidentes CCAAValores de Referencia

Expuestos:La población expuesta fue reclutada a través de Servicios Médicos de empresas colaboradoras en las que se manipulóamianto. Se reclutaron 99 trabajadores expuestos y sin MPM.

¿Cómo se mide la Mesotelina?

ELISA: InmunoanálisisMesomark, de Fujirebio Diagnostic Inc. (FDI), Dilución 1:101

Cuantificación de mesotelina soluble (SMRP): Suero / Orina/ L. Pleural

Anticuerpos monoclonales distintos (4H3 y OV569): uno para capturar SMRP / otro para su detección

t de Student-Fisher :Niveles de Mesotelina superiores en sujetosque han estado expuestos al amianto.

Mesotelina (nmol/L)

Exposición N Media DS IC 95% Significación

No 71 0.82 0.31 0.64-0.89 P<0.05

Sí 99 0.98 0.44 0.88-1.07

Tabla 1: Resultados de la concentración de mesotelina en nuestra muestra control y

expuestos

RESULTADOS

RESULTADOSMesotelina (nM/L)

Exposición N Media DS IC 95% Significación

No 71 0.81 0.31 0.75-0.89

P<0.01 < 12 meses 48 0.88 0.41 0.77-1.01

>= 12 meses 51 1.08 0.47 0.84-0.97

Tabla 2: Resultados de la concentración de mesotelina en nuestra muestra control / expuestos por

debajo 12 meses y por encima de 12 meses

Test LEVENE

> 12 meses< 12 mesesNo expuestos

Grupos

1,10

1,05

1,00

0,95

0,90

0,85

0,80

Media

de M

esote

lina

Los niveles de mesotelina se incrementan en relación con el tiempo de exposición.

RESULTADOS

Concentración/Tiempo Exposición

2402281801441321209684604836248654321

Tiempo exposición (meses)

2,40

2,10

1,80

1,50

1,20

0,90

0,60

Med

ia M

esot

elin

a

1,167

1,467

2,50

1,50

0,920,90

1,101,133

1,167

0,70

0,90

0,778

1,20

0,90

1,20

0,75

0,657

0,7770,75

CONCLUSIONES

1.- Monitorización del tratamiento

2.- Indicador pronóstico

3.-Confirmación de la sospecha diagnóstica ante la sospecha clínica

4.-Seguimiento población expuesta?

5.- Potencial utilización en futuros tratamientos

6.- Es necesario seguir estudiando

LIMITACIONES MesotelinaEstudios de carácter retrospectivos

Factores de confusión: Filtrado glomerular Edad del sujeto Índice de masa corporal Variación biológica Homogeneidad de la exposición

Población Expuesta:VIGILANCIA

Revisión Sistemática de artículos científicos

siguiendo un método explícito para resumir/evaluar

la información sobre un determinado tema.

Metaanálisis

Punto de partida: Preguntas estructuradas y protocolo definido previamente.

Metaanálisis

Búsqueda de la evidenciase realiza de manera sistemática con una declaración de los criterios de selección: ingles, casos, controls (X tipos), Mesomark….

Evaluación crítica de los artículos primarioscalidad metodológica de los estudios.

Resultados individuales aportados por cada autor

Arbritariamente : Cutt-off 2 nM/L

Heterogeneidad de los resultados:Calidad metodológica OK

Diferencias entre el numero de participantes

Edad, tipo de control, estadío, histología.

Metodología

Habilidad/capacidad de una prueba para distinguir entre dos estados de salud

Existen diferencias estadísticas Caso/Control:

Estadío / Carga Tumoral, Epitelioide Joven (control)

ROC

DIAGNÓSTICO TEMPRANO

No expuestos

Stadio I y II, epitelioide

Sintomáticos /alto riesgo

AUC. 0.77Sobrediagnóstico: FP

1.- TEST POS ↑especificidad: 95% ↑FN Cutt-off ↑ S= 32%

2.- TEST NEG ↑sensibilidad: 95% ↑FP Exclusión diagnóstico Cutt-off↓ E= 22%

Screening 1º test Sensible (laxo) FP

2ª Test especifico FN

Prevalencia Baja::: TEST ESPECIFICOS

ENFOQUES

1.- Monitorización 2.-Edad, filtrado glomerular, masa coprpral, 3.- Gold :mesomark: mejorar 4.-Añadir biomarcadores:

CYFRA; CEA, 8 OH dG, FPEV…

CUESTIONES Valores de referencia :

Diferencias entre los grupos

Teorías de V.R. del cambio (autocontrol)

Variación biológica: inter / intraindividual Estabilidad de la proteína

Categorización de los trabajadores expuestos de forma homogénea:

Tipo de tareaTipo de FibraDuración / Intensidad de la exposición

Nuevos Marcadores

Biomarcador 8OHdG

Marcador de iniciación de daño oxidativo del ADN

Factor de promoción de la carcinogénesis

Marcador de exposición no de diagnóstico

Procesos epigenéticosMetilación del ADN:

adición de un grupo metilo a la citosinarelacionada con la silenciación de genes.

micro RNA (no codificantes)relacionados con la regulación de la expresión génicaalteración de los miRNA puede inducir fenotipos cancerosos.niveles más bajos de miRNAs:

MM/Sanos (e)Expuestos / sanosmiRNAs podría ser un marcador diagnóstico precoz

exposición al amianto

FUTURAS TERAPIAS

Ensayos Ac monoclonales :

Diana específica en el tratamiento del cáncer.

NANOSHELLS (dielectric core (silica) surrounded by thin metal shell (gold):- Properties similar to Quantum dots, but the heavy metal associate toxicity- Larger than (10-300 nm) Qdots, which means less cellular internalization- PEG coating improves their bio-availability- Good for in vivo and in vitro imaging- Useful for phototermsdfdjsfjhjksdfhsf

Nano-Medicine and Cancer (Cont.)

- LIPID-BASED VEHICLES (liposomes, micelles, polymersomes: - Unspecific (and fast) uptake by the reticuloendothelial system (RES). Can be improved by

poly(ethilene glycol) (PEG) coating.- Can contain air bubles (to enhance contrast b y ultrasound) or drugs, that can be delivered

upon ultrasound frequency stimulation.QUANTUM DOTS (inorganic elemental core (Cd, Hg) + metal shell):- Fluorescence with wide spectrum, including NIR (400-2000 nm)- Resistant to photobleaching (unlike organic nanoparticles)- TOXICITY concerns, associated to heavy metals.

Nano-Medicine and Cancer

LABORATORIO CONOCIMIENTOSEGURA CERTERA INNOVADORA

DiagnósticoSeguimientoTratamiento

CLÍNICOS

Gracias por su atención