∞

*ELISA (acrónimo del inglés Enzyme-Linked

ImmunoSorbent Assay, ‘Ensayo por

Inmunoabsorción Ligado a Enzimas’) es una

técnica de inmunoensayo en cual un antígeno o

anticuerpo inmovilizado se detecta mediante

un Ac o Ag enlazado a una enzima capaz de

generar un producto detectable como cambio

de color, o incluso fluorescente.

∞

Competitivo

No competitivo

Directo

Indirecto

Sándwich

∞

*En este método, el anticuerpo de la muestra va

a competir con el conjugado por un número

limitado de sitios de unión del antígeno. Habrá

ausencia de color en una muestra positiva

debido a que el sustrato no encontrará a la

enzima porque el conjugado ha sido desplazado

por el anticuerpo presente en la muestra.

∞

*Consiste en enfrentar la muestra con el

antígeno o anticuerpo que está en la fase

sólida. Si una muestra es positiva se formará el

complejo antígeno-anticuerpo y al agregar el

conjugado reaccionará con el respectivo

sustrato desarrollando color.

∞

*En este se fija el antígeno al soporte, se lava

para eliminar los no fijados, luego se adicionan

los anticuerpos marcados con la enzima para

que reacción con el antígeno y que solubilizado

el complejo, se lava para eliminar anticuerpos

que no reaccionaron y se agrega un sustrato

específico para la enzima, al final se observa la

coloración.

∞

*En este la diferencia viene dad que a nivel que

el elemento marcado por la enzima es un anti-

anticuerpo que va a reaccionar con el

anticuerpo, que reacciono junto al antígeno

previamente fijado; finalmente agrega un

sustrato específico para la enzima, se lava y se

observa la coloración.

∞

*En esta forma, la placa suele ya venir con un

anticuerpo fijado (monoclonal ó policlonal)

frente al antígeno problema, sobre el que se

añadirá el macerado del órgano sospechoso,

que en caso de reaccionar con el anticuerpo de

la placa, será puesto en evidencia tras la

adición del segundo anticuerpo marcado con la

enzima. Por último, se añade el substrato para

revelar la reacción.

∞

*Enfermedades producidas por

parásitos

*Babesias y tripanosomas

*Toxocara canis

*Toxoplasmosis

*Triquinosis

*Enfermedades producidas por

Micoplasmas

*Enfermedades producidas por

bacterias

*Mycobacterium tuberculosis

*Brucelas

*Enterotoxinas Vibrio cholerae

*Estreptococos

*Salmonelas*Enfermedades producidas por virus

*Enfermedad de Aujeszky

*Enfermedad de Newcstle

*Fiebre aftosa

*Leucemia felina

*Peste porcina africana

*Peste porcina clásica

*Rinotraqueitis infecciosa

*Rotavirus

*Artritis vírica

*VIH

∞

*Hormonas

*Gonadotropina coriónica

*Progesterona

*Testosterona

*Hormonas tiroideas

*Cuantificación de inmunoglobulinas

* IgG

* IgE

* IgA

* Inmunopatología

*Anticuerpos anti-DNA

*Factor reumatoide

* Inmunocomplejos

circulantes

∞

*Suero

*Orina

*Heces

*Saliva

*LCR

*Otros

∞

*Peroxidasa

*Fosfatasa alcalina

*β-galactosidasa

*Penicilinasa

*Ureasa

*Glucosa oxidasa

∞

*Peróxido de hidrogeno

*o-dianazina

*o-fenilenodiamina (OPD)

*tetrametilbencidina (TMB)

*ácido- 2,2-acino-di-(3-etil)benzatiazolina-6-sulfónico (ABTS)

*Paranitrofenilfosfato

*ortonitrofenil-beta–D-galactopiranosido

*Glucosa