5.2. Valoración de los leucocitos por laboratorio 5.2.1. Cuenta de leucocitosNumero de leucocitos que se encuentra en un milímetro cúbico (un mililitro) de sangre. Se expresa en miles de células/mililitro (“n” x 103/mm3), o de manera menos frecuente, (“n” x 109/l).Los leucocitos se distinguen de los eritrocitos por su gran tamaño, también porque estos tienen núcleo, mitocondrias y otros organelos. Se van a encontrar en menor cantidad que los eritrocitos, 7000 por mililitro cúbico en comparación de 4 a 5 millones de eritrocitos por mililitro. En un hombre promedio hay 75 mil millones de leucocitos en total. Una cuenta normal de leucocitos no descarta la posibilidad de una enfermedad.

En el recién nacido de 10 a 26 mil/mm3  A los 3 meses de 6 a 18 mil/mm3 Al año de vida de 8 a 16 mil/mm3 Entre los 3 y 5 años de 10 a 14 mil/mm3 De los 5 a los 15 años de 5,5 a 12 mil/mm3 En el adulto de 4,5 a 10 mil/mm3

5.2.2. Fórmula diferencialTambién llamada “Recuento Diferencial” y es la proporción (tanto por ciento) de cada tipo de leucocito.Es la cantidad de cada uno de los tipos o población de leucocitos.

a) Granulocitos:

• Neutrófilos. • Eosinófilos. • Basófilos.

b) No granulocitos o agranulocitos:

• Monocitos. • Linfocitos.

Los granulocitos son llamados así porque al teñirlos presentan gránulos coloreados en su citoplasma.

Puede obtenerse mediante aparatos automatizados y se expresará de la misma forma que la cuenta de leucocitos. También se pueden observar 100 leucocitos en un frotis mediante microscopía, en cuyo caso se obtiene un valor porcentual o relativo. Si hay anormalidades en la cuenta de leucocitos y sólo se tiene un reporte relativo de la cuenta diferencial, es necesario obtener un valor absoluto, ya que los valores porcentuales, cuando la cuenta de leucocitos está aumentada o disminuida, pueden ocasionar confusión e inducir al error. Esto ayudará para el diagnóstico de enfermedades infecciosas, inflamatorias, procesos neoplásicos, leucemia, entre otros.

Leucocitosis o Leucopenia.Leucocitosis:

Causa más común Neutrofilia, Linfocitosis, Monocitosis. O bien, Granulocitosis.Neutrofilia: Principalmente por infección aguda. También puede ser por infección crónica, procesos mieloproliferativos, glucocorticoides, liberación de adrenalina y tabaquismo. Eosinofilia: Enfermedades parasitarias, enfermedades alérgicas. También en tumores malignos.Basofilia: Muy rara. Puede ser por enfermedad mieloproliferativa.Linfocitosis: Absoluta y relativa (junto con neutropenia). Mononucleosis infecciosa. Monocitosis: Normal en neonatos y mujeres gestantes, junto con los neutrófilos. Infecciones crónicas o tumores.

Leucopenia: Menor de 4,000/ mm3Neutropenia: Hereditaria o adquiridaEosinopenia: Ocurre durante la gestación y especialmente en el trabajo de parto. Puede ser por estrés, infección bacteriana aguda, administración de glucocorticoides. Linfocitopenia: Principalmente en niños por una inmunodeficiencia severa. Muy útil para pacientes con VIH. Por tensión, neoplasias, infecciones, inmunodeficiencias y radioterapia. Tratamiento de esteroides lo provoca por 12 h. Monocitopenia: Aplasia medular o leucemia de células pilosas.Basopenia: Sólo por aparatos automatizados. Ocurre en la ovulación.

5.2.3. Revisión del frotisSe hace un frotis sanguíneo. Método longitudinal: En una lanceta estéril se hace una punción en el pulpejo del dedo (meñique), se coloca una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos. Se coloca otro portaobjetos delante de la gota de sangre hasta que este toco con su borde la gota de sangre, se desliza sobre toda la superficie del otro portaobjetos donde se había colocado la sangre de manera que se obtenga una fina capa de sangre, que sería el frotis.Método Transversal: Sobre la gota se deja caer un segundo portaobjetos de tal manera que la sangre se extendiera en forma rápida y uniforme. En el momento en que la sangre deje de extenderse, se desliza paralelamente el portaobjetos superior con un movimiento constante.

Se coloca etanol para fijar la tinción. Posteriormente se agregan las sustancias para la tinción, puede ser con Hematoxilina o Giemsa. Usando Hematoxilina se deja actuar 15 minutos, se enjuaga y se agrega Eosina para que actúe 1 minuto, por otra parte si se utiliza Giemsa es lo único que se agregaría y se dejaría actuar por 5 minutos. Se deja secar la muestra y se aérea en forma de abanico.

En primer lugar se inspecciona la extensión sanguínea para seleccionar la región con la mejor distribución de leucocitos. Los leucocitos se identifican fácilmente por la presencia de su núcleo teñido de morado.

No Granulocitos:Linfocitos Núcleo redondeado que ocupa casi todo el glóbulo.

Monocitos Poco frecuentes

Granulocitos:

Neutrófilos Más abundantes. Granulaciones pequeñas y teñidas de azul pálido

Basófilos Menos abundantes. Granulaciones grandes y teñidas de color azul

Eosinófilos Poco abundantes. Granulaciones teñidas de rojo

REFERENCIAS Bramblia, Eduardo. Et al. Red de Revistas Científicas de América Latina, El Caribe, España y Portugal.

Bioquímica, Vol. 28, núm. 3, Julio-Septiembre 2003, pp. 4-12, México.http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=57611572002

García, Flora. Et al. Utilidad de la Biometría Hemática en la Práctica Clínica. Leucocitos (Segunda parte). Rev Sanid Milit México 2012. http://www.medigraphic.com/pdfs/sanmil/sm-2012/sm121g.pdf

Mateo, Rafael. Análisis Clínicos de Rutina. Capítulo 8 La Cuenta de Leucocitos. México, 21 de Julio del 2006. http://www.mailxmail.com/curso-analisis-clinicos-rutina/cuenta-leucocitos

UNAM, Facultad de Medicina. Biología Celular e Histología Médica, Unidad Temática 2. Departamento de Biología Celular y Tisular. Curso 2011-2012. México. http://www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/Doc/Valores_normales-BH.pdf

INTRADERMORREACCIONES

Es una aplicación intradérmica de una sustancia conocida con la finalidad de evaluar la hipersensibilidad retardada (HSR). Se utilizan con fines diagnósticos y pronósticos en algunas enfermedades.

La HSR es la respuesta inmunitaria de tipo celular, la cual depende de Linfocitos T CD4+funcionales.

USO en HSR Evaluar inmunidad en pacientes con sospecha de infección, en inmunodeficiencias o en valoraciones pretrasplante o pretratamiento con agentes biológicos.

Mecanismo inmunológico de las HSR.

Participan los Linfocitos T, responsables patogénicos de la dermatitis por contacto y del rechazo a trasplantes. Después de 4 a 8 horas de ingresar la sustancia extraña induce vasodilatación y edema; formándose un infiltrado perivascular mixto en la dermis profunda, constituidos por linfocitos e histiocitos, con algunos basófilos y neutrófilos. El antígeno es procesado por las células de Langerhans o macrófagos, y presentando al Linfocito T que sufre numerosas mitosis se obtienen células de memoria, proceso de transformación.

La segunda vez que el mismo antígeno penetre la dermis será presentado a los Linfocitos T de memoria previamente sensibilizados, que se multiplicaran y producirán linfocinas que actúan sobre los neutrófilos, macrófagos y otros linfocitos resultando en hipersensibilidad retardada; asimismo, se induce un aumento de la permeabilidad vascular y se activa el sistema de coagulación. La fibrina obtenida atrapa otras proteínas y constituye un gel, responsable de la induración observada en estas reacciones junto con los histiocitos y linfocitos. (2-4). La reacción alcanza su máximo a las 24 horas de la inyección y, en ocasiones, se observarán vesículas o necrosis, además de induración en el sitio de la aplicación.

Intradermorreacciones más utilizadas

*Tuberculina: Unas de las más utilizadas en todo el mundo. Valorar la HSR a antígenos de microbacterias y se conoce como Reacción de Mantoux.

*Lepromina: Determinar el estado inmunológico de una persona, conocida como Reacción de Mitsuda. Clasificación de enfermos de lepra, pronóstico y seguimiento.

*Candidita: Reacción positiva con este antígeno indica contacto previo con Candida albicans, presenta intradermorreacción positiva.

*Tricofitina: Estado inmunológico del paciente, respuesta inmediata a los 15 m.

*Histoplasmina: Existencia de contacto previo con Histoplasma capsulatum.

REFERENCIAS

Barquero, Liliana. Intradermorreacciones y su aplicación. Revista Médica de Costa y Centroamérica LXVI (589) 85-88; 2009. http://www.binasss.sa.cr/revistas/rmcc/587/art14.pdf