Resumen

La meningitis es una infección del sistema nervioso central, se desarrolla a partir de complicaciones infecciosas en las vías respiratorias que se dan con mas frecuencia en la población infantil. Uno de los microorganismos más recurrentes en estas infecciones es el S. pneumoniae, que debido a su patogenicidad se ha convertido en un problema de salud pública en México. En Guerrero no se aplican los métodos para su identificación, por lo tanto no hay registros de su prevalencia y distribución en la población del estado.

Los métodos usuales para la identificación de meningitis causada por S. pneumoniae son principalmente bacteriológicos. Sin embargo la aplicación de métodos moleculares es inexistente a pesar de su precisión y confiabilidad. Uno de los métodos es la PCR que además permite identificar y clasificar todos los serotipos. Por lo tanto consideramos que la estrategia que planteamos en este proyecto es de gran relevancia ya que aportaría las bases para la realización de planes de prevención, control, tratamientos y diseño de vacunas en base a la prevalencia de los serotipos locales. Para así contribuir

Palabras clave: meningitis, s. pneumoniae, infecciones en las vías respiratorias, serotipos y La PCR.

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PROBLEMA PARA EL TRABAJO INTEGRADOR FINAL DEL QUINTO TRIMESTRE

Grupo 504, Equipo 3. Asesor: Dr. Oscar del Moral Hernández

A pesar de los notables avances en la prevención, diagnóstico y tratamiento de las enfermedades infecciosas en las últimas tres décadas, las meningitis bacterianas permanecen como uno de los problemas más importantes de salud pública en todo el mundo, dentro de las 10 principales causas de muerte por enfermedades infecciosas, con uno a dos millones de casos anuales y 135,000 muertes; el problema es mayor en países pobres y en algunas regiones de África, Asia y Latinoamérica, en donde su mortalidad llega a ser de 17 a 60% de los casos, y en países desarrollados, de 3 a 19%. Sus secuelas neurológicas, como sordera, ceguera, retraso psicomotor, hidrocefalia, etcétera, se presentan hasta en 54% de los que sobreviven. En México, las meningitis bacterianas constituyen también una importante causa de morbilidad, mortalidad y secuelas neurológicas, pero su epidemiología y frecuencia evaluadas por cifras de mortalidad y morbilidad son poco confiables a causa de las deficiencias en su diagnóstico mi-crobiológico, comunicación de casos y registro de muertes.

a) Mencione los factores de riesgo para presentar una infección meníngea.

b) Describa la epidemiología de las infecciones meníngeas causadas por bacterias en México y en Gro.

c) Enumere los microrganismos capaces de infectar meninges.

d) Describa los signos y síntomas que presentan los pacientes infectados.

e) Cuando sospechas de una infección meníngea, como tomas, transporta, conservas y cultivas las muestras obtenidas de los pacientes infectados.

Enfocarse en este problema:

Describa la importancia de la aplicación de vacunas para prevenir la meningitis causada por Streptococcus pneumoniae.

Describe como identificas a S. pneumoniae de manera convencional y molecular.

Indica que otros estudios de gabinete se solicita a los pacientes infectados y porque?

Describa las pruebas bioquímicas que utilizaste para identificar a los patógenos obtenidos de las muestras clínicas.

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Describe como realizas el antibiograma para S. pneumoniae y en base a esto como reportaría al médico.

Diseña un canal de comunicación para generar cultura en salud en los pacientes y para mantener actualizado al personal de salud.

1. Marco teórico.

1.1 Generalidades

El Sistema nervioso central (SNC) de los vertebrados está formado por el encéfalo y la médula espinal, está rodeado de capas de tejido nervioso y una cavidad central llena de líquido y revestida de epitelio. Tres capas membranales, denominadas meninges, se ubican entre los huesos y los tejidos del sistema nervioso central. Sirven para estabilizar el tejido nervioso y protegerlo de los golpes contra los huesos del esqueleto. Las membranas son:1) duramadre (se vincula con venas que drenan sangre desde el encéfalo a través de vasos y cavidades denominados senos) ,2) aracnoides esta unida laxamente a la piamadre y deja un espacio subaracnoideo entre la dos capas y,3) la piamadre es una membrana delgada que se adhiere a la superficie del encéfalo y de la medula espinal. Silverthorn, D. E. et al (2009). Fisiología humana. Madrid – España. Panamericana. P.296

La meningitis es una de las patologías infecciosas más graves en pediatría, es un proceso inflamatorio agudo del SNC causado por microorganismos que afectan las meninges. Un 80% ocurre en la infancia, en niños menores de 5 años siendo las más frecuentes, provocadas por bacterias. Baquero-Artigao, F.et al (2007). Meningitis bacteriana.

Madrid-España.asociacion española de pediatría.p.46

Los agentes bacterianos más frecuentes causantes de meningitis son: Haemophilus influenzae (Hi), Neisseria meningitidis (meningococo) y Streptococcus pneumoníae (neumococo). Otros menos frecuentes son: Neisseria gonorrhoeae, Salmonella serotipo typhi, Shigella, Vibrio cholerae, E. coli, Listeria monocytogenes, Klebsiella spp y P. aeruginosa. También los virus pueden causar meningitis, los agentes víricos más frecuentes son los enterovirus (coxsackie, el virus la polio y el virus del herpes) aunque con menos frecuencia. OPS, (2009). Vigilancia

de las neumonías y meningitis bacterianas en en menores de 5 años. http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

La meningitis bacteriana depende, principalmente de dos factores; a) edad ya que es más común en menores de 5 años y b) horas de evolución de infecciones en oído medio, senos nasales y pulmones provocada por Streptococcus

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pneumoniae. Gomez J.F. y Gomez L. F. et al (2008).Pautas de tratamiento en pediatría. Colombia. Editorial

universidad de Antioquina. P. 73.

Streptococcus pneumoníae es un diplococo gram positivo α- hemolítico, causante de procesos sistémicos invasivos como la bacteriemia sin foco evidente de infección, la neumonía grave y la septicemia con o sin componente meningoencefálico. También es el agente bacteriano más frecuente en la etiología de las infecciones respiratorias como la otitis media aguda, la sinusitis aguda y la neumonía. Valeria Preado, J. (2001).conceptos microbiológicos de streptococcus pneumoniae. Revista chilena de

infectiologia.18.1 – 2.

Los síntomas de la meningitis varían según la edad y la causa de la infección. En recién nacidos no suelen presentarse manifestaciones típicas de meningitis, apareciendo irritabilidad, vómitos, aletargamiento, rechazo de alimentación y convulsiones recurrentes están ausentes la fiebre y signos de irritación meníngea (rigidez de la nuca) .En las siguientes semanas ya es habitual encontrar fiebre, hipertensión de fontanela y signos de irritación meníngea como rigidez de la nuca que se manifiesta con una limitación de la motilidad y dolor a la movilización del cuello. Los signos de irritación meníngea necesitan varías horas para desarrollarse a partir de que el microorganismos penetra el LCR, por ejemplo la rigidez de la nuca necesita de 12-14 horas de infección meníngea. Torres Moreno, L.M. et al. (2002). Tratado

de cuidados críticos y emergencia. España. Aran ediciones, S.L. p.2057 – 2058.

1.1.1 Diagnostico Es de gran importancia realizar un diagnostico oportuno de la meningitis bacteriana, para ello se necesitan tomar varios tipos de muestras para conocer el grado de infección del paciente y evitar que llegue a desarrollar meningitis bacteriana. Los tipos de muestras recomendados son: exudado nasofaríngeo, faríngeo, oído medio y LCR por punción lumbar. La obtención de una muestra de LCR es un procedimiento imprescindible para establecer la etiología de una meningitis bacteriana. OPS, (2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis bacterianas en en menores de 5

años. http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

Se recomienda realizar como mínimo las siguientes pruebas de laboratorio en muestras de LCR de los casos sospechosos de meningitis: citoquímico, tinción de Gram y cultivo. En una meningitis bacteriana el LCR presenta las siguientes características de apariencia y citoquímicas:

• Turbidez,• Leucocitos aumentados (>100/mm3),• Elevación de proteínas (>100 mg/dl),

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• Disminución de la glucosa (<40 mg/dl).

La tinción de Gram del LCR sugiere la etiología bacteriana de la infección, por su aspecto microscópico. En los casos de meningitis bacteriana, en la tinción de Gram se pueden identificar:

• Cocobacilos gramnegativos (H. influenzae),• Diplococos gramnegativos intra o extracelulares (meningococos),• Diplococos grampositivos (neumococos). Koneman, E. y Stephen E. (2008). Diagnostico

microbiologico. Madrid españa. Panamericana. P. 22 – 23.

Para realizar los cultivos se utilizan las muestras de LCR y de sangre, por la posibilidad de aislar la bacteria en cualquiera de los dos. El cultivo permitirá identificar con seguridad la bacteria causante de la enfermedad. Una vez que se tiene la cepa aislada es posible identificar el serotipo/serogrupo de esta bacteria y realizar los antibiogramas para establecer la susceptibilidad a los antimicrobianos probados. El cultivo es considerado “la prueba de oro” para el diagnóstico etiológico de bacterias. OPS, (2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis bacterianas en en menores de 5

años. http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

La identificación de la bacteria causante de un caso de meningitis bacteriana y la determinación de la susceptibilidad antimicrobiana posibilitan:

Confirmar el diagnostico. Establecer el tratamiento específico. Identificar el serotipo circulante. OPS, (2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis

bacterianas en en menores de 5 años.http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

Las pruebas de laboratorio tienen como objetivo principal establecer el diagnóstico etiológico de las neumonías y meningitis bacterianas, así como la susceptibilidad antimicrobiana. OPS, (2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis bacterianas en en menores de 5

años.http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

Se deben seguir ciertos pasos para obtener muestras de LCR, sangre y líquido pleural de buena calidad que permitan el aislamiento de la cepa. Siempre que sea posible, se debe tomar la muestra para cultivo antes de iniciar el tratamiento con antibióticos, ya que de lo contrario podrían obtenerse resultados falsos negativos. Las muestras deben obtenerse bajo las condiciones estandarizadas de asepsia en todos los casos y los técnicos que realizan el procedimiento (en este caso solo los médicos pueden extraer el LCR dentro en el quirófano), deben usar guantes

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estériles y mascarilla. OPS, (2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis bacterianas en en menores de 5

años. http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

Una vez tomada la muestra para el cultivo, debe enviarse inmediatamente al laboratorio. El tiempo máximo para las muestras de sangre, LCR y líquido pleural al laboratorio es de dos horas. Mientras tanto, debe mantenerse a temperatura ambiente. Si hubiese que conservar la muestra por más tiempo, se recomienda mantenerla en incubadora a una temperatura de 35 a 36 °C (nunca debe almacenarse en refrigerador). No debe enviarse la muestra de LCR en ningún medio de cultivo. OPS, (2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis bacterianas en en menores de 5

años.http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

Para el transporte de este tipo de muestras debe cumplirse con los siguientes requisitos:

Las muestras de sangre, LCR y líquido pleural para el cultivo no se deben refrigerar ni congelar durante el transporte.

La muestra debe ir correctamente identificada e incluir una ficha epidemiológica.

El frasco, envuelto en papel aluminio o en papel de empaque estéril, se debe embalar y colocar en una caja bien protegida con espuma o papel, con la finalidad de amortiguar los golpes y evitar que se rompan. Se debe indicar con una flecha el sentido en que los frascos han sido colocados para evitar que se volteen y se derramen las muestras.

Identificar la caja con los datos del remitente y del destinatario. Identificar en la caja el tipo de material biológico que contiene. OPS, (2009).

Vigilancia de las neumonías y meningitis bacterianas en en menores de 5 años. http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

Las meningitis bacterianas permanecen como uno de los problemas más

importantes de salud pública en todo el mundo, se encuentran dentro de las 10

principales causas de muerte por enfermedades infecciosas, con uno a dos

millones de casos anuales y 135,000 muertes. Barriga Angulo, G.et al. (2009). Características

clínicas y epidemiologia de 3,183 casos de meningitis confirmados bacteriológicamente (1980/2007).29 (3). P. 2-3.

1.2 Antecedentes

Epidemiologia de los serotipos de Streptococus pneumoniae, se han caracterizado

los serotipos y serogrupos circulantes de estas bacterias y ha establecido la

susceptibilidad bacteriana a los antibióticos más utilizados. La comprobación de la

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calidad de los procedimientos de laboratorio ha estado a cargo del Programa de

Evaluación Externa del Desempeño (PEED).

Con relación al neumococo, en el periodo 1993-2004, la red logró procesar más de

11.000 aislamientos obtenidos de procesos infecciosos invasivos en niños

menores de 6 años. Los aislamientos obtenidos en Argentina, Brasil, Chile,

Colombia, México y Uruguay en el período 2000-2005 mostraron que el serotipo

predominante era el 14, con 29,2% del total de aislamientos, seguido por los

serotipos 6B, 5 y 1. Para el periodo 2000-2005, se observó que 13 de 20 países

reportaron el serotipo 14 como el prioritario, siguiendo en orden de importancia el

6B, 5 y 1 que eran los mismos que prevalecieron en el periodo 2000-2003. OPS,

(2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis bacterianas en en menores de 5 años.

http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

En un estudio de determinación de frecuencia de serotipos y susceptibilidad a

ocho antimicrobianos en Streptococcus pneumoniae aislados de la nasofaringe de

una muestra representativa de niños menores de cinco años de edad residentes

en el distrito federal, muestra que en 573 niños se aisló S. pneumoniae. Los

serotipos más frecuentes fueron el 23F, 35 19F, I IA y 15; 46% de los serotipos

encontrados no son cubiertos con la vacuna heptavalente. Solorzano Santos, F. et al. (2005).

Serotipos prevalentes de Streptococcus pneumoniae colonizadores de nasofaringe, en niños del distrito federal. Salud

pública de México. Vol. 47. P. 276.

En estados unidos de norte América se estiman 3 casos por 100 000 habitantes.

En México se registran al año alrededor de 2,000 muertes que representan

aproximadamente el 30% de los casos anuales, por lo que podrían suponerse que

se presentan alrededor de 6,000 cada año. Duval, U. R. (Ed.). et al. (2004). Manual de prácticas de

bacteriología medica. (350 vols.). México. Academia de bacteriología medica. P.260.

En México, las infecciones de vías respiratorias continúan siendo una de las 10

primeras causas de morbilidad y mortalidad en los menores de cinco años

de edad. En las infecciones de origen comunitario los principales agentes

etiológicos son virus y bacterias. Secretaria de salud. (2011). Perfil epidemiológico de la infancia en México

2010. Junio del 2011, http://www.cenavece.salud.gob.mx/.

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Mientras que en el estado de Guerrero se desconocen los casos de meningitis

bacteriana debido a que no hay un diagnostico confiable y seguro. Además no es

obligatorio reportar los casos al sistema de vigilancia epidemiológica.

2. Estrategia de solución

La meningitis causada por Streptococcus pneumoniae es una de las infecciones

más frecuentes en niños menores de 5 años, por lo tanto es necesario establecer

un diagnostico oportuno para la identificación de este microorganismo y contribuir

al tratamiento de los pacientes.

Por lo tanto se propone una técnica de diagnostico molecular por PCR para

detectar los serotipos circulantes de Streptococcus neumoniae en la población

Guerrerense. Debido a que no se conocen y es de suma importancia para el

diseño de la vacuna.

2.1 Desarrollo

Diseño epidemiológico: se realizara un estudio transversal retrospectivo.

Tamaño de la muestra: se buscaran 500 infantes menores de 5 años que

cumplan con los criterios de inclusión.

Lugar donde se realizara el estudio: En los laboratorios de microbiología y

biomedicina molecular de la unidad académica de ciencias químico biológicas de

la ciudad de Chilpancingo Gro, durante del mes de abril.

A los infantes seleccionados se les tomaran tres muestras independientes (de

exudado faríngeo, nasofaríngeo, oído medio).

Criterios de inclusión:

Niños mayores de dos meses y menores de 5 años

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que presente infecciones en el momento de la toma de muestra y/o

refieran infecciones en su historial clínico.

Cuyos padres que firme la autorización por escrito de la toma de muestra.

Que residan en el estado de guerrero.

Criterios de exclusión:

Niños Menores de dos meses y mayores de 5 años.

Aquellos que presenten infección y que estén bajo a tratamiento

Los que no tengan el consentimiento de los padres a la toma de muestra.

A los que tenga alguna enfermedad aguda.

Que sean foráneos.

Criterios de eliminación:

Muestra insuficiente o mal conservada

Muestras contaminadas.

Muestras no etiquetadas.

Variable dependiente.

Presencia o ausencia del streptococcus pneumoniae.

Variables independientes

La edad

Las infecciones recurrentes.

La alimentación.

Inmunosupresión

Automedicación

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2.2 Consideraciones éticas y de seguridad.

Para el desarrollo de esta estrategia debemos de contar con el consentimiento

informado de los padres o tutores de los infantes en estudio. De no autorizarlo no

podrán tomar las muestras.

La muestra se tomaran de acuerdo a la NOM-017-STPS-1993 relativa al equipo

de protección personal para los trabajadores en el laboratorio que deben de

considerar al momento de tomar las muestras es el uso de bata, guantes y cubre

bocas.

Los residuos peligrosos biológicos infecciosos (RPBI) que se utilizaran en el

estudio, se desecharan de acuerdo a la NOM-087-ECOL-SSA1-2002, en bolsas

de polietileno de color rojo.

2.3 Técnica molecular para la identificación de serotipos.

Después de haber realizado el aislamiento del microorganismo y haber confirmado

la presencia del Streptococcus pneumoniae por técnicas microbiológicas como

agente causal, se procederá a realizar la tipificación del serotipo presente en la

muestra aislada.

Por lo tanto se implementara una técnica de diagnostico molecular por PCR-

multiplex para detectar los serotipos 11A, 15A, 19F Y 23 F que se han reportado

como los más frecuentes en otros estudios realizados en México. Solorzano Santos, F. et

al. (2005). Serotipos prevalentes de Streptococcus pneumoniae colonizadores de nasofaringe, en niños del distrito federal.

Salud pública de México. Vol. 47. P. 276.

En primer lugar se procederá al diseño de sondas y primers para la detección del gen blanco que se desea amplificar para su análisis. Hay que tomar en cuenta que se debe conocer la secuencia y las características fenotípicas y bioquímicas del Streptococcus pneumoniae. Los primers serán diseñados con base en la secuencia de los genes de la autolisina y pneumolisina, los cuales son factores de virulencia capsulares del Streptococcus pneumoniae, e identifican a cada uno de los serotipos. Los primers que se usaran fueron diseñados específicamente para los serotipos 11A, 15A, 19F y 23F por investigadores del Departament of Pediatrics, Seul National University Children´s Hospital Seul¨,c Ki. Wook Yun, ki. et al.

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(2011, march).Streptococcus pneumonioae. Type determination by multiplex Polymerase chain reaction. J Korean med sci. vol. 26. P. 971-978.

Una vez que se cuente con los oligos se extraerá el ADN. De una colonia confirmada de Streptococcus pneumoniae se realizara una suspensión para proceder a extraer el ADN por la técnica fenol cloroformo. Brito, D. A., Ramirez M. and de

lencastre H. (2003, june). Serotyping streptococcus pneumoniae by multiplex PCR. Journal clinical microbiology. Vol. 41. P. 2379-2383.

Para la realización de la PCR multiplex se hará la siguiente mezcla de reacción:

ADN 1 ugPrimers 3 µl11 A-f 3 µl11 A-r 3 µl15 A-f 3 µl15 A-r 3 µl19 F-t 3 µl19 F-r 3 µl23 F-f 3 µl23 F-r 3 µl

Taq polimerasa, 1.2 µldNTP´s 5 µlMgCl2 3 µlH2O

Buffer para PCR 10X 10 µl10µl

Volumen total 52.2µl

Reactivos utilizados para la realización de la PCR-multiplex.

La PCR multiplex a diferencia de la PCR convencional nos permitirá identificar varios serotipos a la vez en la muestra y poder identificar en un solo gel hasta 10 productos de PCR diferentes, en nuestro caso pretendemos identificar solo 4 (11A,23F,19FY 15A .Este resultado nos permitirán tipificar al Streptococcus pneumoniae. Se usara como control positivo una cepa de referencia de Streptococcus pneumoniae CVCM 650. Y los controles negativo correspondiente.

Es de suma importancia el diseño de los primers, así como la exactitud en cuanto al tamaño (bp) ya que de no ser así se podría tener una tipificación errónea o tener una amplificación de bandas inespecíficas.

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A continuación la tabla 1. Muestra la secuencia de los primers y algunas de sus características.

Primers Secuencia (5´-3´) (3´-5´) Gen Serotipo Tamaño de producto (bp)

11A-f11A-r

GGA CAT GTT CAG GTG ATT TCC CAA TAT AGT G GAT TAT GAG TGT AAT TTA TTC CAA CTT CTC CC

wzy 11A 463

15A-f15A-r

ATT AGT ACA GCT GCT GGA ATA TCT CTT C GAT CTA GTG AAC GTA CTA TTC CAA AC

wzy 15A 434

19F-f19F-r

GTT AAG ATT GCT GAT CGA TTA ATT GAT ATC C GTA ATA TGT CTT TAG GGC GTT TAT GGC GAT AG

wzy 19F 304

23F-f23F-r

GTA ACA GTT GCT GTA GAG GGA ATT GGC TTT TC CAC AAC ACC TAA CAC TCG ATG GCT ATA TGA TTC

wzy 23F 384

En esta tabla se especifican los primers que se utilizarán para la realización de la

PCR multiplex en específico para cada gen, serotipo y tamaño de producto.

En la figura se muestras las temperaturas con las que se pretende amplificar los diferentes serotipos de Streptococcus pneumoniae.

Figura 1. Programa de ciclaje para la amplificación de la PCR.

representa el proceso de la PCR, de acuerdo a los tres pasos que esta recurre, los cuales son: Desnaturalización, Alineamiento y Extensión. En

12

94 °C

10 min.

4 °C72 °C72 °C57 °C

94 °C 90”

30”10 min.∞60”

base a su recorrido y temperatura que estabiliza cada uno de los procesos. Y muestra el paso final del ciclo permitiendo finalizar el ciclo y/o su almacenamiento.

Todas las reacciones se realizarán por duplicado, en un termociclador para PCR

punto final Eppendor.22331.

El producto de la reacción de PCR se correrá por electroforesis en gel de agarosa

al 2%.

A continuación figura 2.Muestra un ejemplo de lo que se espera obtener al

amplificar y comprobar la presencia de distintos serotipos en comparación con la

cepa control.

Figura 2. Se muestran los productos de la amplificación por PCR de S. pneumoniae. En el carril 1 se muestra una banda de 463 pb que corresponde al serotipo 11A. En el carril 2 muestra una banda de 434 pb que corresponde al serotipo 15A. En el carril 3 muestra una banda de 304 pb que corresponde al serotipo 19F. En el carril 4 muestra una banda de 389 pb que corresponde al serotipo 23F.

13

A11 15A 19F 23F

pb.

910780650

520

390

260

130

PCR1

1 2 3 4 5

14

Niños menores de 5

Niños enfermos Autorización de los padres

Historial clínico Residen en

Exudado faríngeo.

Exudado nasofarínge

Exudado de oído medio.

Pruebas microbiológicas

Extracción de ADN

Técnica Fenol cloroformo

Investigar secuencia del S. pneumoniae y de los serotipos

requeridos.

Extensión (74-76 °C)

PCR multiplex

Diseño de oligos y zondas para cada serotipos

Colonias aisladas de streptococcus pneumoniae

2.4 Alcance de la estrategia planteada.

Establecer un registro de los infantes en el estado los cuales presentan el

factor de riesgo más importante para desarrollar meningitis por

Streptocococcus pneumoniae.

complementar el diagnostico microbiológico por medio de un diagnostico

molecular.

.sugerir el diseño de una vacuna dirigida contra los serotipos de mayor

frecuencia.

2.5 Metas

Obtener 500 muestras (de exudado faríngeo, exudado nasofaríngeo y de

oído medio).

Aislar a Streptococcus pneumoniae por un pruebas microbiológicas a partir

de alguna de las muestras.

Identificar los serotipos (11A, 15A, 23F, 19F) y establecer su frecuencia en

la población estudiada más frecuentes causantes de la meningitis

bacteriana por técnica molecular de PCR multiplex.

Sugerir desarrollo una vacuna que cubra los serotipos encontrados más

frecuentes en la población Guerrerense.

3. Conclusiones:

Es de suma importancia conocer la frecuencia de los serotipos de acuerdo de que la vacuna no cubre todos.

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Desnaturalización (94-96 °C)

Alineamiento (50-60 °C)

Es necesario realizar un diagnostico integral que sea complementario al diagnostico microbiológico como lo es la PCR multiplex.

Complementar o implementar técnicas moleculares para el diagnostico de prevalencia de Streptococcus pneumoniae en niños menores de 5 años del estado de Guerrero.

En base a la frecuencia de los serotipos encontrados en Guerrero sugerir el diseño de una vacuna local y en base a esto disminuir los casos de infecciones en las vías respiratorias por Streptococcus pneumoniae.

4. Glosario.

Irritabilidad: Se considera como una capacidad homeostática de los seres vivos para responder ante los estímulos que dañan su bienestar o su estado natural.

Liquido intersticial: El líquido intersticial o líquido tisular es el líquido contenido en el intersticio o espacio entre las células. Alrededor de una sexta parte de los tejidos corporales corresponden. 

Meninges: son unas estructuras que a modo de sabanas o envoltorios cubren la parte noble del cerebro. De esta forma, evitan que los gérmenes o cualquier proceso traumático afecten directamente al cerebro.

Morbilidad: conjunto de complicaciones derivadas de un procedimiento medico. Pueden ser efectos secundarios o complicaciones de procedimientos técnicos (diagnostico o terapéutico)

Neumonía: la neumonía es un término general que hace referencia a una infección de los pulmones, que puede ser provocado por diversos microorganismos, entre los que se incluyen virus, bacterias, hongos y parásitos

Otitis media: inflamación del oído medio, esta inflamación suele ser resultado de una infección proveniente de la garganta, ya que esta se comunica con el oído a través de la trompa de Eustaquio.

Punción lumbral: La punción lumbar (PL) es una técnica invasiva realizada por personal médico, cuyo fin es obtener líquido cefalorraquídeo (LCR).

Septicemia: es una infección grave y potencialmente mortal que empeora en forma muy rápida y que puede surgir de infecciones en todo el cuerpo, entre ellas infecciones en los pulmones, el abdomen y las vías urinarias

Sinusitis: la sinusitis es el término que se utiliza para designar la inflamación (irritación e hinchazón) de los senos nasales. Suele estar provocada por una infección.

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Ventrículos: están compuestos por varias partes: los ventrículos laterales, el tercer ventrículo y el cuarto ventrículo. El líquido cefalorraquídeo se encuentra en el interior de este sistema. Su misión principal es servir de fluido amortiguador de los posibles traumatismos que pueda sufrir el sistema nervioso central y la medula espinal, así como también nutrir a ciertas células nerviosas y eliminar los desechos metabólicos de alguna de ellas.

5. Referencias

1. -2. Silverthorn, D. E. et al (2009). Fisiología humana. Madrid – España. Panamericana. P.296.3. Baquero-Artigao, F.et al (2007). Meningitis bacteriana. Madrid-

España.asociacion española de pediatría.p 46.4. OPS, (2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis bacterianas en

en menores de 5 años. http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.5. Gomez J.F. y Gomez L. F. et al (2008).Pautas de tratamiento en

pediatría. Colombia. Editorial universidad de Antioquina. P. 73.6. Valeria Preado, J. (2001).conceptos microbiológicos de streptococcus

pneumoniae. Revista chilena de infectiologia.18.1 – 2.7. Torres Moreno, L.M. et al. (2002). Tratado de cuidados críticos y

emergencia. España. Aran ediciones, S.L. p.2057 – 2058. 8. Koneman, E. y Stephen E. (2008). Diagnostico microbiologico. Madrid

españa. Panamericana. P. 22 – 23.9. – 17. OPS, (2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis

bacterianas en en menores de 5 años. http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

18. Barriga Angulo, G.et al. (2009). Características clínicas y epidemiologia de 3,183 casos de meningitis confirmados bacteriológicamente (1980/2007).29 (3). P. 2-3.

19.OPS, (2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis bacterianas en

en menores de 5 años. http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

20. OPS, (2009). Vigilancia de las neumonías y meningitis bacterianas en en menores de 5 años. http://www.paho.org/search/DbSReturn.asp.

21.Solorzano Santos, F. et al. (2005). Serotipos prevalentes de Streptococcus pneumoniae colonizadores de nasofaringe, en niños del distrito federal. Salud pública de México. Vol. 47. P. 276.

22.Duval, U. R. (Ed.). et al. (2004). Manual de prácticas de bacteriología medica. (350 vols.). México. Academia de bacteriología medica. P.260.

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23.Secretaria de salud. (2011). Perfil epidemiológico de la infancia en México 2010. Junio del 2011, http://www.cenavece.salud.gob.mx/.

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