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Laboratorios de Sanidad Animal y Química 1
Estación Experimental Agropecuaria Mercedes. Centro Regional Corrientes. Grupo Sanidad Animal Méd. Vet. Sergio Gastón Caspe
DESCRIPCIÓN DEL GRUPO DE SANIDAD ANIMAL
El Grupo de Sanidad Animal de la E.E.A. Mercedes es uno de los 11 grupos
regionales de Sanidad Animal del INTA y uno de los dos laboratorios nacionales
que producen hemovacuna para la prevención de la tristeza bovina. Nuestra
estación experimental cumple un rol protagónico en el diagnóstico, control y
prevención las enfermedades transmisibles en la provincia de Corrientes como
parte de la red de laboratorios diagnósticos del INTA, fomentando a su vez el
desarrollo y creación de laboratorios privados en la región través de cursos de
capacitación y especialización.
Esta experimental tiene una función importante en la caracterización y
control de las enfermedades regionales, destacándose la capacitación de
veterinarios de la actividad privada en post de eficientizar los sistemas productivos
zonales. Dentro de las enfermedades de relevancia regional se encuentran el
botulismo (Mal del Aguapey), Babesiosis y Anaplasmosis bovina (tristeza bovina),
parasitosis gastrointestinal en bovinos y ovinos, abortos y muertes perinatales.
El grupo de sanidad animal consta de 5 secciones: microbiología y
serología, patología, parasitología, enfermedades venéreas y hemoparásitos.
Muchas de las patologías, sobre todo virales, pueden estar fuera de nuestro
campo de acción, por tal motivo, al momento de llegar a un diagnóstico utilizamos
los servicios de otros laboratorios.
Estación Experimental Agropecuaria Mercedes, Corrientes
C. de C. Nº 38 (3470) Tel. 03773 421115/420392 www.inta.gov.ar/mercedes
§ Ediciones Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria
TOMA Y REMISIÓN DE MUESTRAS Laboratorios de Sanidad Animal y Química
Laboratorios de Sanidad Animal y Química 2
INDICE
Necropsia 3
Muestreo para laboratorio de hispatología 6
Muestreo para laboratorio de bacteriología 7
Enfermedades que requieren consideraciones especiales 11
Diagnóstico de aborto bovino 16
Muestreo para laboratorio de hemoparásitos 18
Muestreo para laboratorio de parasitología 20
Muestreo para laboratorio de Química 23
Muestreo de Sangre Entera 24
Muestra para suero 25
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NECROPSIA
Condiciones Generales:
La necropsia es una herramienta de gran importancia diagnóstica que facilita el control de muchas enfermedades. Pero esta técnica debe ser realizada con habilidad, prolijidad, capacidad de observación comparativa, unida a una inteligente interpretación de los hallazgos post mortem, y el sentido común que le permita llegar a la máxima eficiencia diagnóstica. Para realizar diagnósticos, a partir de una necropsia, se requiere un conocimiento general y particular de las posibles patologías y los órganos o sistemas que puedan ser afectados por la misma. Evidentemente este procedimiento requiere el conocimiento de la normalidad de los órganos y la identificación de los cambios post mortem que eventualmente se produzcan. El hecho de contar con un protocolo le permitirá al veterinario realizar una necropsia completa, prolija, ordenada, rápida y sistemática.
Siempre hay que tener en cuenta que muchas de las enfermedades que afectan a los bovinos pueden ser zoonosis, por lo que el manipuleo del material debe hacerse con mucho cuidado tratando de extremar las medidas para preservar la propia salud o la de quienes los rodean. La posibilidad de adquirir una zoonosis nunca debe ser subestimada.
El porcentaje de casos con diagnósticos certeros es mucho mayor cuando se envían al laboratorio los animales vivos con síntomas o recientemente muertos, mientras que dicho porcentaje es mucho menor cuando se envían solamente las muestras de órganos al laboratorio. La elección equivocada de la muestra, las malas condiciones de envío y conservación, y el tiempo transcurrido entre la muerte y el procesado del material mayor ayudan a que las condiciones para aun correcto diagnóstico ya no sean las óptimas. Bajo nuestras condiciones climáticas donde las temperaturas suelen ser extremadamente altas, las muestras suelen sufrir el efecto de la putrefacción en un tiempo relativamente corto si no están dadas las condiciones para su conservación. A pesar de que pueda sonar reiterativo, como muchas de las patologías que se encuentran en estos animales pueden ser zoonosis, es conveniente que el material sea colocado en recipientes adecuados que impidan el goteo o escurrimiento de fluido, en especial cuando el material que se manipulea son fetos.
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Antes de comenzar una necropsia es indispensable:
1. Estar equipado con la vestimenta adecuada.
2. Disponer del material adecuado como cuchillos, costótomo, sierra o
serrucho, hacha, chaira, piedra de afilar, material y recipientes de
remisión de muestras como bisturí, pinzas, tijeras, etc. Tratar de que
los instrumentales se mantengan con buen filo y libres de óxido o
restos de material.
3. Al realizar la necropsia hay que mantener siempre en mente un
protocolo el cual le permita al veterinario proceder ordenadamente
examinando los diferentes órganos y tejidos sistemáticamente.
4. No producir alteraciones en los tejidos por realizar cortes
inadecuados sin una previa y detenida observación.
5. No lavar tejidos u órganos antes de observarlos detenidamente.
6. No descartar órganos o tejidos sin una completa revisión de los
mismos.
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Antecedentes del caso
Como regla general nunca debe comenzarse una necropsia hasta tanto no se haya estudiado los antecedentes del caso. Se debe anotar la mayor cantidad de datos del animal a necropsiar tales como: especies, raza sexo, edad, estado general y/o peso. Además cada caso debería acompañarse de los siguientes datos anamnésico:
Datos esenciales que deben acompañar a las muestras
• Nombre, dirección y teléfono tanto del propietario como del
veterinario actuante.
• Ubicación y superficie del establecimiento.
• Nº° RENSPA Y CUIT.
• Tipo de campo (monte, flechillar, pasturas implantadas, etc.) y
proporción aproximada de cada uno.
• Nº° de animales en total y categorías.
• Nº° de animales en el lote.
• Carga Animal y disponibilidad de forraje.
• Tipo de alimentación y si se le da suplemento de qué tipo y en
qué cantidad.
• Plan sanitario del establecimiento.
• Época de servicio, % Preñez (Principalmente para fetos).
• % Parición.
• Detalles del problema que motiva la consulta.
• Descripción de signos Clínicos.
• Tiempo transcurrido entre el comienzo de los signos y la muerte.
• Tiempo transcurrido desde la primera muerte.
• Morbilidad/Mortalidad.
• Tratamiento, si lo hubiera y respuesta al mismo.
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MUESTREO PARA LABORATORIO DE HISTOPATOLOGÍA
Extracción y conservación de muestras:
Para realizar un análisis histopatológico deben tomarse secciones de los
órganos de no más de 1,5 cm de ancho x 2 cm de alto x 4 cm largo, tratando de
incluir en el corte una porción de tejido sano y una patológica. Los cortes se
colocan en formol al 10% bufferado, (dilución 1:10 formolagua utilizando formol
comercial al 40%), tratando que la relación entre el formol y la muestra sea de
10:1. En la medida de lo posible hay que tratar de evitar el manipuleo excesivo de
las muestras para no producir alteraciones histológicas que dificulten el
diagnóstico, especialmente, cuando se trata de sistema nervioso. Lo recipientes
deben ser, de preferencia con tapa a rosca y limpios, aunque no es necesario que
sean estériles.
Cuando el muestreo se quiere realizar por lesiones que afectan el sistema
reproductor, hay que tener en cuenta que para fijar testículos y ovarios se deben
utilizar solución Bouin´s (solución acuosa saturada de ácido pícrico, formaldehído
y ácido acético), debido a que el formol al 10% altera morfológicamente la
histología de los testículos y ovarios.
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MUESTREO PARA LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA
Extracción y conservación de muestras
Se considera esencial que las muestras estén acompañadas de los datos
anamnésicos del caso, Datos clínicos, anatomopatológicos y epidemiológicos
(número de animales enfermos, número total de animales en el lote, etc.),
mencionando si hubo tratamientos y vacunaciones.
Cabe destacar que la mejor muestra proviene de la necropsia de un animal
vivo enfermo. Debe recordarse que en el momento de la muerte, y durante los
periodos agónicos, ocurre una invasión de bacterias intestinales a los tejidos. El
diagnóstico bacteriológico puede verse dificultado en éstos casos, debido a que
algunas de esas bacterias son patógenos potenciales y su crecimiento en la
mayoría de los medios de cultivo de rutina es prominente y rápido, provocando
competencia a los otros patógenos y en algunos casos impidiendo su crecimiento.
Envases e Instrumental Las muestras para asilamiento bacteriológico deben ser colocadas en
recipientes estériles de buen cierre. Esto se puede lograr con recipiente de vidrio
de boca ancha con tapa a rosca, limpios y enjuagados con agua destilada,
secados en estufa y estériles. La esterilización de los mismos se puede realizar en
autoclave a 121°C durante 20 minutos o en horno seco a 160°C180°C durante
dos horas. Los envases de uso culinario como frascos de dulces, mayonesa, etc.,
provistos de tapa a rosca pueden adaptarse perfectamente, utilizando una olla a
presión en reemplazo del autoclave. El material de vidrio envuelto en papel y
esterilizado en el horno de cocina, estará estéril cuando el papel tome un color
caramelo. Este material puede ser guardado durante largos periodos en un lugar
seco y limpio. En el comercio existen recipientes colectores de plástico
descartables estériles, prácticos y de precio accesible.
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El instrumental (pinzas, tijeras, bisturí) que se utilizan para la extracción
deben estar limpios, secos y bien afilados. Previo a su uso, deben ser sumergidos
en alcohol y flameados para asegurar la asepsia. No deben utilizarse
desinfectantes químicos (espadol, yodo etc.) para evitar afectar a los posibles
patógenos. En muestreos a campo se tratarán de mantener las mayores
condiciones de asepsia. Se puede utilizar una garrafa chica con un mechero para
flamear y utilizar bolsas de nylon que vienen en rollos, debido que por el
procesamiento que reciben durante su elaboración se consideran estériles.
MUESTREO: Extracción y Remisión
1. Los líquidos o contenidos de cavidades se colectan con jeringa
y agujas estériles, debiendo preferentemente ser trasvasados a
tubos o frascos estériles.
2. Las secreciones deben extraerse con hisopos de algodón
estériles que se sumergirán posteriormente en medios de
transporte o en solución fisiológica estéril, para concederle a los
gérmenes las condiciones mínimas que les permitan soportar el
transporte y llegar viables al laboratorio.
3. Los órganos deben ser muestreados tomando secciones de
5x5x5 cm, que se extraerán al abrigo de la llama y cuidando las
mejores condiciones ambientales de asepsia. Para elegir la
sección a extraer se examinarán externamente los órganos y se
extraerán trozos que abarquen una parte normal y una con
lesiones, flameando levemente la parte externa. El intestino
siempre debe ser envasado por separado y con sus extremos
ligados, manteniendo su contenido intacto. Las muestras de
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cerebro deben ser enviadas una parte refrigerada y una
congelada, debido a que algunos de los patógenos que afectan el
sistema nervioso no soportan la congelación. Los órganos de
elección para aislamiento bacteriológico son bazo, pulmón,
hígado, riñón y hueso largo (previamente descarnado), enviando
cada muestra en un recipiente separado e identificado.
4. Sueros. El material que se utiliza para el muestreo debe estar
limpio y seco. Los restos de humedad y partículas de suciedad
provocan hemólisis, lo que impide que el material remitido pueda
ser procesado. Todos los tubos deben estar perfectamente
rotulados con números y letras claras y legibles. Las muestras de
sangre sin anticoagulante deben ser extraídas en tubos de 1015
cc llenando no más del 60% del tubo, obteniendo la sangre por
punción venosa yugular o coccígea de animales identificados.
Éstas muestras de sangre entera se pueden conservar
refrigeradas 1448 horas una vez que se haya producido la
coagulación. En estas condiciones no puede ser congelado, ya
que se produciría hemólisis. Para congelarlos debe esperarse
que se forme el coagulo, y una vez que se separan coagulo y
suero se extrae el suero ya sea con pipeta o centrifugado,
colocando el suero en un tubo de vidrio con tapón seco, pudiendo
de esta manera congelarlo y mantenerlo en ese estado por
periodos prolongados.
5. Conservación y Remisión del Material. Los recipientes
correctamente identificados deben colocarse en conservadoras
de telgopor acondicionados con papel para evitar el movimiento y
con un número adecuado de conservantes. En el caso de que las
distancias sean demasiado largas o si los periodos de
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conservación deban ser prolongados se recomienda sumergir los
trozos de órganos en glicerina bufferada pH 7 al 30 ó 50% estéril
e igualmente enviarlos refrigerados. Cuando nos referimos a
material refrigerado, la temperatura debe oscilar entre 4° y 8° C.
Esto se logra utilizando conservadoras de telgopor y refrigerantes
en abundancia.
6. Consideraciones Generales.
• No enviar muestras los viernes de tarde, los fines
de semana o vísperas de feriados. Para enviar una
muestra deberá consultar telefónicamente y
consensuar si es posible recibir la muestra y que tipo
de muestra enviar para evitar pérdidas de material.
• Tener especial cuidado en el acondicionamiento
de muestras por los riesgos que implica manipular
material infeccioso por personal no capacitado.
• Las muestras deberán ser trasportadas por un
profesional que pueda comentar sus hallazgos clínicos
o sospechas siempre que sea posible. Si la distancia
para el traslado es muy grande se debe enviar el
material en un recipiente bien cerrado, con
conservantes y remitir los materiales bien identificados
y con los antecedentes del caso, enviándola por un
transporte previo aviso al laboratorio.
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ENFERMEDADES QUE REQUIEREN CONSIDERACIONES ESPECIALES
CARBUNCLO BACTERIDIANO
Las muestras de elección son las siguientes:
1. Huesos largos, sin piel, tendones ni músculos envueltos en papel y
colocados dentro de una envoltura segura de polietileno.
2. Hisopos embebidos en sangre exudada o extraídas con aguja de la vena
yugular e un animal enfermo o recientemente muerto.
3. Frotis de sangre secados al viento y envueltos en papel.
4. Bazo: haciendo una pequeña ventana entre las últimas dos costillas.
Consideraciones de importancia:
No se debe realizar una necropsia de los animales muertos con sospecha
de carbunclo bacteridiano. Si esta se hubiera realizado, se debería extraer en
bovinos trozos de bazo, en equino linfonódulos hemorrágicos e hisopado de
exudados y en cerdo, linfonódulos retrofaríngeos. Es importante evitar la
predación incinerando los cadáveres lo más rápido posible.
El Bacillus anthracis, agente del carbunclo y del ántrax humano, esporula en presencia de oxigeno, en consecuencia por la dispersión de las esporas,
pueden contaminarse los potreros. Las esporas pueden sobrevivir durante
muchos años en el ambiente, formando los llamados “Campos Malditos”. Al no
realizarse la necropsia las formas vegetativas se destruyen muy fácilmente
durante los procesos de autólisis y descomposición del cadáver.
Si hubiera existido contacto directo con el material sospechoso y
existe riesgo de infección, se debería consultar inmediatamente al médico,
ya que como es una zoonosis de ciclo agudo, por lo que tal vez deba
instaurarse una terapia antibacteriana inmediatamente.
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BOTULISMO O MAL DEL AGUAPEY
Esta enfermedad es una toxiinfección provocada por la toxina del Clostridium botulinum tipo D y ocasionalmente por el tipo C. Como esta enfermedad es producida por una toxina, el diagnóstico se basa en la
identificación de la misma en diferentes tejidos. Las muestras que se deben tomar
en estos casos son: intestino delgado (ligando ambos extremos del tejido para
conservar en contenido), hígado, riñón y cerebro. El material puede congelarse
para su conservación.
En el animal vivo se puede tomar sangre y evaluar niveles de fósforo
(debido a que esta enfermedad esta asociada a una deficiencia de fósforo con
pica), hematocrito y proteínas plasmáticas. Además son importantes los
antecedentes del campo como si se da suplementación mineral, evaluación del
contenido de sales del alimento, categorías afectadas, disponibilidad de forraje y
estado corporal del animal.
ENFERMEDAD DE JOHNE´S O PARATUBERCULOSIS
Para el diagnóstico de ésta enfermedad se deberá remitir la válvula
ileocecal o trozos de intestino de 5 cm de, libre de contenido que presenten lesión
macroscópica, junto a los ganglios mesentéricos que drenen esa zona y los
ileocecales, pudiendo conservar la muestra refrigerada o congelada. En caso de
realizarse biopsias rectales, las muestras deberán ser tomadas de la parte más
anterior posible. A partir de esa biopsia puede realizarse un extendido sobre un
portaobjetos secado al aire y deben ser envueltas posteriormente en papel.
TUBERCULOSIS
Está es una enfermedad crónica de tipo granulomatosa, por lo que se
encontrarán abscesos de distinto tamaño según el curso que haya tomado la
enfermedad. Para el muestreo de la misma se deben tomar secciones de los
órganos afectados y los linfonodos que drenan dicha zona enviándolos
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refrigerados. También conviene enviar una porción de esos órganos en formol al
10 % para realizar cortes y coloraciones especiales para micobacterias como ser
la tinción de Zielh Neelssen.
LETOSPIROSIS
Para definir las muestras que se va a obtener se deberá analizar el tipo de
presentación ante la cual nos encontremos.
En el caso de terneros la enfermedad se presenta con mortandad, fiebre,
anorexia, anemia, hemoglobinuria e ictericia. En estos casos se puede obtener
humor acuoso, sangre, líquido cefalorraquídeo, hígado, riñón, pulmón, bazo y
orina.
En adultos, donde el aborto es la principal característica, y en vacas de
tambo suele provocar mastitis. El aborto suele producirse en el último tercio de la
gestación y el feto se presenta autolítico en el momento del aborto. En estos casos
las muestras de elección son fetos, sangre de la madre (2 extracciones seriadas
cada 1520 días), orina (para esta muestra es recomendable utilizar diuréticos
como furasemida), leche por punción de la cisterna de la leche en caso de
mastitis. Estas muestras deben ser enviadas en recipientes estériles y refrigeradas
y llegar al laboratorio dentro de las seis horas de extraído. Los fetos deben ser
enviados en conservadoras de telgopor con abundantes refrigerantes. Deben
extremarse las medidas higiénicosanitarias debido a que esta enfermedad es una
zoonosis grave que puede ser mortal. Por lo tanto el recipiente en el que se envía
debe estar bien sellado para impedir goteos o escurrimientos de fluidos que
puedan ser posibles fuentes de infección. Además ésta bacteria tiene la capacidad
de penetrar la piel intacta, por lo que debe evitarse el contacto.
RABIA
Cuando un animal muere con la sospecha de Rabia se lo debe decapitar lo
antes posible para evitar que el cerebro se descomponga, colocándolo en doble
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bolsa, debiéndose conservar de inmediato la muestra en frío para su pronto
traslado y posterior investigación en el laboratorio. Se trata de una enfermedad
zoonótica en la que deben extremarse las medidas higiénico sanitarias, tratando
de minimizar el contacto con el material infectado. Ésta enfermedad también es
transmitida por saliva, por lo tanto, hay que tratar de evitar las prácticas en la
región bucal para evitar mordeduras.
BRUCELOSIS
Generalmente esta enfermedad en bovinos se presenta con abortos,
manifestándose en vaquillonas como tormenta de abortos. Los fetos suelen ser
frescos al momento del aborto. Como se considera que es un problema de rodeo
debería realizarse un muestreo al total de los animales o en su defecto a no
menos del 10% incluyendo entre estos a los animales abortados que deben estar
perfectamente identificados. Además se puede extraer secreción de los cuartos
mamarios de las vacas abortadas. El feto debe ser refrigerado y enviado en una
conservadora de telgopor, ya que como la anterior, es una zoonosis y hay evitar
el contacto. Además ésta enfermedad es crónica y los tratamientos en humanos
son largos y tediosos.
En toros se puede recolectar fluido seminal mediante el masajeo transrectal
de las vesículas seminales, enviando ese material refrigerado tanto para
aislamiento como para realizar pruebas serológicas, debido a que cualquier título
en plasma seminal es indicativo de infección. Debe evitarse en lo posible el
congelado de las muestras.
CAMPYLOBACTERIOSIS
La campylobacteriosis bovina generalmente se presenta con muerte
embrionaria, por lo que el único signo de la enfermedad lo tendremos al momento
del tacto en forma de bajos índices de preñez. Ocasionalmente pueden producir
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abortos. En estos últimos casos, se puede mandar el feto refrigerado en una
conservadora de telgopor bien sellado. En caso de no poder mandar el feto se
puede obtener liquido de abomaso y colocarlo en el medio de transporte Cary
Blair, lo que asegurará la sobrevida del microorganismo en una 2448 hs. A la
hembra abortada se le puede extraer mucus cervicovaginal con una pipeta de
Cassou (vaina Azul) y colocar la muestra en CaryBlair, enviando la muestra
refrigerada.
Las muestras de esmegma prepucial cuando son para cultivo deberán ser
extraídas con pipeta de Cassou y colocarla en medio de transporte CaryBlair.
Para evitar que la muestra este sucia conviene lavar la cavidad prepucial con
solución fisiológica bufferada (SFB) pH 7,2 y luego extraer la muestra con pipeta
limpia. Para el análisis por inmunofluorescencia directa se puede utilizar un
raspador o una pipeta de Cassou colocando la muestra extraída en SFB formolada
al 1%. Conservar la muestra refrigerada.
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DIAGNÓSTICO DE ABORTO BOVINO Generalidades para todas las patologías
1 Antecedentes del caso:
Junto a las muestras que se envíen se deberían incluir los siguientes datos:
• Nº° de animales afectados.
• Edad de los animales afectados.
• Época de servicio.
• Nº° partos (Si es primeriza o no).
• Estado de gestación al momento del aborto.
• Antecedentes de abortos previos en el rodeo y
en los mismos animales.
• Incorporación de animales al rodeo, cambios
en la alimentación u otros aspectos de manejo.
• Tratamientos recientes con vacunas,
suplementos etc.
2 Muestras a remitir:
Suero. El muestreo se debe hacer: uno al momento del examen y otro 1520 días
después.
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Mucus cérvico vaginal. Se obtienen con una pipeta de Cassou de vientres
recientemente abortados. La muestra debe fraccionarse y remitirse en los
siguientes medios:
Medio Tipo de Aislamiento
Amies Brucella, Haemophilus
Stuart Aerobios, Listeria
Cary Blair Campylobacter Sutherland mod. Tritrichomona
Hank´s Aislamiento Viral
Feto. El feto debe ser enviado a la brevedad, en un recipiente bien cerrado, que
no permita los escurrimientos o el goteo, de preferencia que sean conservadoras
de telgopor, enviándola con abundantes refrigerantes. El material no debe
congelarse.
Nota: el material que se remite debe estar perfectamente identificado y
rotulado.
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MUESTREO PARA LABORATORIO DE HEMOPARÁSITOS
Extracción y Remisión
1 Animales vivos:
a. Los muestreos para diagnóstico de hemoparásitos deben
realizarse a partir de los sitios de irrigación periférica, como
ser punta de cola o punta de oreja. Para la extracción debe
depilarse la zona con una tijera y realizar una pequeña
incisión punzante para producir un leve goteo. Se toma un
porta objetos y se colocan dos gotas de sangre. A una de
ellas se la debe distribuir levemente sobre el porta para
disminuir un poco su grosor mediante movimientos
circulares sobre la gota, formando un círculo de
aproximadamente 1 cm de diámetro y se deja secar a
temperatura ambiente.
b. Con la otra gota se debe realizar un frotis fino, utilizando otro
portaobjetos en ángulo de 45° se toca la gota y se hace
correr a lo largo del porta objetos para provocan una
distribución homogénea y fina sobre el portaobjetos. Los
frotis se deben dejar secar a temperatura ambiente y asi
remitirse envueltos en papel absorbente.
c. Adicionalmente al frotis, debe enviarse sangre entera del
animal con heparina para evaluar el hematocrito, ya que en
estas enfermedades producen anemia.
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2 Animales muertos:
a. Cuando se cuenta con la posibilidad de realizar una
necropsia, las mejores muestras que se pueden tomar son
improntas de órganos. Los órganos que deben ser utilizados
para este muestreo son: hígado, bazo, punta de corazón,
corteza cerebral, riñón y pulmón. Hay que tratar de
muestrear todos estos órganos para poder tener mayor
posibilidad de realizar el diagnóstico. Además, pueden
realizarse frotis de sangre a partir de los pequeños vasos del
extremo distal de los miembros, punta de oreja o punta de
cola.
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MUESTREO PARA LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA
Extracción y Remisión:
Toda muestra que se envíe al laboratorio de parasitología debe remitirse
perfectamente identificada con letra clara y legible. Anexado a esto deben
remitirse los antecedentes del caso como: la categoría, la fecha de la última
desparasitación y que droga se utilizó, y la descripción del estado general de la
hacienda.
ECTOPARÁSITOS:
SARNA: Para el muestreo de sarna deben realizarse raspados de piel que serán
colocados entre dos portaobjetos superpuestos. Esta muestra puede ser enviada a
temperatura ambiente, correctamente rotulada y cubierta con papel.
GARRAPATA: Cuando se desean enviar garrapatas para diagnóstico se deben
enviar al menos 20 teleoginas, desprendidas espontáneamente o por tracción
manual cuidadosa, de vacunos parasitados que no hayan sido bañados. Para
remitir las muestras se aconseja colocarlas en envases plásticos de boca ancha,
colocando en el fondo de los mismos algodón ligeramente humedecido con agua y
cerrado con tapones de algodón o plásticos con perforaciones pequeñas para
permitir la oxigenación.
ENDOPARÁSITOS:
a. Las muestras para la evaluación de parásitos gastrointestinales
deben tomarse en bolsas de nylon, obteniendo la muestra
directamente del recto del animal, estimulando el reflejo anal con los
dedos. Se debe atar el extremo de la bolsa eliminando aire que
pueda quedar en la misma.
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b. Las muestras tienen que ser individuales, y bien rotuladas. No
deben realizarse pooles mezclando materia fecal de varios
animales, ya que los muestreos individuales permiten apreciar si hay
animales con altos huevos por gramo de materia fecal (H.p.g.). En un
pool podrían verse diluidas en el resto.
c. Deben ser refrigeradas, tratando de enviarlas a la brevedad al
laboratorio. En caso de no enviarlas inmediatamente, pueden
permanecer un máximo de 2448 horas si se las mantiene
refrigeradas en heladera, aunque hay que tratar de evitar retrasar el
envío al laboratorio, ya que podrían alterarse los resultados.
d. En bovinos, la cantidad de materia fecal debería rondar entre 80 y
100 gramos por muestra, ya que los huevos no se encuentran
distribuidos homogéneamente en la materia fecal. De esta manera se
permite que en el laboratorio de homogeinice la muestra, obteniendo
una muestra que sea representativa de la misma.
e. Durante un muestreo, los animales deben ser representativos del
lote, que se encuentren pastoreando en el mismo potrero. En general
se considera que un muestreo de 1215 animales es representativo
de un lote.
TRITRICHOMONA
a. Para el diagnóstico de tritricomoniasis (Tritrichomona foetus) se debe remitir esmegma prepucial en medio de Suthenland modificado
obteniéndose el mismo por raspado prepucial.
b. Para la extracción del mismo se puede utilizar raspadores o vainas
de Cassou mediante un movimiento hacia adentro y afuera del
prepucio, repitiendo el movimiento alrededor de 40 veces.
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c. Las muestras deben ser lo más limpias posible, ya que, el
crecimiento de la Tritrichomona es muy lento y en muestras muy sucias se ve dificultado su crecimiento por competencia con otros
microbios de crecimiento más rápido. En éste caso se puede
higienizar la cavidad prepucial utilizando 20 ml de solución fisiológica
y volviendo a muestrear luego.
d. Las muestras no deben ser refrigeradas ya que el parásito es muy
sensible a los cambios de temperatura. Para el transporte se puede
enviar a temperatura ambiente protegido de la incidencia directa de
los rayos solares.
Méd. Vet. Sergio Gastón Caspe Mail: [email protected]
Estación Experimental Agropecuaria Mercedes Centro Regional INTA Corrientes
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MUESTREO PARA LABORATORIO DE QUÍMICA
Debido a que algunas de las enfermedades de importancia clínica de la
zona se relacionan con alteraciones bioquímicas sanguíneas, es primordial
realizar una correcta toma y remisión de muestras. Previo a todo muestreo, deben
comunicarse con el laboratorio para consultar forma de extracción y envío.
Las muestras que se remiten al laboratorio deben ser representativas del
rodeo. Cada muestra debe estar identificada en el tubo de recolección (mediante
etiqueta o marcador permanente). Se recomienda que el número de muestras sea
al menos de 10 y 15 muestras por rodeo. En caso de que los animales estén en
potreros separados, debe tomarse el muestreo de cada grupo por separado.
Junto a cada muestra deben remitirse los antecedentes del caso que deben
incluir los datos del profesional responsable, propietario, establecimiento, animales
(edad, sexo, estado nutricional, raza, alimentación, suplementación), del caso
(número animales del rodeo, número de afectados y número de muertos,
categoría, duración de la enfermedad, signos clínicos y hallazgos de necropsia).
Al momento del muestreo se tratará de tranquilizar a los animales, para lo
cual se seguirán pautas de manejo que contemplen el bienestar animal. Los
animales serán traídos desde los potreros en una marcha tranquila, sin gritos ni
perros. En el corral se evitarán picanas y otros elementos que perturben al animal.
La restricción en el cepo deberá ser suave evitando, de ser posible, el uso de
mocheta para inmovilizar la cabeza del animal.
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MUESTRA DE SANGRE ENTERA
En bovinos la muestra se obtiene por punción yugular utilizando una
aguja de acero inoxidable de calibre 1,8 o 2,0 x 40 mm. La sangre debe fluir con
facilidad y hacerlo sobre las paredes del tubo que deberá estar heparinizado (esto
asegura que no se produzca espuma y consiguiente hemólisis).
En ovinos se utilizaran jeringas que no tengan componentes de goma y
agujas de calibre 1,6 X 40 mm. Se recomienda un tubo de Kahn de 10 ml con 2
gotas de heparina al 1%, donde se colectan 5 a 7 ml de sangre. Una vez obtenida
la muestra se tapa con tapón de goma y se mezcla invirtiendo el tubo 3 o 4 veces.
Posteriormente, los tubos deben ser colocados en una gradilla en posición vertical.
La muestra se coloca inmediatamente en una conservadora con hielo
o preferentemente en agua helada para refrigerar y demorar la transformación de
fósforo orgánico en inorgánico. Esta muestra debe ser remitida en el día al
laboratorio para su análisis, debiéndose coordinar con el mismo la hora de llegada.
Durante el transporte de las muestras se deberá evitar el traqueteo
para lo que se recomienda no colocarlas en la caja de la camioneta, sino sobre el
asiento del vehículo en un recipiente protegidas de la luz.
Laboratorios de Sanidad Animal y Química 25
MUESTRA PARA SUERO
El procedimiento de extracción es similar al utilizado para sangre entera. Se
utilizarán tubos que han sido mantenidos durante 48 horas como mínimo en una
solución de agua bidestilada con el 5 % de ácido clorhídrico, luego enjuagados
con agua bidestilada y secados en estufa (Tubos dormidos en ácido). Este
procedimiento asegura que no haya contaminación de las muestras donde se
determinarán microelementos. Estos elementos pueden ser pedidos al laboratorio
previo al muestreo.
Las muestras no se deben agitar. Se colocaran en una gradilla que asegure
su posición vertical, tratando de que mantengan una posición estable y evitando el
movimiento de los tubos.
No utilizar tapones de goma, ya que contaminan con zinc, para tapar los
tubos se recomienda el uso de Parafilm. La muestra se tratará con especial
cuidado, especialmente hasta que se haya formado el coágulo para evitar
hemólisis. Se mantendrá a temperatura ambiente, nunca deben ponerse en
estufas para acelerar la retracción del coágulo. El suero puede separarse
despegando suavemente el coágulo de las paredes del tubo, evitando romperlo.
Se centrifuga y se coloca el suero en recipientes dormidos en ácido. De esta
manera, las muestras pueden ser refrigeradas o congeladas en caso de no
remitirse inmediatamente al laboratorio.
Dr. Diego Rochinotti Mail: [email protected]
Estación Experimental Agropecuaria Mercedes Centro Regional INTA Corrientes