REACCIÓN INFLAMATORIA

PRÁCTICAS INTERMEDIAS: JESENIA PEREZ BRAVO

INTRODUCCIÓN

Constituyen procesos inflamatorios crónicos con períodos de actividad, que alternan con otros de latencia y con manifestaciones digestivas y extradigestivas muy variadas. Se engloba una amplia gama de trastornos inflamatorios del intestino, unos de etiología conocida (infecciosa, química, física o por sensibilidad inmunológica específica) y otros en los que no se ha logrado evidenciar un factor casual. Se han implicado en su patogenia diversos factores exógenos que interactuarían sobre un organismo con una cierta predisposición genética.

INTRODUCCIÓN

Signos y/o síntomas con carácter recurrente: rectorragia, dolor abdominal, distensión, retortijón, episodios de diarrea, tenesmo o urgencia defecatoria, presencia de lesiones anogenitales y presencia de determinadas manifestaciones extraintestinales.

Entre las manifestaciones sistémicas o extraintestinales cabe destacar: pérdida de peso, retraso del crecimiento en niños, aftas y ulceraciones en boca, lesiones dérmicas (eritema nodoso, pioderma gangrenoso), oculares (epiescleritis o iritis), articulares (artritis seronegativa, sacroileitis o espondilitis anquilopoyética) y hepáticas (colangitis esclerosante primaria).

IMPORTANCIA

Mediante esta prueba, el médico puede tener una información rápida e importante para establecer, junto con la historia clínica, un cierto grado de exactitud acerca del tipo de diarrea que afecta al paciente.

Cabe mencionar que algunas bacterias ocasionan cuadros diarreicos a través de toxinas, razón por la cual no se observan leucocitos en la muestra.

Esta prueba también nos informa de la presencia de otros elementos que proporcionan valiosa información al médico.

HECES

Materia fecal o excremento y/o deposiciones. Son el conjunto de los desperdicios generalmente

sólidos (o, casi siempre por algún padecimiento, a veces también líquidos) que genera todo ser viviente como producto final del proceso de la digestión. Las heces son los restos de los alimentos no absorbidos por el tubo digestivo (como fibras y otros componentes que no son útiles para el ser en cuestión), y también células del epitelio intestinal que se descaman en el proceso de absorción de nutrientes, microorganismos, y otras sustancias que no logran atravesar el epitelio intestinal.

EXAMEN DE LABORATORIO

RECOLECCION DE LA MUESTRA

Un espécimen fecal bebe colectarse en un recipiente con tapón de rosca, limpio (no necesariamente estéril), que no debe estar contaminado con orina. En la etiqueta se debe marcar la hora en que se depositó la muestra y la fecha, así como los datos de identificación del paciente.

Son suficientes cantidades pequeñas de heces, en general 2.5cc de heces formadas o 15-30 cc de heces liquidas.

CONSERVACIÓN DE LA MUESTRAI. Especímenes preservados en formol al 10% 1. Observación en fresco (helmintos y protozoarios) 2. ELISA (Giardia y Cryptosporidium) 3. Tinción cromotrofa (microsporidia)

II. Especímenes preservados con formol y acetato de etilo. 1. Observación en fresco 2. Epifluorescencia (Cyclospora, Isospora) 3. Tincion Acido-alcohol resistente (coccidios intestinales) 4. Inmunofluorescencia (Giardia y Cryptosporidium) 5. Tinción con Safranina (Cyclospora)

III. Especímenes fijados con alcohol polivinilo de baja viscosidad (LV PVA) es el fijador superior para la elaboración de preparaciones fijas teñidas de quistes y trofozoitos de protozoarios.

TRANSPORTE DE LA MUESTRA Colocar la muestra elegida en un envase apropiado,

rotulado correctamente y en un recipiente secundario (podría ser de plástico u otro material resistente a roturas)

Enviar la muestra al laboratorio lo antes posible; en caso fuera fresca, dentro de las 2 a 4 horas de obtenida.

Si el envío de la muestra va a demorar más de un día en llegar al laboratorio, debe guardarse en un fijador conservador, aplicando las medidas de bioseguridad correspondientes.

Cerrar herméticamente. Indicar la posición. Datos del paciente. Escribir: Frágil, Material Biológico. Señalar la T° a mantener. Fecha.

USUARIO / PACIENTE

Orden de Laboratorio. Verificar su seguro y/o boleta de pago. Verificar la muestra. Poner su respectivo rotulado.

MATERIALES, REACTIVOS, INSTRUMENTOS Y EQUIPOS

Muestra. Guantes. Bajalenguas. Láminas portaobjetos. Láminas cubreobjetos. Gradilla. Pipetas Suero Fisiológico y Lugol. Azul de metileno. Wrigt, etc. Reactivo Benedict. Reactivo Thevenon. pHmetro. Microscopio.

ASPECTO MACROSCÓPICO

CONSISTENCIA

Normalmente es pastosa-dura. En las diarreas la consistencia es líquida, en

cantidad abundante cuando se deben a patología del intestino delgado y escasas y mucosas si proceden del intestino grueso.

Las deposiciones semiblandas indican un tránsito rápido por el intestino delgado o son propias de las afecciones pancreáticas o biliares.

En el estreñimiento son duras, en forma de grandes bolos en la atonía, y acintadas en las obstrucciones mecánicas.

Las deposiciones caprinas son propias de los estados espásticos acentuados.

Mucosas, mucosas sanguinolentas, pastosas, formes, duras, caprinas, grumosas.

CONSISTENCIA• Tipo 1: Trozos duros separados, como

nueces, que pasan con dificultad.• Tipo 2: Como una salchicha

compuesta de fragmentos.• Tipo 3: Con forma de morcilla con

grietas en la superficie.• Tipo 4: Como una salchicha; o

serpiente, lisa y suave.• Tipo 5: Trozos de masa pastosa con

bordes definidos, que son defecados fácilmente.

• Tipo 6: Fragmentos blandos y esponjosos con bordes irregulares y consistencia pastosa.

• Tipo 7: Acuosa, sin pedazos sólidos, totalmente líquida.

Los tipos 1 y 2 indican estreñimiento; los 3 y 4 son heces ideales, especialmente el 4, ya que son los más fáciles de defecar; los tipos 5, 6 y 7 tienden hacia diarrea o cólera.

ASPECTO

Las heces pueden presentar consistencia homogénea o heterogénea. Esta peculiaridad debe indicarse en el informe final, pues puede ser la justificación de un falso resultado negativo. En efecto, unas heces líquidas, susceptibles de contener trofozoítos de protozoos, pero remitidas al laboratorio en condiciones inadecuadas serán la causa, casi segura, del resultado negativo.

ASPECTO

HOMOGÉNEA: Los componentes de la cual no pueden ser distinguidos ni por el ojo humano ni por un microscopio convencional. En cuanto a sus características, sus partículas están colocadas de forma uniforme y su composición se mantiene constante en cualquiera de sus partes.

HETEROGÉNEA: Los componentes de la cual sí que pueden ser distinguidos tanto por el ojo humano como por un microscopio poco potente, la distribución de sus partículas no es uniforme y por lo tanto la composición en todos sus puntos no es la misma.

COLORLas heces son de color pardo de diferente intensidad, este color se debe a la presencia de urobilina y urobilinogeno, formados por las bacterias, como resultado de la reducción de la bilirrubina varia de acuerdo a la ingestión de alimentos y medicamentos. Grasas de color claro pueden indicar una alteración

pancreática. Blanco: Debido a la ingesta (leche, bario, caolín...) o a la

ausencia de bilis fundamentalmente. Negro un exceso de bilis. Presencia de sangre coagulada

presente en el aparato digestivo (Pastosas - melenas). Por medicamentos (carbón, hierro, bismuto).

Amarillento indican que el paciente sufre una infección conocida como giardiasis. Síndrome de Gilbert. Esta enfermedad está condicionada por brotes de ictericia y de hiperbilirubinemia y ocurre cuando hay un exceso de bilirrubina en la sangre.

Azules o verdes: ciertas enfermedades o consumir ciertos alimentos. O a la biliverdina.

Rojo: remolacha o a la existencia de hemorragias próximas al ano.

MUCUS

Su presencia en las heces es propia de los estados inflamatorios (enteritis y colitis), pero también se presenta en los estados espásticos, aún sin Inflamación.La presencia de mucus es indicio de irritación compatible con la existencia de un parasitismo

Utilizar un aplicador de madera para buscar la presencia de mucus en la muestra.

Reporte: (+), (++), (+++).

ASPECTO QUÍMICO

pH

En la lámina portaobjeto se echa una a dos gotas de suero fisiológico a lo cual se agrega con la bajalengua unos gramos de heces. Luego se emplea una tira de papel indicador universal, sobre el cual se aplica una pequeña cantidad de materia fecal, se espera unos minutos y se compara con la escala de colores. Varía entre 6,8 y 7,2 dependiendo del régimen

alimenticio. Los valores normales se van a modificar según el proceso digestivo. pH ácidos indican EDA de tipo viral, malaabsorción de

carbohidratos, grasas. pH alcalinos indican EDA invasivas, degradación de

proteínas, colitis, adenoma velloso, cáncer, etc.

THEVENON

(Sangre oculta en heces) 3 ml. de agua destilada 1 gr. de heces (maíz). Se añade 3 gotas de ácido acético. Al 50%. Se añade 1 ml de agua oxigenada. Se añade de 3 á 4 gotas de piramidón. Se deja en reposo 3 minutos: para leer.

POSITIVO: Color Violáceo. NEGATIVO: Sin reacción.

BENEDICT (Detección de glucosa)

5 gotas de Heces (liquido); 1 gramo de heces (pastoso).

2.5 ml. de Benedict. Hervir aproximadamente 5 min. Moviendo el tubo

lentamente. Dejar en reposo y evaluar en cruces.

Azul verdoso: vestigio o trazas. Amarillo verdoso: (+). Amarillo intenso: (++). Naranja ladrillo: (+++).

Esta prueba se trata de una reacción cualitativa en la cual interviene el reactivo de Benedict, el cual es una disolución alcalina de ion cúprico.

PARÁMETROS IMPORTANTES PARA LA CLASIFICACION DE LAS DIARREAS INFLAMATORIAS Y SECRETORAS

PARAMETRO DIARREA INFLAMATORIA DIARREA SECRETORA

pH Acido o alcalino Acido

Azúcares reductores Ausentes Presentes

Localización del agente causal Intestino grueso Intestino delgado

Mecanismo de acción del

agente

Invasivo Osmótico

OTRAS PRUEBAS

Sudan III: detección de grasas. Cuerpos reductores o azúcares reductores en

heces: tableta clinitest (comercial). Reacción de la Bencidina: Hemoglobina. Reacción de Weber o del Guayaco:

Hemoglobina. Prueba del Cromo Radioactivo: Hemoglobina. Prueba del Sublimado: Pigmentos biliares. Prueba de Grigaut: Pigmentos biliares. Etc.

ASPECTO MICROSCÓPICO

EXAMEN DIRECTO PROCEDIMIENTO. Colocar en un extremo de la lámina portaobjeto una

gota de suero fisiológico y, con ayuda de un aplicador, agregar 1 a 2 mg de materia fecal emulsionarla.

Colocar en el otro extremo de la lámina portaobjeto, una gota de lugol y proceder a la aplicación de la muestra fecal como en el párrafo anterior.

OBSERVACIÓN Observar al microscopio a 10X ó 40X. Recorrer la lámina siguiendo un sentido direccional,

ejemplo: de derecha a izquierda, o de arriba a abajo.

EXAMEN DIRECTO

Tinción Vacuolas Núcleos

SF Lugol

Movilidad (Trofozoítos)

Nom

bre

2

FORMA DE EXTENDIDO

RESULTADO: Poner al reverso de la orden, se anotará el nombre de la especie del parásito y los demás elementos observados, indicando la densidad (número de formas parasitarias y demás elementos por campo microscópico) expresado en cruces.

1 – 2 parásitos en 100 campos microscópicos se anota los números de parásitos observados. (+) Si se observan de 2 a 5 elementos por campo microscópico. (++)) Si se observan de 6 a 10 elementos por campo microscópico. (+++) Si se observan >10 elementos por campo microscópico.

EXAMEN DIRECTO

LEUCOCITOS Con una bajalengua se hace un extendido delgado en la

lámina portaobjeto, luego se colorea con azul de metileno, nos ayuda a diferenciar: Eosinófilos: Estas células, generalmente redondeadas,

tienen un diámetro similar al de los PMNS, y se caracterizan en las tinciones, por la presencia de grandes gránulos rojo púrpura, además que suelen presentar su núcleo segmentado.

Neutrófilos Polimorfonucleares (PMNS): Bacteriana. No Segmentados: Viral Mononucleares: Disenteria, infección de bacterias.

No se Observan en Diarrea Secundaria: a Parásitos, Toxinas y Virus.

HEMATÍES

Los glóbulos rojos tienen un diámetro de 7,5 μm. Su presencia en las heces puede indicar ulceración a nivel del tacto intestinal u otro problema hemorrágico.

Las eritrocitos son discos bicóncavo y pueden parecer tener un cuerpo central con un margen periférico de citoplasma o gránulos por consiguiente.

En parásitos, bacterias, virus, etc.

PIOCITOSSe presenta en pequeñas cantidades en la enteritis y colitis de cualquier etiología.Pero la presencia brusca de pus abundante es indicio de la evacuación a la luz intestinal de un absceso próximo (perirrectales, prostáticos, piosálpinx, etc.).

LÓBULOS DE GRASA En una dieta que contenga al menos 50 g de grasa diarios la cantidad de lípidos es de

menos de 6 g/24 h, correspondiendo a menos del 30% del peso seco de las heces. La cantidad total de lípidos desdoblados debe ser al menos del 50% de las grasas totales.

Cantidades menores indicarían una absorción intestinal deficitaria. Hay aumento de la grasa fecal total en insuficiencias pancreáticas, esprúe, mucoviscidosis, obstrucciones biliares, etc..

En la observación lo mas importante son las grasa neutras. Se informa positivamente a partir de 15 - 20 gotas/campo. El aumento patológico de grasas en heces se llama ESTEATORREA. Si en el microscopio se observa mas de 60 gotas/campo es seguro esteatorrea.

Grasas neutras Glóbulos refringentes tamaño variable.

Esteatorrea, creatorrea, amilorrea, lienteria.

CRISTALES

Indican una excesiva irritabilidad. Presentan el mismo aspecto que en el sedimento

urinario. Origen alimentario (oxalato de calcio). Endógeno (Oxalato calcio, fosfato amónico-

magnésico). Hay unos, característicos del parasitismo intestinal,

llamados cristales de Charcot-Leyden, presentando una forma típica de agujas de brújula.

Medicamentos.

CRISTALES

Cristales aciculares de ácidos grasos Cristal de Oxalato Cálcico

Cristal de Charcot Leyden

BACTERIAS

Carecen de significación clínica. Las bacterias pueden infectar cualquier

parte del cuerpo, pero frecuentemente ocasionan diarrea al invadir el tracto digestivo.

CÉLULAS EPITELIALES Mucosa intestinal. Indican una excesiva irritabilidad. Las células epiteliales o células escamosas

pueden estar presente en las heces. El tamaño de estas células son semejantes al

de las amebas, la coloración es verde pálido con apariencia uniforme no granular cuando se les colorea con Trichome-Gomori.

Célula coloidal, refráctil

y amorfa. Coloración lugol

Célula epiteliales , refráctil.

Coloración lugol

HONGOS - LEVADURAS Células ovoides de 4 a 6 μm y que pueden

encontrarse en forma de levaduras o hifas. Son altamente hepatotóxicos y

lesionan la mucosa gastrointestinal(agravando el problema de hiperpermeabilidad).

Junto con los hongos, erradican al resto de la flora.

Levaduras en heces Conidio de alternaria Esporas de hongos

PÁRASITOSEs un análisis de la materia fecal para verificar la presencia de un parásito o de una infección del intestino causada por organismos similares a gusanos. Los huevos se refieren a la primera etapa del ciclo de vida del parásito. Algunos parásitos son organismos unicelulares como la Amebiasis, la Giardia y las Tricomonas, etc., mientras que otros tienen apariencia de gusanos.

REACCIÓN INFLAMATORIA

Informar los leucocitos en % tanto PMN y M. Negativo: 0 por campo. Dudoso: 1 á 20 por campo. Positivo: +20 por campo. (+10 PMN por

campo) POSITIVO: Salmonella, Shiguella, Campylo-

bacter, Yersinia, E. Coli, etc. NEGATIVO: Toxinas (estafilococos, Vibrio

cholerae, diarrea por parásitos, virus, colitis ulcerosa, etc.

RECOMENDACIONES

Ante la presencia de una reacción inflamatoria positiva en una muestra de heces, se sugiere realizar un cultivo (Coprocultivo) que permitirá identificar la posible bacteria que produce la enfermedad, tener presente que el consumo de antibióticos puede influir en el resultado.

Las muestras obtenidas de pañal descartable deben de ser colocadas en otro recipiente, debido a que absorben líquidos alterando el estado natural de la muestra.

Es importante que escriba la información que se solicita en la etiqueta que viene con el frasco.

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