UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALAFACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIALABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.Alumno: Pardo Leiva Yasmani CarlosCurso: Quinto Año Paralelo: “B” Grupo N°: 3Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 24 de Junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 1 de Julio del 2014

PRÁCTICA N° 5

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO

Animal de Experimentación: Cobayo.

Vía de Administración: Vía Intraperitonial.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por Cloroformo.2. Identificar el cloroformo mediante pruebas de identificación.

MATERIALES

Jeringuilla de 10cc Probeta Cronómetro Equipo de disección Bisturí Vaso de precipitación Erlenmeyer Equipo de destilación. Tubos de ensayo Pipetas Bata de Laboratorio Guantes de látex Mascarilla Gorro Zapatones

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“Página 1

10

SUSTANCIAS

NaOH (20%) Ácido tartárico Etanol Agua destilada alcohol de 95% nitrato de plata potasa alcohólica cloruro de potasio beta naftol amoniaco diluido percloruro de hierro resorsinol piridina lejía de sosa 1:2 piperacina

PROCEDIMIENTO1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo.2. La bioseguridad: colocarse la mascarilla, bata de laboratorio, gorro, zapatones y los

guantes.3. Una vez listo el animal, se llena la jeringuilla de cloroformo se toma de manera segura

al animal por la parte posterior de su cabeza y su lomo para evitar mordeduras.4. Se administra la cantidad de 10 ml de cloroformo y se deja el animal en la meseta.5. Se observan las reacciones y conducta post-administración.6. Transcurrido el tiempo de la muerte del animal se procede a colocarlo en mesa de

disección.7. Con ayuda de una tijera o una hoja guillet se rasura el pelaje del abdomen del animal

para facilitar el corte.8. Con un bisturí se disecciona todo el dorso evitando perforar las entrañas luego se

recogen las entrañas en un vaso de precipitación.9. Observamos los cambios que presentan sus órganos.10. Con ayuda del equipo de disección se trituran las entrañas y se colocan en el balón11. A las vísceras ya picadas le añadimos 10ml de ácido tartárico, y lo llevamos a un balón.12. Una vez ya instalado el equipo de destilación se instala el balón y se da inicio al proceso

de destilación por el lapso de 2 horas.13. Luego de terminada destilación, se procede a tomar una pequeña cantidad de destilado

para proceder a realizar las reacciones de reconocimiento en medios biológicos.

Reacciones y Conducta Post-Administración

Tiempo de muerte: 25 minutos (7:56 – 8:21)Síntomas: Perdida de actividad motora, estado de sueño profundo, hinchazón abdominal, hipoxia.7.56 Se inyectó la dosis al cobayo.8:21 muerte del cobayo

GRAFICO

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

Página 2

Administrando la sustancia toxica por vía Intraperitonial

1

4 65

Colocamos el cobayoEn la panema y observamos

sus manifestaciones

Rasurando al cobayo.

32

Extracción de líquidosExtracción de vísceras

Disección del cobayo

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN LA MUESTRAReconocimiento en Medios Biológicos

1.- Reacción 1: (+) Positivo Característico. (Precipitado de cloruro de plata).

2.-Reacción de Dumas: Reacción con percloruro de Hierro (FeCl3): (+) Positivo característico en frio y caliente (Coloración Roja).

o Reacción con percloruro de Hierro (FeCl3): (+) Positivo característico en frio y

caliente (Coloración Roja).

o Reacción con Nitrato de Plata(NO3Ag): (+) Positivo característico (Precipitado

de cloruro de Plata).

3.- Reacción de Lustgasrten: Reacción con B-naftol: (+) Positivo no característico (Coloración azul).

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

Página 3

o Reacción timol: (+) Positivo característico (Coloración amarilla).

o Reaccion con el resorsinol: (+) Positivo característico (Coloración rojo – violáceo).

o Reaccion con la Piridina: (+) Positivo característico (Coloración roja).

5.- Reacción de Roseboom: (+) Positivo característico (Coloración roja)

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

Página 4

6.- reacción de Benedict: negativo

OBSERVACIONES: Debido a la toxicidad y a las propiedades químicas del tóxico se recomienda usar

mascarilla con filtros de celulosa. Los reactivos para la reacciones de reconocimiento deben encontrarse en óptimas

condiciones y de ser necesario de prepararlos realizarlo de una forma adecuada tomando en cuenta la concentración requerida.

CONCLUSIÓN:

Mediante la práctica se llegó a la conclusión que el cloroformo es toxico agresivo para la salud que al ser inhalado en altas cantidades provoca en muchos casos la muerte, es muy irritante y provoca narcosis.

RECOMENDACIONES Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Realizar las reacciones de identificación en la muestra biológica. Tener mucho cuidado con el líquido y vísceras ya que contienen concentraciones de

cloroformo Evitar contaminar la muestra.

CUESTIONARIO

Que es el cloroformo?

 El cloroformo, triclorometano o tricloruro de metilo, es un compuesto químico de fórmula química CHCl3. Puede obtenerse por cloración como derivado del metano o del alcohol etílico o, más habitualmente en la industria farmacéutica, utilizando hierro y ácido sobre tetracloruro de carbono. A temperatura ambiente, es un líquido volátil, no inflamable, incoloro, de olor penetrante

. Se descompone lentamente por acción combinada del oxígeno y la luz solar, transformándose en fosgeno (COCl2) y cloruro de hidrógeno (HCl) según la siguiente ecuación: 2 CHCl3 + O2 → 2 COCl2 + 2 HCl por lo cual se aconseja conservarlo en botellas de vidrio color ámbar y lejos de la luz.2 

¿El cloroformo para qué sirve?Tiene usos como anestésico en medicina, antes anestesiaban con cloroformo o con éter, en la actualidad se usa para preservar tejidos y huesos. 

 En el laboratorio de química se utiliza el cloroformo como solvente.La mayor parte es usada en la industria en producción de fluorocarbono 22, que se usa como refrigerante, en frezers, aires acondicionados, etc.

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

Página 5

Es usada como solventes para la extracción y purificación de antibióticos, alcaloides, vitaminas y algunos saborizantes. También se usa como solvente industrial en fotografía y lavado en seco. Preparación de tintes y pesticidas.

 Es usada como solventes para la extracción y purificación de antibióticos, alcaloides, vitaminas y algunos saborizantes. 

¿Qué riesgos tiene?Puede causar narcosis, paro cardiorrespiratorio o muerte tardía por lesiones hepáticas y renales. El cloroformo líquido puede provocar desengrasado de la piel y quemaduras de tipo químico. De acuerdo a la concentración y a la duración de la exposición al cloroformo produce dolores de cabeza, somnolencia, sensación de borrachera, laxitud, mareos, náuseas, excitación, pérdida de conciencia, depresión respiratoria, coma y muerte en narcosis.

Los obreros expuestos a concentraciones bajas de este producto adquieren una dependencia que presentan síntomas de índole neurológico y gastro-intestinal, parecidos a los que se dan en los casos de alcoholismo crónico.

En los estados tardíos de exposición se ha comprobado efectos carcinógenos en las ratas, por lo que cabe sospechar que también sea cancerígeno para el hombre. 

Almacenamiento del cloroformo?

Los recipientes que contienen este producto deben ser almacenados en lugares alejados de la luz directa del sol, ya que se descompone lentamente a productos como el fosgeno

GLOSARIO:

Anestésico: son fármacos universalmente utilizados por multitud de profesionales de la salud(anestesiólogos, cirujanos, enfermeros, odontólogos,podólogos, dermatólogos, internistas, médicos veterinarios,etc.) a diario que, a concentraciones suficientes, evitan temporalmente la sensibilidad en el lugar del cuerpo de su administración. Su efecto impide de forma transitoria y perceptible, la conducción del impulso eléctrico por las membranas de los nervios y el músculo localizadas.

Fosfogeno: el fosgeno es un gas venenoso. Si es enfriado y presurizado, el gas de fosgeno puede ser convertido en líquido, de forma que pueda ser transportado y almacenado. Cuando se libera fosgeno líquido, éste se transforma rápidamente en gas que permanece cerca del suelo y se propaga con rapidez (es más denso que el aire y por esa razón se expande hacia áreas más bajas). Al fosgeno también se le conoce por su denominación militar.

Hipoxia: es un estado en el cual el cuerpo completo (hipoxia generalizada), o una región del cuerpo (hipoxia de piel loca), se ven privado del suministro adecuado de oxígeno.

Laxitud: Conducta libre o relajada, o falta de firmeza de una persona ocasionada por inhalación de toxicos muy fuertes en grandes cantidades.

Narcosia: Estado de inconsciencia producida por un narcótico; sueño artificial.Narcótico. Que produce sueño, somnífero, estupefaciente. Sustancia que tiene esta propiedad.

BIBLIOGRAFÍA:

http://www.taringa.net/posts/ciencia-educacion/16298842/Conoscamos-al-Cloroformo.html

https://es.answers.yahoo.com/question/index?qid=20110903155543AAs7gpf

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

Página 6

RevisadoDía

Mes Año

Machala 24 de Junio del 2014

______________________ _________________________

Yasmani Pardo Dr. Carlos García. Mg. Sc. Estudiante Catedrático

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

Página 7

ANEXOS:

INTOXICACION POR CLOROFORMO

Generalidades

El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente anestésico, pero poco después se abandonó este uso por s gran toxicidad hepática y renal.es un líquido incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente volátil y muy liposoluble.

Fuentes de exposición

Está disponible como disolvente en laboratorios y en la industria química.se ha prohibido su uso como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos como resultado de su efecto carcinogénico en animales después de exposiciones crónicas. La intoxicación aguda y crónica puede ocurrir por exposición a sus vapores.

Toxicocinetica y mecanismo de acción

El cloroformo es un anestésico potente y origina una profunda depresión del SNC. Entra en el organismo por vía respiratoria, digestivo dérmico. En humanos puede producir la muerte con la ingestión oral de tan solo 10ml .exposiciones prolongadas o repetidas a los vapores pueden producir hepatotoxicidad, severa que se característica por necrosis centrolobular. Asimismo se ha descrito degeneración grasa del hígado, el riñón el corazón. El mecanismo de lesión parece ser la oxidación a nivel hepático del cloroformo a fosgeno a través del sistema microsomal. También se forma fosgeno cuando los vapores de cloroformo se exponen al calor de una llama. El fosgeno inhalado se convierte en ácido hidroclorhidrico y dióxido de carbono cuando reacciona con el agua en el alveolo; y el ácido produce edema pulmonar.

Cuadro clínico

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

Página 8

La severidad de los síntomas por exposición aguda, vía respiratoria, digestivo, dérmica, está en relación directa con la dosis absorbida. El cloroformo, cuando se inhala, produce todos los niveles de anestesia, teniendo un margen de seguridad muy estrecho, debido a que causa fallo cardiaco y respiratorio de forma casi simultánea. No puede detectarse por el olfato hasta que su concentración excede de 400 ppm. Una exposición durante 10 minutos a concentraciones de 1000 ppm produce síntomas generales como nauseas, vómitos, vértigo cefaleas .exposiciones a una concentración de 1000 a 4000 ppm origina desorientación y concentraciones de 10000 a 20000 ppm dan lugar a pérdida de conciencia, pudiendo originar la muerte.

Dependiendo de la dosis absorbida va a producir alteraciones más o menos importantes de la función hepática, renal y cardiaca.

El cloroformo, por su acusado poder como disolvente de grasas, en contacto con la piel da lugar a dermatitis local, y en los ojos produce irritación corneal.

Reacciones en medio biológico

El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación.

1.-En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata.

Reacción de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.

CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O

Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente.

A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido.

Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.

Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.

Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

Página 9

Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.

Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.

Efectos Potenciales de Salud

Inhalación: Actúa como anestésico relativamente potente. Irrita el tracto respiratorio y produce efectos en el sistema nervioso central, incluyendo dolor de cabeza, somnolencia, mareos. La exposición a altas concentraciones puede resultar en inconsciencia e inclusive muerte. Puede causar daño hepático y desórdenes sanguíneos. La exposición prolongada puede llevar a la muerte debida una frecuencia cardíaca irregular y desórdenes renales y hepáticos.

Ingestión: Causa quemaduras severas de boca y garganta, dolor pectoral y vómitos. Grandes cantidades pueden causar síntomas similares a los de la inhalación.

Contacto con la Piel: Causa irritación cutánea causando enrojecimiento y dolor. Elimina los aceites naturales. Puede ser absorbido a través de la piel.

Contacto con los Ojos: Los vapores causan dolor e irritación ocular. Las salpicaduras pueden causar severa irritación y posible daño ocular.

Exposición Crónica: La exposición prolongada o repetida a los vapores puede causar daño al sistema nervioso central, corazón, hígado y riñones. El contacto con el líquido elimina las grasas y puede causar irritación crónica de la piel con grietas y resequedad y la correspondiente dermatitis. Se sospecha que el cloroformo es un carcinógeno en humanos.

Estabilidad y reactividad

Estabilidad: Establo bajo condiciones ordinarias del uso y del almacenaje. el pH disminuye en la exposición prolongada a la luz y al aire debido a la formación de HCl. Productos peligrosos de la descomposición: Monóxido de carbono del producto de mayo, bióxido de carbono, cloruro de hidrógeno y fosgeno cuando está calentado a la descomposición.

Manejo

Guarde en un envase resistente a la luz, cerrado herméticamente y almacene en un área fresca, seca y bien ventilada. Proteja contra los daños físicos. Aísle de las substancias incompatibles.

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

Página 10

Use equipo de protección especial para realizar el mantenimiento o donde las exposiciones puedan exceder los niveles de exposición establecidos. Lávese las manos, la cara, los antebrazos y el cuello al salir de las áreas restringidas. Dese un baño de regadera, deseche la ropa exterior, cámbiese la ropa vistiendo ropa limpia al terminar el día.

Evite la contaminación cruzada de las ropas de calle. Lávese las manos antes de comer y no coma, ni beba, ni fume en el trabajo. Los envases de este material pueden ser peligrosos cuando están vacíos ya que retienen residuos del producto (vapores, líquido); observe todas las advertencias y precauciones que se alistan para el producto. Umbral de olor del cloroformo: 250 mg/m3. El umbral de olor sólo sirve como advertencia de la exposición; si no siente el olor, no significa que usted no está siendo expuesto.

Desechos:

En pequeñas cantidades puede dejarse evaporar en una campana extractora. En caso de grandes cantidades, debe mezclarse con combustible, como queroseno, e incinerarse en equipo especializado para evitar la generación de fosgeno.

ALMACENAMIENTO:

Los recipientes que contienen este producto deben ser almacenados en lugares alejados de la luz directa del sol, ya que se descompone lentamente a productos como el fosgeno.

INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA

DATO TOXICOLÓGICOS:

Chloroform: LD50 oral en ratas: 908 mg/kg; LD50 piel de conejos: > 20 gm/kg; LC50 inhalación en ratas: 47702 mg/m3/4H; irritación data: piel de conejos 10 mg/24H abierta leve; Ojo de conejos: 20 mg/24H moderada; Ha sido investigado como tumorígeno, mutagénico y causante de efectos reproductivos.

Se han observado defectos al nacimiento en ratas y ratones expuestos a la inhalación de cloroformo a concentraciones en el aire mayores de 100 ppm. La ingestión de cloroformo por animales de laboratorio gestantes, ha causado feto toxicidad pero no defectos al nacimiento y sólo a niveles que causan severos efectos en la madre

INFORMACIÓN ECOLÓGICA

Esta sustancia puede ser peligrosa para el ambiente; debería prestarse atención especial al agua. Ecotoxicidad

Algas (Chlamydomonas reinhardii) EC50 = 13,3 mg/l (72 horas) Crustáceos (Artemia salina) EC50 = 68 mg/l (10 horas) Peces (Brachydanio rerio) LC50 = 100 mg/l (48 horas) Movilidad Coeficiente de reparto octanol/agua como log Pow: 1,97

BIBLIOGRAFÍA:http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdfhttp://www.dorwil.com.ar/msds/Cloroformo.pdfhttps://www.murciasalud.es/recursos/ficheros/137913-CLOROFORMO.pdf

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

Página 11