UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.Alumno: Khatherine Elizabeth Cayambe AvilesCurso: Quinto Paralelo: A Grupo N03Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 23 de junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 30 de junio del 2014

PRÁCTICA N° 5

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO

Animal de Experimentación: Cobayo

Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

Distinguir que sintomatología se presenta cuando hay intoxicación por cloroformo..

Efectuar las reacciones químicas dispensables para detectar intoxicación por cloroformo.

MATERIALES:

Soporte de hierro Pinza de nuez Vaso de precipitación 250ml Matraz Erlenmeyer 250ml Equipo de decisión Bisturí Perlas de vidrio Mangueras Cronometro Balón de destilación Agitador Mechero de alcohol Tabla de disección Panema Jeringa de 10ml Probeta de 50ml

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

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SUSTANCIAS: Ácido Tartárico Cloroformo Alcohol de 95% Nitrato de plata.(AgNO3) Ácido clorhídrico. (HCl) Potasa alcohólica. Percloruro de Hierro (FeCl3) Amoniaco diluido. (NH3) Resorsinol. Piridina. Timol Legía de sosa. Cristal de Yodo Clorhidrato de piperacina. Reactivo de Benedict 

Refrigerante Cinta de embalaje Aro de hierro Fosforo Piola Pipetas Pinza para tubos Funda plástica Tubos de ensayos Mandil Mascarilla Guantes de látex

PROCEDIMIENTO1. Previamente antes de realizar la práctica se debe desinfectar el área donde se la

realizara y así mismo tener os materiales limpios y secos que se emplearan en la práctica.

2. Llevamos al cobayo a la campana de gases para aplicar 10 ml de cloroformo 3. Una vez administrado el toxico se procede a colocarlo en el panema.4. Se observaran toda la sintomalogia que presente por la intoxicación de cloroformo

hasta que muera tomando en cuenta el tiempo transcurrido.5. Se coloca el cobayo en la tabla de diseccion previamente puesta una funda encima

de la tabala y lo sujetamos por las extremidades con ayuda de unas piolas para facilitar abrirlo.

6. Una vez correctamente ubicado se procede a rasparar el área donde se realizara el corte con el bisturí y después se abrirá con cuidado para evitar cortar los órganos.

7. Luego se observa detenidamente los órganos que se han afectado por la intoxicación de cloroformo.

8. Seguido se coloca las vísceras afectadas en un balón volumétrico picando lo más fino posible estas.

9. Luego colocamos NaOH 20% 10. Se arma el equipo de destilación correctamente, abrimos la llave de agua para

empezar el proceso de destilación por 30 minutos. 11. Una vez obtenido el destilado se realizara las respectivas reacciones de

reconocimiento para cloroformo.12. Culminada la práctica se limpiara y desinfectara el área donde se realizó la

práctica y se dejara los reactivos en el lugar correcto bien cerrados y los materiales empleados limpios y secos.

Reacciones de reconocimiento:

1. Ensayo a la llama:

En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95% que contienen un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se observa que esta arde con una llama bordeada de verde y que el ácido

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clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata.

2. Reacción de Dumas:

Al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos milímetros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3 + 4KOH --- 3ClK + HCO2K + 2H2O. Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos proporciones a una proporción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente. A la otra proporción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelven en amoniaco diluido.

3. Reacción de Lustgarten :

Al calentar la muestra con unos miligramos de beta – naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Se sustituye el B-naftol por timol el color es amarillo más o menos oscuro; con Resorsinol la coloración es roja – violácea y con la piridina rojo.

4. Reacción de Fujiwara:

En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de legía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agita, ponemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposos; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina. Esta reacción sensible para unos pocos microorganismos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.

5. Reacción de Roseboom:

Se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla – rojiza al disolverse al alcaloide

6. Reacción de Benedict:

Si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.

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GRAFICOS

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Colocación del cobayo en el panema

Administración de etanol, primera dosis

Manifestaciones físicas después de la administracion

Administracion de etanol, segunda dosis

Deceso del cobayo, después de la 2da dosis

Preparación de cobayo en la tabla para la disección

Observación de los órganos afectados por el tóxico

Trituración de las vísceras

Destilacion del preparado por 30 minutos

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:

Ensayo a la llama:Reaccion positivo característico precipitacion

Reacción de Dumas:

FeCl3:

Reaccion positivo caracterisitico cambio de color

FRIO:

Reaccion positivo caracterisitico cambio de color

CALIENTE:

Con AgNO3:

Reaccion positivo caracterisitico precipitado

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Reacción de Lustgarten:

β-naftol

Reaccion positivo caracterisitico cambio de color

Timol:

Reaccion positivo caracterisitico cambio de color

Resorsinol:

Reaccion positivo caracterisitico cambio de color

Reacción de Roseboom:

Reaccion positivo caracterisitico precipitado

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OBSERVACIONES

Hemos observado que al administrar Cloroformo ( 10ml) por vía intraperitoneal al cobayo, se presentaron las siguientes manifestaciones:

Inicio de administración metanol (5ml): Fue 8:34 am. Presentando Convulsiones leves, respiración agitada, perdida de equilibrioSegunda administración Metanol (5ml) : Respiración lenta,depresión del SNC, estado de anestesia, hipoxiaDeceso: 9:02am.

CONCLUSIONES

Al concluir la práctica nos dimos cuenta cuales son las manifestaciones que presento el cobayo ante la administración del toxico; presentando depresión del SNC, perdida de la movilidad motora, hipoxia, el cual duro 28minutos hasta su deceso, y mediante la autopsia del animal se observó una inflamación del estómago, al igual que la vesícula, por lo cual indica que un consumo exagerado de etanol, produce daños graves en el organismo. A traves de las reacciones de reconocimientos identificamos la presencia del toxico en el animal.

RECOMENDACIONES

Tener limpia los materiales y área de trabajo Tomar en cuenta las normas de bioseguridad al momento de manipular los

reactivos. Al momento de administrar la dosis realizarlo en la vía correcta, para evitar de

esta manera provocar embolias. Al finalizar práctica desinfectar en área en donde se realizo la practica.

CUESTIONARIO:

¿Qué produce la exposición del cloroformo?

La exposición a cloroformo puede ocurrir al respirar aire contaminado o al tomar agua contaminada o al tocar sustancias que lo contienen. Respirar cloroformo puede causar mareo, fatiga y dolores de cabeza. Respirar o ingerir cloroformo por períodos largos puede causar daño al hígado y a los riñones. El cloroformo puede causar ulceración de la piel si hay contacto con grandes cantidades.

¿Aplicaciones del cloroformo?

Usado como reactivo relajante por los lípidos orgánicos, el triclorometano es usado para dormir. El cloroformo es un reactivo químico útil debido a la polarización de sus enlaces C−Cl, por lo que es una herramienta apreciada en síntesis orgánica, al proporcionar el grupo CCl2. Además, debido a que es usualmente estable y miscible con la mayoría de los compuestos orgánicos lipídicos y saponificables, es comúnmente utilizado como solvente. Es también utilizado en biología molecular para varios

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procesos, como la extracción de ADN de lisados celulares. Asimismo, es usado en el proceso de fijación de muestras histológicas post mortem. 

¿Cuáles son las Fuentes de exposición del cloroformo?

Está disponible como disolvente en laboratorio y en la industria farmacéutica. Se ha prohibido su uso como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos como resultado de su efecto cancerígeno en animales después de exposiciones crónicas, la intoxicación aguda y crónica.

 ¿Cuáles son las principales características del cloroformo?

El cloroformo, triclorometano o tricloruro de metilo, es un compuesto químico de fórmula química CHCl3. Puede obtenerse por cloración como derivado del metano o del alcohol etílico o, más habitualmente en la industria farmacéutica, utilizando hierro y ácido sobre tetracloruro de carbono. A temperatura ambiente, es un líquido volátil, no inflamable, incoloro, de olor penetrante , dulzón y cítrico, descripto por Samuel Guthrie como "de delicioso sabor".5 Se descompone lentamente por acción combinada del oxígeno y la luz solar, transformándose en fosgeno (COCl2) y cloruro de hidrógeno (HCl) según la siguiente ecuación: 2 CHCl3 + O2 → 2 COCl2 + 2 HCl por lo cual se aconseja conservarlo en botellas de vidrio color ámbar y lejos de la luz

¿Cuáles son los usos del cloroformo?

Usado como reactivo relajante por los lípidos orgánicos, el triclorometano es usado para dormir. El cloroformo es un reactivo químico útil debido a la polarización de sus enlaces C−Cl, por lo que es una herramienta apreciada en síntesis orgánica, al proporcionar el grupo CCl2. Además, debido a que es usualmente estable y miscible con la mayoría de los compuestos orgánicos lipídicos y saponificables, es comúnmente utilizado como solvente. Es también utilizado en biología molecular para varios procesos, como la extracción de ADN de lisados celulares. Asimismo, es usado en el proceso de fijación de muestras histológicas post mortem. También tiene la particularidad de permitir "saborear colores", dado que los colores vívidos se pueden saborear gracias a una disrupción entre las neuronas sensitivas del quinto par craneal (nervio trigémino)quien proporciona el sentido del gusto al tercio posterior de la lengua, con su nucleo iridioconstrictor y con el segundo par craneal (nervio óptico) que genera la extraña sensación de saborear colores, ya que ambos nervios poseen los mismos núcleos cerebrales y son estimulados enérgicamente al entrar el cloroformo en contacto con ellos. Debido a que interactúa con ciertos receptores del sistema nervioso, el cloroformo tiene las características de un depresor del sistema nervioso central y genera de suaves a severas alucinaciones psicodélicas en jóvenes y adultos. Ya se utilizaba como anestésico en la práctica médica. 

GLOSARIO:

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Triclorometan.-El triclorometano, también conocido como cloroformo, es un líquido claro, volátil, no inflamable y con un olor característico. Se evapora muy rápidamente y posee una solubilidad en el agua escasa, aunque es miscible con la mayoría de los disolventes orgánicos.

Fosgeno.- Es un importante componente químico industrial utilizado para hacer plásticos y pesticidas. A temperatura ambiente (70 °F / 21 °C), el fosgeno es un gas venenoso. Si es enfriado y presurizado, el gas de fosgeno puede ser convertido en líquido, de forma que pueda ser transportado y almacenado. 

Post mortem.- Que significa «después de la muerte», puede referirse a una autopsia 

Disrupción.- Es un término que procede del inglés disruptive y que se utiliza para

nombrar a aquello que produce una ruptura brusca.

Experiencia psicodélica, viaje o vuelo a las vivencias derivadas del uso de

algún fármaco psicodélico o de algún otro tipo de práctica que posibilita el paso de la

mente a un estado alterado de conciencia, como la privación sensorial o el control de la

respiración.

Nervio trigémino o nervio trigeminal (del .: trigeminus, de tres mellizos), también

conocido como quinto par craneal o V par, es un nervio craneal sensitivo. Se suele

confundir con un nervio mixto ya que algunas ramas motoras de otro plexo pasan en

forma conjunta a este, pero el nervio trigémino tiene exclusivamente ramas sensitivas.

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BIBLIOGRAFIA:

o Baeder, C. y Hofmann, T. Chloroform: Supplementary inhalation

embryotoxicity study in Wistar rats.1991. (consultado el 25 de junio del 2014). Disponible: en: http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/TextosOnline/Valores_Limite/Doc_Toxicologica/FicherosSerie2/DLEP%2026.pdf

o Komorniski E.; Calistro S. Hospital General De Agudos Juan

Fernandez.Intoicacion con Cloroformo. 2010. (consultado el 25 de junio del 2014). Disponible: file:///C:/Users/Usuario/Downloads/cloroformo.pdf

o

FIRMAS DE RESPONSABILIDAD:

DAYSI AMBULUDI ______________________

KHATHERINE CAYAMBE ______________________

NELLY CEPEDA ______________________

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ANEXOS

Toxico utilizado en la práctica (CLOROFORMO)

Animal en el cual se experimentó ( Cobayo )

Resultados de las reacciones realizadas en la práctica

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