Presentacin de PowerPoint

Nombre: Alicia CrdobaDocente: Fabiola BarraCarrera: Tecnologa MdicaMARCADORES DE LA INFLAMACINObjetivosIdentificar los Marcadores de la inflamacin: Protena C reactiva y Procalcitonina.

Conocer: Sus fundamentos tericos. Tcnicas de laboratorio.Valores de referencia.

IntroduccinLos marcadores biolgicos constituyen una alternativa atractiva y potencialmente interesante para realizar diagnstico de infeccin, inflamacin o dao tisular y para monitorizar la evolucin y la respuesta al tratamiento.As, los marcadores se han estudiado para: Realizar el diagnstico de infeccin.Evaluar la gravedad de la infeccin.Predecir la evolucin de la infeccin.

Protena C ReactivaDescubierta en 1930 Aparece muy tempranamente en la infeccin Aumenta en diversas situaciones tales como: -Infecciones bacterianas -Traumatismos-Patologas inflamatorias agudas-Artritis reumatoidea Protena de fase aguda

Protena C ReactivaEstructura

Es pentamrica

5 subunidades de 23 kDa

El gen que la codifica se localiza en el cromosoma 1.

Protena C ReactivaSntesis y funcin

Producida por las clulas del hgado.

Respuesta a las citocinas: IL-6, IL-1.

Se une a estructuras de la superficie bacteriana.

Acta como opsonina y activa el complemento.

Protena C ReactivaClnicaLa determinacin de los niveles sricos de PCR es de utilidad para el seguimiento y control de procesos infecciosos, inflamatorios o de dao tisular. Provee informacin sobre el estado inflamatorio de un paciente.Frente al estmulo inflamatorio los valores de PCR aumentan en las primeras 4 a 6 horas alcanzando un mximo a las 36-50 horas. Con la excepcin del fallo heptico agudo, la PCR se eleva siempre que haya un proceso inflamatorio.Para determinar su concentracin se requiere de una muestra de suero. Hay varios mtodos analticos para determinar la PCR.

Protena C ReactivaMtodos para determinar PCR:Turbidimetra y Nefelometra-Prueba fotomtrica-turbidimetrca para la determinacin cuantitativa de protena C-reactiva (PCR) -Determinacin cuantitativa de Protena C-Reactiva; PCR-TurbiltexTcnica de aglutinacin-Prueba rpida de aglutinacin en ltex, para la determinacin cualitativa y semi-cuantitativa de la protena C-reactiva; Humatex PCR

Protena C ReactivaTURBIDIMETRA Y NEFELOMETRASensibles y cuantifican la reaccinEn la nefelometra, los complejos dispersan la luz de un rayo incidente a una longitud de onda apropiada. En turbidimetra, la formacin de complejos obstruye el paso de luz. Si la concentracin del anticuerpo permanece constante, la cantidad de complejo formado depende directamente de la concentracin del antgeno desconocido en la mezcla de reaccin. Los test de nefelometra y turbidimetra tienen buena precisin.

Protena C ReactivaTURBIDIMETRA Y NEFELOMETRA

Prueba foto-turbidimetrca para la determinacin cuantitativa de PCR: -La PCR en muestras de pacientes reacciona con los Ac anti-PCR en presencia de un buffer acelerador. -El complejo inmune formado causa turbidez en la mezcla de reaccin la cual es directamente proporcional a la concentracin de PCR y se mide por turbidimetra.

.Determinacin cuantitativa de Protena C-Reactiva; PCR-Turbiltex: -Las partculas de ltex recubiertas con anticuerpos anti-PCR humana, son aglutinadas por PCR presente en la muestra del paciente. -El proceso de aglutinacin provoca un cambio de absorbancia proporcional a la concentracin de PCR de la muestra.

Protena C ReactivaTCNICA DE AGLUTINACIN

Interaccin entre un anticuerpo y una partcula antignica.

Anticuerpo es conocido como aglutinina y el antgeno como el aglutingeno.

Aglutinacin en ltex.

Protena C ReactivaTCNICA DE AGLUTINACIN

Prueba Humatex PCR CualitativaCuantitativa

RESULTADOPositivoNegativoMarcada y visible aglutinacin de las partculas de ltex en el rea de la lmina. Ausencia de aglutinacin de las partculas de ltex en el rea de la lmina. Se lee el ttulo en la ltima dilucin que presente una aglutinacin visible. Determinacin cuantitativaProtena C ReactivaValores de Referencia:

hasta[mg/dL][mg/L]Recin nacidos hasta 3 das1.515Nios desde el cuarto da110Adultos0.55Protena C ReactivaUtilidad diagnstica de la PCR:Indicador precoz de inflamacinSu disminucin indica buena respuesta al tratamiento antibitico.Se usa como prueba rpida ante la presuncin de infeccin bacteriana (PCR alta) contra infeccin vrica (PCR baja). Es til en deteccin de infecciones ocultas, particularmente, en leucemias y en pacientes luego de una operacin.Sugiere presencia de enfermedades crnicas (artritis reumatoidea, enfermedades del tejido conectivo).Diagnstico y monitoreo de infecciones cuando las pruebas son muy lentas y/o imposibles.Rpida identificacin de infecciones en pacientes de alto riesgo, neonatos, inmunosuprimidos y transplantes de mdula sea.Indica presencia de infeccin como consecuencia de la ruptura de membranas.

Protena C ReactivaSignificado Clnico:-La protena C reactiva es positiva en las siguientes situaciones:

Fiebre reumticaArtritis reumatoideInfarto al miocardioCncer activo o diseminadoInfarto pulmonarProblemas de rechazo de trasplantesTraumatismosInfecciones bacterianasEnfermedad del tejido conectivoEnfermedad intestinal inflamatoriaLupusTuberculosis

Protena C ReactivaInterferencias:

AUMENTADADISMINUIDAPREANALTICASTrauma, ciruga, neonatos, embarazo, trabajo de parto, trasplante renal, hemodilisis, endotoxinas, ejercicio; fumadores, altitud. En personas de edad avanzada aumenta la frecuencia de niveles positivos elevados.AlcoholPOR FARMACOSEstrgenos, anticonceptivos orales (efecto de los estrgenos).Anticonceptivos orales (efecto de la progesterona), antibiticos, terapia antimicrobiana, antiinflamatorios no esteroidales, pentopril, budesonida, dexametasona, prednisona.Procalcitonina Marcador sensible y especfico de la respuesta inflamatoria sistmica.

Permite valorar el grado de una infeccin bacteriana.

Su determinacin esta indicada cuando exista duda diagnostica sobre la presencia de sepsis o shock sptico.

ProcalcitoninaEstructura

Precursor polipeptdico de la calcitoninaConsta de 116 aminocidosTiene un peso molecular aproximado de 12.6 KdaEl mRNA situado en el cromosoma 11, codifica para la PCT

ProcalcitoninaSntesisSintetizada en las clulas C de laglndula tiroidesy en clulas neuroendocrinas delpulmn. En situaciones de sepsis se sintetiza en tejidos y rganos como elbazo,hgado,testculos, grasa ocerebro, por lo que sus niveles en sangre se disparan. El principal estmulo para la liberacin de PCT durante una infeccin es la endotoxina bacteriana.En situaciones crticas no asociadas a infeccin, pueden encontrarse concentraciones elevadas de PCT.

ProcalcitoninaCintica

ProcalcitoninaClnica

Uno de los marcadores ms sensible y especfico

Los aumentos de procalcitonina ocurren en infecciones bacterianas, parasitarias y por hongos con manifestaciones sistmicas.

Habitualmente los niveles de procalcitonina no son detectables.

ProcalcitoninaMtodos para determinar PCT:

ProcalcitoninaBRAHMS PCT-Q

Test inmunocromatogrfico para la medicin semicuantitativa de la PCT

Utiliza Ac mc (tracer) deanti-catacalcinade ratn + Ac pc (fase slida) de anti-calcitoninade oveja.

ProcalcitoninaBRAHMS PCT-QModo de empleo:Abrir el envase individual antes de la realizacin de la prueba. Pipetear 200 l en la cavidad redonda de la placa. Evitar la formacin de burbujas. Incubar durante 30 min. (mx..45 min.) a temperatura ambiente.

ProcalcitoninaBRAHMS PCT-QLectura y evaluacin: Despus de 30 min. Se determina la gama de concentracin de la PCT de la prueba. LECTURAINTERPRETACINNo hay banda visible o solamente banda de test visibleNo son validosVisible solamente la banda de controlValidos negativosBandas de control y de test visibleValidos positivos

ProcalcitoninaBRAHMS PCT LIA Ensayo inmunoluminomtrico (ILMA) usado para cuantificar la concentracin de PCT.Se aplica en exceso dos anticuerpos monoclonales especficos del antgeno que enlazan la PCT (antgena) en dos puntos diferentes. Uno de los anticuerpos est marcado por luminiscencia (el tracer), el otro est fijado a las paredes interiores del tubo (sistema de tubos revestido).

ProcalcitoninaBRAHMS PCT LIA Lectura:La magnitud de la seal de luminiscencia (RLU) es directamente proporcional a la concentracin de PCT en la prueba respectiva. Mediante los valores de la seal de luminiscencia de los estndares es posible elaborar una curva de estndares; ahora es posible cuantificar las concentraciones desconocidas de PCT de los sueros o plasmas de pacientes comparando los valores de test con la curva.

ProcalcitoninaValores de referencia:

MARCADORVALOR NORMALProcalcitonina< 0.05 ng/mLProcalcitoninaUtilidad diagnstica de la PCT: Diagnstico diferencial etiologa inflamatoria Infecciona / no infecciosaSRISPancreatitisInmunosupresion (SIDA, leucopenia, neoplasia)Diagnstico diferencial infeccin bacteriana / no bacterianaMeningitisNeumoniaITUDiagnstico precoz complicaciones infecciosasPacientes quemadosTraumatismoPacientes PostQuirrgicosTrasplanteProcalcitoninaSignificado Clnico:

ConclusinSe puede concluir que los marcadores de inflamacin hoy en da son de mucha ayuda para el diagnstico, pronstico y control de procesos inflamatorios, infecciosos o dao tisular. Aunque la PCR es ms sensible suele ser menos especfica a diferencia de la PCT que es muy sensible y especfica.Finalmente aunque la PCT muestra en general, ms aplicaciones que la PCR, el uso combinado de ambas puede ser ms til que la determinacin aislada de una de ellas.