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  • 7/31/2019 Micologa gral. S.L. PowerPoint

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    EUMYCETOSCITOLOGA Y REPRODUCCIN

    FISIOLOGA Y METABOLISMO -----------------Tcnicas de laboratorio

    yMateriales utilizados en Micologa

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    HONGOS O EUMYCETOS SON ORGANISMOS QUE POSEEN NCLEODEFINIDO Y UNA PARED CELULAR CUYOCOMPONENTE PRINCIPAL ES LAQUITINA,AUNQUE EN ALGUNOS GRUPOS TAMBINSE ENCUENTRACELULOSA, MANANOS YGLUCANOS.SU CUERPO SE DENOMINATHALLO OMICELIO, Y ESTE, DA ORIGEN AL MICE-LIO DE FRUCTIFICACIN, QUE A SU VEZ,PUEDE ORIGINAR UNA REPRODUCCINASEXUAL, COMO SEXUAL O AMBAS A LAVEZ.

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    EN CUANTO A SU ORIGEN Y EVOLUCIN SONPOLIFILTICOS Y PERTENECEN ALREINO

    FUNGI (PROTISTAS SUPERIORES) PORQUEPOSEEN CITOLOGAEUCARIOTAY SIN MOVI-LIDAD.

    POR SU METABOLISMO SON CONSIDERADOSHETERTROFOS (AUSENCIA DE CLOROFILA) YCRECEN EN UN AMPLIO RANGO DE PH YTEMPERATURA (EURITRMICOS).

    SUS COLONIAS PRESENTAN ASPECTOS MUYVARIADOS, QUE VAN DESDE ALGODONOSO, LA-NOSO, VELLOSO, HASTA CREMOSO O PASTOSOEN OTROS.

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    Hongos o Eumycetos - Reino FUNGI-

    CITOLOGA EUCARIOTA. UN CUERPO; THALLO O MICELIO (UNICELULAR

    O FILAMENTOSO). SIN MOVILIDAD.

    FRUCTIFICACIN ASEXUAL Y SEXUAL. METABOLISMO HETERTROFO / FUENTE H.C. DESARROLLAN EN UN AMPLIO RANGO DEPH

    y TEMPERATURA( 0 - 50 C EURITRMICOS ) POLIFILTICOS, POR ORIGEN Y EVOLUCIN.

    (ALGAS>

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    M I C E L I O DE ACUERDO CON SU FUNCIN SE DIS-TINGUEN:

    MICELIO VEGETATIVO ENCARGADO DELA NUTRICIN, SOSTN, RESISTENCIA,DISEMINACIN, ETC. MICELIO DE FRUCTIFICACIN VINCU-LADO CON LA REPRODUCCIN, ESTO ES,LA FORMACIN DE NUEVOS INDIVIDUOSQUE POSEEN Y MANTIENEN TODAS LASCARACTERSTICAS DE LA ESPECIE.

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    El MICELIO VEGETATIVO puede ser :

    Tipo LEVADURAS (UNICELULAR).Tipo MOHOS (PLURICELULAR).

    Tipo LEVADURAS o levaduriforme: ORIGINA CLULAS SIMPLES AISLADAS, O

    DES O ESFRICAS, QUE SE MULTIPLICAN BROTACIN, ESCISIN (BIPARTICIN) O P

    CESO INTERMEDIO.

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    PSEUDOHIFAS

    Algunos hongos producen a partir deuna sola clula y por brotacinsucesiva, cadenas lineales o ramifi-cadas de clulas, pero sin los septoscaractersticos, el micelio pseudota-

    bicado mal llamado

    pseudomicelio

    .

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    EumycetosTipo levaduras

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    LEVADURAS MICELIO UNICELULAR

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    GRAM: Micelio unicelular

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    GRAM: PSEUDOHIFAS ( Pseudomicelio)

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    Tipo MOHOS:

    EST REPRESENTADO POR FILAMENTOSCON RAMAS DISPUESTAS EN TODASDIRECCIONES (HIFAS), CONFORMANDOELMICELIO FILAMENTOSO..

    ESTE TIPO DE MICELIO PUEDE PRESENTARPAREDES TRANSVERSALES (TABIQUES OSEPTOS) A CIERTOS INTERVALOS:MICELIO FILAMENTOSO TABICADO.

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    CUANDO EL PROTOPLASMA DE LAS HIFASNO POSEE SEPTOS, se denomina:

    MICELIO CONTINUO O CENOC TICO.

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    EUMYCETOSTipo Mohos

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    COLONIAS DE MOHOS

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    MICELIO FILAMENTOSO

    TABICADO

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    AMANITA

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    El micelio vegetativo puede desarrollarcon respecto a la superficie del mediode cultivo o substrato, en tres sentidos:

    AREO. RAMPANTE (adherido al medio). SUMERGIDO (en el medio de cultivo).

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    Las temperaturas de incubacin son

    de 28C y 37C segn se trate delorigen de la muestra.

    Los hongos oportunistas y patgenosprimitivos productores de micosisprofundas crecen en ambas tempe-raturas.

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    Los ambientales se incuban a tempe-ratura ambiente.

    Los hongos, a diferencia de las bac-terias comunes tienen crecimientolento. Los tiempos de incubacin vandesde 7 a 60 das.

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    FORMAS ESPECIALES DEL

    MICELIO VEGETATIVO EL MICELIO VEGETATIVO ADOPTA

    DIFERENTE MORFOLOGA PARAFACILITAR DETERMINADAS FUN-CIONES VINCULADAS A SU ADAP-

    TACIN AL MEDIO Y SUPERVI-VENCIA.

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    ELEMENTOS DE PROPAGACI N (DISPERSIN, DISEMINA-CIN, MULTIPLICACIN, ETC.)

    NACEN EN CUALQUIER PUNTO DEL THALLO Y SE MUL-TIPLICAN VEGETATIVAMENTE; POR CIERTA SIMILITUD CONLAS ESPORAS VERDADERAS SE LOS CONOCE O DENO-MINA THALLOSPOROS (CONIDIOS).

    A. BLASTOSPORAS - BLASTOCONIDIOS : CLULAS QUE SEMULTIPLICAN POR BROTACI N (GEMACI N) Y ESTNPRESENTES, EN GENERAL, EN HONGOS DE MICELIOUNICELULAR AUNQUE TAMBIN SE PRODUCEN EN LOSHONGOS DE MICELIO FILAMENTOSO.

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    ELEMENTOS DE NUTRICIN

    A. RIZOIDES: HIFAS ESPECIALES QUE PENETRANEN EL SUSTRATO ALIMENTICIO; SE RAMIFICAN AMODO DE RAICILLAS DESEMPEANDO FUNCIO-NES DE ABSORCIN DE LOS NUTRIENTES.SE OBSERVAN EN MOHOS DE MICELIO FILAMEN-TOSO CONTINUO.

    B. HIFAS DE PERFORANTES E INFECTANTES:Poseen diferentes formas.

    Invaden las c lulas de la epidermis delhospedador, atraviesan su pared celular ypenetran en su interior.

    Son ricas en contenido enzim tico, quefavorecen su poder infectante.

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    ELEMENTOS DE RESERVA Y RESISTENCIA

    A. Clamidosporas : clula de paredgruesa que se forma en el recorrido de

    una hifa o en su parte terminal. Pueden serterminales o intercalares, rico en sustan-cias de reserva.

    Funci n: perdurar en ambientes desfavo-rables. B. Esclerotes: ovillado de hifas, una zona

    externa mas densa y esclerosada ( pseudo-par nquima ) y una interna laxa, donde lashifas permanecen definidas y viables, elpros nquima . Es multicelular y visible.

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    FISIOLOGA Y METABOLISMFNGICO

    Los hongos necesitan para su crecimientocarbono, y para ello utilizan fuentes de car-bono qumicamente complejas; el nitrgeno

    es metabolizado a partir de sales sencillascomo nitratos y amonioo de otras sustan-cias de origen orgnico (proteinas).

    Tambin son importantes los mineralescomo elfsforo,. magnesio,. azufre,. cobre,.hierro,.potasio,y.calcio,.etc.

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    Los monosacridos y otros compuestos

    pequeos e hidrosolubles que contienencarbono son el alimento ms importante yasimilable (con mayor rapidez) por los

    hongos.Independientemente de todos los sustratosque pueden degradar para su crecimiento, la

    glucosaes el azcar ms utilizado.Fuente de carbono universal .

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    MICELIO DE FRUCTIFICACI

    REPRODUCCIN ASEXUAL Este tipo de micelio originado a partir del

    micelio vegetativo, se caracteriza por poseerhifas frtiles (esporforos / conidiforo),especializadas para la reproduccin. General-mente se diferencian del micelio vegetativo(somtico) por su morfologa y cambios en supigmentacin.

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    La R.A. es la ms importante para ladiseminacin o multiplicacin de las

    especies. Se repite varias veces al ao (en el

    laboratorio ocurre tantas veces comonuevos repiques se practiquen) ori-ginando infinita cantidad de nuevosindividuos a travs de esporas asexua-les.

    Podra generalizarse que, la reproduc-cin asexual involucra cualquier mto-do de proliferacin que origine nuevosindividuos.

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    ESPORAS: clula diferenciada.

    Unidad de reproduccin que mantienelas caractersticas de la herencia, ya

    sean de origen asexual o sexual. Las esporas fngicas toman el nombre

    acorde con su origen y/o el fruto quelas produce o contiene.

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    CLASIFICACINDE LAS ESPORAS

    Existen diversos tipos y se los pue-de caracterizar segn:

    MORFOLOGA: esfricas, ovoides, piri-formes, aciculares, helicoidales, oblon-gas, reniformes y vermiformes.

    NMERO Y DISPOSICINde sus clulas(tabiques): amerosporas, didimosporas,fragmosporas, dictiosporas, etc.

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    ANATOMA: en general estn com-puestas por doble pared, una exter-na, el exosporio , y una interna, en-dosporio . La pared puede ser lisa orugosa.

    PIGMENTACIN: esporas de coloresclaros, amarillas, verdes, rojas, etc.que se denominan hialosporas .Esporas de colores oscuros (pigmentomelnico), castaos, caf, negros, etc.las feosporas .

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    Amerosporas (Sin septos)

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    Didimosporos (1 tabique)

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    Fragmosporos hialinos(Hialosporos)

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    Dictiosporos (Esporos muricados)

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    EJEMPLOS DE ESPORAS

    CONIDIOS: ESPORAS ASEXUALES EXTERNAS, ENFUNGI IMPERFECTI (DEUTEROMYCETES).

    ESPORANGIOSPORAS: ESPORAS ASEXUALESINTERNAS DENTRO DE ESPORANGIOS EN LOSZYGOMYCETES.

    ASCOSPORAS: ESPORAS SEXUALES DENTRO DEASCOS (FRUTOS) EN ASCOMYCETES.

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    ESPORAS SEXUALES INTERNAS La reproducci n sexual de los hongos

    se realiza como consecuencia de launi n de gametas (n cleos) com-patibles.

    Esta acci n se produce en tres etapas: PLASMOGAMIA la fusi n de dos

    protoplastos. (reuni n en una c lulade ncleos haploides (n + n).

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    MEIOSIS dos divisiones nuclearesconsecutivas, una de las cualeses reduccional. Como resultadode la misma se producen cuatroncleos haploides (n+n+n+n).

    CARIOGAMIA fusi n de dosncleos y formaci n de un ncleodiploide (2n).

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    TAXONOMIA

    ESTUDIOSMACRO Y MICROMORFOLGICOS

    DE LAS CEPAS

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    Aspergillus ochraceus

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    Aspergillus nidulans (Anamorfo)

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    CONIDIOS EN CADENETA

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    CONIDIOS EN CABEZUELA

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    Ctedra de Micologa Medica.Carrera de Microbiologia.FCV.UNLP. EHR 09

    Fragmoconidios(feosporos)

    Dreschlera sp.

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    CLEISTOTECIOS CON HIFAS ORNAMENTALES

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    Emericella nidulans (TELEOFORMO)

    TCNICAS MATERIALES MEDIOS D

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    TCNICAS.MATERIALES. MEDIOS DCULTIVO y REACTIVOS.

    Las t cnicas micol gicas est n especial-mente vinculadas a demostrar la mor-folog a de los hongos macro/microsc -pica (macro / micromorfol gica) .

    Para este fin son necesarios algunosmateriales: ansas en anillo , en gancho,esp tulas , agujas de disecci n, porta-objetos , cubreobjetos, l quidos de mon-tar , escala microm trica, etc.

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    MTODOS DE TRABAJO En general los preparados se hacen en

    fresco entre porta y cubreobjetos, adicio-nando una gota de l quido de montarcomo: Guegu n, Patterson, Lactofenol oinclusive una gota de soluci n fisiol gica.

    Los medios de cultivo comunes para aisla-

    miento y crecimiento de hongos son Agarmiel de Sabouraud, Agar glucosado deSabouraud, Czapeck-Dox y Agar papaglucosa.

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    Materiales (rutina) Ansa en anillo: para trabajar con hongos tipo

    levaduriformes. Ansa en gancho: para trabajar con hongos tipo

    mohos o filamentosos. Esptulas: para cortar el medio de cultivo o

    sembrar por estra en profundidad. Agujas de diseccin:para disgregar o separar el

    material en el preparado (portaobjetos). Escala micromtrica graduada:medicin declulas y otros elementos fngicos.

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    Lquidos de montar Guegu n: Azul Cotton (Azul de algod n,

    Azul marino de metilo), Sudan III , tinturade yodo y cido l ctico . Se observan tantomicelio como frutos con un tinte azul claro

    o celeste, vacuolas de l pidos (color rosa) yelementos de reserva hidrocarbonados(color caoba-marr n claro).

    Patterson: Acetato de potasio , alcoholmet lico , glicerina y agua destilada .

    Se observan los hongos por refringencia ocontraste ya que el reactivo es incoloro. .

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    MEDIOS DE CULTIVO. Para cultivo y aislamiento de mohos y levaduras

    Agar miel de Sabouraud Peptona 20 g Miel de abejas 80 g Agar 20 g Agua corriente csp 1000 ml

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    Agar Sabouraud glucosa

    Mohos y levaduras Peptona 10 g Glucosa 40 g Agar 20 g

    Agua corriente csp 1000 ml

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    CLASIFICACIN SIMPLIFICADA

    BASADA EN LAS FORMASREPRODUCTIVAS

    ASEXUALES Y SEXUALES

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    Clase ZIGOMYCETES

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    ZIGOSPORAS

    Clase ZYGOMYCETES

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    ZIGOSPORAS HETEROTLICAS

    PERITECIO

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    PERITECIO

    ASCOCARPO

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    ASCOCARPOAscos con ascosporas

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    Clase Deuteromycetes(Fungi Imperfecti)

    Micromorfologa

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    Micromorfologa Aspergillus sp (ANAMORFO)

    Cl B i

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    Clase Basiomycetes