Q.C. Claudia Arronte [NOMBRE DE LA COMPAA] | [DIRECCIN DE LA COMPAA]

Manual de Prcticas de Parasitologa Clnica

Universidad Veracruzana

Xalapa

Facultad de Bioanlisis

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NDICE

NDICE .......................................................................................................................................................... 1

EXMEN DIRECTO .................................................................................................................................... 2

COPROPARASITOSCPICO MEDIATO O INMEDIATO CON COLORANTES VITALES ............ 3

AMEBAS DE VIDA LIBRE ......................................................................................................................... 4

INVESTIGACIN DE PROTOZOARIOS DE CAVIDAD ....................................................................... 5

INVESTIGACION DE TOXOPLASMA GONDII ...................................................................................... 6

INVESTIGACIN DE PROTOZOARIOS PULMONARES .................................................................... 7

INVESTIGACIN DE PLASMODIUM ...................................................................................................... 8

ESTUDIO DE HEMOFLAGELADOS ...................................................................................................... 10

CPS DE FLOTACIN CON SOLUCIN DE SACAROSA (SHEATHER) ........................................ 11

MTODO DE CONCENTRACIN POR FLOTACIN MTODO DE FAUST ................................ 12

MTODO DE CONCENTRACIN POR FLOTACIN WILLIS .......................................................... 13

MTODO DE CONCENTRACIN POR SEDIMENTACIN RITCHIE ............................................ 14

MTODO DE GRAHAM ........................................................................................................................... 16

MTODO CUANTITATIVO DE DILUCIN TCNICA DE STOLL .................................................... 17

METODO CUANTITATIVO DE FROTIS GRUESO KATO ................................................................. 19

MTODO DE BAERMAN ......................................................................................................................... 21

HARADA-MORI ......................................................................................................................................... 23

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EXMEN DIRECTO

OBJETIVO: Observacin de los protozoos en fresco y coloreados con lugol.

GENERALIDADES: Este mtodo es el ms antiguo que se conoce; por los datos histricos que se tienen en relacin con los primeros microscopios probablemente Anton van Leewenhoek, a mediados del siglo XVII, fue de los primeros en utilizarlo, al observar y encontrar en sus propias heces fecales trofozoitos de Giardia lamblia. Este mtodo tiene, entre sus caractersticas, la sencillez y rapidez para llevarlo a cabo, adems de la economa, pues es el que requiere menos material. Este mtodo es el indicado para bsqueda de trofozoitos. En la prctica ha demostrado su eficacia cuando se utiliza lugol para la identificacin de quistes, huevos y larvas.

MATERIAL Y EQUIPO

Aplicadores de madera

Portaobjetos de 25 X 76 mm

Cubreobjetos de 22 X 22 mm

Solucin salina isotnica

Lugol

Microscopio

METODO

1. En un portaobjetos limpio y desengrasado, se colocan separadamente, una

gota de solucin salina y otra de lugol.

2. Con el aplicador de madera se toma una muestra de 1 a 4 mg de heces 8 en

muestras con sangre y moco elegir esa parte para estudiar) y se mezcla con

la solucin, con el mismo aplicador se retiran las fibras y otros fragmentos

gruesos, procurando hacer una suspensin no un frotis.

3. Colocar el cubreobjetos.

4. Repetir estas operaciones en la gota de lugol.

5. Observar al microscopio con objetivos de 10X y 40X.

6. Reportar dibujos de observacin y resultados

http://para1.wordpress.com/2008/06/21/examen-directo/

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COPROPARASITOSCPICO MEDIATO O INMEDIATO CON

COLORANTES VITALES

OBJETIVO: Conocer los diferentes colorantes y su afinidad con los protozoos en la

facilitacin de la observacin.

GENERALIDADES: La utilidad de los colorantes vitales (azul de metileno, rojo

congo, eosina, verde de malaquita, verde de Janus, Safranina) para poder

diferenciar correctamente los diferentes protozoos basndose en las caractersticas

morfolgicas de cada uno de ellos observando sus ncleos, endosomas, etc.

MATERIAL Y EQUIPO

Aplicadores De madera

Portaobjetos de 25 X 76 mm

Puente de tincin

Lmpara de alcohol

Azul de metileno al 3.5%

Agua destilada

Microscopio

METODO

1. En un portaobjetos se coloca una gota de azul de metileno al 3.5%

2. Se toma una porcin pequea de heces fecales con un aplicador y se realiza

una suspensin homognea con el colorante.

3. Se deja actuar el colorante por 3 minutos o bien se flamea pero sin que

hierva la muestra, slo hasta la emisin de vapores.

4. Observar al microscopio con objetivos de 10X y 40X.

5. Anotar dibujos de observacin y resultados.

http://para1.wordpress.com/2008/06/21/coproparasitoscopico-mediato-o-inmediato-con-colorantes-vitales-2/http://para1.wordpress.com/2008/06/21/coproparasitoscopico-mediato-o-inmediato-con-colorantes-vitales-2/

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AMEBAS DE VIDA LIBRE

OBJETIVO: observacin de amebas de vida libre con hbitat en la tierra y agua. GENERALIDADES: Entre las numerosas amebas de vida libre, Acanthamoeba culbertsoni y Naegleria fowleri son parsitos facultativos del hombre causando meningoencefalitis amebiana primaria. El paciente se infecta por nadar en aguas termales o estancadas de 3 a 6 das antes del comienzo de cefalea frontal intensa, fiebre y constipacin nasal, seguidas de afeccin del sistema nervioso central. Puede haber alteraciones del gusto y olfato, as como rigidez de la nuca. Tambin puede producir lceras en la crnea que conducen a la ceguera e infecciones granulomatosas de la piel. MATERIAL Y EQUIPO

Microscopio

Portaobjetos de 25 X 76 mm

Cubreobjetos de 22 X 22 mm

Pipeta Pasteur

Aguas negras

METODO

1. Se coloca una gota de aguas negras en un portaobjetos. 2. Se coloca el cubreobjetos encima. 3. Observar al microscopio con objetivos de 10X y 40X. 4. Anotar resultados de observacin y hacer dibujos.

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INVESTIGACIN DE PROTOZOARIOS DE CAVIDAD

OBJETIVO: Demostrar la presencia de protozoarios flagelados en exudados vaginales y uretrales y en orina por medio de examen directo.

GENERALIDADES: Las parasitosis por Tricomonas vaginalis carece de hospedero intermediario. En la transmisin sexual, el hombre funciona como vector y la mujer infectada como reservorio del parsito; la infeccin es ms frecuente en grupos de mujeres donde la higiene es deficiente, siendo el contacto sexual el mecanismo ms frecuente por el que se adquiere el parsito; sin embargo se sabe de casos de tricomoniosis que se han adquirido en el momento del parto, por contacto con ropa, toallas, baos, instrumentos de exploracin ginecolgica u otros objetos contaminados. La presencia del parsito en el tracto urinario del varn pasa inadvertida con mayor frecuencia que en el de la mujer o las molestias son mnimas.

MATERIAL Y EQUIPO

Microscopio

Hisopo

Portaobjetos y Cubreobjetos

Tubo de ensaye con sol. Isotnica estril

Espejo vaginal

Puente de tincin

Pipeta Pasteur con bulbo

Aceite de inmersin

Colorante de Wright

Secrecin vaginal, uretral u orina

Pizeta con agua destilada

METODO 1. Se coloca a la paciente en posicin ginecolgica. 2. Introducir con cuidado el espejo vaginal. 3. Con un hisopo tomar la muestra del fondo de saco posterior. 4. Depositar la primera toma en un portaobjetos limpio y hacer un extendido. 5. La segunda toma depositarla en un tubo de ensaye con solucin salina

conservando a 37C. 6. Una vez seco el extendido se procede a teir con el colorante de Wright

de 1 a 3 min. 7. Se observa al microscopio con objetivos de 10X, 40X y 100X agregando

a ste ltimo aceite de inmersin. 8. Con una pipeta Pasteur se toma una gota del fondo del tubo de ensaye y

se deposita en un portaobjetos y se cubre. 9. Examinar con objetivos de 10X y 40X. 10. Anotar resultados de observacin y hacer dibujos.

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INVESTIGACION DE TOXOPLASMA GONDII

OBJETIVO: Estudiar las caractersticas morfolgicas y tintoreales de Toxoplasma gondii tanto en heces frescas de gato como en preparaciones fijas y teidas.

GENERALIDADES: La toxoplasmosis es una enfermedad parasitaria producida por Toxoplasma gondii el cual lleva su fase sexual de reproduccin en su hospedero definitivo que es el gato y otros felinos salvajes y su fase de multiplicacin asexuada en los tejidos de una gran variedad de mamferos, aves y el hombre. La toxoplasmosis se presenta con una diversidad de signos y sntomas. De las entidades clnicas que destacan son meningoencefalitis, retinocoroiditis y abortos.

En el examen microscpico, puede observarse la forma proliferativa en media luna o banana, con un extremo redondeado y otro afilado, con un solo ncleo central que se tie de color rojo y citoplasma de color azul. Se pueden encontrar en forma individual o en grupos. La forma qustica la podemos encontrar en tejidos teidos.

En los felinos las esporas del parsito se encuentran en la luz intestinal