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DETERMINACIÓN DE FIBRA EN LOS ALIMENTOS IMPORTANCIA DE LA FIBRA EN LOS ALIMENTOS

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Page 1: Determinacion de fibra en alimentos

DETERMINACIÓN DE FIBRA EN LOS ALIMENTOS

IMPORTANCIA DE LA FIBRA EN LOS ALIMENTOS

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REQUERIMIENTOS DE FIBRA DIETÉTICA DIARIOS

HOMBRES (19 A 50 AÑOS): 30g

CONSUMO REAL: 22g

MUJERES (19 A 50 AÑOS): 25-30g

CONSUMO REAL: 19g

Page 3: Determinacion de fibra en alimentos

DEFINICIÓN DE FIBRA DIETÉTICA

LA LIGNINA MÁS LOS POLISACÁRIDOS DE LOS VEGETALES QUE NO PUEDEN SER DIGERIDOS POR LAS ENZIMAS HUMANAS.

TAMPOCO ES DIGERIDO ALGO DE ALMIDÓN EN EL INTESTINO DELGADO Y ES LLAMADO ALMIDÓN RESISTENTE. EXISTE CONTROVERSIA SOBRE SI DEBE SER INCLUIDO EN LA DEFINICIÓN DE FIBRA.

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ALMIDÓN RESISTENTE

RESULTA DE LA RETROGRADACIÓN DEL ALMIDÓN. ESTO ES EL ALMIDÓN QUE NO ES FÁCILMENTE GELATINIZADO. TAMBIÉN RESULTA DE LA REACCIÓN DE MAILLARD, EL ALMIDÓN CRISTALINO Y SIMILARES TIPOS DE ALMIDÓN.

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CONTENIDO DE FIBRA DIETÉTICA EN DIVERSOS ALIMENTOS

CEREALES

PAN DE TRIGO BLANCO 3.5%

PAN DE CENTENO 5.5%

PAN INTEGRAL DE CENTENO 7.7%

HARINA DE TRIGO 4-12.9%

ARROZ FRITO 1.4%

ARROZ HERVIDO 2.9%

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CONTENIDO DE FIBRA DIETÉTICA EN DIVERSOS ALIMENTOS

VEGETALES ALCACHOFA 10.8% APIO 1.5% ESPÁRRAGO 1.5% ESPINACA 1.8% JITOMATE 1.8% LECHUGA 1.5% PEPINO 0.9% ZANAHORIA 3.4%

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CONTENIDO DE FIBRA DIETÉTICA EN DIVERSOS ALIMENTOS

SEMILLAS

ALMENDRA 9.8%

AVELLANA 7.4%

CACAHUATE 7.4%

CASTAÑA 8.4%

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CONTENIDO DE FIBRA DIETÉTICA EN DIVERSOS ALIMENTOS

FRUTAS ARÁNDANO 4.9% CEREZA 1.9% CIRUELA 1.7% CIRUELA PASA 9% FRESA 2% CHABACANO 2%

Page 9: Determinacion de fibra en alimentos

CONTENIDO DE FIBRA DIETÉTICA EN DIVERSOS ALIMENTOS

FRUTA

DÁTIL 9.2% DURAZNO 1.7% MANZANA 2.3%MANZANA DESHIDRATADA 7%NARANJA 2.2%PERA 2.8%PIÑA 1.4%

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IMPORTANCIA DE LA FIBRA DIETÉTICA

A INICIOS DE LOS 1970’S BURKITT Y TROWEL POSTULAROLN QUE LA PREVALESCENCIA DE LA ENFERMEDAD DEL CORAZÓN Y CIERTOS TIPOS DE CÁNCER EN LAS SOCIEDADES OCCIDENTALES SE RELACIONABAN CON UN CONSUMO INADECUADO DE FIBRA DIETÉTICA.

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IMPORTANCIA DE LA FIBRA DIETÉTICA

EL LIBRE CONSUMO DE FIBRA DITÉTICA PROVENIENTE DE DIVERSOS TIPOS DE ALIMENTOS AYUDARÁN A PROTEGERNOS CONTRA EL CÁNCER DEL CÓLON Y AYUDARÁN A NORMALIZAR LOS LÍPIDOS EN LA SANGRE Y A REDUCIR, POR TANTO, EL RIESGO DE ENFERMEDADES CARDIOVASCULARES

Page 12: Determinacion de fibra en alimentos

IMPORTANCIA DE LA FIBRA DIETÉTICA

CIERTOS TIPOS DE FIBRA PUEDEN RETARDAR LA ABSORCIÓN DE LA GLUCOSA Y REDUCIR LA SECRECIÓN DE INSULINA, IMPORTANTE PARA LA GENTE DIABÉTICA, AUNQUE TAMBIÉN PARA LOS NO DIABÉTICOS.

LA FIBRA AYUDA A EVITAR EL EXTREÑIMIENTO Y ENFERMEDADES POR DIVERTÍCULOS

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IMPORTANCIA DE LA FIBRA DIETÉTICA

LA FIBRA DIETÉTICA ES UN COMPONENTE ESENCIAL DE UNA DIETA BIEN BALANCEADA Y UN CONSUMO ADECUADO DE FIBRA DIETÉTICA DURANTE NUESTRA VIDA AYUDARÁ A MINIMIZAR ALGUNOS DE LA MAYORÍA DE LOS PROBLEMAS DE SALUD.

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COMPONENTES DE LA FIBRA Y SUS RESPUESTAS FISIOLÓGICAS

LA FRACCIÓN PENTOSA DE LA FIBRA DIETÉTICA PARECE SER LA MÁS BENÉFICA AL EVITAR EL CÁNCER DEL CÓLON Y AL REDUCIR EL RIESGO DE LA ENFERMEDAD VASCULAR.

LAS PECTINAS Y LOS HIDROCOLOIDES SON MUY BENÉFICOS AL REDUCIR LA ABSORCIÒN DE LA GLUCOSA Y AL REDUCIR TAMBIÉN LA SECRECIÓN DE INSULINA.

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COMPONENTES DE LA FIBRA Y SUS RESPUESTAS FISIOLÓGICAS

LAS PECTINAS Y LOS HIDROCOLOIDES SON DE POCO VALOR PERO AYUDAN A PREVENIR LA DIVERTICULOSIS Y EL EXTREÑIMIENTO.

LA MEZCLA DE CELULOSA Y HEMICELULOSA AYUDA A PREVENIR EL EXTREÑIMIENTO Y LA DIVERTICULOSIS.

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PRINCIPALES COMPONENTES DE LA FIBRA DIETÉTICA

CELULOSA HEMICELULOSA PECTINAS HIDROCOLOIDES LIGNINA

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POLISACÁRIDOS DE LAPARED CELULAR

CELULOSA.- POLÍMERO LARGO, PRÁCTICAMENTE LINEAL FORMADO POR UNIDADES DE GLUCOSA UNIDAS POR ENLACES β-1,4. ALGUNOS POLÍMEROS PUEDEN CONTENER 10 000 UNIDADES DE GLUCOSA.

LAS MICROFIBRILLAS DE GLUCOSA PROPORCIONAN LA FUERZA Y RIGIDEZ REQUERIDAS EN LAS PARÉDES CELULARES PRIMARIA Y SECUNDARIA DE LA CÉLULA VEGETAL

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POLISACÁRIDOS DE LAPARED CELULAR

HEMICELULOSAS.- SON UN GRUPO HETEROGÉNEO DE SUBSTANCIAS QUE CONTIENEN MUCHAS UNIDADES DE AZÚCARES EN SUS CADENAS: XILOSA, MANOSA Y GALACTOSA, QUE CONFORMAN SU COLUMNA VERTEBRAL.

ARABINOSA, GALACTOSA Y ÁCIDOS URÓNICOS CONFORMAN LAS CADENAS SECUNDARIAS DE SU ESTRUCTURA

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POLISACÁRIDOS DE LAPARED CELULAR

PECTINAS.- ESTRUCTURAS RICAS EN ÁCIDOS URÓNICOS. SON SOLUBLES EN AGUA CALIENTE Y FORMAN GELES. SU ESTRUCTURA CONSISTE EN CADENAS NO RAMIFICADAS DE ÁCIDO GALACTURÓNICO UNIDAS POR ENLACES 1,4- .

SUS CADENAS LATERALES PUEDEN CONTENER: RAMNOSA, ARABINOSA, XILOSA Y FUCOSA.

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POLISACÁRIDOS QUE NO SONDE LA PARED CELULAR

HIDROCOLOIDES:

MUCÍLAGOS

GOMAS

POLISACÁRIDOS DE ALGAS

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HIDROCOLOIDES

POLISACÁRIDOS HIDROFÍLICOS QUE FORMAN SOLUCIONES VISCOSAS O DISPERSIONES EN AGUA FRÍA O CALIENTE.

Page 22: Determinacion de fibra en alimentos

MUCÍLAGOS VEGETALES

GOMAS:

GUAR

ALGARROBA

GOMA ARÁBIGA

GHATTI

KARAYA

GOMA DE TRAGACANTO

Page 23: Determinacion de fibra en alimentos

POLISACÁRIDOS DE ALGAS

AGAR ALGINATOS CARRAGENAN

POLISACÁRIDOS QUE NO SON DE LA PARED CELULAR:

AZÚCARES NEUTROS ÁCIDOS URÓNICOS

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LIGNINA

POLÍMERO NO CARBOHIDRATO, TRIDIMENSIONAL. CONSISTE EN 40 UNIDADES DE FENOL CON UNIONES INTRAMOLECULARES FUERTES.

A MENUDO ESTÁ UNIDA EN FORMA COVALENTE A LA HEMICELULOSA

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MÉTODOS PARA LADETERMINACIÓN DE FIBRA DIETÉTICA

GRAVIMÉTRICOS

QUÍMICOS

Page 26: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODOS GRAVIMÉTRICOS

LOS CARBOHIDRATOS, LÍPIDOS Y PROTEÍNAS SE SOLUBILIZAN SELECTIVAMENTE MEDIANTE AGENTES QUÍMICOS Y/O ENZIMAS.

LOS MATERIALES NO DIGERIBLES SE COLECTAN, POSTERIORMENTE, MEDIANTE FILTRACIÓN Y EL RESIDUO DE FIBRAS SE DETERMINA GRAVIMÉTRICAMENTE.

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MÉTODOS QUÍMICOS DE DETERMINACIÓN DE FIBRADIETÉTICA

LOS CARBOHIDRATOS DIGERIBLES SON ELIMINADOS MEDIANTE DIGESTIÓN ENZIMÁTICA. LOS COMPONENTES DE LA FIBRA SON HIDROLIZADOS MEDIANTE UN ÁCIDO , Y SE MIDEN LOS MONOSACÁRIDOS. LA SUMA DE LOS MONOSACÁRIDOS EN EL HIDROLIZADO ÁCIDO REPRESENTA LA FIBRA.

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COMPONENTES PROBLEMÁTICOS EN LA DETERMINACIÓN DE FIBRA DIETÉTICA

ALMIDÓN

GLUCOSA

Page 29: Determinacion de fibra en alimentos

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

LA MUESTRA DEBE SER BAJA EN GRASAS (MENOS DE 5-10%)

DEBE ESTAR SECA DEBE SER FINAMENTE MOLIDA LAS MUESTRAS QUE NO SON SÓLIDAS SE

DEBEN LIOFILIZAR, EXTRAÉRSELES LA GRASA, SECAR Y MOLER.

Page 30: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODOS GRAVIMÉTRICOSFIBRA CRUDA

DESARROLLADO EN LOS 1850´S PARA ESTIMAR LOS CARBOHIDRATOS NO DIGERIBLES Y ALIMENTOS PARA ANIMALES.

PARA LOS ALIMENTOS DE HUMANOS, AL NO HABER OTRO MÉTODO DISPONIBLE, TAMBIÉN SE UTILIZÓ HASTA PRINCIPIOS DE LOS 1970´S

Page 31: Determinacion de fibra en alimentos

FIBRA CRUDAFUNDAMENTO

EXTRACCIÓN SECUENCIAL DE LA MUESTRA CON H2SO4 AL 1.25% Y NaOH AL 1.25%.

EL RESIDUO INSOLUBLE SE COLECTA POR FILTRACIÓN.

EL RESIDUO ES SECADO, PESADO Y LLEVADO A CENIZAS PARA CORREGIR CONTAMINACIÓN POR MINERALES.

Page 32: Determinacion de fibra en alimentos

DESVENTAJAS DEL MÉTODODE FIBRA CRUDA

ESTE MÉTODO MIDE CANTIDADES VARIABLES DE CELULOSA Y LIGNINA EN LA MUESTRA.

LA HEMICELULOSA, PECTINAS Y LOS HIDROCOLOIDES SON SOLUBILIZADOS SIN SER DETECTADOS. POR ESTA RAZÓN EL MÉTODO HA SIDO DESCONTINUADO.

Page 33: Determinacion de fibra en alimentos

FIBRA DETERGENTE

FUNDAMENTO

SE SOLUBILIZAN LAS PROTEÍNAS INTRACELULARES PARA LIBERAR, ASÍ, A LA FIBRA INSOLUBLE AL DETERGENTE

Page 34: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODOS DETERGENTES DE DETERMINACIÓN DE FIBRA CRUDA

FIBRA DETERGENTE ÁCIDA

FIBRA DETERGENTE NEUTRA

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FIBRA DETERGENTE NEUTRA

FUNDAMENTO

SE AÑADE A LA MUESTRA 100mL DE UNA OLUCIÓN DE DETERGENTE NEUTRO:

DISODIO ETILENDIAMINO TETRA ACETATO DIHIRATADO

BORATO DE SODIO DECAHIDRATADO

2-ETOXI ETANOL

Page 36: Determinacion de fibra en alimentos

FIBRA DETERGENTE NEUTRA SE AÑADEN 2mL DE

DECAHIDRONAFTALENO Y 0.5g DE SULFITO DE SODIO.

SE CALIENTA LA MUESTRA HASTA EBULLICIÓN Y LUEGO UN REFLUJO

SE FILTRA EN UN CRISOL, SE ENJUAGA CON AGUA CALIENTE

SE ENJUAGA CON ACETONA Y SE SECA.

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DESVENTAJAS DEL MÉTODO CAUSA FORMACIÓN DE ESPUMA

ALGO DE ALMIDÓN PERMANECE INSOLUBLE EN EL DETERGENTE CALIENTE ASÍ QUE ES MEDIDO COMO FIBRA NO DIETÉTICA

SE DEBE ELIMINAR EL ALMIDÓN PARA EVITAR INTERFERENCIAS

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FIBRA DETERGENTE ÁCIDA

SE UTILIZA UNA SOLUCIÓN DE DETERGENTE ÁCIDO QUE CONTIENE 0.5M DE H2SO4 Y EL DETERGENTE CTAB (BROMURO DE CETIL TRIMETIL AMONIO)

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DESVENTAJA DEL MÉTODO

NO ES UNA BUENA MEDICIÓN DE FIBRA DIETÉTICA YA QUE SÓLO PROPORCIONA UNA ESTIMACIÓN DE LA CELULOSA Y LA LIGNINA EN EL ALIMENTO.

SE RELACIONA BIEN CON EL MATERIAL INDIGERIBLE DE LOS RUMIANTES PERO NO DA UNA BUENA ESTIMACIÓN DEL MATERIAL NO DIGERIBLE EN HUMANOS.

Page 40: Determinacion de fibra en alimentos

COMPARACIÓN DE MÉTODOS DETERGENTES DE DETERMINACIÓN DE FIBRA CRUDA

LA FIBRA DETERGENTE NEUTRA ES IGUAL A LA FIBRA DETERGENTE ÁCIDA MÁS HEMICELULOSAS.

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FIBRA SOLUBLE E INSOLUBLE TOTAL

FUNDAMENTO

ESTE MÉTODO REPRESENTA UNA EVOLUCIÓN LENTA DE METODOLOGÍAS QUE COMBINAN LAS DETERMINACIONES DE: FIBRA CRUDA, FIBRAS DETERGENTES Y METODOLOGÍAS DE SOUTHGATE

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FIBRA SOLUBLE E INSOLUBLE TOTAL

FUNDAMENTO

MUESTRAS MOLIDAS, SECAS, LIBRES DE GRASAS SON DIGERIDAS ENZIMÁTICAMENTE CON ∞-AMILASAS, AMILOGLUCOSIDASA Y PEPTIDASA PARA ELIMINAR EL ALMIDÓN Y LA PROTEÍNA.

LA FIBRA INSOLUBLE ES COLECTADA POR FILTRACIÓN.

Page 43: Determinacion de fibra en alimentos

FIBRA SOLUBLE E INSOLUBLE TOTAL FUNDAMENTO

LA FIBRA SOLUBLE SE PRECIPITA AÑADIENDO AL FILTRADO ETANOL AL 78% Y COLECTANDO EL RESIDUO POR FILTRACIÓN.

LA FIBRA FILTRADA ES LAVADA CON ETANOL Y ACETONA, SECADA AL HORNO Y PESADA.

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FIBRA SOLUBLE E INSOLUBLE TOTAL UN DUPLICADO ES ANALIZADO PARA

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNA

EL OTRO DUPLICADO ES INCINERADO PARA DETERMINAR EL CONTENIDO DE CENIZAS.

FIBRA = PESO DEL RESIDUO – (PESO DE LA PROTEÍNA + CENIZAS)

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FIBRA SOLUBLE E INSOLUBLE TOTALPROCEDIMIENTO

MUESTRAS POR DUPLICADO (1g) SE MEZCLAN CON 40 mL BUFFER (pH 8.2).

SE AÑADE ∞-AMILASA TERMORRESISTENTE

SE INCUBA ASÍ LA MUESTRA 15 MINUTOS A 95-100°C

SE ENFRÍA LA MUESTRA A 60°C

Page 46: Determinacion de fibra en alimentos

FIBRA SOLUBLE E INSOLUBLE TOTALPROCEDIMIENTO

SE AÑADE PROTEASA

SE INCUBA A 30 MINUTOS A 60°C

SE AJUSTA EL pH A 4.0-4.7 Y SE AÑADE AMILOGLUCOSIDASA

SE INCUBA 30 MINUTOS A 60°C

SE FILTRA LA MUESTRA DIGERIDA

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FIBRA SOLUBLE E INSOLUBLE TOTAL

PROCEDIMIENTO

SE LAVA EL RESIDUO FILTRADO CON 10 mL DE AGUA (2 VECES) EL CUAL SE UTILIZA POSTERIORMENTE PARA LA DETERMINACIÓN DE FIBRA INSOLUBLE.

EL FILTRADO + LOS LAVADOS CON AGUA SE UTILIZAN PARA LA DETERMINACIÓN DE FIBRA SOLUBLE

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FIBRA INSOLUBLE

EL RESIDUO DESTINADO PARA ESTA DETERMINACIÓN SE LAVA CON 10mL DE ALCOHOL AL 95% (2 VECES)

SE LAVA EL RESIDUO CON 10mL DE ACETONA (2 VECES)

LA MUESTRA SE SECA AL HORNO

SE PESA EL CRISOL

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FIBRA INSOLUBLE

SE INCINERA UNO DE LOS DUPLICADOS Y SE VUELVE A PESAR (525°C DURANTE AL MENOS 5 HORAS).

SE DETERMINA LA PROTEÍNA RESIDUAL EN EL OTRO DUPLICADO (POR EL MÉTODO KJELDAHL N X 6.25).

SE CALCULA EL CONTENIDO DE PROTEÍNA INSOLUBLE.

Page 50: Determinacion de fibra en alimentos

FIBRA SOLUBLE

SE LLEVA EL FILTRADO Y SUS LAVADOS CON AGUA A UN PESO DE 80g.

SE AÑADEN 320mL DE ETANOL AL 95% PRECALENTADO A 60°C.

SE FORMA UN PRECIPITADO (1 HORA A TEMPERATURA AMBIENTAL)

SE FILTRA LA MUESTRA DIGERIDA

Page 51: Determinacion de fibra en alimentos

FIBRA SOLUBLE

SE LAVA EL RESIDUO FILTRADO CON 20mL DE ETANOL AL 78% (3 VECES)

SE LAVA EL RESIDUO CON 10mL DE ETANOL AL 95% (2 VECES)

SE LAVA EL RESIDUO CON 10 mL DE ACETONA (2 VECES)

SE SECA LA MUESTRA AL HORNO

Page 52: Determinacion de fibra en alimentos

FIBRA SOLUBLE

SE PESA EL CRISOL

SE INCINERA UNO DE LOS DUPLICADOS Y SE VUELVE A PESAR

SE DETERMINA LA PROTEÍNA RESIDUAL EN EL OTRO DUPLICADO (KJELDAHL N X 6.25)

SE CALCULA EL CONTENIDO DE FIBRA SOLUBLE

Page 53: Determinacion de fibra en alimentos

CÁLCULOS PARA LA DETERMINACIÓN DE FIBRA DIETÉTICA TOTAL

FIBRA DIETÉTICA TOTAL = FIBRA INSOLUBLE + FIBRA SOLUBLE

Page 54: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODOS QUÍMICOS PARA LA DETERMINACIÓN DE FIBRA

DIETÉTICA

EN LOS MÉTODOS QUÍMICOS LA FIBRA ES IGUAL A LA SUMA DE TODOS LOS MONOSACÁRIDOS QUE NO SON ALMIDÓN MÁS LIGNINA.

LOS MONOSACÁRIDOS SE MIDEN YA SEA INDIRECTAMENTE POR MÉTODOS COLORIMÉTRICOS O POR MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS (CG O HPLC)

Page 55: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODOS QUÍMICOS PARA LA DETERMINACIÓN DE FIBRA

DIETÉTICA

FUNDAMENTO

LOS CARBOHIDRATOS EN PRESENCIA DE ÁCIDOS FUERTES SE COMBINAN CON UNA CANTIDAD DE SUBSTANCIAS PARA PRODUCIR CROMÓGENOS QUE SE PUEDEN MEDIR POR ESPECTROFOTOMETRÍA

Page 56: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODOS QUÍMICOS PARA LA DETERMINACIÓN DE FIBRA DIETÉTICA

FUNDAMENTO

BAJO CONDICIONES ESTANDARIZADAS ESPECÍFICAS:

LAS HEXOSAS SE PUEDEN DETERMINAR CON ANTRONA,

LAS PENTOSAS CON ORCINOL,

LOS ÁCIDOS URÓNICOS CON CARBAZOL

Page 57: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODOS QUÍMICOS PARA LA DETERMINACIÓN DE FIBRA DIETÉTICA

EL ÁCIDO URÓNICO ES TÉCNICAMENTE DIFÍCIL DE CUANTIFICAR POR CROMATOGRAFÍA. POR LO TANTO, LA MAYORÍA DE LOS PROCEDIMIENTOS MIDEN EL ÁCIDO URÓNICO POR EL MÉTODO DEL CARBAZOL. SUS VALORES SON FACTORES DE CORRECCIÓN PARA HEXOSAS Y PENTOSAS.

Page 58: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODO DE SOUTHGATE

FUNDAMENTO

EL MÉTODO FRACCIONA A LA FIBRA EN POLISACÁRIDOS NO CELULÓSICOS INSOLUBLES Y SOLUBLES; CELULOSA Y LIGNINA.

LA LIGNINA ES DETERMINADA GRAVIMÉTRICAMENTE Y EL CONTENIDO DE POLISACÁRIDOS ES DETERMINADO A PARTIR DE CONSTITUYENTES QUE SON MEDIDOS COLORIMÉTRICAMENTE.

Page 59: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODO DE SOUTHGATEPROCEDIMIENTO

SE EXTRAEN LOS AZÚCARES LIBRES DE LA MUESTRA CON METANOL AL 85%

SE EXTRAEN LOS LÍPIDOS CON ÉTER

SE INCUBA LA MUESTRA TODA LA NOCHE CON TAKADIASTASA® PARA HIDROLIZAR EL ALMIDÓN

SE EXTRAEN LOS POLISACÁRIDOS SOLUBLES CON AGUA CALIENTE (FIBRA SOLUBLE)

Page 60: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODO DE SOUTHGATEPROCEDIMIENTO

SE CENTRIFUGA LA MUESTRA PARA PRECIPITAR LA FIBRA INSOLUBLE (FRACCIÓN I)

SE AÑADEN 4 VOLÚMENES DE ETANOL AL SOBRENADANTE

SE CENTRIFUGA LA MUESTRA PARA PRECIPITAR LAS FIBRAS SOLUBLES (FRACCIÓN II)

Page 61: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODO DE SOUTHGATEPROCEDIMIENTO

SE HIDROLIZAN LA FRACCIÓN I Y LA FRACCIÓN II CON H2SO4 DURANTE 2.5 HORAS A 100°C

SE CENTRIFUGA LA FRACCIÓN I

SE LAVA EL SEDIMENTO DE LA FRACCIÓN I CON ETANOL AL 50% Y SE COMBINA ESTE LAVADO CON ETANOL CON EL SOBRENADANTE DE LAFRACCIÓN I

Page 62: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODO DE SOUTHGATEPROCEDIMIENTO

SE HIDROLIZA LA CELULOSA DEL SEDIMENTO DE LA FRACCIÓN I CON H2SO4 POR 24 HORAS A 0-4°C

SE FILTRA EL HIDROLIZADO ÁCIDO

SE LAVA EL SEDIMENTO DEL FILTRO CON AGUA

SE SECA LA MUESTRA Y SE PESA

SE INCINERA EL RESIDUO

Page 63: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODO DE SOUTHGATEPROCEDIMIENTO

LA PÉRDIDA DE PESO SE DENOMINA LIGNINA DE KLASON

SE MIDEN MEDIANTE COLORIMETRÍA LAS HEXOSAS, PENTOSAS Y ÁCIDOS URÓNICOS DE LOS HIDROLIZADOS ÁCIDOS 1N DE LAS FRACCIONES I Y II ASÍ COMO LAS HEXOSAS Y PENTOSAS DE LOS HIDROLIZADOS DE H2SO4 AL 72%.

Page 64: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODO DE SOUTHGATE CÁLCULOS

FIBRA = SUMA DE AZÚCARES + PESO DE LA LIGNINA

Page 65: Determinacion de fibra en alimentos

MODIFICACIONES AL MÉTODO DE SOUTHGATE

MÉTODO DE ENGLYST-CUMMINGS

FUNDAMENTO

EL ALMIDÓN ES GELATINIZADO Y DIGERIDO ENZIMÁTICAMENTE.

LOS POLISACÁRIDOS QUE NO SON ALMIDÓN RESTANTES SE HIDROLIZAN CON ÁCIDO SULFÚRICO PARA LIBERAR A LOS MONOSACÁRIDOS LIBRES

Page 66: Determinacion de fibra en alimentos

MÉTODO DE ENGLYST-CUMMINGS

FUNDAMENTO

LOS AZÚCARES NEUTROS SON DETERMINADOS POR CG Y LOS ÁCIDOS URÓNICOS SON DETERMINADOS COLORIMÉTRICAMENTE.

LOS VALORES DE LA FIBRA TOTAL, SOLUBLE E INSOLUBLE SE PUEDEN DETERMINAR COLORIMÉTRICAMENTE O POR CROMATOGRAFÍA.

ESTE MÉTODO PERMITE LA DETERMINACIÓN DE ALMIDÓN RESISTENTE.

Page 67: Determinacion de fibra en alimentos

APROXIMACIÓN PORTHEANDER-MARLETT

LOS ASPECTOS RELEVANTES DE ESTE MÉTODO SON:

1. EXTRACCIÓN DE LOS AZÚCARES LIBRES DE LA MUESTRA EN LOS PRIMEROS PASOS DEL ANÁLISIS.

2. LA CUANTIFICACIÓN DIRECTA DE LA LIGNINA.

Page 68: Determinacion de fibra en alimentos

APROXIMACIÓN PORTHEANDER-MARLETT

FUNDAMENTO

LOS AZÚCARES LIBRES Y LÍPIDOS SON EXTRAÍDOS CON ETANOL Y HEXANO.

EL ALMIDÓN ES ELIMINADO MEDIANTE UNA DIGESTIÓN ENZIMÁTICA Y LA FIBRA INSOLUBLE ES SEPARADA DE LA FIBRA SOLUBLE.

Page 69: Determinacion de fibra en alimentos

APROXIMACIÓN PORTHEANDER-MARLETT

FUNDAMENTO

LAS FRACCIONES DE FIBRA SON HIDROLIZADAS CON ÁCIDO SULFÚRICO Y SE DETERMINA EL CONTENIDO DE AZÚCAR DE LOS HIDROLIZADOS ÁCIDOS.

SE DETERMINA LA LIGNINA GRAVIMÉTRICAMENTE.

Page 70: Determinacion de fibra en alimentos

APROXIMACIÓN PORTHEANDER-MARLETT

CÁLCULOS

FIBRA = MONOSACÁRIDOS + LIGNINA

Page 71: Determinacion de fibra en alimentos

DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS

CONSIDERACIONES GENERALES

Page 72: Determinacion de fibra en alimentos

CARBOHIDRATOS

SON LOS COMPONENTES MÁS ABUNDANTES Y AMPLIAMENTE DISTRIBUIDOS EN LA NATURALEZA.

SON UN GRUPO MUY HETEROGÉNEO CON RESPECTO A ESTRUCTURA Y PROPIEDADES FÍSICAS

Page 73: Determinacion de fibra en alimentos

CARBOHIDRATOS

ESTAS MOLÉCULAS OCURREN EN DONDE QUIERA QUE SE COMBINEN EL DIÓXIDO DE CARBONO Y EL AIRE EN LAS HOJAS DE LAS PLANTAS Y EN PRESENCIA DE AGUA.

LA MULTITUD DE FUNCIONES DE LOS CARBOHIDRATOS EN LA NATURALEZA ES NOTABLE.

Page 74: Determinacion de fibra en alimentos

CARBOHIDRATOS

LOS CARBOHIDRATOS JUEGAN UN PAPEL IMPORTANTE EN LA NUTRICIÓN HUMANA COMO RESERVAS DE ENERGÍA.

EN LA NATURALEZA ESTOS COMPUESTOS JUEGAN SÓLO UN PAPEL PEQUEÑO COMO ALMACÉNES DE ENERGÍA DEBIDO A SU EXCELENTE SOLUBILIDAD EN AGUA QUE RESULTA EN LA INHABILIDAD DE ENRIQUECER SU CONCENTRACIÓN EN LAS PLANTAS.

Page 75: Determinacion de fibra en alimentos

CARBOHIDRATOS

OTRA DE SUS FUNCIONES EN LA NATURALEZA ES LA DE TRANSPORTAR SUBSTANCIAS .

EXISTEN MUCHAS SUBSTANCIAS AUXILIARES EN COMBINACIÓN CON LOS CARBOHIDRATOS, LLAMADAS GLUCOCONJUGADOS.

Page 76: Determinacion de fibra en alimentos

FUNCIÓN DE LOS GLUCOCONJUGADOS MEJORAN LA SOLUBILIDAD DE

SUBSTANCIAS QUE NO PODRÍAN ATRAVESAR LAS MEMBRANAS CELULARES QUE CONSTITUYEN BARRERAS NATURALES.

LOS MECANISMOS DE RECONOCIMIENTO ENTRE LAS CÉLULAS SE APOYAN TAMBIÉN EN LOS CARBOHIDRATOS DE LA SUPERFICIE CELULAR.

Page 77: Determinacion de fibra en alimentos

FUNCIONES DE LOS GLUCOCONJUGADOS

LAS ESTRUCTURAS CON CONTENIDO DE GLUCOCONJUGADOS EMBEBIDOS EN MEMBRANAS CELULARES COMO LAS GLUCOPROTEÍNAS Y LOS GLUCOLÍPIDOS SON RESPONSABLES DE INTERACCIONES ESPECÍFICAS CON OTRAS SUPERFICIES CELULARES

Page 78: Determinacion de fibra en alimentos

CLASIFICACIÓN DE LOS CARBOHIDRATOS

MONOSACÁRIDOS (LLAMADOS TAMBIÉN AZÚCARES SIMPLES)

OLIGOSACÁRIDOS

POLISACÁRIDOS

Page 79: Determinacion de fibra en alimentos

MONOSACÁRIDOS

COMPUESTOS SOLUBLES EN AGUA, CRISTALINOS.

GENERALMENTE ALDEHÍDOS O CETONAS ALIFÁTICOS QUE CONTIENEN UN GRUPO CARBONILO Y UNO O MÁS GRUPOS HIDROXILO:

POLIHIDROXIALDHEÍDOS, CETONAS, ÁCIDOS, ALCOHOLES, AMINAS Y SUS DERIVADOS SIMPLES.

Page 80: Determinacion de fibra en alimentos

PROPIEDADES DE LOS MONOSACÁRIDOS

LOS CENTROS REACTIVOS DE ESTOS COMPUESTOS SON LOS GRUPOS CARBONILO E HIDROXILO.

LOS CARBOHIDRATOS QUE REDUCEN LOS REACTIVOS DE FEHLING O BENEDICT O TOLLEN SE CONOCEN COMO AZÚCARES REDUCTORES.

Page 81: Determinacion de fibra en alimentos

AZÚCARES REDUCTORES

CUANDO UN AZÚCAR REDUCTOR ES DISUELTO EN AGUA SE OBTIENE UNA SOLUCIÓN QUE PUEDE CONTENER HASTA 6 COMPUESTOS:

LAS DOS PIRANOSAS, LAS DOS FURANOSAS Y LA FORMA CARBONIL ACÍCLICA (CADENA ABIERTA) Y SU HIDRATO.

A ESTAS FORMAS SE LES CONOCE COMO FORMAS TAUTOMÈRICAS

Page 82: Determinacion de fibra en alimentos

AZÚCARES REDUCTORES

SON AZÚCARES QUE CONTIENEN UN GRUPO ALDEHÍDO O CETONA LIBRE.

INCLUYEN A TODOS LOS MONOSACÁRIDOS (GLUCOSA, FRUCTOSA) Y A ALGUNOS DISACÁRIDOS (LACTOSA, MALTOSA)

Page 83: Determinacion de fibra en alimentos

AZÚCARES REDUCTORES

BASE DE LAS PRUEBAS DE AZÚCARES REDUCTORES

LOS AZÚCARES REDUCTORES EN SOLUCIONES ALKALINAS REDUCEN RÁPIDO IONES OXIDANTES COMO: Ag++, Hg++, Cu++ y Fe(CN)6

+++. LOS AZÚCARES SON OXIDADOS PARA FORMAR UNA MEZCLA COMPLEJA DE ÁCIDOS.

Page 84: Determinacion de fibra en alimentos

AZÚCARES REDUCTORES

SE ENOLIZAN EN SOLUCIONES ALKALINAS.

LOS ENEDIOLES SE ROMPEN EN LAS DOBLES LIGADURAS PARA PROPORCIONAR UNA MEZCLA COMPLEJA DE PRODUCTOS, QUE AUMENTA ENORMEMENTE LA EFECTIVIDAD DEL PODER REDUCTOR DE UN AZÚCAR

Page 85: Determinacion de fibra en alimentos

MONOSACÁRIDOS MÁS IMPORTANTES

HEXOSAS D-glucosa (TAMBIÉN LLAMADA

DEXTROSA) D-fructosa (TAMBIÉN LLAMADA

LEVULOSA) D-galactosa D-manosa D-ribosa

Page 86: Determinacion de fibra en alimentos

OLIGOSACÁRIDOS

OLIGOS = UNOS CUANTOS

TIENEN PESO MOLECULAR RELATIVAMENTE BAJO (340-1600 daltons)

PRODUCEN MONOSACÁRIDOS POR HIDRÓLISIS. ESTOS ESTÁN LIGADOS POR ENLACES GLUCOSÍDICOS CON PÉRDIDA DE AGUA.

Page 87: Determinacion de fibra en alimentos

OLIGOSACÁRIDOS

LA CONVENSIÓN ESTÁNDAR PARA EL NÚMERO DE UNIDADES DE MONÓMEROS QUE CONSTITUYEN UN OLIGOSACÁRIDO ES DE 10.

LOS OLIGOSACÁRIDOS CONSTITUIDOS POR DOS UNIDADES DE MONÓMERO SON LLAMADOS DISACÁRIDOS

Page 88: Determinacion de fibra en alimentos

OLIGOSACÁRIDOS

LOS OLIGOSACÁRIDOS CONSTITUIDOS POR DOS UNIDADES DE MONÓMERO SON LLAMADOS DISACÁRIDOS

LOS OLIGOSACÁRIDOS CONSTITUIDOS POR DOS UNIDADES DE MONÓMERO SON LLAMADOS TRISACÁRIDOS, ETC.

Page 89: Determinacion de fibra en alimentos

OLIGOSACÁRIDOS

LOS OLIGOSACÁRIDOS OCURREN DE MANERA NATURAL EN LAS PLANTAS, ANIMALES Y MICROORGANISMOS.

ESTOS COMPUESTOS SE PUEDEN SITENTIZAR ENZIMÁTICAMENTE O POR HIDRÓLISIS ÁCIDA

Page 90: Determinacion de fibra en alimentos

LOS OLIGOSACÁRIDOS MÁS IMPORTANTES

LOS OLIGOSACÁRIDOS CONSTITUIDOS POR UNIDADES DE:

D-glucosa D-fructosa D-galactosa

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LOS OLIGOSACÁRIDOS MÁS IMPORTANTES EL MÁS IMPORTANTE ES: SACAROSA, UN DISACÁRIDO NO

REDUCTOR. LACTOSA MALTOSA ISOMALTOSA RAFINOSA VARBASCOSA MALTRIOSA

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POLISACÁRIDOS

LA MAYORÍA DE LOS CARBOHIDRATOS QUE SE ENCUENTRAN EN LA NATURALEZA OCURREN COMO POLISACÁRIDOS.

TIENEN UN ALTO PESO MOLECULAR (HASTA 420 MILLONES DE DALTONS).

SON POLÍMEROS QUE PRODUCEN MONOSACÁRIDOS MEDIANTE LA HIDRÓLISIS ÁCIDA O ENZIMÁTICA ESPECÍFICA.

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NOMENCLATURA DE LOS POLISACÁRIDOS LOS POLISACÁRIDOS QUE TIENEN

MONÓMEROS DE CARBOHIDRATOS IDÉNTICOS SE LLAMAN HOMOPOLISACÁRIDOS (U HOMOGLICANOS).

LOS POLISACÁRIDOS QUE ESTÁN COMPUESTOS DE MÁS DE UN TIPO DE MONÒMERO SON LLAMADOS HETEROPOLISACÁRIDOS.

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HOMOPOLISACÁRIDOS MÁS IMPORTANTES

LOS MÁS IMPORTANTES SON LOS QUE CONTIENEN D-glucosa E INCLUYEN :

ALMIDÓN GLUCÓGENO CELULOSA DEXTRINAS

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HETEROPOLISACÁRIDOS MÁS IMPORTANTES PECTINA (COMPUESTA DE ÁCIDO D-

galacturónico, SU METIL ÉSTER, AZÚCARES NEUTROS, ETC.).

HEMICELULOSA (COMPUESTA DE AL MENOS SEIS MONÓMEROS DIFERENTES).

NUMEROSAS GOMAS VEGETALES Y MICROBIANAS

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CONTENIDO DE CARBOHIDRATOS EN DIVERSOS TIPOS DE ALIMENTOS

PRODUCTOS LÁCTEOS:

YOGOURTH 5.6%

LECHE (EN GENERAL) 4.78%

ALMIDÓN (DE PAPA) 83.1%

Page 97: Determinacion de fibra en alimentos

CONTENIDO DE CARBOHIDRATOS EN DIVERSOS TIPOS DE ALIMENTOS

VEGETALES

PAPA 15.4%

ZANAHORIA 3.59%

BRÓCOLI 2.3%

TOMATE 3.63%

Page 98: Determinacion de fibra en alimentos

CONTENIDO DE CARBOHIDRATOS EN DIVERSOS TIPOS DE ALIMENTOS

FRUTAS

MANZANA 12.39%

UVA 16.11%

NARANJA 9.19

CEREZA 13.3%

Page 99: Determinacion de fibra en alimentos

CONTENIDO DE CARBOHIDRATOS EN DIVERSOS TIPOS DE ALIMENTOS

MIEL 75.1%

CERVEZA (LIGERA) 2.9%

Page 100: Determinacion de fibra en alimentos

IMPORTANCIA DE LAS DETERMINACIONES DE CARBOHIDRATOS

EL ANÁLISIS DE MATERIA PRIMA Y ALIMENTOS PROCESADOS SE PUEDE UTILIZAR PARA PROPORCIONAR MUCHA INFORMACIÓN IMPORTANTE.

PUEDEN SER INDICATIVOS DE ADULTERACIÓN DE LOS ALIMENTOS.

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IMPORTANCIA DE LAS DETERMINACIONES DE CARBOHIDRATOS

SE PUEDE DETERMINAR SI EL ALIMENTO HA SIDO IRRADIADO.

EL PRINCIPAL COMPONENTE DE LOS ALIMENTOS MOSTRADOS, DESPUÉS DEL AGUA SON LOS CARBOHIDRATOS.

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