026 - cambios hematologicos en pacientes positivos a ehrlichiosis canina en la ciudad de lazaro...

XXII ENCUENTRO DE INVESTIGACION

VETERINARIA Y PRODUCCIN ANIMAL

TRABAJOS DE CLINICA

VETERINARIA

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UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SAN NICOLAS DE HIDALGO

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

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CAMBIOS HEMATOLOGICOS EN PACIENTES POSITIVOS A EHRLICHIOSIS CANINA EN LA CIUDAD DE LZARO CRDENAS MICHOACN

Romero-Blancas-V.H.*, Padilla-Arellanes-S., Alvarado-Enrquez-N.L.A.

Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Clnica Veterinaria para Perros y Gatos de la UMSNH-FMVZ

Correo electrnico: [email protected]

RESUMEN

La ehrlichiosis canina es una enfermad producida por una bacteria intracelular gramnegativa cocoide pleomrfica la cual se presenta en forma intracitoplsmica en grupos de organismos llamados mrulas, este agente infecta a los monocitos de los perros y es transmitida por la garrapata Rhipicephalus sanguineus la cual no es considerada como reservorio. El objetivo de este trabajo fue obtener la prevalencia general de perros que presentaran anticuerpos contra E.canis (positivos a la prueba de ELISA) en la ciudad de Lzaro Crdenas, as como identificar las alteraciones hematolgicas ms frecuentes de dichos pacientes para describir los cambios hematolgicos durante la fase subclnica de la enfermedad. Los perros muestreados no deberan presentar signos clnicos de la enfermedad, adems deberan tener historial infestacin reciente del vector y no debieron ser tratados con antibiticos por los menos en el ltimo mes. Se observ que el 64% de los perros muestreados presentaron ttulos positivos a la enfermedad, y que el 100% de los perros positivos present una o ms alteraciones en el hemograma. Se identific que ningn paciente present pancitopenia y solo un bajo porcentaje present bicitopenias, adems se identific que la alteracin ms frecuente fue la hiperproteinemia y leucocitosis por linfocitosis en su mayora. Se pudo concluir que la prevalencia en zonas donde existe el vector es muy alta y que hay una gran cantidad de perros que no presentan signologa clnica de la enfermedad por lo que dicho estudio proporciona una gua prctica para interpretar alteraciones hematolgicas si en la historia clnica hay historial de infestacin por el vector.

INTRODUCCIN

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La ehrlichiosis canina tambin es conocida como ricketsiosis canina, fiebre hemorrgica canina, enfermedad del perro rastreador, tifus de la garrapata canina, desorden hemorrgico de Nairobi y pancitopenia tropical canina. La distribucin de la ehrlichiosis est relacionada con la distribucin del vector Rhipicephalus Sanguineus, se ha descrito su ocurrencia en cuatro continentes incluyendo Asia, frica, Europa y Amrica. E T I O L O G A Y E P I D E M I O L O G A : La ehrlichiosis monoctica canina es causada por la ricketsia Ehrlichia canis, bacterias intracelulares obligadas gramnegativas, cocoides pleomrficas pequeas (0,5 m de dimetro), transmitidas por garrapatas y que parasitan el citoplasma, principalmente, de los leucocitos (monocitos, macrfagos y granulocitos) circulantes, en grupos de organismos denominados mrulas. Son bacterias aerbicas que no tienen una va glucoltica. E. canis fue identificada por primera vez en Algeria en 1935 (Donatien y Lestoquard). Otras especies de Ehrlichia, pueden infectar a los perros como E. platys, E. equi y E. ewingii, estas ltimas produciran manifestaciones clnicas ms benignas. Se ha agregado a este gnero E. ruminantium, que provoca hidropericardio en ganado de frica.

XXII ENCUENTRO DE INVESTIGACION VETERINARIA Y PRODUCCIN ANIMAL

Coordinacin de la Investigacin Cientfica FMVZ-UMSNH

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En un estudio publicado en Mxico (Nez, 2003) se report la prevalencia de E.canis en dicho pas, donde se observ que un 33.1% de los perros muestreados (n=2,395) resultaron positivos por prueba serolgica de ELISA. Observndose en la regin de Michoacn una prevalencia nula a partir de 13 perros muestreados. Aunque el autor seala que los resultados obtenidos en distintas regiones del pas podan variar ampliamente debido a la diversidad de ecosistemas y de los factores de riesgo a los que se exponen los animales tales como el vector de la enfermedad. La enfermedad es transmitida por la garrapata marrn del gnero Rhipicephalus sanguineus. El modo de transmisin, en la garrapata es transestadial y no transovrica por lo cual este artrpodo no puede ser reservorio de la enfermedad. Se infectan de E. canis como larvas o ninfas al alimentarse de perros con rickettsias y transmiten la infeccin a perros susceptibles durante por lo menos 155 das despus de la infeccin. Esto permite al patgeno sobrevivir al invierno en la garrapata e infectar a perros susceptibles. La mayora de los casos se producen en las estaciones clidas donde aumenta el nmero de garrapatas. P A T O G E N I A Una gran variedad de factores como el tamao de inculo, cepa de Ehrlichia, inmunidad del paciente, enfermedades concomitantes producidas por otros parsitos transmitidos por garrapatas, pueden influir en el curso y el resultado de la infeccin. No hay predileccin de edad y sexo en esta enfermedad, sin embargo parece que los Pastores Alemanes son ms susceptibles. El perro se infecta por la picadura de una garrapata que al alimentarse inyecta en el lugar secreciones salivares contaminadas con Ehrlichia canis o en forma iatrognica por medio de transfusiones sanguneas de un perro infectado a otro susceptible. La patognesis de la ehrlichiosis canina incluye un perodo de incubacin de 8 a 20 das, seguido de una fase aguda, subclnica y a veces crnica. Durante la fase aguda, el parsito ingresa al torrente sanguneo y linftico y se localiza en los macrfagos del sistema retculo-endotelial del bazo, hgado y ganglios linfticos, donde se replica por fisin binaria. Desde all, las clulas mononucleares infectadas, diseminan a las ricketsias hacia otros rganos del cuerpo. La fase aguda puede durar entre 2 y 4 semanas. Los perros mal tratados o no tratados pueden desarrollar posteriormente una fase subclnica que aunque sin signos clnicos de la enfermedad mantiene recuentos bajos de plaquetas. Estos pacientes se transforman en portadores sanos por un perodo que puede llegar hasta los 3 aos. Durante el curso de la enfermedad, ocurren recombinaciones repetidas en los genes antignicos proteicos principales de la membrana externa de ehrlichias, que conduce a la generacin de variaciones en eptopes inmunognicos y permite que los microorganismos evadan los mecanismos de defensa del husped y den como resultado infecciones persistentes.En los pacientes con fase crnica de la enfermedad, en su forma ms grave, el cuadro se caracteriza por la reduccin de la produccin de elementos sanguneos de la mdula sea. Diferentes mecanismos inmunolgicos intervienen en la patognesis de la enfermedad, entre los da 4 y 7 posteriores a la infeccin aparece IgM e IgA y la IgG aumenta a partir del da 15, esta respuesta humoral tiene un efecto mnimo en la eliminacin del organismo intracelular y no proporcionan proteccin ante una nueva infeccin, en cambio produce efectos perjudiciales en el progreso de la enfermedad debido a las consecuencias inmunopatolgicas. Esto se evidencia por pruebas de Coombs y de autoaglutinacin positivas en animales infectados y la demostracin de anticuerpos antiplaquetas (APA), lo cual parece ser una de las causas de la trombocitopenia o trombocitopata. (Warner et al. 1997) C O - I N F E C C I N Otras enfermedades transmitidas por garrapatas pueden presentarse en forma conjunta con E. canis. Se han encontrado perros con ehrlichiosis que presentaron infecciones concomitantes con Bartonella spp. y Babesia spp. Cuando se demuestra en los frotis sanguneos la existencia de otros parsitos transmitidos por Rhipicephalus sanguineus, como Hepatozoon canis o Babesia canis, la co-infeccion con Ehrlichia spp. debe ser



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considerada. Infecciones concurrentes de E. canis con Borrelia burgdorferi o Leishmania donovani han sido documentadas as como con Dirofilaria immitis entre otras, indicando la posibilidad de co-infecciones con otros parsitos, que no son transmitidos por la garrapata marrn del perro. SIGNOLOGA CLNICA Se han descrito una gran variacin de signos clnicos y esto puede ser debido a muchos factores, incluyendo diferencias en la patogenicidad entre las cepas de Ehrlichia, raza de perros, infecciones concomitantes con otras enfermedades transmitidas por garrapatas y el estado inmunitario del perro. En la fase aguda, que puede durar ente 1 y 2 semanas los signos pueden incluir: depresin, letargia, anorexia, fiebre, linfoadenomegalia, esplenomegalia y prdida moderada de peso. Los perros pueden presentar tendencia al sangrado, petequias y esquimosis en la piel y membranas mucosas, y ocasionalmente epistaxis. Los signos oculares son frecuentes e incluyen uvetis, hipema, tortuosidad de vasos retinales y lesiones corio-retinales focales. Puede haber desprendimiento de retina y ceguera debido a hemorragias subretinales. Se pueden presentar otro signos clnicos como vmitos, descarga oculonasal serosa a purulenta, claudicacin, ataxia y disnea. Los signos clnicos ms comunes en la enfermedad crnica son debilidad, depresin, anorexia, prdida crnica de peso, palidez de mucosas, fiebre y edema perifrico, especialmente en miembros posteriores y escroto. Sangrado por trombopata, como petequias y esquimosis drmicas y de membranas mucosas y epistaxis son hallazgos frecuentes. Con muerte del paciente por las infecciones bacterianas secundarias o hemorragias incontrolables. Los signos neurolgicos pueden ocurrir tanto en la enfermedad aguda como crnica, estos ser deben a hemorragias, infiltracin celular extensa y compresin perivascular de las meninges. Pueden aparecer signos neuromusculares generalizados como polimiositis con tetraparesia progresiva de aparicin aguda, hiporeflexia y consuncin muscular. Es posible que los perros con ehrlichiosis presenten claudicaciones con andar endurecido por la poliartropata, la cual puede ser producida por hemorragias en la articulacin o por deposicin de complejos inmunes con artritis como resultado y efusin neutroflica en la articulacin. La trombocitopenia es el hallazgo hematolgico ms comn, tambin leucopenia y anemia moderada (normoctica, normocrmica, no regenerativa). Las principales anormalidades bioqumicas vistas en los perros infectados son la hipoalbuminemia, hiperglobulinemia e hipergamaglobulinemia. Un aumento transitorio moderado en la actividad de la aminotransferasa y de la fosfatasa alcalina pude presentarse. D I A G N S T I C O El diagnstico de la enfermedad se basa en la anamnesis, presentacin clnica, hallazgos patolgicos al examen clnico y se confirma con las pruebas de laboratorio. Los cambios hematolgicos que pueden encontrarse son: trombocitopenias, anemia, por lo general, no regenerativas, y leucopenias. Tambin pueden observase la hiperglobulinemia. Puede confirmarse la infeccin por la visualizacin de las mrulas en los monocitos en frotis sanguneos o aspirados de bazo teidos con Giemsa, pero solo aparecen en el 4% de las pacientes enfermos por lo cual no debe ser el mtodo de eleccin. Se puede ampliar la sensibilidad de esta tcnica mediante la realizacin de frotis de capa flogstica o frotis de sangre obtenida de capitales del margen de pabelln auricular. Actualmente, la prueba de inmunofluorescencia indirecta de anticuerpos (IFA) usando antgenos de E. canis es el test serolgico de diagnstico ms aceptable. Pueden detectar enfermos a partir de los 7 das despus de la infeccin inicial, a pesar de que es posible que algunos perros no se tornen seropositivos hasta los 28 das despus de la infeccin inicial, con lo cual luego de un diagnostico negativo deben repetirse el examen a la 2 o 3 semanas. Despus del tratamiento los anticuerpos declinan gradualmente y se tornan negativos entre los 6 y los 9 meses, aunque algunos perros mantienen los niveles de anticuerpos altos de por vida, sin



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saber si el microorganismo persiste en el organismo por lo que se supone que el paciente se ha recuperado de la infeccin cuando resuelve la trombocitopenia, la hiperglobulinemia y otras anormalidades clnicas y de laboratorio de forma progresiva. Otros mtodos, usados principalmente en investigacin, son cultivos sanguneos para evaluar el crecimiento del parsito, que puede tardar hasta 8 semanas en mostrar crecimiento, PCR puede utilizarse para la deteccin de E. canis dentro de los 4 a 10 das posinoculacin y Western inmunobloting. El diagnstico de la enfermedad subclnica es un desafo para el clnico. (Greene et al. 2008) P R O F I L A X I S El control de las garrapatas es la medida de prevencin ms eficaz contra la infeccin de E. canis. En las perreras deben realizarse test serolgicos y control de garrapatas antes de ingresar a los perros a la misma. Los perros de regiones endmicas y aquellos que viajan hacia o desde reas endmicas deben ser considerados como candidatos potenciales a enfermarse. La enfermedad no deja proteccin por lo que un paciente curado de ehrlichiosis puede volver a infectarse, sobre todo cuando viven a ambientes endmicos. (Harrus et al. 1998)

OBJETIVOS

Determinar la prevalencia de E.canis por mtodo de ELISA en perros parasitados con garrapatas de la ciudad de Lzaro Crdenas, Michoacn.

Categorizar por raza, sexo y edad a los perros positivos a E.canis. Categorizar valores hematolgicos en alto, normal o bajo con respecto a los

intervalos de referencia del hemograma en los perros positivos a E.canis. Correlacionar los resultados con lo reportado en la literatura actual.

HIPTESIS

Los perros con ehrlichiosis crnica presentan anemia, trombocitopenia y leucopenia por aplasia medular.

MATERIALES Y MTODOS

El estudio se llev a cabo en el periodo comprendido entre los meses de Febrero a Junio de 2011, en la ciudad de Lzaro Crdenas, Michoacn, Mxico, ubicado al sur de este estado, justo en la frontera con el estado de Guerrero, que est delimitada por el Ro Balsas, adems colinda con el ocano Pacfico; se encuentra en las coordenadas 1757!22"N 10211!32"O a una altitud de 10 metros sobre el nivel del mar. Cuenta con una poblacin de 178,817 habitantes hasta el 2010 segn el INEGI. Su clima es tropical con lluvias en verano. Tiene una precipitacin pluvial anual de 1,276.8 milmetros y una temperatura media anual de 27,8 C. Su ecosistema consiste en bosque tropical deciduo y su flora nativa consiste en papaya, zapote, mango, tepeguaje, congolote, parota y ceiba, palma, coco, anona, coyol, enandi y curamo. Adems dentro de la fauna endmica de esta regin consta de armadillo, cacomixtle, zorro, tlacuache, venado, coyote, nutria, ocelote, jabal, pato, cerceta, faisn, adems de muchas otras especies marinas. (Gobierno del estado 2011; INEGI 2011).



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Como se muestra en la figura 4.1, se localiza la regin, as como la distribucin de toma de muestreo para la realizacin de este estudio, para lo cual fueron seleccionadas 7 zonas urbanas en la entidad antes descrita, en las cuales se obtuvieron por zona en promedio 4 a 7 muestras de sangre perifrica venosa por venopuncin (vena ceflica o safena) de perros (Canis familiaris) conforme a la NOM-062-ZOO-1999 y cuyos propietarios refirieron haber estado expuestos dentro de los 3 ltimos meses al vector de la enfermedad en estudio, en este caso la garrapata Rhipicephalus sanguineus o en su defecto que fueran portadores del mismo al momento de la revisin, y que no tuvieran signos clnicos de la enfermedad, adems stos no deberan haber sido tratados recientemente (durante el ltimo mes) con antibiticos. Si cumplan con los requisitos se proceda a tomar la muestra de sangre con una jeringa de 3 ml de capacidad, con aguja hipodrmica, una vez obtenidas las muestras, siendo una cantidad mnima de muestreo 1 ml. de sangre, se depositaron de forma inmediata (previo retiro de la aguja para evitar la hemlisis) en tubos con cido etildiaminotetractico (EDTA) para impedir la coagulacin de la sangre, posteriormente se mezclaron suavemente y se dejaron reposar por 30 min, enseguida se colocaron en una hielera con refrigerante a una temperatura de 2 - 4 C donde fueron transportadas a la ciudad de Morelia, Michoacn; esto debido a que en el lugar donde se realiz el presente trabajo no hay algn lugar que brinde el servicio de estudios de laboratorio especializado en animales ni hay personal capacitado para su procesamiento. Una vez llevadas a dicha ciudad se realizaron las pruebas de ELISA consistente en un kit de diagnstico llamado Canine Snap 4Dx (IDEXX) para detectar anticuerpos contra Ehrlichia canis; dicha prueba es cualitativa y presenta una sensibilidad del 97% (aunque dependiendo de la cantidad de ttulos puede verse mas fuerte la reaccin de coloracin durante el procedimiento, o muy tenue si la reaccin de aglutinacin fuera moderada en caso de haber pocos ttulos). El procedimiento para realizarla consisti en (ver figura 4.2):

1. Se dej que la muestra alcanzara la temperatura ambiente aproximadamente durante 30 minutos, pues estas haban sido refrigeradas (no se calentaron como se indica en las instrucciones del kit).

2. Se tom con una pipeta (incluida en el kit) 3 gotas de la muestra y se colocaron en un tubo de ensayo nuevo.

3. Se agreg 4 gotas del conjugado (solucin incluida en el Kit), al mismo tubo de ensayo sosteniendo en posicin vertical.

4. Enseguida se tap el tubo de ensayo y se mezcl a fondo, invirtiendo entre 3 a 5 veces.

5. Se coloc el dispositivo sobre una superficie horizontal, agregando el contenido del tubo de ensayo en el pocillo de muestras del dispositivo. Teniendo cuidado de no verter el contenido fuera de dicho pocillo.

6. Se observara que la muestra fluya por la ventana de resultados, alcanzando el circulo de activacin en aproximadamente entre 30 a 60 segundos. Es posible que quede algn resto de la muestra en el pocillo.

7. En cuanto aparezca el color en el crculo de activacin, presionar el activador con firmeza hasta que quede al ras con el cuerpo del dispositivo.

8. Leer los resultados de la prueba despus de haber transcurrido 8 minutos.

Si la prueba anteriormente descrita se tornaba positiva, se le realizaba un estudio de hemograma convencional para medir los valores de los tres tipos de grupos celulares y poder generar as los datos concernientes a la investigacin, dichos datos se registraron en la bitcora y se recopilaron en una computadora en un programa de hoja de clculo para su procesamiento y anlisis.

RESULTADOS



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En el estudio efectuado se observ que la prevalencia de anticuerpos contra E.canis en Lzaro Crdenas Michoacn fue de 64 % (ver grfica 5.1) (32 de 50 perros), el 16% de los perros muestreados no present ninguna reaccin positiva a E.canis o a alguna de las otras tres enfermedades (Borrelia burdogferi, Dirofilaria immitis, Anaplasma phagocytophilum), el porcentaje restante (20%) present coinfecciones con dichas enfermedades as como presentacin nica de las mismas. La raza que result con mayor porcentaje de pacientes caninos positivos a la prueba fue la criolla (ver grafica 5.2). El 66 % de los perros positivos a E.canis fueron hembras y el 34 % machos (ver grfica 5.3). Los perros de acuerdo al rango de edad ms afectado fueron los que se encontraban entre 4 a 7 aos de edad (grfica 5.4) con un 41%. Se observ que 20 perros positivos a la prueba de ELISA (62%) presentaron infeccin nica de E.canis, el 25% present coinfeccin con Dirofilaria immitis, y el 13% restante present alternancia con infeccin de Anaplasma phagocytophilum y Dirofilaria immitis. Esto fue posible determinarse gracias a que el kit de ELISA tambin detecta anticuerpos y antgenos de estos agentes, dicha prueba tambin detecta anticuerpos contra Borrelia burdogferi (el agente etiolgico de la enfermedad de Lyme) y se obtuvo una prevalencia nula. El 85% de los perros positivos present alguna alteracin hematolgica en el recuento de leucocitos, hematocrito y plaquetas, solo el 15% de los perros no present alteraciones en el recuento general aunque si presentaron alteraciones en los recuentos de linfocitos, eosinfilos, neutrfilos segmentados y en banda. Por lo que se observ que el 100% de los perros positivos a E.canis presentaron una o ms alteraciones hematolgicas. Ninguno de los 32 perros positivos a E.canis present pancitopenia, solo el (3%) present bicitopenia consistente con trombocitopenia y anemia. Se observ que 38% de los perros presentaron anemia, el 19 % trombocitopenia, 47% leucocitosis, 91% Hiperproteinemia, 16% neutropenia, 75% present desviacin a la izquierda, 69% present linfocitosis, 72% eosinofilia y 22 % present basofilia como se muestra en la grfica 5.5. Tambin se pudo observar que del 47 % de perros que presentaron leucocitosis, solo el 40% la present sin ninguna otra alteracin en el hematocrito ni recuento plaquetario, el 33% present leucocitosis en combinacin con anemia, el 19% presento leucocitosis con trombocitopenia, y ningn perro present pancitopenia como ya se haba mencionado.

DISCUSIN

En el presente trabajo se observ que el agente etiolgico de la enfermedad Ehrlichia canis se encuentra ampliamente distribuido como lo refirieron Martin y cols. en el ao 2000 y Nez en el 2003, donde hablan sobre la prevalencia de este agente en el mundo y este ltimo, en Mxico, en dicho estudio la prevalencia fue de 33.1%, y especficamente en el apartado del estado de Michoacn manej una prevalencia nula, aunque Nez lo asocia a un bajo muestreo, y refiri en su estudio que las prevalencias podran variar ampliamente dependiendo de la zona en la que se halla muestreado as como por su ecosistema; es por ello que se puede corroborar con el 64% de prevalencia obtenido en el presente estudio, que aunque ya haba sido muestreado por Nez en 2003, dicho mtodo fue insuficiente para la regin de Michoacn, y no selectivo hacia regiones endmicas de la enfermedad en el mismo estado como lo son las zonas clidas y tropicales donde abunda el vector. Aunque este estudio solo se posicion en una regin especfica de la Costa del estado, se contrast altamente la diferencia en prevalencia entre zonas pertenecientes a la misma regin. Tambin se denot que hay una alta relacin con la prevalencia de ttulos de anticuerpos contra E.canis y la existencia de historial de infestacin previa con el vector (la garrapata Rhipicephalus sanguineus) como lo mencion Johnson y cols. en 1998. Aunque en este estudio no se contabiliz estadsticamente.

Durante los muestreos se corrobor mediante un cuestionamiento verbal y un examen fsico que los perros muestreados no presentaran signologia clnica de la enfermedad, de lo contrario no eran muestreados, esto porque se dese estudiar pacientes en fase subclnica,



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debido al enfoque de relevancia que se le dio al estudio, puesto que la fase clnica de la enfermedad ya ha sido descrita ampliamente como se muestra en la introduccin de este trabajo.

Dichos conteos de prevalencia se pueden asociar en gran medida a infecciones con curso subclnico o crnico, pues a pesar de que son pacientes clnicamente sanos absolutamente el 100% present alteraciones hematolgicas en el recuento de alguna de sus lneas celulares; aunque en un estudio reportado por Hoskins y cols. en 1988 se detectaron ttulos persistentes a ehrlichiosis en perreras saludables con una prevalencia del 20.3%.

Warner y cols. en 1996, refirieron que en los perros no tratados es posible que ingresen a la fase subclnica por lo que no se observa signologia y los perros se normalizan clnicamente pero tambin comentaron que es posible que los niveles de plaquetas permanezcan en niveles inferiores a los rangos de referencia, en este estudio se observ que solo el 19% de los perros positivos a la prueba de ELISA presentaron trombocitopenia. Harrus y cols. en 1998 comentaron que los perros que se encuentran en la fase subclnica pueden ser portadores persistentes en potencia durante aos como lo demostraron en su estudio de seguimiento a 3 aos, por lo que se valida el hecho de que pacientes que no tenan garrapatas al momento del estudio, presentaban ttulos de anticuerpos contra E.canis lo que los asocia a pacientes con infeccin persistente del agente sin signologia aparente. Cabe sealar que ninguno de los perros muestreados presentaba signos clnicos de la enfermedad, por lo que se asume que los ttulos de anticuerpos que presentaban eran por infeccin subclnica, crnica, o en su defecto haban resuelto sin tratamiento la enfermedad clnica. Se puede considerar que aunque las pruebas de ELISA como el Kit Snap 4DX presentan una sensibilidad del 97% resultaron positivas a anticuerpos contra E.canis no significa que los individuos porten la bacteria, si se ha asociado altamente los ttulos altos con las alteraciones hematolgicas a la persistencia de la ehrlichia misma en las clulas del hospedero como lo report Bartsch y cols. en 1996. Aunque mencionaron su dificultad para comprobar su persistencia en el organismo.

En el estudio se observ una mayor prevalencia en perros de sexo hembra y con edad de 4 a 7 aos, aunque Nyindo y cols. sealaron en 1991 que no existe predileccin de edad ni sexo para la enfermedad; se denot que la raza que present ms casos positivos fue la criolla, tambin Nyindo y cols sealaron en 1991 que hay una susceptibilidad a la raza Pastor alemn de la cual en este estudio no se obtuvo una muestra representativa, cabe sealar que este resultado pudo verse afectado ya que la raza criolla fue la predominante durante el muestreo.

Se pudo observar que las alteraciones hematolgicas mas presentadas fueron la hiperproteinemia (91%) la cual Harrus y cols. en 1997 la describieron ampliamente y lo han asociado a que la enfermedad produce gamapatas policlonales y la cual debe diferenciarse de leucemia linfoctica de y mieloma. Tambin los perros muestreados presentaron anemia, neutropenia, trombocitopenia, como lo han descrito Warner y cols. en el ao 1999 las cuales las han descrito en todas las fases de la enfermedad; adems en el presente estudio se encontr que los perros positivos a anticuerpos contra E.canis presentaron leucocitosis, desviacin a la izquierda, linfocitosis, eosinofilia, y basofilia lo cual se asocia ampliamente a la persistencia de E.canis en los perros como lo mencionaron Willard y cols. pero tambin se puede asociar a coinfecciones con otras enfermedades como Anaplasma phagocytophilum, y sobre todo la eosinofilia a la infestacin con Dirofilaria immitis, inclusive dichos autores refirieron la asociacin de estas alteraciones a la infestacin por parsitos como las garrapatas, aunque tambin se puede asociar a alrgenos o degradacin tisular. Adems pueden presentarse infecciones oportunistas por otros protozoos, hongos y bacterias como tambin lo mencionaron Dubey y cols. en el ao 2003. As mismo en este estudio se describe que solo el 40% de los perros positivos presentaron leucocitosis como nica alteracin, que el 33 % present leucocitosis en conjunto con anemia, y 19%



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leucocitosis con trombocitopenia, lo cual se puede asociar a la infeccin crnica de la enfermedad y a sus coinfecciones con otros agentes como se mencion anteriormente.

Greene y cols. en 2008 describieron que los pacientes con infeccin E.canis presentan linfocitosis granular por presencia de grnulos azorfilos, la cual se confunde con leucemia linfoctica bien diferenciada en algunos perros; en el presente trabajo, si se pudo observar en algunos pocos casos este tipo de linfocitos. Murphy y cols. en 1998, mencionaron la posibilidad de realizar el diagnstico definitivo de la Ehrlichia canis por medio de frotis de sangre con la identificacin de mrulas en leucocitos, mencionaron que es ms sencillo realizar la identificacin de frotis de sangre del lecho capilar del pabelln auricular; aunque en dicho trabajo se realizaron los frotis de sangre de vena ceflica o safena no se pudieron identificar estos hallazgos en los frotis de perros positivos anticuerpos contra E.canis debido a que los frotis eran delgados y de sangre perifrica como ya se mencion.

CONCLUSIONES

Al finalizar el presente trabajo se puede concluir que tiene relevancia clnica, ya que proporciona una herramienta muy til al momento de interpretar anlisis de laboratorio como lo es el hemograma en pacientes que han estado expuestos a ectoparsitos endmicos de la regin de la costa michoacana como es el caso de la garrapata Rhipicephalus sanguineus, la cual transmite el agente etiolgico E.canis, sobre todo cuando se trata de pacientes clnicamente sanos, que se les podra realizar por ejemplo dicho estudio de laboratorio preoperatoriamente, en los que lo nico que observaramos durante el examen fsico es la infestacin por este artrpodo, o que en la historia clnica se nos refiera que ha presentado dicha infestacin. Por lo que nos servira de referencia para observar los valores normales que podemos encontrar, sin perdernos tanto en buscar la etiologa de dichas alteraciones, es decir, nos proporciona una gua prctica para deducir un diagnstico ms certero y poder as elegir si procedemos a un tratamiento especfico dependiendo de cada paciente y las alteraciones que presente.

Otra cuestin importante es que en la regin donde se realiz el estudio, de manera casi nula se envan muestras de sangre para su anlisis como el caso de un hemograma o una bioqumica sangunea, ya que en esta zona, no se tiene acceso a lugares donde se realice de manera cotidiana dicho procedimiento en animales, ni gente capacitada para realizarlo, y es del inters del sustentante de este trabajo, crear una base de datos til, practica y de fcil acceso que permita valorar a los pacientes en el ambiente de la regin, ya que est bien documentado que los individuos presentan ajustes en los valores hematolgicos dependiendo de cada zona, de su entorno, clima, humedad, altitud y de las interacciones que tenga cada uno con dicho medio. Lo que permitira brindar un servicio completo y de calidad a las mascotas y sus propietarios.

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148

ANEXOS

Figura 4.1 Mapa de localizacin y distribucin del estudio.

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149

Figura 4.2 Mtodo para realizar prueba de ELISA

Grfica 5.1 Prevalencia de anticuerpos contra E.canis en perros muestreados en la ciudad de Lzaro Crdenas Michoacn. (n=50)

2&!#3'&3#!4#!)#.3'&!#4!0/5(!+&!&.)#6(! 2&!#3'&3#!4#!)(4/7,8.!#4!0/5(!+&!&.)#6(!

2&!9#7:#!&4!7(.0&.,+(!+&4!0/5(!#4!%(7,44(! 2&!;#7&!4#!4&70/'#!#!4()!XXII ENCUENTRO DE INVESTIGACION VETERINARIA Y PRODUCCIN ANIMAL


150

Grfica 5.2 Razas ms afectadas con ttulos de anticuerpos contra E.canis de perros muestreados en la ciudad de Lzaro Crdenas Michoacn. (n=32)

Grfica 5.3 Predisposicin por sexo encontrada en perros con anticuerpos contra a E.canis muestreados en la ciudad de Lzaro Crdenas Michoacn (n=32)



151

Grfica5.4 Rango de edad con mayor prevalencia de anticuerpos contra a E.canis de perros muestreados en la ciudad de Lzaro Crdenas Mihoacn. (n=32)

Grfica 5.5 Alteraciones hematolgicas ms frecuentes en perros con ttulos contra E.canis muestreados en la ciudad de Lzaro Crdenas Michoacn (n=32)



152

026 - cambios hematologicos en pacientes positivos a ehrlichiosis canina en la ciudad de lazaro...

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