Gemelizacion en Poecilia reticulata causada por citrato de clomifeno

Asela del Carmen Rodriguez-Varela*, Adolfo Cruz-Gomez* y Horacio

Vazquez-Lopez**

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA

© 2009 BIOCYT

INTEGRANTES:

RESUMEN

Los miembros de la familia Poeciliidae (conocidos comunmnete como guppys) son pequenos peces de distribucion restringida a la porcion suroestes de los Estados Unidos y Centroamerica.

Los guppys (Poecilia reticulata) tenian una distribucion original en Venezuela, Barbados,norte de Brazil y Guayana (Scholtz y Dahlstrom, 1977).

Actualmente son utilizados por sus caracteristicas esteticas como especies de ornato, educativas e incluso terapeuticas, esto ha provocado una creciente demanda , lo cual coloca a estos peces cono un importante recurso renovable.

Conceptos Previos

Nombre común : GUPPY

Reino: Animalia

Filo: Chordata

Clase: Actinopteryaii

Orden: Cyprinodontiformes

Familia: Poeciliidae

Genero: Poecilia

Especie : P. reticulata PETERS, 1859

Originario de Trinidad, Barbados, Venezuela y norte de BrasIl, este pez fue descubierto varias veces en varios lugares y por personas distintas, cada una de las cuales le dio un nombre distinto.

En la actualidad este pez es comúnmente conocido como “guppy”. En Trinidad se los conoce además como “pez millón” por su alta tasa de reproductividad. En Argentina y Uruguay es conocido como “lebistes”.

Rev. biol. trop vol.52 n.4 San José Dec. 2004 Cultivo de Poecilia reticulata (Pisces:Poecilidae) en cuerpos de agua tropicales,Veracruz,MéxicoPatricia Devezé Murillo,Juan Lorenzo Reta Mendiola &Basilio Sánchez LunaColegio de Postgraduados,Campus Veracruz,Km.26.5 Carr.Fed.Veracruz-Xalapa.Apdo.Postal 421,Veracruz,Ver.CP 91700,México.Tel./Fax:52 (229)923-1870;patricia_deveze@hotmail.com

Caracteristicas Ornamentales

Poecilia reticulata,especie conocida comúnmente como "guppy ",es un pez muy popular en el ámbito acuarístico.

Hoy en día se ha logrado desarrollar una gran cantidad de variedades que van desde cambios en su coloración hasta su tipo y forma de la colas.

Entre las variedades más comerciales se encuentran: king cobra,flamingo,cabeza de jade,mitad negro,metálico y multicolor (Morales 1996).

Caracteristicas Sexuales

Dimorfismo Sexual

Los machos presentan una gran variedad de vivaces colores desplegados en su aleta anal. Su cuerpo es estilizado y suelen alcanzar, en promedio, los 3 cm. Poseen un órgano reproductor denominado gonopodio, el cual utilizan para inseminar los huevos que la hembra carga en su vientre, durante el cortejo de apareamiento.

Las hembras poseen colores más apagados predominando el grisáceo y suelen ser un tanto más robustas que sus congéneres del sexo opuesto. Este rasgo característico suele exacerbarse notablemente al momento de la preñez.

MACHO HEMBRA

Caracteristicas Reproductivas

La copulación se efectúa en 1/20ª parte de segundo después de que el macho haya cortejado la hembra y ella esté receptiva, una sola fecundación servirá para seguir gestando después de varias camadas (de 3 a 5), almacenando los espermatóforos por si escasean los machos, en las sucesivas camadas, el padre siempre será el último que la haya fecundado.

Ovovivíparo-matrotrofia. Es decir, que reciben una alimentación de la madre durante la gestación, el embrión se desarrolla y crece dentro del corion (huevo) el cual se rompe al nacimiento.

El sistema reproductor de la hembra está compuesto por ovarios pares dentro del saco, formando un órgano vascularizado que suspende dorsalmente ocupando casi la totalidad de la cavidad peritoneal, distendiéndose puede llevar al mismo tiempo ovocitos, óvulos, huevos y embriones en su cámara incubatriz, normalmente el parto coincide con la ovulación.

La gestación dura aproximadamente un mes a temperaturas de 24º a 26º, pudiendo adelantar ó retrasarla durante horas e incluso días si las condiciones de medio no les son favorables y peligrasen sus crías, incluso reabsorber los huevos.

Pueden nacer una media de entre 20 y 50 alevines, dependiendo de la hembra pueden incluso sobrepasar los 150 alevines .

Importancia Economica

De acuerdo con FAO (1997) ,los principales países productores a nivel mundial son Japón, India,República de Corea,Filipinas y Rumania.En los Estados Unidos el acuarismo es el segundo pasatiempo más popular después de la fotografía y se calcula que en ese país cuenta con más de 25 millones de personas que poseen acuarios,y por consiguiente se estima que el número de peces de acuario vendidos anualmente,tiene un promedio superior a los 350 millones de individuos.

Países como Indonesia,Filipinas, Sri Lanka,Taiwán y Tailandia proveen al mercado internacional especies exóticas entre las que destacan las de origen mexicano:guppys (P.reticulata), mollys (P.velifera y P.sphenops )y espadas (Xiphophorus helleri).

Según Bezard y Maigret (199),hay una fuerte demanda de peces tropicales para acuarios domésticos, con un mercado estimado a nivel mundial en US$200.

Crianza

Su acuario

Debe ser lo suficientemente espacioso ya que necesitan mucho espacio para nadar. Podemos seguir la regla que dice que por cada pez adulto le proporcionamos 7 litros de agua. El minimo de longitud del acuario debe ser de unos 40cm de longitud.

En cuanto a la vegetacion es otra de las cosas importantes, cuanto mas tenga mejor. Las plantas protegen a los recien nacidos de los adultos ya que esta especie no protege a su descendencia y se la come, ademas les proporciona a las hembras tranquilidad que a menudo es acosada por el macho.

Condiciones apropiadas del agua:

Su temperatura optima esta entre los 22 y 26 ºC.-El pH debe ser 7 (neutro).-El agua moderadamente dura.-El agua es aconsejable para cualquier pez tenerla bien oxigenada ya que ademas de suministrarles un gran aporte de oxígeno para ellos, tambien evapora el amoniaco producido por las heces y la orina de los peces.

Su alimentación:

- Este pez es omnívoro por lo cual le podemos dar cualquier alimento, vivo como artemias, pulgas de agua, larvas de mosquitos, tambien algas, espinacas...-Es aconsejable proporcionarles una dieta lo mas variada posible para que se encuentren lo mas sanos posible.

Accion Hormonal

En peces, como en todos los vertebrados, la reproducción es regulada por el cerebro a través de la hormona liberadora de gonadotrofina (GnRH) que se produce específicamente en el hipotálamo (Harvey y Hoar 1980, Zohar 1988, Montero y Dufour 1996, Donaldson 1997, Peter y Yu 1997). Este decapéptido estimula la producción de gonadotrofinas (GtH) por parte de la hipófisis o pituitaria. En algunos peces la dopamina es un inhibidor negativo de la producción y liberación de GtH por parte de la hipófisis (Zohar 1988, Redding y Patiño 1993, Peter y Yu 1997). El control de la reproducción que realiza esta glándula es a través de dos hormonas gonadotróficas: la hormona folículo estimulante (FSH o GtH I), que regula la vitelogénesis en hembras y la espermatogénesis en los machos, y la hormona luteinizante (LH o GtH II), encargada de controlar la maduración final del oocito en las hembras (Peter y Yu 1997).

Farmacos Estimuladores

MANEJO REPRODUCTIVO MEDIANTE EL USO DE PREPARADOS HORMONALES :

Hormona Liberadora de Gonadotrofina (GnRh)

Hormona Luteinizante (LH) y Hormona Folículo estimulante (FSH)

Hormona Gonadotrofina Corionica Humana (HCG) (Chorulon)

Hormona del Suero de Yegua Preñada (PMSG)

Citrato de clomifeno (CC)

Como funciona el Citrato de Clomifeno (CC)

El citrato de clomifeno (CC) se une a los receptores estrogenicos del hipotalamo. La depleción de los receptores estrogenicos genera un mecanismo compensatorio que estimula la secrecion endogena de gonadotrofinas. Esto produce uno o mas folículos dominantes aumentando los niveles de estradiol lo que desencadena el pico de LH y la ovulacion.

El mayor nivel de FSH estimula el desarrollo de los folículos ováricos que contienen óvulos. A medida que los folículos crecen, secretan estrógeno al torrente sanguíneo.

Si el tratamiento tiene éxito, aproximadamente una semana luego de que se toma la última pastilla de CC, la pituitaria está hipersensibilizada a la GnRH y produce un pico de LH . El pico de LH provoca la liberación del óvulo del folículo maduro durante la ovulación.

Superovulacion

La superovulación es la producción de un número mayor de lo habitual de ovocitos, causado por el tratamiento de hormonas o farmacos.

Gemelizacion

Es la división de un ovocito fertilizado único, que se denominan gemelos monocigóticos o idénticos.

Estos comparten un cuadro genético idéntico y por eso parecen iguales, según van creciendo. Se producen por la división y separación de las células del cigoto, en diferentes estadios del desarrollo.

La separación más temprana puede que ocurra en la etapa bicecular, en cuyo caso los dos cigotos se desarrollan separados y los blastocistos se implantan separados, entonces cada embrión tiene su propia placenta y saco coriónico (Valdés, 2010).

INTRODUCCION

o No obstante a la gran cantidad de organismos que se pueden producir en poco tiempo, es necesario sin embrago, aumentar la cantidad de crias para cubrir las necesidades de un mercado en constante crecimiento cada vez mas amplio.

o Como en el caso de Singapur, el mayor exportador de guppys del mundo que aumento su valor en exportacion de $ 16.4 millones de dolares en 1976 a $ 74 millones de dolares en 1993.

o Lo cual muestra que “el volumen de comercio de las actividades relacionadas al acuarismo en el mundo, esta lejos de la saturacion y existe campo para un mayor desarrollo.

ANTECEDENTES

Relacionado a lo anterior, se han empleado farmacos que se puden producir en poco tiempo, es necessario sin embargo, aumentar la cantidad de crias para cubrir las necesidades de un mercado en constante crecimiento cada vez mas amplio, como en el caso de Singapur, el mayor exportador de guppys del mundo que aumento su valor de exportacion de $ 16.4 millones de dolares en 1976 a $ 74 millones de dolares en 1993, lo cual muestra que “ el volumen de comercio de las actividades relacionadas al acuarismo en el mundo, esta lejos de la saturacion y existe campo para un mayor desarrollo”

Pandey y Hoar, reportaron el rol del citrato de clomifeno en la inducción a la ovulación en pez dorado en hembras grávidas mantenidas a 13-14°C, cuando la ovulación se efectúa en condiciones naturales a 20°C. Los huevos producidos fueron viables y de su fertilización se desarrollan alevines normales.

EXPERIMENTACION

Los antecedentes relacionados :

Formaron tres grupos experimentales y uno control, cada uno consistio de 12 peces en proporcion de tres hembras por macho.

Los organismos fueron mantenidos a 26.5 ± 1 ᵒC.

Las dosis experimentales fueron las siguientes: 12.5 mg de CC/30 g de alimento seco, 25 mg de CC/30 g de alimento seco y 50 mg de CC mg de CC/30g de alimento seco.

El grupo control fue alimentado solo con hojuelas.

La administracion del farmaco se ajusto a las especificaciones del fabricante y la via de admistracion del medicamento fue oral a traves del alimento.

Se utilizo el metodo de evaporacion del alcohol para adherirlo a las hojuelas.

La racion de alimento diario fue el 3% de la biomasa individual dividida en dos raciones, suministradas en la manana y en la tarde.

HIPOTESIS

La hipótesis planteada fue la siguiente:

”La utilización de fármacos anovulatorios en Poecilia reticulata afectara su fecundidad con relación a la concentración utilizada”.

OBJETIVO

El objetivo planteado fue:

“Determinar si el citrato de clomifeno promueve un aumento de la cantidad de óvulos producidos por la hembra de P. reticulata y la concentración óptima para lograr una superovulacion viable”.

MATERIALES Y METODOS

La aplicacion del farmaco se realizo por 60 dias, al termino se evaluo la eficaia de las concentraciones experimentadas mediante el porcentaje promedio de huevos inmaduros, maduros y embriones producidos por gonada, para lo cual se sacrifico al total de la poblacion hembra de cada grupo y se les aplico la tecnica de diseccion ovarica.

Se determino el promedio de elementos de la gonada producidos y de esta forma se determino el indice de fecundidad.

Se pesaron las gonadas y el higado con el fin de obtener los indices gonasomaticos (IGS) y hepatosomatico (HIS).

Se aplico un analisis de varianza de un factor para determinar si existieron direfencias significativas entre tratamientos(Daniel, 1996).

RESULTADOS La fecundidad mas alta la presento el grupo control con 98.15

huevos, le siguió la dosis de 25 mg de clomifeno con un promedio de huevos producidos de 81.91, con la dosis de 50 mg el promedio de huevos producidos fue de 70.69 y finalmente la dosis de 12.5 mg resulto en un promedio de huevos producidos de 61.4.

Se observaron diferencias significativas entre los tratamientos (p<0.05)

Fig. 3

Figura 3. Fecundidad total promedio por tratamiento

El mayor porcentaje promedio de embriones se presento con la dosis de 12.5 mg de clomifeno (22.59%), le siguió la dosis de 50 mg (13.48%), la dosis de 25 mg (12.82%) y el ultimo lugar le corresponde al grupo control (9.91%).

No se encontraro diferencias significativas en los tratamientos (p<0.05)

Fig. 4

Figura 4. Porcentajes de embriones por tratamiento.

CONCLUSIONES

1. El citaro de clomifeno (CC) no promueve un aumento de la cantidad de óvulos producidos por hembras de P. reticulata.

2. CC actúa sobre la fecundidad de las hembras de P. reticulata aumentando la maduración de los huevos, aunque ésta no es estadísticamente significativa.

3. La mejor dosis, basado en la mayor producción de alevines fue la de 12.5 mg de CC.

No se probó la hipótesis planteada ni se logró el objetivo, pero los resultados fueron inesperados.

Cuando se disectaron algunas hembras grávidas que habían muerto durante el experimento, se observó la presencia de embriones gemelos en varios huevecillos.

Se observó una relación directa entre la concentración del fármaco y la cantidad de huevecillos con dos embriones para los tratamientos experimentales de 12.5, 25 y 50 mg de CC.

Se observó que en una sola hembra se presentaron dos “gemelaciones” .

DISCUSION

Uribe, éste efecto es conocido en anfibios y reptiles pero no está documentado en peces.

Hadashi (1984), CC es empleado como un agente que promueve la ovulación en mujeres; y en varias clinicas se ofrece este farmaco como una alternativa para mujeres con problemas de fertilidad.

Pandey (1973), aplicaron éste fármaco a peces dorados y argumentan que CC induce la ovulación.

Trabajos similares reportan que CC inducen la ovulacion en otros peces.

Lo importante de estas observaciones es que hasta el momento no se ha encontrado algún trabajo en el que se reporte este fenómeno.

GRACIAS!!!