revision y actualizacion del programa de limpieza y ... · 16 revision y actualizacion del programa...
TRANSCRIPT
16
REVISION Y ACTUALIZACION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE
ANGLOPHARMA S.A.
DIANA C. PEREZ H.
ADRIANA M. VERA T.
TRABAJO DE GRADO
Presentado como requisito parcial
Para optar al título de
MICROBIOLOGA INDUSTRIAL
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
FACULTAD DE CIENCIAS
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
BOGOTÁ D.C.
DICIEMBRE DE 2008
17
NOTA DE ADVERTENCIA
Articulo 23 de la resolución N° 13 de Julio de 1946
“La universidad no se hace responsable por los conceptos emitidos por sus alumnos
en sus trabajos de tesis. Solo velará porque no se publique nada contrario al dogma y
a la moral católica y por que las tesis no contengan ataques personales contra
persona alguna, antes bien se vea en ellas el anhelo de buscar la verdad y la justicia.”
18
REVISION Y ACTUALIZACION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE
ANGLOPHARMA S.A.
DIANA C. PEREZ H.
ADRIANA M. VERA T.
Trabajo de grado
Presentado como requisito parcial
Para optar el título de
MICROBIOLOGA INDUSTRIAL
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
FACULTAD DE CIENCIAS
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
BOGOTÁ D.C.
DICIEMBRE DE 2008
19
REVISION Y ACTUALIZACION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE
ANGLOPHARMA S.A.
DIANA C. PEREZ H.
ADRIANA M. VERA T.
--------------------------------------------------
JAIME HERNAN SILVA MONTAÑA
Director
---------------------------------------------------
LORENA VALENCIA ZULETA
Asesora
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
FACULTAD DE CIENCIAS
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
BOGOTÁ D.C.
20
DICIEMBRE DE 2008
REVISION Y ACTUALIZACION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE
ANGLOPHARMA S.A.
DIANA C. PEREZ H.
ADRIANA M. VERA T.
--------------------------------------------- --------------------------------------------
Dr. Guillermo Romero Molina Dr. Zulma Valbuena Jiménez
JURADO JURADO
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
FACULTAD DE CIENCIAS
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
BOGOTÁ D.C.
DICIEMBRE DE 2008
21
REVISION Y ACTUALIZACION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE
ANGLOPHARMA S.A.
DIANA C. PEREZ H.
ADRIANA M. VERA T.
APROBADO
--------------------------------------------- --------------------------------------------
Dra. Janeth Arias Palacios Dra. Ingrid Schuler
Directora de Carrera Decano Académico
22
Dedicatoria
A mis padres por su esfuerzo y confianza que me impulsaron y motivaron a seguir adelante,
avanzar y alcanzar una más de mis metas.
A mis hermanos por su compañía, por escucharme y sobretodo por creer y confiar en mí.
A Lorena y Jaime quienes dedicaron tiempo, nos aguantaron tantas molestias y motivaron a
continuar con este proyecto que hoy es un hecho.
Adriana Vera Tovar.
A ti mama que eres mi motor y mi aliciente para ser cada día mucho mejor y nunca dejarme
vencer siempre con la firme convicción de ser la mejor y ser tu orgullo.
A ti que eres como mi padre que siempre estás ahí para darme apoyo y nunca dejarme caer, porque
siempre me ayudas a seguir adelante y nunca jamás vencerme, siempre has sido mi ejemplo a
seguir.
A ti mi piloto que eres el soporte de mis alas para siempre volar más lejos y jamás dejarme caer,
porque nunca me dejaste sola y siempre estuviste conmigo en todo momento dándome apoyo y
ayudándome para no rendirme y ser cada día mejor Te amo amorcito.
A todos mi amigos a Sonia y a Jaimito porque me ayudaron a que fuera posible esta tesis dándome
consejos y siempre confiaron en mí…
A la profe Lorena porque siempre nos ayudo y nos aguanto molestándola tanto, por sus consejos y
su total apoyo.
Gracias a todos por siempre estar ahí esto es con mucho esfuerzo para los que siempre están
conmigo porque sola jamás podría…
Diana Carolina Pérez Herrera.
23
24
25
26
27
28
RESUMEN
En el campo farmacéutico, la desinfección ha hecho parte fundamental de las actividades
para controlar el nivel de microorganismos contaminantes que puedan llegar a comprometer
la calidad de un producto en proceso o terminado. El objetivo del estudio fue evaluar y
actualizar el programa de limpieza y desinfección de ANGLOPHARMA S. A. optimizando el
control de los microorganismos contaminantes de las áreas de manufactura de productos no
estériles, para esto, se llevó a cabo una revisión preliminar de las áreas y equipos apoyados
en una lista de chequeo. P o s teriormente, se realizó un análisis retrospectivo de los
monitoreos microbiológicos realizados durante el año 2008, luego, se efectuó la evaluación
de los 4 desinfectantes de rotación en el área de manufactura, evaluándolos frente a tres
diferentes microorganismos aislados en el área (Neurospora sp, Rhodotorula sp y
Staphylococcus epidermidis).
Se evaluó la actividad desinfectante y efectividad en procesos de sanitización de Tego 51®
(0.1, 0.5 y 1%), Cloruro de Benzalconio, Hipoclorito de sodio (0.5,1 y 1.5%) y Alcohol al 70%,
frente a las 3 cepas aisladas. Se determinó que los productos valorados presentan actividad
contra las cepas evaluadas; el desinfectante con mejores resultados fue el Cloruro de
Benzalconio con una Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) de 31.25 mg/L para la levadura
y 62.50 mg/L para el hongo y la bacteria, demostrando que requiere de muy bajas
concentraciones para ser activo. En los otros productos evaluados la CMI obtenida fue
superior: Tego 51®, la CMI de 125 mg/L para la levadura y el hongo y 250 mg/L para la
bacteria; El Hipoclorito de sodio obtuvo una CMI de 750 mg/L para las 3 cepas en estudio y
en los resultados conseguidos con el alcohol al 70% la CMI alcanzada fue de 7000 mg/L,
una concentración muy superior a la que se obtuvo con los otros desinfectantes evaluados,
probando que se requiere utilizar prácticamente puro para ser efectivo.
Se concluyó que el desinfectante más efectivo frente a las 3 cepas evaluadas es el Cloruro
de Benzalconio®, siendo el más destacado de los desinfectantes a emplear y a contribuir en
las exigencias en la instalación farmacéutica.
29
ABSTRACT
In the pharmaceutical field, disinfection is part of the activities to control the level of micro-
pollutants that jeopardize a process or finished product. The aim of this study is to assess
and update the program of cleaning and disinfecting of ANGLOPHARMA optimizing the
control of the areas of micro-polluting manufacturing. Was carried out a preliminary review of
the areas and equipment based on a checklist.
We performed a retrospective analysis of microbiological monitoring conducted during 2008,
then the evaluation of the 4 disinfectants rotation in the area of manufacturing, compared to
assessing three different isolates of the area (Neurospora sp, Staphylococcus sp and
Rhodotorula epidermidis).
We evaluated the activity and effectiveness in disinfectant processes sanitization of Tego 51
(0.1, 0.5 and 1%), benzalkonium chloride, sodium hypochlorite (0.5,1 and 1.5%) and Alcohol
70%, compared with 3 strains isolated. It was observed that the products tested have activity
against strains tested, the best disinfectant was benzalkonium chloride with a minimum
inhibitory concentration (MIC) 31.25 mg / L for yeast and 62.50 mg / L for the fungus and
bacteria, showing that requires very low concentrations to be active in other tested products
from the CMI is higher: In Tego 51 CMI 125 mg / L for yeast and fungus and 250 mg / L for
the bacteria. Sodium hypochlorite was a CMI 750 mg / L for the 3 strains under study. In the
results obtained with alcohol 70% from the WCC was 7000 mg / L, a concentration far higher
than that obtained with the other disinfectants evaluated showing is required to use almost
pure.
We concluded that the most effective disinfectant against the 3 strains tested is the
benzalkonium chloride being the best use of disinfectants which helps to get products of
excellent quality to generate credibility with the consumer.
16
1. INTRODUCCIÓN
Es de gran importancia la fabricación de medicamentos que generen una respuesta eficaz
frente a la dolencia del paciente y a la vez garanticen un alto grado de confiabilidad, que es
medida por la calidad ofrecida. Para evitar fallas en la calidad es necesario tener en cuenta
el control de la presencia de los microorganismos que pueden generar contaminación y
deterioro o alteración de los productos.
La industria farmacéutica es un sector vital en el ciclo de la asistencia a la salud en donde
uno de los factores más relevantes a controlar es la presencia de agentes contaminantes
durante cada una de las etapas de manufactura de los medicamentos. Una de las principales
vías por las que estos se pueden alterar es por el contacto con las superficies,
manipuladores y equipos de procesamiento contaminados, por lo tanto es necesario que se
realice una limpieza y desinfección suficiente y regular con base en técnicas estandarizadas
y validadas.
Para controlar la proliferación de los microorganismos es necesario que las empresas
cuenten con un programa de l impieza y desinfección actualizado que garantice la
eliminación de cualquier forma microbiológica viviente que pueda interferir con el producto,
manteniendo así las condiciones higiénico-sanitarias en las áreas de manufactura.
Los procesos d e sanitización en general, se ven afectados por aspectos como: Tipo de
microorganismos presentes, ambiente, temperatura, pH del producto sanitizante, edad de la
célula, tiempo de exposición; con base en la interacción de estos factores se toma la
decisión de la clase de agente a utilizar. Una gran variedad de agentes desinfectantes se
usan para eliminar los microorganismos por lo que se hace importante realizar una
evaluación teórico-práctica de los agentes desinfectantes con el fin de obtener el criterio para
determinar el tipo de desinfectante que se va a emplear.
Usualmente, un programa de limpieza y desinfección efectivo es parte del proceso de
sanitización e n las industrias farmacéuticas, para prevenir la acumulación de carga
microbiana y biopelículas, así como de partículas viables en las superficies de los equipos de
procesamiento.
17
La importancia del presente trabajo radica en revisar, actualizar y establecer un adecuado
programa de limpieza y desinfección que corrija y prevenga alteraciones a futuro causadas
por microorganismos contaminantes, garantizando el cumplimiento de las normas nacionales
e internacionales dirigidas a este tipo de industrias, la inocuidad de sus productos, y la mejor
relación costo-beneficio al interior de la empresa.
18
2. MARCO TEÓRICO
2.1. ANTECEDENTES HISTÓRICOS
La utilización de los desinfectantes y antisépticos proviene de la antigüedad; los sacerdotes
Egipcios lo utilizaban para embalsamar con el fin de evitar la putrefacción. El papel del Cloro
fue reconocido por el médico obstetra Semmelweis quien observó que la mortalidad debida a
la fiebre puerperal era causada por la transferencia de material infectante de un paciente a
otro por parte de médicos y estudiantes; implantaron entonces el método de lavarse las
manos primero con jabón y luego con una solución clorada antes y después de examinar al
paciente (Semmelweis, 1847).
Lister, quien se interesó por evitar las infecciones de las heridas operatorias comenzó su
trabajo mientras estaba en Glasgow, durante los años 1865 a 1869; sus primeros escritos al
respecto se publicaron en 1867. Fueron varios sus aportes, como cirujano su anhelo fue
prevenir infecciones graves y a menudo fatales, que frecuentemente se producían después
de las operaciones y heridas. Observó la similitud entre las heridas infectadas y los
procesos de putrefacción y fermentación que Pasteur había atribuido a los
microorganismos, y concluyó que los microorganismos debían ser los causantes de las
infecciones de las heridas, estaba convencido que las heridas se podrían liberar de las
bacterias si se las protegían con la aplicación de unas sustancias que mataran los
microorganismos, así sentó las bases de su método antiséptico.
Posteriormente, Lister empleó sustancias químicas bactericidas como el fenol y bicloruro de
mercurio para el lavado de las heridas, manos y material quirúrgico e incluso para la
pulverización del aire; con dicha sustancia logro un gran descenso de las cifras de
mortalidad y sentó las bases de desinfección y asepsia. Comenzó utilizando el ácido fénico,
que era una sustancia germicida conocida como profiláctico el que aplicaba en las heridas
de fracturas abiertas en donde tuvo un gran éxito ya que las heridas sanaron rápidamente
sin formar el pus que era normal en ellas. Más adelante Lister aplicó este método al
tratamiento de abscesos y otros tipos de heridas. Finalmente propuso un método
sistemático para el uso de ácido fénico en las operaciones, conocido “como método
antiséptico de Lister” (Sikes, 1965).
Por otra parte, Pasteur obtuvo como resultado directo la validez del uso del ácido carbólico
para poner sobre heridas, para desinfectar instrumentos y para esparcir sobre la atmósfera
19
antes de una cirugía. Estas sustancias Lister la utilizó en soluciones de 1:20 para
instrumentos y 1:40 para desinfección de piel. (Sikes, 1965).
2.2 CONCEPTOS IMPORTANTES EN UN PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN
Para un buen proceso de desinfección es necesario tener claridad acerca de diferentes
conceptos que son utilizados en la implementación de un proceso de sanitización.
2.2.1 SANITIZACIÓN
Se refiere al proceso empleado para reducir el contenido de microorganismos viables
remanentes en una superficie limpia. En la industria se emplea este término cuando se trata
con agentes químicos o físicos las áreas de producción y los equipos empleados en la
elaboración de productos con el propósito de reducir el contenido microbiano hasta niveles
insignificantes (Rossi, 1998)
Las aplicaciones de las sustancias desinfectantes generalmente tienen como base amonio
cuaternario, soluciones yodadas o cloradas con un bajo nivel de toxicidad. Estos productos
controlan los niveles de todo tipo de bacterias, hongos, levaduras, protozoos y algas al ser
aplicados de forma adecuada en superficies de pisos, muros, baños, entre otros (Barsotii,
2001).
2.2.2 LIMPIEZA
Se entiende por limpieza la cualidad que se le atribuye a una superficie a la cual se le han
retirado todas las partes orgánicas e inorgánicas, incluyendo microorganismos, biofilms, etc.
Las suciedades son separadas de su sustrato y puestas en soluciones o dispersión. El
propósito de la limpieza es eliminar todo tipo de residuos presentes en las diferentes áreas
de procesos de producción, con el fin de restablecer el normal funcionamiento de éstas,
prolongar la vida útil de instalaciones y por ende asegurar la calidad óptima del producto a
obtener (Leveau, 2002).
20
2.2.3 HIGIENE
Conjunto de hábitos que garantizan una adecuada conducta sanitaria y que van acorde con
la limpieza y la desinfección. La higiene trata de la conservación y del mejoramiento de la
salud del individuo y de la sociedad; su tarea fundamental es el estudio de la influencia en la
salud (Wildbredt, 2000).
2.2.4. DESINFECCIÓN
Es la destrucción, inactivación o remoción de aquellos microorganismos que pueden causar
infección u ocasionar otros efectos indeseables en superficies u objetos inanimados; la
desinfección no implica necesariamente esterilización.
Dentro de los objetivos de la desinfección están el proteger la salud del consumidor y
asegurar la calidad del producto frente a la influencia microbiana (Wildbrelt, 2000).
Adicionalmente, el proceso de desinfección de superficies consiste en la aplicación manual
de un desinfectante que moja e impregna las superficies tratadas, dependiendo del producto
que se utilice (Gonzáles, 2004).
2.2.5 DESINFECTANTE
Agente usualmente químico, que mata las formas en crecimiento de los microorganismos,
pero no necesariamente las esporas. El término se refiere a sustancias utilizadas sobre
objetos inanimados que son capaces de matar microorganismos patógenos (infecciosos) de
un material y pueden en muchos casos presentar efectos tóxicos sobre tejidos vivos.
Pueden ejercer dos tipos de efectos diferentes sobre las bacterias:
Bacteriostáticos: Compuestos que evitan la reproducción y crecimiento de las bacterias,
pero no las matan.
Bactericida: Compuestos que matan a las bacterias, aunque generalmente no matan a las
esporas (Anzola, 2003).
21
2.2.6 ANTISÉPTICO
Sustancia que impide el crecimiento o la acción de los microorganismos, ya sea
destruyéndolos o inhibiendo su crecimiento y actividad en tejidos vivos (Ketchum, 1988).
2.2.7 SANITIZANTE
Agente que reduce la población microbiana a niveles seguros según los requerimientos de
salud pública; se aplica en objetos inanimados de uso diario por ejemplo utensilios y equipos
para manipular alimentos, vasos, platos y otros objetos de uso similar (Leveau, 2002).
2.2.8 GERMICIDA
Agente que mata los microorganismos pero no necesariamente las esporas (Leveau, 2002).
2.2.9 ESTERILIZACIÓN MICROBIANA
Es la destrucción o eliminación de todas las formas de vida de los microorganismos. Se
puede llevar a cabo por procesos químicos o físicos. Dado que las endosporas que hacen
parte de las estructuras de l os microorganismos más resistentes a los agentes físicos y
quimímicos de esterilización, se usan como indicadores biológicos del proceso. La
esterilización por calor ha sido utilizada desde épocas antiguas; tanto el calor seco como el
húmedo esterilizan, pero el seco lo hace a menor velocidad y requiere temperaturas mayores
y un tiempo más prolongado de exposición. La resistencia al calor, varia entre diferentes
microorganismos y depende del tipo de calor (Malagon, 1999).
2.2.10 ANTISÉPSIA
Implica la eliminación de microorganismos o su inhibición en los tejidos o fluidos corporales.
No necesariamente destruye todos los microorganismos, pero los reduce a niveles de no
infección (Malagon, 1999).
22
2.3 PROCESOS DE LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN
Aunque tradicionalmente han sido consideradas como conceptos sinónimos, la realidad es
bien distinta, ya que se trata de operaciones complementarias pero apreciablemente
diferentes. La limpieza es el proceso mediante el cual se logra la eliminación de la suciedad
en las superficies aplicadas, que significa a la vez la destrucción de la fracción principal de
gérmenes presentes en estas superficies.
Por otro lado, la desinfección es la eliminación de microorganismos infecciosos remanentes
en objetos inanimados o la reducción de los mismos a niveles que no constituyan un peligro
para la salud pública (Fleitas, 1994). En el proceso de desinfección se produce una reacción
entre el agente infeccioso y el producto desinfectante mediante la cual se destruye o reduce
el agente infeccioso y numerosos saprófitos, pudiendo ser empleados para alcanzar tal fin
medios físicos como el calor (ebullición y pasteurización), radiaciones UV, ultrasonidos,
filtraciones o por medio de sustancias químicas denominadas desinfectantes (Rossoni,
2002).
Existen varias formas de eliminar o reducir los residuos de suciedad o contaminantes por
debajo de los limites establecidos de forma que no afecte la calidad y seguridad de cualquier
producto fabricado en un equipo, esta limpieza se realiza de forma físicoquímica
acompañada de una acción mecánica. Esta tiene que ver con la presión a chorro de agua
para la remoción de suciedad. La acción mecánica tiene ventajas como la baja inversión,
centraliza operaciones, disminuye salpicaduras, reduce un poco el lavado a mano y es de
fácil uso, sin embargo una desventaja de este proceso es que en superficies muy sucias se
requiere de la utilización de demasiada cantidad de agua.
Otro sistema utilizado es la limpieza manual, la eficacia de este sistema de lavado depende
de lo cuidadoso que sea el operario, en este caso se recomienda cambiar las soluciones
limpiadoras de acuerdo con un cronograma de rotación de desinfectantes. En vez de utilizar
agua caliente se puede utilizar una solución desinfectante durante 10 a 15 minutos,
dependiendo de la sustancia utilizada; en lo posible no enjuagar el desinfectante, solo en el
caso que se precise ser enjuagado; se debe dejar escurrir el material sin secarlo para evitar
que se contamine de nuevo (Barsotti, 2001).
23
2.3.1. OBJETIVOS DE LOS PROCESOS DE LIMPIEZA DESINFECCIÓN
La limpieza además de que busca cumplir las exigencias estéticas en las instalaciones
farmacéuticas tiene como compromiso de calidad el iminar los residuos microscópicos
presentes (Barsotii, 2001), restablecer el normal funcionamiento de los equipos y las
instalaciones tras su actividad en el proceso de producción y asegurar la calidad óptima de
los productos farmacéuticos frente a los contaminantes químicos.
Por otra parte, la desinfección a su vez permite tener una calidad óptima de los productos,
desde el punto de vista microbiológico, reduciendo hasta el mínimo posible la carga
microbiana y en las áreas de producción tanto en equipos, superficies y demás áreas que la
componen (Bruins, 1995).
Lo anterior hace parte de un sistema de calidad en donde tienen gran influencia las buenas
practicas de manufactura (BPM), siendo estas responsables de involucrar todo lo
relacionado con el proceso productivo, desde la calidad óptima de las materias primas hasta
el producto final elaborado en donde se debe tener muy en cuenta aspectos como el diseño
de la distribución de la planta, el cual debe contar con un flujo de proceso lógico, funcional y
definido.
· Buenas practicas de manufactura (BPM) en industria farmaceutica (BPM).
Todo sistema integral de garantía sobre la calidad de los productos farmacéuticos debe
basarse no solo en un sistema confiable de procedimientos para autorizar el registro y la
comercialización y en un análisis independiente del producto acabado, sino también en la
seguridad lograda mediante una inspección independiente, de que todas las operaciones de
fabricación que se realizan sean de conformidad con normas aceptadas, comúnmente
conocidas como “Buenas Prácticas de Manufactura”.
En 1969, la 22a. asamblea mundial de la Salud aprobó las normas recomendadas para la
fabricación y la inspección de calidad de los medicamentos. Estas prácticas comprenden
normas reconocidas y respetadas internacionalmente cuya opción y aplicación se
recomienda a todos los países miembros, las cuales sirven de base para el sistema OMS de
certificación de calidad de los productos farmacéuticos objeto del comercio internacional.
24
Las Normas de BPM son un instrumento administrativo en virtud del cual el estado se
compromete, a petición de una parte interesada a certificar que:
· Está autorizada la venta o distribución del producto.
· Las instalaciones industriales donde se fabrica el producto están sometidas a
inspecciones regulares para comprobar si el fabricante se ajusta a las Buenas
Prácticas de Manufactura e inspección de la calidad.
Es así que se hace necesario que la Industria Farmacéutica Nacional elabore
medicamentos, sujetándose a normas de BPM, las que facilitarán el control y garantía de la
calidad de las mismas; dando seguridad y confiabilidad para su uso, administración,
expendio y dispensación al paciente y a los profesionales de salud.
El proyecto de requisitos revisados para las BPM se compone de tres partes. La Primera
Parte, "Administración de la calidad en la industria farmacéutica: filosofía y elementos
esenciales", esboza los conceptos generales de la garantía de la calidad, como también los
principales componentes o subsistemas de las BPM, que son responsabilidades conjuntas
de la administración principal y de la administración de la producción y del control de calidad.
Entre éstos se incluyen higiene, comprobación, autoinspección, personal, instalaciones,
equipos, materiales y documentación. La segunda parte, buenas prácticas en la producción
y el control de calidad", provee asesoramiento con respecto a las acciones que debe
efectuar separadamente el personal de producción y el de control de calidad, para la puesta
en práctica de los principios generales de garantía de la calidad.
La tercera Parte contiene dos pautas complementarias, pero no es una sección taxativa,
pues se prevé la inclusión de otras pautas en el futuro, como por ejemplo las referentes a
productos biológicos, materiales para ensayos clínicos, y comprobación.
Las estipulaciones incluidas en esta guía concuerdan totalmente con las normas antes
mencionadas de la Comunidad Económica Europea (CEE) y la Cámara de la Industria
Farmacéutica (CIF).
Los productos farmacéuticos autorizados deben ser producidos solamente por fabricantes
registrados (que posean autorización de fabricación), cuyas actividades sean inspeccionadas
regularmente por las autoridades nacionales. Esta guía de las BPM deberá usarse como
25
patrón indispensable en el cumplimiento de las condiciones exigidas por las BPM, lo cual
constituye uno de los elementos esenciales del Sistema de Certificación de la Calidad de los
Productos Farmacéuticos, objeto de Comercio Internacional, y como base para la evaluación
de las solicitudes de autorización de fabricación y para la inspección de las instalaciones de
producción. Dicha guía puede usarse también para la capacitación de funcionarios
encargados de la inspección de medicamentos, y la del personal de producción y control de
calidad en la industria farmacéutica.
La guía puede aplicarse a la producción en gran escala de medicamentos en su forma
farmacéutica terminada, incluyendo los procesos en gran escala empleados en los
hospitales, y la preparación de materiales para ensayos clínicos.
Las Buenas Prácticas detalladas más adelante deben ser tenidas en cuenta como guías
generales, y pueden ser adaptadas a las necesidades individuales. No se pretende que la
Primera y Segunda Partes de esta guía cubran todos los aspectos referentes a la producción
de principios farmacéuticos activos, para los cuales en la Sección 18 se describen los
requisitos específicos. La guía tampoco cubre aspectos de seguridad para el personal
involucrado en la fabricación, ya que ello se rige por la legislación de cada país. No obstante,
el fabricante es responsable de garantizar la seguridad de los trabajadores. Siempre que sea
posible, deben emplearse las denominaciones comunes para las sustancias farmacéuticas
designadas por la OMS, juntamente con los demás nombres designados.
2.3.2 ETAPAS DE UN PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN
Una vez superadas las evaluaciones de la capacidad del producto desinfectante elegido, se
debe adecuar un proceso de limpieza y desinfección para realizar las pruebas in vivo, el
cual en forma general debe contemplar las siguientes etapas (Barsotii, 2001).
a. Pre-enjuague: Se trata de realizar una limpieza previa con agua, para eliminar la
suciedad más gruesa y la materia orgánica visible. Puede usarse agua fría o caliente siendo
esta última de especial interés para suciedades grasientas y para eliminar parte de la carga
microbiana en la superficie.
b. Aplicación del detergente: Se realiza mediante el sistema adecuado a cada caso e n
particular, con el detergente se genera la remoción de la suciedad de un material sólido por
26
medio de un baño líquido, que es a la vez capaz de mantener en suspensión a la suciedad
removida previniendo la redeposición de la misma sobre la superficie.
La acción de detergencia involucra factores como el descenso de la tensión superficial,
solubilización, emulsificación y dispersión. Esta fase es la responsable de disolver y
solubilizar la suciedad para facilitar su desprendimiento de las superficies tratadas.
c. Enjuague: Se realiza mediante agua potable abundante, a media y baja presión para
evitar nebulizaciones.
d. Aplicación del desinfectante: Una vez realizado el proceso de limpieza como tal, se
procede a aplicar un desinfectante, de manera que se genere una eliminación de los
microorganismos presentes en el área.
e. Enjuague: Se realiza con el objetivo de eliminar los residuos de desinfectante y evitar
que éstos contaminen los productos. En esta etapa es importante tener en cuenta el tiempo
de exposición del desinfectante para que se ejerza una acción adecuada.
f. Secado: En la medida de las posibilidades se realizará una etapa de secado, esto con el
fin de eliminar excesos de agua que puedan favorecer el crecimiento bacteriano y en
consecuencia pueda servir de vehículo diseminador en el caso que quede a lgún
microorganismo presente.
2.3.3 ETAPAS DE LA CONFECCION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION
Los programas de limpieza y desinfección deberán asegurar que todas las partes de las
instalaciones estén debidamente limpias, e incluir la limpieza del equipo de limpieza. Este
programa debe considerar que las labores de limpieza sean realizadas por los mismos
empleados del proceso, por lo que deberán ser entrenados y tener acceso a este documento
(Delgado, 2006).
a. OBTENER TODAS LAS INFORMACIONES QUE FORMAN PARTE DE LAS BASES
DEL PROGRAMA.
En esta etapa es pertinente recoger información acerca de las características y condiciones
en las que trabaja el laboratorio en donde se incluyen las sustancias y útiles empleados
27
diariamente en cada una de las actividades a realizar, los cuales deberán estar rotulados y
contenidos en recipientes destinados para tal fin, siendo estos de uso específico.
Los aspectos relacionados con el laboratorio se obtendrán mediante observaciones directas
de todas y cada una de las actividades que en el mismo se realizan y puedan relacionarse
directa o indirectamente con la limpieza y la desinfección, por lo cual se tendrán en cuenta
las condiciones existentes en diferentes momentos de la jornada de trabajo y del día.
b. REDACTAR LA PRIMERA VERSIÓN DEL PROGRAMA SOBRE LA BASE DE LAS
INFORMACIONES RECOLECTADAS.
Durante la redacción del documento se garantizará que en este se encuentren todas las
instrucciones de limpieza y desinfección del establecimiento en forma integrada, organizada
y clara, con un lenguaje fácil de entender por toda persona que quiera consultarlo. Este
documento debe constituir una guía para la aplicación y verificación del programa, además
de expresar la preocupación y ocupación en el establecimiento por garantizar sus
condiciones higiénico-sanitarias.
c. COMPROBAR LA PRIMERA VERSIÓN EN EL ESTABLECIMIENTO EN RELACIÓN
CON SU CORRESPONDENCIA CON ESTE Y OBTENER LA INTERPRETACIÓN Y
ACEPTACIÓN DE ESTE DOCUMENTO POR EL PERSONAL QUE PARTICIPARA EN EL
PROGRAMA.
Para esta etapa se debe facilitar la lectura y estudio del documento al personal que lo
aplicará, de esta manera se solicitará al mismo que lo valore de forma comparativa con las
actuales actividades y que señalen sus opiniones sobre todos los aspectos que puedan
estar expresados incorrectamente o que no se puedan aplicar del mismo para generar a
tiempo la aprobación de cambios por el encargado del programa.
De igual manera es importante la asignación de responsabilidades correspondientes con las
tareas específicas a realizar, así como el método y la frecuencia de limpieza a implementar
en cada caso, teniendo en cuenta el tipo de producto, instalación, equipo y su disponibilidad.
28
d. CAPACITAR AL PERSONAL QUE PARTICIPARA EN EL PROGRAMA.
En esta capacitación es importante cumplir con las etapas de concepción, formulación,
aplicación y retroalimentación.
De acuerdo con las características del personal que recibirá la capacitación, las condiciones
y características del establecimiento, se plantearan objetivos que permitan adquirir
conocimientos y habilidades para limpiar y desinfectar correctamente. Para impartir los
mensajes y realizar la retroalimentación se debe hacer énfasis en actividades prácticas.
e. REDACTAR LA VERSIÓN DEFINITIVA DEL PROGRAMA Y PRESENTARLO AL
PERSONAL QUE LO APLICARA.
De acuerdo con todos los señalamientos recibidos por el personal que tendrá relación con el
programa y de las observaciones realizadas, se realizaran los arreglos al documento final
que será presentado en el establecimiento como su programa de limpieza y desinfección
f. REALIZAR UN SEGUIMIENTO DE LA APLICACIÓN DEL PROGRAMA.
Mediante el cual se brindara el asesoramiento para su mejor utilización, además de conocer
los inconvenientes de la utilización del programa y brindarles solución.
Se debe realizar una vigilancia o supervisión desde los inicios de la aplicación y a los 3
meses posteriores con énfasis en la detección de los efectos negativos, además de valorar
los aspectos positivos del programa y eficacia de los métodos de limpieza.
Adicionalmente, este proceso de vigilancia contribuye a la identificación de las necesidades
de capacitación y ayuda a la prevención de contaminación que pueda generar costos
adicionales.
29
Es importante considerar que los programas de limpieza y desinfección deben ser
actualizados, especialmente después de cambios y modificaciones de las condiciones
existentes en los establecimientos cuando se confecciono el programa (Delgado, 2006).
2.4. FACTORES A CONSIDERAR EN LA IMPLEMENTACIÓN DE UN PROGRAMA DE
LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN
La implementación de programas adecuados de limpieza y desinfección en la industria
farmacéutica persigue controlar los microorganismos alteradores, que no permiten obtener
productos de calidad desde el punto de vista microbiológico (Luppens, 2002). Los
consumidores, por su parte, esperan disponer de medicamentos de calidad exentos de
gérmenes patógenos o toxinas de modo que no representen ningún riesgo para su salud.
Esto se requiere, para la satisfacción de ambas partes, la implementación de un programa
adecuado de limpieza y desinfección en los equipos, utensilios e instalaciones implicadas en
la producción de fármacos (Ronner, 1993).
Un programa típico de limpieza en su implementación debe tener en cuenta factores tales
como el tipo de suciedad a tratar, incluir una descripción de los equipos y de los
desinfectantes a utilizar. Los programas de limpieza y desinfección pueden diferir
significativamente de acuerdo a la naturaleza del equipo, características de los depósitos de
suciedad en las instalaciones y el uso al cual sea destinado posteriormente el producto
originado del proceso de fabricación. Un buen programa se debe adecuar a las
características de los microorganismos encontrados durante el proceso de producción de tal
forma que se pueda garantizar la remoción total de éstos, para que el desinfectante aplicado
logre reducir al mínimo, sin ninguna interferencia los microorganismos presentes en las
superficies.
En la selección del desinfectante se debe tener en cuenta factores como el tipo y cantidad de
microorganismos que se desea eliminar, el nivel de desinfección que se desea alcanzar, la
materia orgánica y el nivel de limpieza previo a la aplicación del producto. En función de
estos factores se determina el producto o productos necesarios además de sus posibles
condiciones de aplicación (Concentración, tiempo y temperaturas utilizadas) (Gallardo,
2002). Además, actualmente es importante considerar que el producto no sea
potencialmente contaminante al medio ambiente, que sea poco tóxico para operadores y
30
poco corrosivo para equipos. Una vez elegido el desinfectante es recomendable realizar las
evaluaciones in Vitro del producto, para poder establecer la capacidad del desinfectante
elegido en diferentes concentraciones, tiempo y temperaturas de aplicación contra posibles
microorganismos presentes en la industria a tratar (Urego, 1994).
2.5 MECANISMOS DE RESISTENCIA MICROBIANA
Los microorganismos pueden desarrollar diferentes tipos de resistencia frente a los diversos
desinfectantes utilizados, esto radica en diferencias en su pared celular, morfología y
composición.
Las especies de microorganismos difieren en su susceptibilidad a los agentes físicos y
químicos. La eficacia de un agente en particular depende de las propiedades del organismo
contra el cual está siendo probado. Las más importantes de estas propiedades son: Las
especies de organismos, la fase de crecimiento del cultivo, la presencia de estructuras
especiales como esporas o cápsulas, los antecedentes del cultivo y el número de
organismos en el sistema de prueba (Joklink, 1986).
a. RESISTENCIA DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS
La pared de estas bacterias está compuesta de peptidoglicano y ácidos teicoicos, pero
ninguno de estos parece ser una gran barrera para la acción y entrada de los desinfectantes
y antisépticos.
Existen unos microorganismos que pueden crecer con un aspecto mucoso y otros no, pero
estas últimas mueren mucho más rápido, por lo que se podría decir que esta lama juega un
papel importante al actuar como una barrera física a la penetración de los desinfectantes o
como una capa suelta que interactúa o absorbe el biocida (McDonnell, 1999).
b. RESISTENCIA BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
Las bacterias Gram negativas son más resistentes que las Gram positivas a los
desinfectantes y antisépticos. La membrana externa de estas bacterias actúa como una
31
barrera que limita la entrada de algunos desinfectantes. Muchos autores, consideran que el
peptidoglicano puede ser una gran barrera, porque el contenido de este es mucho más bajo
que el que se encuentra en las bacterias Gram positivas, entonces las hace menos sensibles
a muchos agentes químicos (McDonnell, 1999).
c. RESISTENCIA DE LAS ESPORAS
Las esporas son mucho más complejas debido a que poseen múltiples capas. La capa
externa se conoce como exosporium, una fina y delicada cubierta de carácter protéico y se
presenta en algunas especies. Dentro de éstas se presentan las cubiertas de la espora
compuestas por capas de proteínas. El córtex es una capa de peptidoglicano de uniones
laxas y el protoplasto contiene pared, membrana, citoplasma, nucleoide, ADN, ARN, ácido
dipicolínico, calcio, magnesio, fósforo. El córtex es una parte importante en la resistencia
frente a los desinfectantes y antisépticos. Esta resistencia puede ocurrir dentro de la etapa
de esporulación y puede ser un evento que puede ocurrir en etapas temprana, intermediaria
o tardía (McDonnell, 1999).
d. RESISTENCIA DE HONGOS
Estos organismos poseen dos mecanismos de resistencia, el primero es una resistencia
intrínseca que consiste en una barrera para reducir la entrada del agente microbiano.
También la edad de los cultivos influencia la resistencia y la sensibilidad hacia los
desinfectantes, ya que la pared es mucho menos sensible en fase estacionaria que en fase
logarítmica.
Los hongos son más resistentes que las levaduras y considerablemente más resistentes que
las bacterias no esporuladas. Las esporas de los hongos son menos resistentes que las
esporas bacterianas a los agentes biocida (McDonnell, 1999).
32
2.6 TIPOS DE DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS
2.6.1 QUÍMICOS
a. Aldehídos
Los aldehídos mas comúnmente usados como desinfectantes son el formaldehído y el
glutaraldehído. El formaldehído es muy similar al glutaraldehído en su toxicidad y
tratamiento, aunque probablemente sea más tóxico. El glutaraldehído se prepara
comúnmente como una solución acuosa concentrada al 2% y es levemente alcalino de esta
manera. Se ha informado que causa irritación respiratoria dando lugar a rinitis y asma
ocupacional. Raramente causa taticardia en seres humanos. Debido a los efectos irritantes
del glutaraldehído se requiere el uso de un equipo protector para la piel y los ojos de acuerdo
a las normas de las OSHA; los empleados que se encuentren expuestos al glutaraldehido
durante el proceso de limpieza y desinfección requieren el uso de respiradores apropiados.
El glutaraldehído es efectivo frente a virus, células vegetativas y esporas de bacterias y
hongos. Se usa en medicina para esterilizar instrumentos urológicos y ópticos (Arias, 2006).
2.6.2. ORGÁNICOS
a. Alcoholes
Los alcoholes poseen un amplio historial de uso como desinfectantes. La mayoría de veces,
las mezclas desinfectantes están constituidas generalmente de etanol y alcohol Isopropílico
(Isopropanol). El alcohol de mayor uso doméstico como desinfectante es el alcohol etílico,
manufacturado comercialmente al 96%. Este es un líquido claro e incoloro con un olor similar
al etanol (Manring, 1997).
Los alcoholes son compuestos orgánicos, cuya formula general R-OH. El grupo hidroxilo
determina la posible clase de reacción física o fisiológica, la velocidad y extensión de ésta.
Solamente los alcoholes alifáticos (metílico, etílico, propílico, butílico y amílico), de cadena
corta, son usados como antisépticos y desinfectantes en donde la acción bactericida se
incrementa con el peso molecular. Adicionalmente, tienen como características importantes
que son usados como antisépticos y desinfectantes por su miscibilidad con el agua.
33
Las condiciones antimicrobianas de los alcoholes dependen de la actividad de su
concentración, la condición del microorganismo y la coagulación de las proteínas que se ve
influida también por su solubilidad en lípidos, esta ocurre con ciertas concentraciones límite
que comprenden las concentraciones óptimas, lo cual trae como consecuencia la pérdida de
las funciones celulares específicas en donde las enzimas bacterianas localizadas en la pared
celular son más fáciles de inactivar que las que se encuentran dentro de la célula; esta
coagulación de proteínas puede presentarse también sobre la membrana plasmática en
donde se genera una destrucción de aminoácidos y ácidos nucleicos constituyentes del
citoplasma a relativamente baja concentración.
Adicionalmente, en ausencia de agua existe un incremento del peso molecular que hace que
las proteínas no sean desnaturalizadas como en presencia de agua, ésta es la explicación
por la cual el alcohol etílico absoluto es menos bactericida que las mezclas de alcohol agua.
Su acción desinfectante mejora conforme aumenta la longitud de la cadena alifática de los
alcoholes, hasta aquellos con 8 a 10 átomos de carbono ya que los alcoholes de cadena
más larga tienen una solubilidad baja en el agua (Manring, 1997).
b. Fenol y compuestos fenólicos
Varios fenoles se utilizan como desinfectantes. El fenol o ácido carbólico, históricamente uno
de los primeros desinfectantes en usarse, solo se emplea en la actualidad como patrón para
ensayar el poder desinfectante de otros compuestos. Una solución acuosa al 5% de fenol
elimina rápidamente células vegetativas, pero las esporas son más resistentes. El fenol y
compuestos derivados alteran la permeabilidad de la membrana citoplasmática así como
también desnaturalizan las proteínas. (Arias, 2006).
A partir del fenol se pueden lograr desinfectantes con mayor actividad antibacteriana con
menor toxicidad y mejor olor sustituyendo hidrógenos del anillo bencénico por radicales
alquílicos o halogenados; el cresol es un alquil fenol con radical alquílico que puede estar en
posición orto, meta o para, dando respectivamente el orto cresol, meta cresol y el para
cresol. Normalmente se emplea la mezcla de los tres, denominándose Tricresol (Anderson,
1999).
34
c. Ácidos y álcalis
Son activamente bactericidas, actúan alterando la permeabilidad y coagulando las proteínas,
debido a sus grupos H+ y OH
- disociados, respectivamente. En principio, su actividad es
proporcional al grado de disociación, pero algunos hidróxidos son más potentes de lo
sugerido por su grado de disociación, debido a la acción tóxica directa que puede ejercer el
catión metálico (Franklin, 1989).
En general los ácidos son más eficaces que los álcalis. Dentro de estos compuestos se
encuentran el sulfúrico (H2SO4), nítrico (HNO3), hidróxido sódico (NaOH) e hidróxido
potásico (KOH). Tienen aplicación limitada debido a su naturaleza cáustica y corrosiva. Aún
así el NaOH se utiliza en la industria del vino para limpiar las cubas de madera. (Arias, 2006)
d. Peróxido de hidrógeno
Hace parte de este grupo y es muy utilizado en la industria farmacéutica y cosmética, debido
al bajo costo y a la eficiencia frente a bacterias aerobias. Su acción antimicrobiana radica en
la oxidación directa de estructuras bacterianas o por la liberación de oxígeno:
( 2H2O2 Catalasa O2 + 2H2O).
Los dos componentes principales del peróxido de hidrógeno son el oxígeno, el cual es un
gas incoloro, inodoro e insípido, poco soluble en agua; característica que aumenta la
prolongación del efecto desinfectante; y el hidrógeno que es uno de los elementos más
importantes pues se encuentra en todos los organismos vivos, tanto en las plantas como en
los animales. El hidrógeno se emplea en el laboratorio como agente reductor; teniendo en
cuenta que tiene la capacidad de reducir ciertas sustancias a un estado menor de oxidación,
en pocas palabras cuando un átomo de alguna especie química disminuye su carga eléctrica
(Henao, 1995).
En cuanto a la toxicidad del oxígeno para los microorganismos, es sabido que durante la
respiración se forman cantidades pequeñas de radicales libres superóxido (O2). Estos
35
radicales libres son tóxicos para los componentes celulares, de tal suerte que los
microorganismos que crecen en presencia de oxígeno, como aceptor final de electrones,
deben sintetizar una enzima la superóxido dismutasa, para neutralizarlos. Gracias a ésta
enzima, los radicales superóxido se transforman en oxígeno molecular (O¯2
) y peróxido de
hidrógeno (H2O2). El peróxido de hidrógeno es también tóxico, pero se convierte
inmediatamente en oxígeno molecular y agua mediante la enzima catalasa.
También la peroxidasa destruye al peróxido de hidrógeno. El Ión peróxido (O²-) es otra forma
tóxica del oxígeno, que se genera en pequeñas cantidades en la respiración normal. El
último producto de la reducción normal, el radical hidroxilo libre (2+ ) es muy reactivo. Se
produce principalmente por las radiaciones ionizantes, también en la reacción entre radicales
libres superóxido y peróxido (Cuesta, 2004).
e. Agentes oxidantes halogenados
Son bactericidas muy útiles y muy potentes. El iodo no tiene parangón como desinfectante
de la piel, aparte de su efecto oxidante, se combina irreversiblemente con residuos de
tirosina de las proteínas. Sus principales presentaciones son la tintura de iodo y los
iodóforos, y el cloro fue uno de los primeros antisépticos en usarse (antes de conocerse su
mecanismo, e incluso antes de que se supiera el auténtico papel de los microorganismos en
las enfermedades infecciosas). El cloro se presenta bajo las formas de Cl2 (gaseoso),
hipocloritos y cloraminas. La muerte de los microorganismos por acción de éste se debe en
parte a la combinación directa del cloro con las proteínas de las membranas celulares y las
enzimas. (Arias, 2006).
La actividad biocida de estos compuestos se debe fundamentalmente a la capacidad de
formar acido hipocloroso no disociado y a la liberación de cloro libre. La concentración de
acido hipocloroso no disociado depende directamente de pH de la solución. El siguiente
sistema de ecuaciones químicas muestra la relación existente entre los desinfectantes
liberadores de cloro y su relación con la concentración de acido hipocloroso, cloro libre y el
pH del medio.
Desinfectante liberador de cloro H2O HClO Cl2 + H2O
Activo ClO- + H
+
36
Inactivo determinado por el pH
El hipoclorito de sodio (NaClO), se disocia en el agua para producir ion hipoclorito (ClO-) y el
ion sodio (Na+), según la siguiente reacción:
NaClO ClO- + Na
+
Hipoclorito de sodio Ion hipoclorito Ion sodio
Simultáneamente el ion hipoclorito en presencia de agua genera los siguientes equilibrios
químicos:
OCl- + H+ HClO + HCl
Ion hipoclorito hidrogenion
acido hipocloroso
HClO + HCl Cl2 + H2O
Fuente: Malagón, 1999.
f. Amonios cuaternarios
Son sales, con acción anfótera, que no poseen color, ni olor, ni sabor. Son agentes
desinfectantes que por su acción detergente, rompen la membrana citoplasmática debido a
que disuelven las capas lipídicas, además desnaturalizan las proteínas. Estos son
ampliamente utilizados en desinfección de instrumentos y sanitización de ambientes. La
limitación de estos productos es que no son esporicidas y su efecto puede ser neutralizado
por otros compuestos, como jabones, detergentes aniónicos y en menor cantidad por
materia orgánica ( Tortora, 2001).
Algunos ejemplos son:
· Cloruro de Benzalconio: Es un amonio cuaternario, de color blanco amarillento, de olor
aromático y altamente soluble en agua y alcohol. Su forma anhídrido es soluble en éter.
Estos surfactantes se disocian en solución acuosa en tiempos relativamente largos. Son
muy buenos germicidas frente a bacterias Gram positivas y algunas Gram negativas.
Algunas Pseudomonas sp. son resistentes y también Mycobacterium tuberculosis.
37
El espectro de acción no interfiere frente a la destrucción de esporas. La actividad es buena
frente a Candida albicans y frente a hongos, pero no es eficiente frente a virus. El efecto
antibacterial es variable, pero se puede mejorar con 0.175% de alcohol benzílico o fenil
propanol (Jawetz, 2001).
Los efectos de los amonios cuaternarios se han agrupado en:
Sobre proteínas: Por el efecto tensoactivo, desnaturaliza proteínas por disociación a nivel del
grupo prostético.
Sobre el metabolismo: Interactuando con las enzimas a nivel citoplasmático, estimulando la
glicólisis y alterando la dinámica enzimática de la célula.
Sobre la permeabilidad celular: Produciendo pérdida de iones de potasio y disminuyendo la
actividad de coenzimas (Aldana, 1999).
· SANIT – 10
Sanitizante a base de amonio cuaternario (Superquat), formulado para ser usado en
preparaciones de procesamiento de alimentos, escuelas, clínicas, hospitales, restaurantes e
instituciones en general. Sanitizante para superficies en contacto con alimentos,
desinfectante de frutas y verduras. (Arias, 2006).
g. TEGO 51
Es un desinfectante compuesto por aminoácidos de alto peso molecular, tensoactivo que
ocupa una posición particular. Es un anfótericida debido a que contiene grupos catiónicos y
aniónicos dentro de la misma molécula que tiene como fórmula química dodecil-di
(aminoetil)-glicina. Es un producto soluble en agua, se utiliza una solución desinfectante
caliente a 50ºC. La capacidad bactericida se enfoca en la adsorción de las paredes
celulares, también atraviesa la pared celular cargada negativamente reduciendo pérdida de
potasio y generando una desnaturalización de proteínas (Arias, 2006).
38
Se recomienda su empleo para desinfección de mesas de trabajo, utensilios, en una solución
al 1% (1:100) con tiempo de actuación de 15 minutos. Las concentraciones varían en función
de las necesidades microbiológicas para desinfección normal (Aldana, 1999),
adicionalmente, diferentes estudios han reportado la eficacia de TEGO 51 en evaluaciones
acerca de la eficacia contra Campylobacter jejuni, Listeria monocytogenes, Staphylococcus
aureus, algunos virus como Herpes virus, Adenovirus y Rhabdovirus (Mossel, 1985).
El TEGO 51 posee las siguientes características:
· No contiene ni cloro liberable, ni ácidos, ni álcalis.
· No es corrosivo.
· Forma una capa fina insoluble en las superficies previniendo la infección de nuevos microorganismos (Mossel, 1985).
PARÁMETRO VALOR
Densidad 1000+-0.005g/cc a 20º C
Viscosidad 7.5+5.0mPa. a 20º C
Índice de pH Sin diluir 2+/- 03Solución acuosa 1%
8.3+/- 0.5
Tensoactividad Solución acuosa al 1% -27.8+-0.5mN/m
20º C
Conductividad Solución acuosa al 1% 640+100
micras/cm 20º C
Solubilidad Miscible con agua en cualquier proporción.
TABLA 1. Características Fisicoquímicas TEGO 51.
Fuente: Aldana, 1999.
2.7 NIVELES DE DESINFECCION.
De acuerdo al tipo de agente que es capaz de destruir, se han definido tres niveles de
desinfección: alta, intermedio y bajo.
· Alta: Elimina todos los microorganismos incluyendo los virus resistentes.
39
· Intermedia: Elimina formas vegetativas de bacteria, hongos y virus, pero no
necesariamente todos los virus de tamaño pequeño no lipídico.
· Baja: Elimina bacterias patógenas en su forma vegetativa y algunos hongos.
2.8 FACTORES QUE AFECTAN LA EFICACIA DE LOS PRODUCTOS
DESINFECTANTES.
La eficacia de los productos desinfectantes puede ser influenciada por múltiples factores
dentro de los cuales la concentración, temperatura de aplicación y tiempo de contacto son de
primera importancia. Por otro lado, además de estas características la forma de aplicación,
la materia orgánica, los tipos de superficies y los microorganismos contaminantes serán
determinantes en la eficacia del producto. Según Holah, los factores con mayor influencia en
la capacidad desinfectante son tipo de agua, condiciones de crecimiento y tipo de
microorganismo, sustancias interferentes, pH, temperatura, tiempo y concentración de
desinfectante (Holah, 1995).
2.8.1. AGUA
Es el solvente por excelencia de los productos de limpieza y desinfectantes y el elemento
que arrastra la suciedad. El nivel de humedad disponible se mide con base en la actividad de
agua y sirve para determinar si se producirá alteración de los productos por multiplicación de
microorganismos. Por otro lado, la presencia de agua aumenta el efecto letal del calor sobre
los microorganismos a lo largo del proceso de limpieza. El agua contiene diversas impurezas
ambientales (gases disueltos, sales inorgánicas, sustancias orgánicas solubles). Excepto en
el caso de que se haya destilado en condiciones controladas (I.C.M.S.F.1980).
Las aguas “duras” contienen Calcio y Magnesio, en menor proporción otros iones (Hierro,
Manganeso, Aluminio, Estroncio o Zinc), hasta una tasa total de 60 ppm o superior. Esta
agua al reaccionar con jabones, detergentes aniónicos, sustancias bicarbonatadas o
desinfectantes dan lugar a una reducción de la capacidad antiséptica de estos productos.
Las aguas se pueden “ablandar” adicionando sustancias secuestrantes, como tripolifosfato
cálcico a una mezcla de cal y soda cáustica, que elimina la dureza por precipitación o mejor
aún, tratando las aguas por un procedimiento conocido como Zeolite, que utiliza resinas
40
intercambiadoras de iones, con el fin de reemplazar los iones metálicos alcalinos por sodio.
(I.C.M.S.F.1980).
Las aguas blandas son las que tienen muy pocos minerales. Producen mucha espuma
cuando se les mezcla con el jabón. Las aguas de pozos o aquellas que proceden de aguas
superficiales suelen ser aguas blandas. El agua mas blanda es el agua destilada que no
posee ningún mineral. Asimismo, es importante conocer las características químicas del
agua, puesto que la gran variedad de sustancias que se pueden encontrar disueltas y
suspendidas en ella pueden ser causantes de interferencias en los procesos de limpieza no
permitiendo la obtención de una superficie aséptica que es lo que se busca con este tipo de
procesos . Algunos parámetros sirven para medir las propiedades comunes a muchas
sustancias a la vez, uno de estos parámetros es la acidez que es la capacidad que tiene el
agua de neutralizar una base fuerte, en las aguas superficiales se produce por la formación
de ácidos fuertes, por la disolución del gas carbónico o la actividad microbiana en el agua
por algunos minerales que contienen el suelo como el yeso o cuando la fuente recibe cargas
industriales acidas. Se dice que las acidez es débil cuando es causada por la disolución del
gas carbónico presente en la atmósfera o cuando ésta es producida por la actividad
microbiana del agua. Para prevenir daños de corrosión el agua no debe tener un pH mayor a
6.5. (Holah, 1995).
2.8.2 CONDICIONES DE CRECIMIENTO Y TIPO DE MICROORGANISMO
Idealmente un desinfectante debe tener un amplio espectro contra bacterias, hongos, virus y
esporas. Las formas microbianas más resistentes son las esporas, seguidas por los hongos,
los bacilos Gram negativos, los cocos y por último los bacilos Gram positivos. (Herruzo,
2000).
Es conocido que el microorganismo es más resistente si se encuentra formando biofilms,
que cuando está en suspensión. Esta estructura compleja donde se encuentran los
microorganismos ejerce un efecto protector e interferente y dificulta la acción de los
desinfectantes. (Holah, 1995).
Por otro lado, cuando la carga microbiana es muy alta se requiere una mayor concentración
de desinfectante y un mayor tiempo de exposición; de ahí la necesidad y recomendación de
41
limpiar siempre la superficie previa a la aplicación, pues reducirá en parte la carga
microbiana y facilitará la acción del desinfectante. (Herruzo, 2000).
2.8.3 SUSTANCIAS INTERFERENTES
La eficacia de los productos sanitizantes está ligada a la presencia o ausencia de materia
orgánica e inorgánica, principalmente debido a reacciones químicas no específicas. La
materia orgánica puede reaccionar no específicamente con el desinfectante consumiendo
parte del producto aplicado, lo que hace disminuir su concentración efectiva evidenciándose
una pérdida clara de la potencia del producto. Algunos materiales también pueden ser
afectados por materiales inorgánicos tales como sales presentes en el agua de dilución
(Holah, 1995).
Además de la materia orgánica existen otros elementos como jabones, gomas, corcho, que
pueden reaccionar con el desinfectante y neutralizarlo (Herruzo, 2000).
2.8.4 EL pH
Los desinfectantes pueden ser afectados por le pH del agua en el que se diluyen, por lo que
solo deben ser utilizados en el rango de pH recomendado por el fabricante. El pH afecta el
grado de ionización del producto. Las formas ionizadas de los productos son capaces de
atravesar más fácilmente la membrana de los microorganismos. (Holah, 1995).
2.8.5 TEMPERATURA
Los desinfectantes deberán ser efectivos en el más amplio rango posible de temperaturas y
ser aplicados entre los límites de temperaturas indicados por los fabricantes; estas oscilan
entre 5ºC y máximas de 55ºC. En la mayoría de productos al aumentar la temperatura
aumenta su eficacia hasta alcanzar un punto máximo de eficacia, lo que se considera la
temperatura óptima de aplicación, punto a partir del cual el incremento de la temperatura
produce una perdida del potencial biocida como ocurre con el peróxido de hidrógeno el cual
a temperaturas mayores de 45ºC se vuelve inestable.
42
La temperatura del agua juega un papel importante en el proceso de limpieza y desinfección,
al ser calentada tiene importantes aplicaciones; cuando el agua alcanza altas temperaturas,
por si sola es capaz de emulsificar las grasas de las superficies, desprender partículas
orgánicas y producir una breve acción bactericida antes que la superficie se enfrié (Gallardo,
2002).
La estabilidad de algunos desinfectantes, por ejemplo los halógenos, desciende rápidamente
a altas temperaturas. El Cloro y el Yodo se descomponen rápidamente a altas temperaturas
alrededor de los 60ºC y 48ºC, respectivamente. También, algunos desinfectantes, por
ejemplo el cloro, se tornan más corrosivos en superficies o peligrosos de manejar a altas
temperaturas (Fleitas, 1994).
2.8.6 TIEMPO DE CONTACTO
Para que los desinfectantes sean efectivos en primer lugar deben atravesar la envoltura
celular hasta sus sitio diana. Un tiempo de contacto suficiente del desinfectante con la célula
es por lo tanto requerido y es un punto crítico para asegurar desinfección y alcanzar el
propósito general de la mayoría de desinfectantes, que es reducir la población en un orden
de 5 unidades logarítmicas en 5 minutos de contacto en una prueba de suspensión. (Holah,
1995).
En los productos que forman espuma o son geles los tiempos de aplicación suelen ser
superiores a 5 minutos, alcanzando tiempos de 10 a 15 minutos para espumas y superiores
de 15 para geles. Por otro lado, el tiempo de aplicación va ligado a la concentración de
desinfectante aplicada. Cuando se utilizan concentraciones bajas, por lo general, los tiempos
de aplicación suelen ser mayores y viceversa estando para la mayoría de los casos entre 10
y 15 minutos (Herruzo, 2000).
2.8.7 CONCENTRACIÓN
Cuando se aplica una preparación de desinfectante sobre una superficie o en una prueba de
suspensión, la relación entre muerte microbiana y concentración de desinfectante no es
lineal, pero se sigue una típica curva de muerte microbiana. En esta curva las poblaciones se
resisten a la muerte a bajas concentraciones de desinfectante, pero cuando la concentración
43
se aumenta este punto se alarga hasta que la mayoría de la población sucumbe a l
desinfectante (Holah, 1995).
2.8.8 FORMULACIÓN
La mayoría de los desinfectantes son usados en soluciones acuosas, las soluciones
alcohólicas de formaldehído y glutaraldehído no son siempre más activas que aquellas
soluciones acuosas de similar espectro. Los desinfectantes fenólicos contienen agentes
activos de superficie para promover la solubilidad de compuestos activos.
Los compuestos de amonio cuaternario son también formulados con detergentes, pero sólo
tipos no iónicos son compatibles y la actividad de la fórmula final debe ser confirmada
mediante pruebas microbiológicas.
La compatibilidad de los detergentes para la combinación con desinfectantes clorados y
yodados debe ser también verificada. El espectro antibacterial de formulaciones fenólicas
está influenciado por los tipos de fenoles usados. Algunos son más activos contra bacterias
Gram positivas y otros contra bacterias Gram negativas (Garnedner, 1991).
2.9 CARACTERÍSTICAS DE UN BUEN DESINFECTANTE.
Ningún agente antimicrobiano solo es mejor o ideal para el propósito requerido. Si existiera
un desinfectante ideal tendría que cumplir con los siguientes requisitos:
2.9.1 ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA
La sustancia a utilizar debe ser capaz de matar microorganismos, teniendo en cuenta que a
baja concentración deberá tener un amplio espectro de acción (Pelczar, 1994).
44
2.9.2 CONCENTRACION DEL AGENTE
Muchos desinfectantes solo son efectivos frente a bacterias cuando se utiliza altas
concentraciones del mismo. Otros pueden estimular, retardar o incluso destruir el
microorganismo a concentraciones muy bajas. Sin embargo, la concentración requerida para
producir un efecto dado, así como el espectro de concentración con el cual es demostrable
el efecto, varía con el desinfectante, el organismo y el método de prueba.
Existe una relación entre el desinfectante utilizado y el tiempo requerido para destruir una
fracción de la población. Esta se representa con la siguiente ecuación:
Cn t= K
Donde C es la concentración del agente, t es el tiempo requerido para destruir una fracción
dada de la célula y n y K son constantes (Joklink, 1986).
Con los compuestos fenólicos, un cambio en la concentración del desinfectante tiene un
notable efecto sobre la velocidad de desinfección, o sea, la reducción de la concentración a
la mitad incrementa en aproximadamente 64 veces al tiempo requerido para la esterilización.
Sin embargo, con muchos desinfectantes, el efecto es menos dramático (Joklink, 1986).
2.9.3 ESTABILIDAD
Los cambios en la estabilidad de la sustancias deberán ser mínimos y no afectar
considerablemente la acción germicida (Pelczar, 1994).
2.9.4 SOLUBILIDAD
La sustancia deberá ser soluble en agua y otros disolventes en la medida necesaria para uso
eficaz (Pelczar, 1994).
45
2.9.5 TOXICIDAD
La sustancia utilizada no deberá ser tóxica para los hombres y animales, pero si deberá ser
letal para los microorganismos.
2.9.6 HOMOGENEIDAD
La preparación deberá ser uniforme en su composición de manera que los ingredientes
activos se encuentren en cada aplicación. Las sustancias químicas puras son uniformes,
pero la mezcla de sustancias puede traer como consecuencia perdida de homogeneidad.
2.9.7 NO DEBERÁ REACCIONAR CON MATERIAL ORGÁNICO EXTRAÑO.
Muchos desinfectantes tienen afinidad por las proteínas y otros materiales orgánicos.
Cuando se usan estos desinfectantes en situaciones en las que además de bacterias hay
cantidades considerables de material orgánico, muy poco, si no es que nada del
desinfectante, estará disponible para actuar contra los microorganismos (Pelczar, 1994).
2.9.8 NO DEBERÁ CORROER NI TEÑIR
No deberá producir manchas u otras alteraciones en los metales, o teñir y dañar las telas.
2.9.9 PROPIEDADES DESODORANTES
Aunque no es ideal, es deseable que tenga atributos desodorantes así como desinfectantes.
Lo ideal es que el desinfectante por si mismo tenga olor agradable o sea inodoro.
46
2.9.10 CAPACIDAD DETERGENTES
Un desinfectante que a la vez sea detergente (agente limpiador) logrará dos objetivos pues
la acción limpiadora aumentará la eficacia del desinfectante (Pelczar, 1994).
2.9.11 DISPONIBILIDAD
El compuesto deberá estar disponible en grandes cantidades y a un valor razonable.
(Pelczar, 1994).
2.9.12 TIEMPO DE EXPOSICIÓN
Al exponer las bacterias a una concentración determinada del agente bactericida, incluso en
exceso, no todos los organismos mueren al mismo tiempo, sino que hay una disminución
gradual en el número de células vivientes.
La desinfección se considera un proceso en el cual las bacterias son destruidas durante un
tiempo razonable, pero hay diversas opiniones acerca de cual debería ser este tiempo
(Joklink, 1986).
2.10. LEGISLACIÓN NACIONAL E INTERNACIONAL QUE NORMALIZA LA INDUSTRIA
FARMACÉUTICA
a. BPM Informe 32 OMS
Cada uno de los aspectos de fabricación de productos farmacéuticos y cosméticos debe ir
acompañado de un elevado nivel de saneamiento e higiene, el cual debe abarcar el
personal, instalaciones, equipos y aparatos, materiales y recipientes para la producción,
productos de limpieza y desinfección, y todo aquello que pueda ser fuente de contaminación
47
del producto. Todas estas posibles fuentes deben ser eliminadas mediante un programa
amplio de saneamiento e higiene.
Es sumamente importante el saneamiento de áreas limpias. Deben limpiarse en forma
completa y con frecuencia y de conformidad con un plan escrito aprobado por el
departamento de control de calidad. En caso de que se empleen desinfectantes, debe
usarse más de un tipo cambiándolos periódicamente. Durante los controles periódicos la luz
ultravioleta no debe ser usada en sustitución de la desinfección química.
Los desinfectantes y detergentes deben controlarse para detectar su posible contaminación
microbiana; las diluciones deben mantenerse en recipientes limpios y no deben ser
guardados por mucho tiempo a no ser que hayan sido esterilizados. Si un recipiente está
parcialmente vació no debe rellenarse (Informe 32 OMS, 2003).
La fumigación de las áreas limpias puede ser útil para reducir la contaminación
microbiológica en lugares inaccesibles.
Durante las operaciones, las áreas limpias deben controlarse a intervalos preestablecidos,
mediante el conteo microbiano del aire y de las superficies; cuando se llevan a cabo
operaciones asépticas, dicho control debe ser suficientemente frecuente como para asegurar
que el ambiente esté dentro de las especificaciones (Informe 32 OMS, 2003).
2.11 PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDAR DE SANEAMIENTO (POES).
Estos procedimientos describen las tareas de saneamiento. Se aplican antes, durante y
después de las operaciones de elaboración. Estos son un requerimiento fundamental para la
implementación de sistemas que aseguren la calidad de los medicamentos.
Para la implementación de los POES, al igual que en los sistemas de calidad, la capacitación
y selección del personal responsable cobra suma importancia.
48
Los POES deben identificar procedimientos de saneamiento preoperacional y deben
diferenciarse de las actividades de saneamiento que se realicen durante las operaciones en
líneas generales, una empresa elaboradora debe disponer, como mínimo de los siguientes
POES:
· Lavado y antisepsia de manos.
· Saneamiento de líneas de producción.
· Saneamiento de áreas de recepción.
· Depósito de materias primas.
· Intermediarios y productos terminados.
· Saneamiento de líneas de saneamientos internas y externas de la planta.
· Saneamiento de paredes, techos, zócalos, pisos y ventanas.
Una de las características invalorables de la aplicación de los POES es la posibilidad de
responder inmediatamente frente a fallas en la calidad de los productos, debidas a un
problema de higiene. Sin olvidar que un buen programa de saneamiento, tiende a minimizar
la aparición de tales fallas. Entonces, más allá de la obligatoriedad de los POES, es
indispensable entender que la higiene determina un conjunto de operaciones que hace parte
integrante de los procesos de Buenas prácticas de manufactura (BPM). Así la eficacia de un
POES depende solo de los métodos y los agentes de saneamiento utilizado (Suárez, 2006).
Cada establecimiento debe tener un plan escrito que describa los procedimientos diarios
que se llevarán a cabo durante y entre las operaciones, así como las medidas correctivas
previstas y la frecuencia con la que se realizarán para prevenir la contaminación directa o
adulteración de los productos ( INSEC, 2007).
2.11.1 REDACCION DE LOS POES
Cada sector que genere un POE deberá consultar a Garantía de Calidad para una correcta
asignación del mismo.
Los POES deben ser generados por cada sector en conjunto con Garantía de Calidad el cual
49
indicará los lineamientos generales del mismo como ser: formato, letra (tipo y tamaño), tipo
de hoja, etc.39
. En general, los procedimientos operativos deberán ser elaborados con base
en la estructura documental interna de cada industria donde se implemente el programa de
limpieza y desinfección.
2.12 RESEÑA HISTÓRICA DE ANGLOPHARMA S.A.
2.12.1 HISTORIA
ANGLOPHARMA S.A. fue constituida el 1° de marzo de 1984, con 25 personas, quienes
hacían parte de su planta, la cual hoy en día se ha incrementado a una cifra superior a los
180 colaboradores a nivel nacional.
Es una compañía farmacéutica dedicada a la elaboración y comercialización de
medicamentos para consumo humano que comenzó con 15 sustancias aproximadamente
como parte de su portafolio el cual ahora se apoya en más de 130 sustancias y múltiples
presentaciones.
2.12.2 POLÍTICA DE CALIDAD
El Sistema de Gestión de la Calidad se orienta hacia la satisfacción de las necesidades de
los clientes, apoyados en el cumplimiento de la normatividad vigente, con énfasis en las
buenas prácticas de manufactura.
ANGLOPHARMA S.A. está comprometido con el mejoramiento continuo de sus procesos,
asimismo de facilitar un ambiente integral que permita el desarrollo y bienestar del talento
humano, la participación de sus proveedores en la cadena de calidad, obtener mayores
niveles de productividad, asegurar solidez y ofrecer mejores utilidades a sus accionistas.
50
2.12.3 VISIÓN
Estar en el 2009 dentro de los 12 primeros laboratorios de genéricos en Colombia; por
ventas en unidades y en pesos en el mercado nacional y por ventas en os mercados de 5
países de Centroamérica y el Pacto Andino.
2.12.4 MISIÓN
ANGLOPHARMA S.A. es una empresa dedicada a elaborar y comercializar productos
farmacéuticos de excelente calidad para consumo humano, conforme a la ética y el
cumplimiento de la normatividad vigente, con el fin de satisfacer las necesidades de nuestros
clientes y del consumidor final, cubriendo los mercados genérico de consumo y de marca.
51
3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
La evaluación y actualización de un programa de limpieza y desinfección encaminado al
mejoramiento continuo de los procesos requiere de un compromiso de todo el personal del
laboratorio farmacéutico, ya que gracias al apropiado manejo que se le de a dicho programa,
va a depender en gran medida la calidad de los productos ofrecidos a los consumidores.
Por otro lado, un mal manejo de este puede generar alteraciones en la salud de los
consumidores y retardar la evolución competitiva y la imagen corporativa de la empresa.
El laboratorio ANGLOPHARMA S.A. actualmente cuenta con un programa de limpieza y
desinfección el cual requiere mejoras y actualizaciones en la evaluación y uso de los
desinfectantes, teniendo en cuenta que en diferentes pruebas microbiológicas de ambientes
en áreas controladas se han encontrado desviaciones en los resultados frente a los
estándares establecidos internamente para el área de manufactura, las cuales están siendo
frecuentes y se ven reflejados en los resultados obtenidos en las muestras de ambientes
que se realiza semanalmente en el área blanca. Por lo tanto, no existe garantía en el
cumplimiento de la sanitización; al no tomar las medidas de saneamiento necesarias, se
podría ver afectada la calidad de los medicamentos a comercializar. Con este trabajo se
busca actualizar, apoyar y reforzar los procedimientos de limpieza y desinfección existentes
actualmente en ANGLOPHARMA S.A.
52
4. JUSTIFICACIÓN
Para los laboratorios farmacéuticos es de vital importancia prever y controlar la aparición de
microorganismos que puedan alterar la composición de los principios activos, l o s
excipientes, sus productos, su acción y por ende la calidad de los mismos.
Al ingerir productos que no representen buena calidad puede llegar a generarse ciertas
patologías viéndose reflejadas no en su mejora, sino en un deterioro de la salud. Es por este
motivo que existen sistemas de reglamentación nacional e internacional como los son las
BPM, que dan lineamientos generales para implementar procedimientos que garanticen la
calidad de los productos de las industrias farmacéuticas como ANGLOPHARMA S.A. ,
basándose en controles microbiológicos, desde la recepción de la materia primas y
materiales de envase primario hasta el final del proceso.
Las diferentes actividades llevadas acabo en ANGLOPHARMA S.A. requieren de un
adecuado proceso de limpieza y desinfección para evitar el desarrollo de microorganismos
que pueden presentarse en este; para ello es esencial identificar los puntos críticos de
contaminación que se pueden originar durante todo el proceso, el o los tipos de
microorganismos que puede interferir, y así establecer el método de limpieza a implementar
como el o los tipos de desinfectantes a utilizar, tendiendo en cuenta que no afecten l a
propiedades organolépticas, químicas o fisicoquímicas de los productos y la seguridad del
personal que manipula los mismos.
ANGLOPHARMA S.A. tiene como meta ampliar su mercado y comercializar sus productos
dentro y fuera del país, por lo que ha visto la necesidad de actualizar e implementar un
adecuado programa de limpieza y desinfección teniendo en cuenta que este juega un papel
esencial para alcanzar dicho objetivo. Además de esto, es indispensable dar a conocer de
manera fácil el programa a las personas que realizan el trabajo de la limpieza y desinfección
para que sea llevado acabo de forma adecuada; por lo que se hace necesaria la elaboración
de cartillas que ayudarán en el proceso de capacitación y entendimiento.
53
5. OBJETIVOS
5.1 Objetivo general:
Revisar, evaluar y actualizar el programa de limpieza y desinfección de ANGLOPHARMA
S.A, para que se garantice y se controle un bajo nivel carga microbiana en las áreas blancas
de manufactura, siguiendo los parámetros nacionales e internacionales.
5.2 Objetivos Específicos
· Realizar la evaluación de los desinfectantes utilizados en el área de manufactura con
cepas propias de esta, con el fin de determinar o ratificar las concentraciones
óptimas de los desinfectantes a utilizar.
· Elaborar cartillas instructivas de fácil manejo para los operarios que llevan a cabo el
proceso de limpieza y desinfección en las diferentes áreas de manufactura.
· Capacitar y entrenar el personal del laboratorio para que ejecute de forma adecuada
el programa establecido.
54
6. MATERIALES Y MÉTODOS
6.1 El diseño de la investigación (Experimental o Investigativos): El estudio que se
realizó fue de tipo investigativo y experimental, se realizó una lista de chequeo con el fin de
evidenciar el estado actual del área de manufactura basada en lineamientos dados por el
informe 32 de la OMS, posterior a esto, se realizó un análisis retrospectivo por medio de
datos estadísticos, en donde se tomaron los resultados de la toma de ambientes semanales
del área de manufactura de enero a octubre de 2008. La parte experimental se llevó a cabo
por medio de una revisión-evaluación del M-VRC-001-016 ( Manual de técnicas de análisis
microbiológicos) de Anglopharma S.A. con el fin de recomendar los parámetros para mejorar
el protocolo de evaluación de desinfectantes establecido actualmente en Anglopharma S.A.
Para esto se evaluaron cuatro (4) desinfectantes en distintas concentraciones para
determinar la concentración adecuada a utilizar o ratificar la que actualmente es utilizada en
las áreas de manufactura.
6.1.1 Población de estudio y muestra: Los objetos de estudio fueron cuatro desinfectantes
(Hipoclorito de sodio, cloruro de benzalconio al 0.5%, 1% y 1.5%, Tego 51 al 0.1%, 0.5% y
1% y Alcohol etíl ico a l 70%), empleados en ANGLOPHARMA S.A. en el área de
manufactura, los productos fueron evaluados a la concentración de uso, una por encima y
una por debajo en todos los casos.
6.1.2 Variables del estudio: La variable dependiente del estudio correspondió a las
diferentes concentraciones a evaluar de los desinfectantes utilizados actualmente en el área
de manufactura, y la variable independiente correspondió a las cepas de referencia tomadas
del área de manufactura Levadura Rhodotorula sp, Hongo Neurospora sp y Bacteria Gram
positiva Staphylococcus sp.
6.2 Materiales
· Tubos tapa rosca de 16 x 150 mm.
· Pipeta de 5ml.
· Pipetas de 2ml.
· Micropipeta de 100 a 1000 µl.
55
· Cajas de petri plasticas.
· Asas desechables.
· Gradilla metálica
6.2.1 Medios de Cultivo
· Caldo casoy.
· Agar Plate Count.
· Agar YGC.
· Agar VRB.
6.2.2 Cepas
· Cepas puras de microorganismos a. evaluar obtenidas del área de manufactura (Gram
positivas, hongos y levaduras).
6.2.3 Reactivos
· NaCl al 0.9%estéril.
· Solución de Cloruro de Bario al 1 %.
· Solución de Acido Sulfúrico al 1 %.
· Tego 51 (0.1%, 0.5% y 1.5%).
· Hipoclorito de sodio (0.5%, 1% y 1.5%).
· Cloruro de Benzalconio (0.5%, 1% y 1.5%).
· Alcohol al 70%.
6.2.4 Equipos
· Incubadora 36°C ± 3°C.
· Incubadora 24oC± 3
oC.
· Autoclave.
56
6.3 Metodología
6.3.1 Observaciones tenidas en cuenta según manual de técnicas microbiológicas
evaluación de desinfectantes (M-VRC-001-016) de Anglopharma S.A
· Se deben preparar por lo menos tres (3) concentraciones diferentes de cada
desinfectante.
· Se debe trabajar con cultivos que no tengan más de 48h para bacterias y 5 a 7 días
para hongos y levaduras.
· Los tubos del patrón de Macfarland preparados se conservan entre 8 y 30oC
protegidos de la luz.
· No se deben abrir los tubos de MacFarland después de preparados y deben ser
sellados con papel parafinado.
· Si se observan partículas grandes en la suspensión se deben descartar los tubos y
preparar nuevamente la suspensión.
· Antes de usar los tubos de MacFarland deben ser agitados mecánicamente.
· Si el producto a evaluar es turbio realizar viabilidad en caja para confirmar
resultados.
6.3.2 Modificaciones a la técnica de la norma NTC 2455 del ICONTEC según
requerimientos de ANGLOPHARMA S.A:
a. No se realizo con cepas ATCC debido a que en la empresa ya se había realizado un
estudio inicial con estas.
b. Se aislaron cepas propias del área blanca de ANGLOPHARMA S.A ya que se buscaba
observar el comportamiento del desinfectante frente a cepas propias del área
c. No se realizo comparación con el fenol debido a que no habían las condiciones necesarias
para manejar ese tipo de reactivos puesto que son tóxicos y no se contaba con las medidas
de seguridad necesarias para su manipulación..
6.3.3 Obtención de las cepas a evaluar:
a. Para la obtención de los microorganismos en el área blanca de Anglopharma s.a se
tomaron muestras de ambientes con el equipo MAS 100ECO instrumento que aspira el aire
através de una placa preformada dirigiendo las partículas de aire hacia la superficie del
medio de cultivo especifico para la recuperación de cada microorganismo. Para obtener
57
estos se utilizo medio Plate Count para la recuperación de bacterias totales, para
recuperación de bacterias Gram negativas agar VRB (Violet Red Bile) y en medio YGC
(Yeast Glucose Chloranfenicol) para la recuperación de hongos y levaduras, posteriormente
estas fueron incubadas a 37oC y 25
oC respectivamente.
b. A partir de las colonias obtenidas se realizó la caracterización morfológica por medio de
la coloración de Gram, posterior a esto se realizó un aislamiento de las colonias presentes
en medios nutritivos.
c. La identificación de microorganismos por características de las colonias en medios
sólidos no garantizan la pureza del microorganismo ni la especie a la que pertenece debido
a esto no puede ser fiable para una identificación, e s por esta razón que se realizó el
aislamiento de las cepas y una posterior caracterización mediante un sistema apropiado para
este fin.
d. Una vez obtenido el crecimiento en el medios sólidos esta cepa fue enviada a
laboratorios Farmacoop en donde se realizó una identificación bioquímica por medio de un
montaje de un sistema API 20A para identificación de bacterias Gram Positivas debido a que
el laboratorio Anglopharma S.A no contaba con esta prueba.
6.3.4. Preparación escala de MacFarland
La finalidad, es establecer una relación entre una precipitación química y una suspensión
bacteriana. Crearon 10 estándares de forma que se pudo detectar la concentración de
nuestras diluciones bacterianas de manera aproximada, ya que depende de factores como el
tamaño de la bacteria y la formación de agregados. La escala se basa en la capacidad de
precipitación del cloruro de bario en presencia de ácido sulfúrico. Con el objetivo de
estandarizar la cantidad de bacterias que se emplean en las pruebas de susceptibilidad
antimicrobiana se preparo una escala de MacFarland que es una serie de patrones de
turbidez diferente, esto permitió realizar una estimación de la densidad de las suspensiones
microbianas. Estos patrones están designados por el número de tubos de la escala descrita
inicialmente por McFarland, la preparación se realizo con un estándar de BaSO4. El principio
se baso en la comparación de la densidad de las suspensiones microbianas a evaluar contra
una ampolla de turbidez conocida.
58
Medir y servir en cada tubo los volúmenes que aparecen en la siguiente tabla.
Tabla 2. Volúmenes correspondientes a la preparación de la escala de McFarland.
TUBO
NO
Solución al
1% de BaCl2
mL
Solución al 1%
de H2SO4 mL
Densidad
aproximada
correspondiente
a bacterias/mL
0.5 0.05 9.95 150’000.000
1 0.1 9.9 300’000.000
2 0.2 9.8 600’000.000
3 0.3 9.7 900’000.000
4 0.4 9.6 1.200’000.000
5 0.5 9.5 1.500’000.000
6 0.6 9.4 1.800’000.000
7 0.7 9.3 2.100’000.000
8 0.8 9.2 2.400’000.000
9 0.9 9.1 2.700’000.000
10 1.0 9.0 3.000’000.000
59
6.3.4 Determinación de la concentración Mínima inhibitoria (CMI)
Figura 1. PREPARACIÓN DEL INOCULO
Inicio
Preparación del inoculo
Transferir a tubos tapa rosca 9mL de NaCl al
0.9%
Esterilizar a 121oC durante 15 min.
A
60
Figura 2: PREPARACION DE LA TECNICA CONCENTRACIÓN MINIMA INHIBITORIA
(CMI)
Transferir a tubo tapa rosca NaCl 0.9%
Tomar placas con suspensión de m.o
Homogenizar
Comparar tubo 1 de McFarland
A
61
Determinar si la concentración
bacteriana corresponde tubo 1 de
McFarland
No
Ajustar suspensión bacteriana
Si
3x108m.o/mL.
10-1 1ml1ml10-2 10-3
3.6 mL de caldo Casoy
2 mL de caldo Casoy
Por cada concentración de desinfectante y cepa a estudiar
Esterilizar a 121oC X 15 min
Tomar el tubo con 3.6 mL y marcar como 1 y los 11 restantes de 2 al 12
B
B
62
1 2 543 1211109876
Descartar 2mL .
Adicionar 0.1mL del m.o a evaluar de la dilución 10_3
preparada anteriormente a cada tubo
Incubar a 36oC +/- X 24- 48h para bacterias y Hongos a 24oC X 6 días.
Repetir la prueba con cada m.oa evaluar y con las diferentes
concentraciones de desinfectantes
B
Transferir 2mL del tubo 1 al 2 y del 2 al 3 y así sucesivamente hasta el #12
Adicionar 0.4 mL de desinfectantey agitar suavemente.
Comparar con la tabla # 2, este indica la CMI de desinfectante que inhibe el
crecimiento de los m.o evaluados.
Observar crecimiento y turbidez e identificar el
primer tubo que presente crecimiento ( ).
Resultado de la evaluación de desinfectantes expresado en mg/L
Fin
63
7. RESULTADOS Y DISCUSION
7.1 LISTA DE CHEQUEO
A continuación se presentan los resultados que se obtuvieron con la lista de chequeo
realizada en el área de manufactura en donde se evidenció el estado actual del proceso y
todas las actividades que en esta se realizan. Se pudo observar que cumplen con la mayoría
de las normas y lineamientos estipulados en el informe 32 de la OMS. Se observó que falta
capacitación al personal sobre los procesos de limpieza y desinfección y claridad en
conceptos básicos de este. Asimismo se encontró fallas en la eliminación de la materia
orgánica debido a que no cuentan con elementos de fácil desinfección ya que utilizan
escobas y recogedores que no deben ser usados en el área blanca por norma BPM.
Pregunta Si No Observaciones
Las áreas de producción son de
acceso restringido solo para personal
autorizado?
X
N.A
Las etapas de fabricación desde la
pasada hasta el envasamiento
primario para cada grupo de principio
activo se realiza en áreas o
instalaciones independientes y
autónomas?
X
N.A
Todas las áreas poseen esclusas
independientes para ingreso de
operarios y de materiales?
X
N.A
Poseen diferenciales de presión? X N.A
Existe un sistema de extracción de
aire que evite descargar contaminante
al medio ambiente?
X
N.A
Se lleva a cabo recirculación del aire
que egresa del área?
X
N.A
Se encuentran disponibles en cada
área o sector productivo todos los
X
N.A
64
p r o c e d i m i e n t o s o p e r a t i v o s
normalizados (POE) que se apliquen
en cada uno de ellos?
Para cada procedimiento están
claramente definidos el propósito,
alcance, referencias y
responsabilidades?
X
N.A
Se realizan continuamente
capacitaciones y seguimiento a los
procedimientos establecidos?
X Falta más capacitación acerca de
procesos de limpieza y desinfección,
no hay claridad en muchos conceptos.
Los procedimientos exhibidos están
vigentes?
X
N.A
Figura las firmas/ inicial del personal
que emite, revisa y aprueba el
documento?
X
N.A
Existen los registros de las acciones
indicadas por los procedimientos?
X
N.A
Los rótulos / etiqueta adheridos a los
recipientes, equipos y otros elementos
auxiliares de producción y áreas son
claros e inequívocos?
X
N.A
Se exhibe la documentación
relacionada con el proceso que se
esta llevando a cabo en cada área?
X
N.A
La documentación se completa en el
momento en que se desarrollan las
acciones?
X
N.A
Están disponibles los procedimientos
de operación y uso de cada equipo?
X
N.A
Se cuenta con procedimientos
detallados y claros sobre el proceso
de limpieza y desinfección en áreas de
X Si pero no son utilizados, ya que no
hay claridad en muchos conceptos y
estos no se siguen totalmente. Hay
65
manufactura? pasos que no son realizados como lo
estipula en procedimiento.
Se realiza procesos de limpieza y
Sanitizacion al finalizar cada proceso
productivo?
X
N.A
Se cuenta con un cronograma d e
rotación de desinfectantes y este se
cumple?
X Acepción de que el desinfectante no
este disponible.
8. AREAS
Esta el área físicamente separada de
las demás dependencias por paredes
u otro tipo de separaciones?
X
N.A
Las superficies de paredes pisos y
cielo rasos son lisas y de fácil limpieza
y las unidades pared-pared piso pared
y cielo raso son de tipo sanitario?
X
N.A
Se cuentan con procedimientos claros
de limpieza y Sanitizaciòn de pisos,
paredes y vidrios en el área de
manufactura?
X
N.A
Están en buenas condiciones de
conservación e higiene?
X
N.A
Se cuenta con procedimientos claros
para la preparación y uso de los
sanitizantes?
X
N.A
Se verifica que el sanitizante usado
este de acuerdo con lo establecido en
el cronograma de sanitizantes?
X
N.A
A excepción de las puertas todas las
aberturas están selladas?
X
N.A
Las tuberías, artefactos de
iluminación, puntos de ventilación y
otros servicios están diseñados de tal
forma que permite su fácil limpieza?
X
N.A
La ventilación es efectiva y con X N.A
66
adecuación de (aire, temperatura,
humedad y filtración) si lo requieren
las materias primas y los productos
manipulados?
Se mide y registra la temperatura y
humedad relativa, si los productos los
requieren?
X
N.A
Se verifica la integridad de los filtros? X N.A
Existen registros? X N.A
Existe un POE de revisión y cambio
de los mismos?
X N.A
Se toman las precauciones necesarias
cuando se trabaja con materias primas
fotosensibles?
X N.A
Cuentan con un sistema para
extracciones localizadas de polvo?
X
N.A
Son efectivos en relación a las
cantidades de polvo generado en los
procesos?
X
N.A
Se evita el riesgo de contaminación
del medio ambiente a través del
sistema de extracción de polvos?
X
N.A
Existen sistemas de seguridad en
aquellas áreas donde se emplean
inflamables?
X
N.A
Las áreas están limpias? X N.A
Se utilizan escobas y recogedores
para la limpieza de las áreas de
manufactura?
X Las BPM no permite la utilización de
este tipo de elementos en áreas
blancas porque no son de fácil
desinfección.
Pasillos y vestieres son sanitizados
diariamente?
X Solo son limpiados más no
sanitizados.
Se cuenta con procedimientos donde
se estipula la frecuencia de la limpieza
X No hay claridad con los días de
Sanitizacion, ni con la frecuencia de
67
y Sanitizacion? estos.
Se establece un periodo de vigencia
de la limpieza?
X
N.A
Estas especificaciones están
establecidas en el POE de limpieza de
cada área?
X Solo se establece que la limpieza se
debe realizar cada vez que se termine
un proceso mas no cada cuanto se
debe limpiar y sanitizar las áreas.
Existen recipientes para la recolección
de residuos identificados como tales?
X
N.A
Están bien tapados? X N.A
9. EQUIPAMIENTO
La ubicación de los equipos facilita su
limpieza así como la del área en la
que se encuentran?
X
N.A
Se cuenta con procedimientos claros
de limpieza y Sanitizacion de equipos?
X
N.A
Se cuenta con procedimientos claros
para la preparación y uso de los
sanitizantes?
X
N.A
Se cuenta con un cronogram a d e
rotación de sanitizante de equipos?
X
N.A
Se verifica sanitizante usado este de
acuerdo con lo establecido en el
respectivo cronograma?
X
N.A
Los equipos en reparación se
identifican como tales?
X
N.A
Todos los recipientes, equipos y
elementos auxiliares, son limpiadas
después de su uso?
X
N.A
Se establece un periodo de vigencia
de la limpieza de equipos?
X No esta establecidos en los periodos
de vigencia de la limpieza de los
equipos solo se estipula limpieza
después de un proceso mas no l a
vigencia de esto.
Estas indicaciones están establecidas X Falta claridad en los periodos de
68
en el POE de limpieza de cada
equipo?
vigencia de la limpieza y Sanitizacion.
Para secadores de lecho fluido existe
un juego de mangas para cada
producto, o aplican proceso de
validación de limpieza que garantice la
no contaminación cruzada?
X
N.A
Esta libre de impurezas el aire
inyectado en los equipos de
recubrimiento?
X
N.A
Se utilizan elementos de protección
para las operaciones que lo
requieren?
X
N.A
Cuales? Caretas, guantes, uniforme, gafas
todo dependiendo de la operación a
realizar.
Se utiliza vestimenta acorde a las
tareas que se realizan?
X
N.A
10. OPERACIONES
Se utilizan elementos de protección
para las operaciones que lo
requieren?
X
N.A
Se utiliza vestimenta acorde a las
áreas y tareas que se realizan?
X
N.A
Los operarios están con los uniformes
limpios y en buenas condiciones?
X
N.A
Antes de iniciar el proceso de
elaboración se verifica que el área de
trabajo y los equipos estén limpios y
libres de materiales de una operación
anterior y/o material extrañola proceso
de fabricación?
X
N.A
El personal de producción realiza la
verificación de peso de las materias
primas empleadas en la elaboración
X
N.A
69
de cada lote?
Se realizan controles microbiológicos
en los ambientes controlados?
X
N.A
Frecuencia de controles
microbiológicas en las diferentes
áreas?
X Una vez por semana
Se exhiben registros? N.A
El personal que ingresa al vestuario se
encuentra ya con ropa protectora de
planta?
X
N.A
Los materiales, equipos y
contenedores están sanitizados?
X No siempre se sanitizan los
contenedores con materia prima antes
de ingresar al cubículo de
manufactura.
Ingresan al área aséptica por esclusa? X N.A
Tabla 1. Lista de chequeo de áreas, equipamiento y operaciones del área de
7.2 ANALISIS RETROSPECTIVO
A continuación se presentan los resultados obtenidos en la estadística de toma de muestras
de ambientes semanales de las diferentes áreas de manufactura en ANGLOPHARMA S. A.
de Enero a Octubre del 2008, en donde se evidenció los procesos de limpieza y desinfección
que se llevaron a cabo en todo el área de procesamiento.
· Mesófilos
Nivel de alerta: 60-80 UFC/m3
Nivel de Acción: 80-100 UFC/m3
Nivel Máximo: 100UFC/m3
· Hongos
Nivel de alerta: 10 UFC/m3
Nivel de Acción: 20 UFC/m3
Nivel Máximo: 30 UFC/m3
70
FIGURA 1. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de tabletería # 1.
FIGURA 2. Promedio de las UFC/m3
de hongos en el área de tabletería # 1.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 Tabletería # 1
Mesófilos (UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0
5
10
15
20
25
30
UF
C/m
3
MESES
Promedio ufc/m3 de Enero a Octubre de 2008
TABLETERIA # 1
Hongos (ufc/m3)
71
FIGURA 3. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de tabletería # 2.
FIGURA 4. Promedio de las UFC/m
3 de hongos en el área de tabletería # 2.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Tabletería # 2
Mesófilos (UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
TABLETERIA # 2
Hongos UFC/m3
72
FIGURA 5. Promedio de las UFC/m3
de mesófilos en el área de tabletería # 3.
FIGURA 6. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de tabletería # 3.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Tabletería # 3
Mesófilos ( UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
TABLETERIA # 3
Hongos UFC/m3
73
FIGURA 7. Promedio de las UFC/m
3 de mesófilos en el área de tabletería # 4.
FIGURA 8. Promedio de las UFC/m
3 de hongos en el área de tabletería # 4.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Tabletería # 4
Mesófilos ( UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
TABLETERIA # 4
Hongos UFC/m3
74
Al observar los resultados numéricos obtenidos durante 10 meses en las cuatro áreas de
tabletería se encontró que en ninguno de los casos se supero el nivel máximo de UFC/m3 de
microorganismos según el caso, teniendo en cuenta que el rango permitido de mesófilos es
mucho mas amplio (100 UFC/m3) con relación a los Hongos (30 UFC/m
3).
Adicionalmente se observó que los recuentos estuvieron por debajo de el límite de alerta y
de acción en todas las áreas exceptuando el área de tabletería #1 durante el noveno y
décimo mes en donde se superó el límite de alerta que tiene en este caso un punto máximo
de 10 UFC/m3, Esta recopilación de datos sugieren que si bien es cierto a grandes rasgos
los resultados son satisfactorios, existen puntos críticos de control en donde se hace
necesario verificar los procesos de limpieza y desinfección que se están utilizando.
FIGURA 9. Promedio de las UFC/m
3 de mesófilos en el área de recubrimiento # 2.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio de UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 en Recubrimiento # 2
Mesófilos (UFC/m3)
75
FIGURA 10. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de recubrimiento # 2.
Los datos arrojados durante el monitoreo microbiológico en el área de recubrimiento,
muestran un comportamiento dentro del rango permisible aún cuando se evidencian
variaciones durante los diez meses de recuentos transcurridos en cuanto a mesófilos y
hongos respectivamente cumpliendo con los rangos máximos, los cuales fueron demarcados
en la fig. 8 y fig. 9, sin embargo se puede decir que los datos obtenidos en el recuento de
hongos se acercaron sobretodo en el sexto mes al nivel de alerta que de no ser controlado
podría arrojar recuentos indeseados en los meses siguientes.
FIGURA 11. Promedio de las UFC/m3
de mesófilos en el área de Pulverizador.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
RECUBRIMIENTO # 2
Hongos (UFC/m3)
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008
en pulverizador
Mesófilos (UFCm3)
76
FIGURA 12. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Pulverizador.
En el área de pulverizador se pudo evidenciar recuentos crecientes a partir del sexto mes de
monitoreo en donde se alcanzó el limite de alerta de UFC/m3 para hongos, si bien es cierto
como lo muestra la figura 12, al séptimo mes se tuvo una disminución considerable de
microorganismos, a partir de este, los recuentos estuvieron en aumento lo que indica errores
y problemas de contaminación que deben ser controlados.
FIGURA 13. Promedio de las UFC/m
3 de mesófilos en el área de Granulación.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 Granulación
MesófiIos UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
PULVERIZADOR
Hongos (UFC/m3)
77
FIGURA 14. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Granulación.
El área de granulación mostró una tendencia controlada y dentro de los límites en cuanto al
crecimiento microbiano, sin embargo esto no indica que este libre de peligro de
contaminación por lo que es de vital importancia continuar con el monitoreo y correcto
proceso de limpieza y desinfección de manera continua con el fin de disminuir la carga
microbiana en el caso de mesófílos y hongos durante los siguientes meses en esta área.
FIGURA 15. Promedio de las UFC/m3
de mesófilos en el área de Mezclador Stokes.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
GRANULACIÒN
Hongos (UFC/m3)
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en
Mezclador Stokes
Mesófilos (UFC/m3)
78
FIGURA 16. Promedio de las UFC/m3
de hongos en el área de Mezclador Stokes.
FIGURA 17. Promedio de las UFC/m3
de mesófilos en el área de Mezclador Inoxmor.
0 10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
UFC/ Mm3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 En Mexclador
Inoxmor Inoxmor
Mesófilos UFC 7///7(/(UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
MEZCLADOR STOKES
Hongos UFC/m3
79
FIGURA 18. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Mezclador Inoxmor.
Las áreas de mezclador Stokes e Inoxmor en cuanto a mesófilos arrojaron datos
satisfactorios y controlados según se muestra en la fig. 15 y 17 respectivamente,
presentando recuentos alejados de los valores máximos permitidos en cada caso; sin
embargo, en cuanto a los recuentos de hongos si se tiene recuentos desfavorables en los
dos casos, el mezclador Stokes mostró una tendencia creciente presentando los recuentos
más altos en el sexto, octavo y décimo mes, este último sobrepasa el nivel de acción
acercándose al nivel máximo, lo que indica que puede derivar en un riesgo crítico de
contaminación; de igual manera los valores obtenidos en el mezclador Inoxmor que si bien
son menores a los anteriormente mencionados, aún sobrepasan el nivel de alerta lo que
sugiere tomar medidas preventivas que lleven a disminuir los índices de contaminación en
esta área.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
MEZCLADOR INOXMOR
Hongos (UFC/m3)
80
FIGURA 19. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Horno Rae.
FIGURA 20. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Horno Rae.
0 10 20 30 40 50 60 70 80
90 100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 en Horno Rae
Mesófilos (UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
HORNO RAE
Hongos (UFC/m3)
81
FIGURA 21. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Horno Glatt.
FIGURA 22. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Horno Glatt.
El comportamiento microbiológico de las áreas de los Hornos Rae y Glatt evidenció áreas
controladas y fuera de los niveles de acción, alerta y máximo en el crecimiento de
microorganismos mesófilos, mientras que el crecimiento de hongos en estas mismas áreas
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Horno Glatt
Mesófilos (UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30 35 40
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
HORNO GLATT
Hongos (UFC/m3)
82
permite determinar que se sobrepasó el limite de alerta en ambos casos durante varios
meses, como se puede ver en la fig. 22, este comportamiento estuvo presente durante tres
meses consecutivos (4,5,6 mes), los limites de acción también fueron alcanzados en ambas
áreas lo que sugiere no solo una acción preventiva sino correctiva en los procesos de
limpieza y desinfección de las mismas, teniendo en cuenta que en el área del horno Glatt no
solo se superó los limites de alerta y de acción sino que en el décimo mes se presentó un
crecimiento significativo de microorganismos que arrojo recuentos mayores al nivel máximo
permitido para esta área.
FIGURA 23. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Implementos Limpios.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
Ufc/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Implementos
limpios
Mesófilos (UFC/m3)
83
FIGURA 24. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de implementos Limpios.
El área de implementos limpios es una de las áreas de mayor contaminación evidenciándose
los recuentos más altos de microorganismos, en donde el crecimiento de mesófilos con
relación a otras áreas es mucho más alto aún sin sobrepasar los limites permitidos en el
proceso de producción, en cuanto a los recuentos de hongos si se puede mencionar que a
excepción del primer mes todos sobrepasan limites de alerta y de acción e inclusive del
tercero al sexto mes se sobrepasó el nivel máximo permitido volviendo a manifestarse en el
décimo mes de recuento con un valor limite pero aún así máximo, lo anteriormente
mencionado sugiere que esta es una de las áreas de mayor cuidado en el procesos de
producción y control en los procesos de limpieza y desinfección.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30 35 40
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 IMPLEMENTOS LIMPIOS
Hongos (UFC/m3)
84
FIGURA 25. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Encapsulado # 1.
FIGURA 26. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Encapsulado #1.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Encapsulado #1
Mesófilos (UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/ m3 de Enero a Octubre de 2008
ENCAPSULADO # 1
Hongos (UFC/m3)
85
FIGURA 27. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Encapsulado # 2.
FIGURA 28. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Encapsulado # 2.
En las áreas de encapsulado se encontró un comportamiento aceptable con respecto a el
crecimiento de microorganismos mesófilos sin desestimar algunos picos presentes en
algunos meses que no alcanzan los limites de alerta hay que cuidar; por otro lado, el
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Encapsulado # 2
Mesófilos (UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
ENCAPSULADO # 2
Hongos (UFC/m3)
86
comportamiento de los hongos es mucho más desalentador teniendo que en el área de
encapsulado # 1 además de alcanzar el nivel de alerta en varios meses consecutivos, al
octavo mes el recuento alcanzó el limite de acción lo que sugiere errores en el proceso de
limpieza y desinfección al estar incrementándose sustancialmente la carga microbiana, en el
área de encapsulado # 2 los recuentos de hongos se presentaron en menor proporción aún
cuando al sexto mes de monitoreo microbiológico se encontró un incremento de la población
microbiana superando el limite de alerta que según los meses siguientes fue controlado
observando su disminución.
FIGURA 29. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Granel.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 En Granel
Mesófilos (UFC/m3)
87
FIGURA 30. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Granel.
En el área de Granel a partir del quinto mes se incrementó el crecimiento de hongos
cruzando el límite de alerta lo que genera la necesidad de tomar medidas preventivas que
según lo mostrado en la fig. 30 fue controlado en los meses siguientes en donde se
evidencia una disminución de la carga microbiana en esta área.
FIGURA 31. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Blister Farcon.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
GRANEL
Hongos (UFC/m3)
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Blister Farcon
Mesófilos (UFC/m3)
88
FIGURA 32. Promedio de las UFC/m3
de hongos en el área de Blister Farcon.
En el área de Blister Farcon se observa que los recuentos de mesófilos son aceptables con
respecto a los tres niveles evaluados, mientras que en los datos obtenidos para hongos se
nota un comportamiento variable que mostró errores en los procesos de limpieza y
desinfección los cuales al quinto, octavo y décimo mes sobrepasaron los niveles de alerta
sugiriendo mejoras en el proceso.
FIGURA 33. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Blister Pharmapack.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Blister Pharmapack
Mesófilos (UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
BLISTER FARCON
Hongos (UFC/m3)
89
FIGURA 34. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Blister Pharmapack.
El área del Blister Pharmaphack para mesófilos y hongos como se puede ver en las figuras
33 y 34 respectivamente se mostró dentro de los limites de especificación permitidos para
cada caso, sin embargo también se pudo notar que durante los tres últimos meses en el
caso de los hongos el crecimiento tuvo un aumento con respecto al séptimo mes en donde
no sobrepasó las 5 UFC/m3, lo que sugiere que aun cuando no llegan a salirse de los
rangos, son indicadores de errores en los procesos.
FIGURA 35. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Blister Tecnomaco.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC /m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Blister Tecnomaco
Mesófilos (UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
BLISTER PHARMAPACK
Hongos (UFC/m3)
90
FIGURA 36. Promedio de las UFC/m3
de hongos en el área de Blister Tecnomaco.
El área de equipo Blister Tecnomaco mostró un aumento en el cuarto y quinto mes en
cuanto a los microorganismos mesófilos, lo que no se presentó en áreas anteriores, en
donde el quinto mes sobrepasa el límite de acción, asimismo en la fig. 35 podemos ver que
en los meses siguientes decreció significativamente manteniendo un comportamiento
aceptable hasta el décimo mes. Por otra parte, el recuento de hongos en esta misma área es
bastante alto teniendo en cuenta que más de la mitad de los meses alcanzó los límites de
alerta, el cuarto mes fue el de mayor crecimiento microbiano lo cual se evidencia en la fig. 36
en donde se sobrepasa el nivel máximo permitido de colonias en el área, es te
comportamiento se ve disminuido y controlado durante los últimos cuatro meses de
monitoreo.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100 110 120
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
BLISTER TECNOMACO
Hongos (UFC/m3)
91
FIGURA 37. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Preparación Líquidos.
FIGURA 38. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Preparación Líquidos.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Preparación de Líquidos
Mesófilos UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 PREPARACION LIQUIDOS
Hongos (UFC/m3)
92
FIGURA 39.Promedio de las UFC/m3de Mesófilos en el área de Envase de Líquidos
FIGURA 40. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Envase Líquidos.
En el área de preparación de líquidos a partir del quinto mes y a excepción del noveno se
obtuvo recuentos por encima del limite de alerta lo que sugiere que en esta área se deben
tomar medidas preventivas en cuanto a la limpieza y desinfección que se ha venido
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Envase de
Líquidos
Mesófilos UFCm3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
ENVASE LIQUIDOS
Hongos (UFC/m3)
93
desarrollando con el fin de evitar alcanzar niveles mayores de contaminación que puedan ser
significativos interfiriendo los procesos de producción.
Por otra parte, en esta área de envase líquidos se presenta un comportamiento mas
preocupante ya que casi todos sobrepasan los limites de alerta y no solo estos sino que en
el quinto y sexto mes de estudio se presenta un incremento en la contaminación lo que lleva
a atravesar los niveles de acción, los meses posteriores estos índices disminuyeron
considerablemente pero al décimo mes se presento un recuento bastante grande en donde
se supera el nivel máximo de UFC/m3 permitido (30 UFC/m
3), al analizar la fig 39 se puede
observar un incremento de mesófilos a partir del 6 mes lo que sugiere un cuidado especial
en los procesos de limpieza y desinfección debido a que no cumplen con su objetivo
generando un riesgo critico en el proceso de esta área.
FIGURA 41. Promedio de las UFC/m3
de mesófilos en el área de Alimentación Frascos.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Meses
Promedio de UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Alimentación de Frascos
Mesofilos UFC/m3
94
FIGURA 42. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Alimentación Frascos.
Esta área denota recuentos lejanos a los niveles máximos permitidos en los recuentos de
microorganismos mesófilos y hongos, sin embargo se puede ver en la fig. 41 que a partir del
cuarto mes se presentó un incremento de microorganismos que a partir del sexto mes
parece haber sido controlado generando una favorable disminución de la carga microbiana
en cuanto a presencia de hongos.
FIGURA 43. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Envase Cremas.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio de UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Envase de Cremas
Mesófilos UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25
30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
ALIMENTACION FRASCOS
Hongos (UFC/m3)
95
FIGURA 44. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Envase Cremas.
FIGURA 45. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Preparación Cremas.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio de UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 de Preparación de Cremas
Mesófilos UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
ENVASE CREMAS
Hongos (UFC/m3)
96
FIGURA 46. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Preparación Cremas.
En las áreas de Envase de cremas y Preparación de cremas se evidenció u n
comportamiento común en el mes sexto, donde existe un aumento en los recuentos que
logra sobrepasar el nivel máximo de UFC/m3 de hongos en el área de preparación de
cremas lo cual se ve subsanado posteriormente con una radical disminución del crecimiento
microbiano el cual se muestra en la fig. 46 por debajo de los niveles de alerta. Por otra parte
el comportamiento de los microorganismos mesófilos se mantiene controlado y dentro de los
parámetros estipulados.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30 35 40
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 PREPARACION CREMAS
Hongos (UFC/m3)
97
FIGURA 47. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Pesaje Bodega.
FIGURA 48. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Pesaje Bodega.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Pesaje de
Bodega
Mesófilos UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
PESAJE BODEGA
Hongos (UFC/m3)
98
FIGURA 49. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Cuarentena.
FIGURA 50. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Cuarentena.
Las áreas de pesaje bodega y cuarentena permanecen dentro de los niveles aceptables de
carga microbiana evidenciándose recuentos en el caso de microorganismos mesófilos y
hongos lejanos a los niveles máximos respectivamente.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Cuarentena
Mesófilos UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 CUARENTENA
Hongos (UFC/m3)
99
FIGURA 51. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Recubrimiento.
FIGURA 52. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Recubrimiento.
El área de recubrimiento se mantuvo dentro de los límites de especificación durante los 10
meses de estudio manteniendo valores bajos en los recuentos de mesófilos y hongos
durante los últimos meses.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Recubrimiento
Area # 2
Mesófilos UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
RECUBRIMIENTO
Hongos (UFC/m3)
100
FIGURA 53. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Tabletería.
FIGURA 54. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Tabletería.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 en Tabletería 5 en Area #2
Mesófilos UFC/m3
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Tableteria 6 Area # 2
Mesofilos UFC/m3
101
FIGURA 55. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Tabletería.
El área de tabletería permanece controlada con valores alejados a los niveles máximos de
crecimiento microbiano permitido lo que indicó que los procesos de limpieza y desinfección
llevados a cabo en esta mantienen el control de la misma en cuanto a contaminación se
refiere.
FIGURA 56. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Mezcla y Granulación.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15
20
25
30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
TABLETERIA
Hongos (UFC/m3)
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Mezcla y Granulación Area # 2
Mesófilos UFC/m3
102
FIGURA 57. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Mezcla y Granulación.
El área de mezcla y granulación como se indica en la fig. 57 muestra índices bastantes
variables de contaminación en cuanto a hongos durante los siete primeros meses de estudio
que sugieren una toma de medidas no solo preventivas sino correctivas en algunos casos,
posteriormente se evidenció que a partir del séptimo mes se ven reducido el crecimiento
microbiano.
FIGURA 58. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Horno.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
MEZCLA Y GRANULACION
Hongos (UFC/m3)
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedia UFC/m3 de Enero de Octubre en Horno Area # 2
Mesófilos UFC/m3
103
FIGURA 59. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Horno.
En el área de horno aunque los tres primeros meses del estudio el crecimiento microbiano
fue en aumento y alcanzando el nivel máximo permisible en el caso de los hongos, a partir
del cuarto mes se evidencia una disminución del mismo que para finales del estudio, al
décimo mes, como se puede ver en la fig. 59 ya se encuentra controlado, en donde se puede
afirmar que los procesos de limpieza y desinfección son adecuados.
FIGURA 60. Promedio de las UFC/m3 de mesófilos en el área de Encelofanado.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 HORNO
Hongos (UFC/m3)
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
100
UFC/m3
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre en Encelofanado
Area #2
Mesófilos UFC/m3
104
FIGURA 61. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Encelofanado.
El área de encelofanado permite evidenciar un comportamiento controlado en cuanto al
recuento de mesófilos y hongos, con respecto a los segundos en el séptimo mes logra
atravesar el límite de alerta lo que sugiere medidas preventivas que como se muestra en la
fig. 61 fueron tomadas en los posteriores meses en donde los recuentos disminuyeron
considerablemente.
FIGURA 62. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el área de Envase de Polvos.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25
30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
ENCELOFANADO
Hongos (UFC/m3)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0 5
10 15 20 25 30
UFC/m3
MESES
Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
ENVASE DE POLVOS
Hongos (UFC/m3)
105
En el área de envase de polvos los recuentos realizados durante el segundo, sexto y
séptimo mes atraviesan el nivel de alerta en donde se deben tomar medidas preventivas que
limiten el crecimiento de hongos y eviten un aumento de la población, en la fig. 62 se
muestra que hubo un cambio y mejora en el proceso de limpieza y desinfección dado que los
tres últimos meses arrojan valores menores.
PROMEDIO ANUAL
0102030405060708090
100
ufc/m3
Recubrim
iento
Table
teria #
5
Table
teria #
6
Me
zcla
y
Gra
nula
cio
n
Ho
rno
Encelo
fanado
Areas de Manufactura
Promedio Anual ufc/m3 en el Area # 2 de Manufactura
Mesofilos ufc/m3
FIGURA 63. Promedio Anual de UFC/m3 de mesófilos en áreas de Manufactura.
106
3 4 7 10 146
05
1015202530
UFC/m3
RE
CU
BR
IMIE
NT
O
TA
BL
ET
EA
DO
EN
CE
LO
FA
NA
DO
ME
ZC
LA
Y
GR
AN
ULA
CIO
N
HO
RN
O
EN
VA
SE
DE
PO
LV
OS
Areas de Manufactura
Promedio Anual de ufc/m3 en las áreas de Manufactura
Hongos (ufc/m3)
FIGURA 64. Promedio Anual de UFC/m3 de hongos en áreas de Manufactura.
0102030405060708090
100
ufc/m3
Ta
ble
teria
# 1
Ta
ble
teria
# 2
Ta
ble
teria
# 3
Ta
ble
teria
# 4
Recu
brim
ien
to
Areas de Manufactura
Promedio Anual de ufc/m3 en las Areas de Manufactura
Mesofilos ufc/m3
FIGURA 65. Promedio Anual de UFC/m3 de mesófilos en áreas de Manufactura.
107
7 3 3 4 6
05
1015202530
UFC/m3
TA
BLE
TE
RIA
# 1
TA
BLE
TE
RIA
# 2
TA
BLE
TE
RIA
# 3
TA
BLE
TE
RIA
# 4
RE
CU
BR
IMIE
NT
O
# 2
Areas de Manufactura
Promedio Anual de ufc/m3 en las áreas de Manufactura
Hongos (ufc/m3)
FIGURA 66. Promedio Anual de UFC/m3 de hongos en áreas de Manufactura.
0
102030
405060
708090
100
ufc/m3
Pulv
eriza
dor
Gra
nula
cion
Me
zcla
do
r
sto
kes
Me
zcla
do
r
Ino
xm
or
Horn
o R
ae
Horn
o G
latt
Areas de Manufactura
Promedio Anual ufc/m3 en areas de manufactura
Mesofilos ufc/m3
FIGURA 67. Promedio Anual de UFC/m3 de mesófilos en áreas de Manufactura.
108
4 312
510
19
05
1015202530
UFC/m3
PU
LV
ER
IZA
DO
R
GR
AN
UL
AC
ION
ME
ZC
LA
DO
R
ST
OK
ES
ME
ZC
LA
DO
R
INO
XM
OR
HO
RN
O R
AE
HO
RN
O G
LA
TT
Areas de Manufactura
Promedio Anual de ufc/m3 en las áreas de Manufactura
Hongos (ufc/m3)
FIGURA 68. Promedio Anual de UFC/m3 de hongos en áreas de Manufactura.
0
102030
4050
607080
90100
ufc/m3
Imple
mento
s
limp
ios
En
cap
sula
do
#1
En
cap
sula
do
#2 G
ran
el
Areas de Manufactura
Promedio Anual ufc/m3 del Area de Manufactura
ufc/m3
FIGURA 69. Promedio Anual de UFC/m3 de mesófilos en áreas de manufactura.
109
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
ufc/m3
Blister Farcon Blister
Pharmapack
Blister
Tecnomaco
Areas de Manufactura
Promedio anual ufc/m3 de las areas de Manufactura
Mesofilos ufc/m3
FIGURA 70. Promedio Anual de UFC/m3 de mesófilos en áreas de Manufactura.
6 8 5
25
05
1015202530
UFC/m3
GR
AN
EL
BLI
ST
ER
FA
RC
ON
BLI
ST
ER
PH
AR
MA
PA
CK
BLIS
TE
R
TE
CN
OM
AC
O
Areas de Manufactura
Promedio Anual de ufc/m3 en las áreas de Manufactura
Hongos (ufc/m3)
FIGURA 71. Promedio Anual de UFC/m3 de hongos en áreas de Manufactura.
110
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
ufc/m3
Pre
para
cio
n
de
Liq
uid
os
Alim
enta
cion
de F
rascos
Envase d
e
Cre
mas
Pre
para
cio
n
de C
rem
as
Envase d
e
Liq
uid
os
Areas de Manufactura
Promedio Anual de ufc/m3 en las areas de Manufactura
Mesofilos ufc/m3
FIGURA 72. Promedio Anual de UFC/m3 de hongos en el área de Cuarentena.
116 9 9
23
05
1015202530
UFC/m3
PR
EP
AR
AC
ION
LIQ
UID
OS
AL
IME
NT
AC
ION
FR
AS
CO
S
EN
VA
SE
CR
EM
AS
PR
EP
AR
AC
ION
CR
EM
AS
EN
VA
SE
LIQ
UID
OS
Areas de Manufactura
Promedio Anual de ufc/m3 en las áreas de Manufactura
Hongos (ufc/m3)
FIGURA 73. Promedio Anual de UFC/m3 de hongos en el área de Cuarentena.
111
0
1020
30
40
5060
70
80
90100
ufc/m3
Pesaje de Bodega Cuarentena
Areas
Promedio Anual de ufc/m3 en el area de Pesaje de Bodega y
Cuarentena
Mesofilos ufc/m3
FIGURA 74. Promedio Anual de UFC/m3 de hongos en el área de Cuarentena.
FIGURA 75. Promedio Anual de UFC/m3 de hongos en el área de Cuarentena.
El promedio anual de cada una de las áreas de manufactura muestra claramente que el
crecimiento microbiano durante los diez meses del estudio con relación a los
microorganismos mesófilos no sobrepasó los limites de alerta estipulados inicialmente lo que
nos sugirió recuentos no significativos, sin embargo, al referirnos a los hongos, si se tiene
áreas como Blíster Tecnomaco, Envase Líquidos e Implementos Limpios, que logran
sobrepasar el nivel de acción, siendo el último en mención el de más altos índices de
112
contaminación, el cual llega a tener un promedio de 34 UFC/m3 que en el caso de los
hongos esta sobre el nivel máximo establecido, cabe mencionar que se realizo una acción
correctiva que fue generada por el área de microbiología y diligenciada en el formato (F-
VRQ-024) Relación de acción correctiva o preventiva documento interno de la empresa.
Al analizar estos resultados se puede inferir que se debe considerar cambios y mejoras en el
proceso de limpieza y desinfección de cada una de las áreas dando especial cuidado a las
zonas criticas con el fin de eliminar y controlar la carga microbiana que si bien no es absoluta
si debe ser mínima, manteniendo un monitoreo continuo en todos las áreas de manufactura
que evite enfrentarnos a la no satisfacción de un límite.
Adicionalmente, cabe mencionar que este estudio se enfoco a brindar calidad microbiológica
en las áreas blancas de manufactura del laboratorio ANGLOPHARMA S.A. ya que este es
un indicador de los buenos procesos de limpieza y desinfección que se desarrollan en el
área blanca que es donde se debe tener un ambiente que cumpla con las especificaciones y
limites permisibles de microorganismos según lo establecido en la USP vigente.
7.3 Obtención de las cepas a evaluar en la técnica de concentración minima inhibitoria
para 4 diferentes desinfectantes.
La determinación de las cepas que se obtuvieron a partir de la toma de ambientes del área
de manufactura correspondieron a tres diferentes microorganismos debido a que no se
encontraron cepas correspondientes al genero Gram negativo. Estas cepas fueron
seleccionadas debido a que se presentan con mayor frecuencia en la toma de ambientes en
el área blanca de Anglopharma S.A, posteriormente, fueron purificadas en medios
específicos y se realizaron pruebas de identificación con el fin de caracterizar cada una de
estas obteniendo los siguientes resultados:
El hongo evaluado presentó una morfología en donde se observó hifas hialinas septadas con
presencia de esporas (Figura 76), macroscópicamente se observó una región vegetativa que
crece dentro del sustrato, de color blanco e hifas aéreas cubiertas de esporas que
presentaron una coloración naranja (Figura 77) cumpliendo con características propias del
genero Neurospora sp.
113
Figura 76. Microscopía Hongo Figura 77.Macroscopía Hongo
La levadura evaluada mostró microscópicamente células esféricas, alargadas con bordes
redondeados (Figura 78); macroscópicamente se observa de color rosado, contextura
cremosa y forma irregular (Figura 79) siendo estas características propias del género
Rhodotorula sp.
Figura 78. Macroscopía Levadura Figura 79.Microscopía Levadura
La bacteria evaluada macroscópicamente se observa de color crema y textura cremosa con
colonias pequeñas y de rápido crecimiento (Figura 80), microscópicamente se observan
cocos Gram positivos pequeños (Figura 81), bioquímicamente esta bacteria fue catalasa
positiva y oxidasa negativa (figura 82). Por otra parte, debido a que se encontraron
diferentes tipos de bacterias en el ambiente fue necesario la identificación y aislamiento de
un solo tipo de estas,la cual fue identificada como bacteria # 1, luego de su purificación en el
medio Plate Count (PC) se realizó una identificación con el API 20A dando como resultado
un 97.3% de taxón significativo perteneciente a una bacteria que corresponde al género
Staphylococcus epidermidis. Cabe resal tar que todas las características evaluadas
concuerdan con lo reportado en bibliografía para este tipo de bacterias.
114
Figura 80. Macroscopía Figura 81. Microscopía
Staphylococcus epidermidis Staphylococcus epidermidis
Figura 82. Catalasa y Oxidasa
7.4 Preparación del Inóculo
Para implementar el procedimiento de la preparación del inoculo se trabajo con las 3 cepas,
Neurospora sp es un hongo propio del ambiente, Rhodotorula sp es una levadura que crece
fácilmente en temperaturas en 24oC a 48
oC y se encuentra en piel y esputo de los seres
humanos y Staphylococcus epidermidis es una bacteria que se encuentra frecuentemente
en la piel y mucosas de los humanos.
Para esto se tomó como referencia el tubo No 1 del patrón de la escala de McFarland, de
cada una de las cepas a evaluar hasta que se obtuvo una concentración equivalente a
3X108
UFC/ml, para cumplir con las exigencias de la norma 2455 del ICONTEC,
posteriormente se realizó una dilución 10- 3
la cual fue inoculada en las diferentes
concentraciones evaluadas de los 4 desinfectantes, las cuales no presentaron
modificaciones a lo establecido inicialmente en el procedimiento.
115
7.5. Determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI).
Para la determinación de la CMI se realizó la observación de los tubos correspondientes a
los desinfectantes en estudio: Hipoclorito de Sodio (0.5%, 1% y 1.5%), Cloruro de
Benzalconio (0.5%, 1% y 1.5%), Tego 51 (0.1%, 0.5% y 1%) y Alcohol al 70%. Obteniendo
los resultados expresados a continuación.
7.5.1 Determinación de la concentración mínima inhibitoria del Hipoclorito de Sodio.
Para el NaCl se obtuvieron resultados similares utilizando los 3 diferentes microorganismos,
al observar la Tabla 3 se pudo determinar que a la concentración de 0.05% solo hubo
inhibición de la levadura en el tubo numero 1 lo que quiere decir que para este
microorganismo lo mínimo que se requiere de desinfectante es esta concentración, mientras
que con el hongo y la bacteria evaluadas no se observó ninguna inhibición a esta
concentración, lo que indica que se requiere de una concentración superior a 0.05% para
que sea activo frente a estos dos microorganismos. Por otra parte, al comparar los
resultados obtenidos tomando como parámetro de evaluación una concentración de 0.1% y
0.15% respectivamente, que es la concentración inicial evaluada en el tubo número 1, se
muestra una inhibición para los 3 diferentes microorganismos evaluados, lo que indica que
este desinfectante tiene un buen comportamiento frente a las cepas en estudio.
De acuerdo a lo mencionado anteriormente se sugiere trabajar con una concentración de
Hipoclorito de Sodio al 0.5%, pues es una concentración media en donde se está
asegurando la concentración mínima requerida de desinfectante para que haya actividad
contra diferentes géneros de microorganismos que puedan estar presentes en el área de
manufactura. Cabe anotar que aún cuando la concentración del desinfectante empleada
actualmente de 10000mg/L (1%) genera una buena inhibición, el hipoclorito de sodio ya es
activo a 1000, 2000 y 5000 ppm según (Malagon, 1999), en donde se afirma que en
concentraciones de 1000 ppm de cloro la actividad es buena a los 10 minutos. Es importante
tener en cuenta la toxicidad, y actividad corrosiva del cloro por lo tanto se sugiere emplear la
mínima concentración inhibitoria para que no produzca efectos indeseables en la salud del
personal que manipula este agente desinfectante ni genere daños graves a los equipos.
Adicionalmente, es importante tener en cuenta que factores como el pH y la materia
orgánica son fundamentales para que los compuestos clorados actúen eficazmente.
Respecto a la presencia de la materia orgánica en superficies, elementos a desinfectar
como los constituyentes bacterianos o residuos de productos, estos utilizan el cloro libre
disponible en el sistema, reduciendo de este modo el efecto bactericida y por tanto la
116
eficiencia del proceso. Por lo anterior, y con base en los resultados obtenidos se puede
recomendar que la concentración sugerida, 5000mg/L correspondiente al 0.5% cumple con
las especificaciones y requerimientos en el área de manufactura, sin llegar a ser una
concentración que genere toxicidad ni corrosión y por ende no va a producir daños graves a
la salud ni daño en los equipos y por el contrario si será activo frente a los posibles
contaminantes que se puedan encontrar en esta.
MICROOGANIMOS EVALUADO LEVADURA (Rhodotorula sp)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Hipoclorito
de sodio
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.5% 500 + + + + + + + + + + +
1% 1000 + + + + + + + + + + +
1.5% 1500 750 + + + + + + + + + +
Tabla 3. Concentración mínima inhibitoria del Hipoclorito de sodio frente a la levadura.
MICROOGANIMOS EVALUADO HONGO (Neurospora sp)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Hipoclorito
de sodio
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.5% + + + + + + + + + + + +
1% 1000 + + + + + + + + + + +
1.5% 1500 750 + + + + + + + + + +
Tabla 4. Concentración mínima inhibitoria del Hipoclorito de sodio frente Neurospora sp.
MICROOGANIMOS EVALUADO BACTERIA (Staphylococcus epidermidis)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Hipoclorito
de sodio
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.5% + + + + + + + + + + + +
1% 1000 + + + + + + + + + + +
1.5% 1500 750 + + + + + + + + + +
Tabla 5. Concentración mínima inhibitoria del Hipoclorito de sodio frente Staphylococcus epidermidis.
*Nota: todas las concentraciones del desinfectante y los 3 microorganismos utilizados fueron
117
evaluados por duplicado obteniéndose en todos los casos resultados iguales.
· Positivo (+) Corresponde a turbidez en el tubo al no haber inhibición del microorganismo
por parte del desinfectante evaluado.
7.5.2 Determinación de la concentración mínima inhibitoria para Tego 51®.
De acuerdo con los resultados observados en la tabla 8, se determinó que el Tego 51® no
presenta actividad frente a bacterias Gram positivas en concentraciones iguales y menores
a 0.01% ya que no se observó ninguna inhibición en los 12 tubos evaluados. Adicionalmente,
en las concentraciones de 0.05% y 0.1% se obtuvo resultados iguales para los dos casos en
donde se evidenció una inhibición en los dos primeros tubos lo que corresponde a una CMI
de 250mg/L y 500mg/L respectivamente mostrando de esta forma que diluciones mas altas
son activos frente a bacterias Gram positivas. Con los resultados obtenidos se evidenció
que el porcentaje mínimo requerido para que la bacteria sea contrarrestada es de 0.025%.
Por otra parte, los datos recopilados en las tablas 6 y 7 muestran resultados similares frente
a levaduras y hongos al tener una inhibición máxima en 3 tubos obteniendo una CMI de
125mg/L, 0.0125% lo que muestra que este desinfectante requiere de menores
concentraciones para empezar a ser activo frente a este tipo de microorganismos. Es
importante resaltar que estos porcentajes son demasiado bajos ya que según
especificaciones de la ficha técnica del fabricante se recomienda un porcentaje entre 1% y
2% que generen un efecto desinfectante satisfactorio y muy bueno, según (Aldana, 1999) el
Tego 51® es considerado un buen desinfectante a una concentración de 0.5%, por lo
anteriormente mencionado los porcentajes obtenidos son demasiado bajos y no cumple con
estas especificaciones, por lo cual se deben utilizar concentraciones superiores a la CMI
obtenida que si garantice una mayor inhibición de bacterias en el área de manufactura y que
cubra los diferentes géneros de microorganismos que se puedan encontrar presentes en le
área y de este modo se garantice la actividad del desinfectante. Al analizar los resultados
anteriormente mencionados se recomienda la utilización de una concentración superior a la
CMI que asegure un buen proceso de sanitización, es por esta razón que se sugiere una
concentración de 5000mg/L 0.5% que ya es activa frente a 3 géneros diferentes de
microorganismos y es una concentración que no es tan alta y esta cumpliendo con los
estándares propuestos en la bibliografía evaluada, esta concentración también fue
determinada pensando en la relación costo beneficio de la empresa que es un factor
fundamental teniendo en cuenta que no justifica un gasto superior de desinfectante si a esta
118
concentración se están garantizando los procesos de sanitización en el área que es de
interés para la empresa, c a be resaltar que se debe tener en cuenta que cualquier
concentración adoptada cumpla con las especificaciones del laboratorio y principalmente que
garantice la actividad frente a flora acompañante del área blanca que es donde se aplica
este desinfectante.
MICROOGANIMOS EVALUADO LEVADURA (Rhodotorula sp)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Tego 51 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.1% 100 + + + + + + + + + + +
0.5% 500 250 125 + + + + + + + + +
1.0% 1000 500 250 + + + + + + + + +
Tabla 6. Concentración mínima inhibitoria del Tego 51R frente a la levadura.
MICROOGANIMOS EVALUADO HONGO (Neurospora sp)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Tego 51 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.1% 100 + + + + + + + + + + +
0.5% 500 250 125 + + + + + + + + +
1.0% 1000 500 250 + + + + + + + + +
Tabla 7. Concentración mínima inhibitoria del Tego 51R frente al hongo.
MICROOGANIMOS EVALUADO BACTERIA (Staphylococcus epidermidis)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Tego 51 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.1% + + + + + + + + + + + +
0.5% 500 250 + + + + + + + + + +
1.0% 1000 500 + + + + + + + + + +
Tabla 8. Concentración mínima inhibitoria del Tego 51R frente a la bacteria.
*Nota: todas las concentraciones del desinfectante y los 3 microorganismos utilizados
fueron evaluados por duplicado obteniéndose en todos los casos valores iguales.
· Positivo (+) Corresponde a turbidez en el tubo al no haber inhibición del microorganismo
por parte del desinfectante evaluado.
119
7.5.3 Determinación de la concentración mínima inhibitoria para Cloruro de
Benzalconio.
En el ensayo correspondiente al Cloruro de Benzalconio utilizando una bacteria Gram
positiva se observó una inhibición de 3 tubos en una concentración 0.05% correspondiente a
una CMI de 125mg/L siendo este un porcentaje de 0.0125, lo que muestra que a partir de
esta concentración este desinfectante es activo frente a la bacteria, mientras que en las
concentraciones 0,1% y 0,15% la CMI encontrada corresponde a valor es de 62.5mg/L y
93.75mg/L respectivamente, estos resultados muestran que este desinfectante es activo a
muy bajas concentraciones, esto se ve reflejado en una inhibición de una serie de 5 tubos
en las 2 concentraciones anteriormente mencionadas, los resultados obtenidos concuerdan
con lo mencionado en (Malagón, 1999) en donde se afirma que este desinfectante es un
buen agente bactericida contra bacterias pertenecientes al género de Gram positivas, debido
a que los amonios cuaternarios actúan sobre la pared celular bacteriana al estar cargada
negativamente, permitiendo que la carga positiva del amonio cuaternario se adsorba a la
pared en muy altas concentraciones. Este lazo con la pared celular aumenta si hay leve
alcalinidad, pero la alta alcalinidad puede suprimir esta función.
Una vez que la pared celular esta rota por el amonio cuaternario, se filtran los constituyentes
intracelulares, con eventual coagulación de la membrana y de las proteínas intracelulares lo
que inactiva la célula, la acción bactericida de los cuaternarios se ha atribuido a la
inactivación de enzimas productoras de energía, a la desnaturalización de proteínas
esenciales celulares y disagregación de la membrana celular, lo que provoca la salida de
enzimas, coenzimas e intermedios metabólicos.
En cuanto al ensayo con el hongo evaluado y en relación con los resultados obtenidos con la
bacteria Gram positiva se observó una única variación en la concentración de 0.05%, en
donde hay una inhibición en 4 tubos de la línea que corresponde a una CMI de 62,50mg/L y
a un porcentaje de 0,00625, estos resultados muestran que tanto para bacterias como para
hongos la CMI requerida de desinfectante corresponde a la anteriormente determinada.
Cabe resaltar que según literatura consultada (Rueda, 2003), los amonios cuaternarios y
principalmente el Cloruro de Benzalconio presentan gran efectividad especialmente frente a
bacterias Gram positivas, lo que nos confirma que los resultados obtenidos frente a este
género concuerdan con lo reportado en este estudio ya que este desinfectante requiere
bajas concentraciones para empezar a ser activo, asimismo (Malagon,1999), reporta que el
Cloruro de Benzalconio y en general los amonios cuaternarios son más resistentes frente a
hongos y virus. Este reporte no concuerda con los resultados obtenidos en este estudio ya
120
que en este caso el Cloruro de Benzalconio tuvo mayor actividad frente a hongos y
levaduras lo que se ve reflejado en las tablas de resultados en donde se obtuvieron mas
tubos con inhibición, por ende se requiere de muy bajas concentraciones para empezar a
ser activo, cabe mencionar, que estos resultados son dependientes de las cepas propias
aisladas del área blanca de Anglopharma S.A. y que se utilizan parámetros diferentes a los
reportados en otras bibliografías; es importante resaltar que este desinfectante es utilizado
en el área de manufactura y que las cepas en estudio son propias de esta área por lo cual
este ya es activo frente a estas y genera una buena actividad que se ve reflejada en los
resultados obtenidos en este.
En cuanto al comportamiento obtenido al evaluar la levadura se observó que este
microorganismo requiere de una concentración menor a la utilizada con hongos y bacterias,
esto se ve reflejado en la tabla 9, en donde hubo una inhibición de 4 tubos para una
concentración de 0.05%, y de 6 tubos en concentraciones 0,1% y 0,15% dando como
resultado una CMI de 62,50mg/L, 31,25mg/L y 46,87mg/L respectivamente lo que permite
afirmar que lo mínimo requerido para obtener una inhibición efectiva en el área de
manufactura es de 31,25mg/L correspondiente a un porcentaje de desinfectante de
0,003125%, sin embargo cabe resaltar que este valor es muy bajo de acuerdo con lo
reportado y sugerido en la ficha técnica del desinfectante ya que este sugiere un porcentaje
de 1% , debido a esto se sugiere una concentración superior a la CMI obtenida que garantice
la efectividad de la sanitización y que tenga un mayor campo de acción frente a diferentes
géneros que se puedan encontrar en el área de manufactura, por este motivo se sugiere
utilizar una concentración de 0.5% que garantiza la efectividad de la sanitización, no es una
concentración alta que pueda ser toxica y por ende los costos disminuyen ya que
actualmente la concentración utilizada es superior a esta, se debe mencionar que la
concentración que actualmente se utiliza esta siendo efectiva, pero si al bajar la
concentración se sigue garantizando el proceso de sanitización y por lo mismo se
disminuyen costos esto significa gran beneficio para la empresa en donde también los costos
son factores importantes.
121
MICROOGANIMOS EVALUADO LEVADURA (Rhodotorula sp)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Cloruro de
Benzalconio
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.5% 500 250 125 62.50 + + + + + + + +
1% 1000 500 250 125 62.5 31.25 + + + + + +
1.5% 1500 750 325 187.5 93.75 46.87 + + + + + +
Tabla 9. Concentración mínima inhibitoria del Cloruro de Benzalconio frente a la levadura.
MICROOGANIMOS EVALUADO HONGO (Neurospora sp)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Cloruro de
Benzalconio
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.5% 500 250 125 62.50 + + + + + + + +
1% 1000 500 250 125 62.50 + + + + + + +
1.5% 1500 750 325 187.5 93.75 + + + + + + +
Tabla 10. Concentración mínima inhibitoria del Cloruro de Benzalconio frente al hongo.
MICROOGANIMOS EVALUADO BACTERIA (Staphylococcus epidermidis)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Cloruro de
Benzalconio
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.5% 500 250 125 + + + + + + + + +
1% 1000 500 250 125 62.50 + + + + + + +
1.5% 1500 750 325 187.5 93.75 + + + + + + +
Tabla 11. Concentración mínima inhibitoria del Cloruro de Benzalconio frente a la bacteria.
*Nota: todas las concentraciones del desinfectante y los 3 microorganismos utilizados fueron
evaluados por duplicado obteniéndose en todos los casos valores iguales.
· Positivo (+) Corresponde a turbidez en el tubo al no haber inhibición del microorganismo
por parte del desinfectante evaluado.
7.5.4 Determinación de la concentración mínima inhibitoria para Alcohol al 70%.
Los resultados obtenidos al evaluar el desinfectante alcohol al 70% frente a la Bacteria Gram
122
positiva mostraron que la CMI q u e se presentó en el tubo 1 correspondiente a una
concentración de 7000mg/L con un porcentaje de 0.7% generan actividad, a diferencia del
hongo y la levadura que comienzan su actividad a una CMI de 3500mg/l que corresponde a
0.35% de desinfectante requerido, se pudo observar que hay una baja inhibición por parte
del desinfectante para los 3 microorganismos evaluados, debido a que se observan muchos
tubos con crecimiento lo que muestra que el desinfectante no es activo a muy bajas
concentraciones, lo que nos permite inferir , que se requiere una concentración casi pura de
desinfectante para que este sea eficiente frente a estos microorganismos, a diferencia de los
otros desinfectantes evaluados que requieren una concentración mucho mas baja para
generar una buena inhibición, pero cabe resaltar que las propiedades del alcohol son
bastantes diferentes a la de los otros desinfectantes evaluados ya que el alcohol es de
rápida evaporación y por esta razón tan solo puede ser utilizado como desinfectante de
superficies y equipos más no como desinfectante ambiental, esta característica se ve
reflejada en los datos obtenidos ya que su actividad es muy limitada y requiere de mayores
concentraciones para ser activo, con los resultado obtenidos en este estudio se confirma que
el alcohol al 70% es una concentración adecuada para fines de desinfección de equipos y
superficies en el área de manufactura. Es importante tener en cuenta que porcentajes
mayores de desinfectante no son muy recomendados ya que según lo reportado por (Rossi,
1998) en concentraciones superiores hay limitación de agua y para que la membrana celular
del microorganismo se pueda romper se necesita de este elemento, además hay una
evaporación rápida del alcohol y el tiempo de contacto no es suficiente para que este pueda
actuar.
MICROOGANIMOS EVALUADO LEVADURA (Rhodotorula sp)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Alcohol 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
70% 7000 3500 + + + + + + + + + +
Tabla 12. Concentración mínima inhibitoria del alcohol al 70% frente a Rhodotorula sp.
MICROOGANIMOS EVALUADO HONGO (Neurospora sp)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Alcohol 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
70% 7000 3500 + + + + + + + + + +
Tabla 13. Concentración mínima inhibitoria del alcohol al 70% frente Neurospora sp.
123
MICROOGANIMOS EVALUADO BACTERIA (Staphylococcus epidermidis)
Concentración (mg/L)
Concentración
de Alcohol
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
70% 7000 + + + + + + + + + + +
Tabla 14. Concentración mínima inhibitoria del alcohol al 70% frente a Staphylococcus epidermidis.
· Positivo (+) Corresponde a turbidez en el tubo al no haber inhibición del microorganismo
por parte del desinfectante evaluado.
· Todos los análisis fueron realizados por duplicado y en todos los casos se obtuvo los
mismo resultados tanto en el análisis 1 como en el 2.
7.6. Cartilla instructiva.
Se elaboró una cartilla instructiva de fácil manejo con conceptos básicos de limpieza y
desinfección adaptada a las áreas blancas de Anglopharma S.A. para capacitar los operarios
de una manera breve y didáctica (Anexo D).
7.7. Capacitación al personal del área de manufactura de Anglopharma S.A.
Se realizaron capacitaciones, a todo el personal involucrado con el desarrollo del programa
de limpieza y desinfección principalmente en el área blanca. Esta Capacitación tuvo como
fin dar a conocer el manual de capacitación (Anexo D) que se realizó en este trabajo de
grado y darles a conocer conceptos básicos de limpieza y desinfección así como parámetros
importantes para los procesos de sanitización. Tuvo una duración aproximada de 40 minutos
se realizo de forma didáctica con el fin de que fuera entendida fácilmente y se aplicara
adecuadamente en el área blanca esto se llevo a cabo en las instalaciones de Anglopharma
S.A. y se registro en el formato de asistencia a capacitación F-VRH-002.
8. CONCLUSIONES.
· Se pudo determinar que el Cloruro de Benzalconio es un desinfectante efectivo al requerir
de bajas concentraciones para ser activo frente a 3 diferentes tipos de microorganismos
evaluados.
124
· Una concentración de 0.5% es una concentración favorable para 3 de los desinfectantes
evaluados (Cloruro de Benzalconio, Hipoclorito de Sodio y Tego 51®) ya que no es una
concentración tóxica y garantiza el proceso de desinfección en el área de manufactura de
Anglopharma S.A.
· Se debe considerar el aumento de la concentración de Tego 51®
al 0.09% utilizada
actualmente en ANGLOPHARMA S.A, debido a que esta concentración es demasiado baja y
no esta garantizando la efectividad del proceso de Sanitización.
· Una concentración de 0.5% de Cloruro de Benzalconio es adecuada para la eliminación
de los microorganismos presentes en el área de manufactura, reduce costos y cumple la
misma función que una concentración superior.
· Los resultados obtenidos en este estudio demostraron que la técnica de CMI propuesta en
la norma 2455 del ICONTEC, resulta confiable para evaluar la actividad bactericida de un
desinfectante.
· Se debe hacer seguimiento a la acción correctiva generada en área de implementos
limpios con el fin de evitar que se siga generando contaminación en esta.
9. RECOMENDACIONES.
· Para un buen proceso de desinfección es importante eliminar previamente todo tipo de
materia orgánica y suciedad presente en el área de manufactura esto con el fin de no
disminuir la actividad de la solución desinfectante.
· Se debe evaluar otros métodos de eliminación de suciedad en el área de manufactura que
no sea escoba y recogedor ya que no son de fácil desinfección y levanta muchas partículas
al aire que pueden ser causantes de contaminación cruzada.
· Se recomienda bajar la concentración del Hipoclorito de Sodio al 0.5%, ya que a esta
concentración tiene actividad semejante a la solución al 1%, garantizando la eliminación de
los microorganismos presentes en el área de manufactura y es menos toxico y corrosivo, de
este modo se preserva la salud de los operarios y la integridad de los equipos.
· Se debe desinfectar todo tipo de contenedor de materia prima antes de entrar al área de
manufactura, esto con el fin de evitar contaminación cruzada y aumento de carga microbiana
125
· La preparación y la concentración de desinfectante debe ser dispuesta cuidadosamente, ya
que de esto depende el éxito del proceso de limpieza y desinfección y la inhibición de la
carga microbiana presente en el área de manufactura.
· Se debe preparar la solución desinfectante con agua purificada con el fin de evitar
impurezas y posibles contaminaciones que alteren la calidad del producto a utilizar en los
procesos de limpieza y desinfección.
· Se recomienda por bibliografía un tiempo de exposición de los desinfectantes entre 10 y 15
minutos para garantizar la actividad de los mismos y el éxito del proceso de sanitización.
126
10. LITERATURA CITADA
1. ALDANA, L.; SARASSA, S. 1999. Efectos de desinfectantes y antimicrobianos naturales
frente a cepas de Listeria monocytogenes. Pregrado. Pontificia Universidad Javeriana.
Facultad de Ciencias. Departamento de Microbiología Industrial. Bogotá, Colombia.
2. ANDERSON, J.; COCKBURN, F.; LEBRETON, R. 1999. Continuos providone phenol
solutions. Journal South Medic. 86: 654-657.
3. ANZOLA, B. 2003. Yambal de Colombia S.A. Comunicación pesonal.
4. ARIAS, J.C. 2006. Control de las Poblaciones Microbianas Esterilización y Desinfección.
Aplicaciones a la Microbiología Industrial. Agosto. 1-17 págs.
5. BARSOTII, L.; CHEFTEL, J.C. 2001. Chemical disinfectants and antiseptics. Quantitative
non porous surface test for the evaluation of bactericidal and or fungicidal activity of chemical
disinfectants use in food, industrial, domestic and institutional areas. Test method and
requeriments and whitout mechanical actions. Science des aliments 19: 3-33.
6. BRUINS, G.; DIER, J.A. 1995. Environmental considerations of disinfectants used in
agriculture. Revue scientifique et Technique Office International des Epizootie, 14(1): 82-94.
7. CUESTA, M.A.; CASTILLO, M.A. 2004. Evaluación del peróxido de hidrógeno como
desinfectante de las líneas de agua de las unidades odontológicas de la Pontificia
Universidad Javeriana. Pregrado. Pontificia Universidad Javeriana. Facultad de Odontología.
Bogotá, Colombia.
8. DELGADO, E.; DIAZ, P. 2006. Elaboración y Documentación del Programa de Limpieza y
Desinfección de los Laboratorios del Departamento de Microbiología de la Pontificia
Universidad Javeriana. Pregrado. Pontificia Universidad Javeriana. Facultad de Ciencias.
Bogotá, Colombia.
9. FLEITAS, A. 1994. Compuestos sanitizantes y sus propiedades. Limpieza y sanitización
en plantas de alimentos. Bogotá, Asociación Química Colombiana.
10. FRANKLIN, T.J.; SNOW, G. 1989. Biochemistry of antimicrobial action. Second Edition.
Chapman and Hall. Londres, Inglaterra. 512 págs.
11. GALLARDO, S. C .; SANCHEZ, T.; GALLEGO, A. 2002. Determinación de la actividad
antibacteriana de desinfectantes y detergentes bactericidas de uso habitual en la industria
alimentaría. Rev. Alimentaría 335: 47-53.
127
12. GARNEDNER, J. 1991. Introduction to sterilization, disinfection and infection control.
Editorial Churchill Livintone. Second Edition. New York. 156 págs.
13. GONZÁLEZ, C. 2004. Propuesta de un programa de desinfección para el área de
fabricación de productos estériles en el laboratorio de farmacia industrial de la Universidad
Nacional de Colombia. Pregrado. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ciencias.
Departamento de Farmacia. Bogotá, Colombia.
14. HENAO, J. 1995. Química Inorgánica. Editorial Santillana. Bogotá, Colombia.169 págs.
15. HERNÁNDEZ, L.; OSPINA, F. 1983. Los Antisépticos y los Desinfectantes en el manejo
de la infección intrahospitalaria. Pregrado. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de
Ciencias. Departamento de Farmacia. Bogotá, Colombia.
16. HERRUZO, R. 2000. Desinfectantes españoles para el siglo XXI. Editorial Anales de la
Real, Academia Nacional de Medicina .Madrid, España. 806págs.
17. HOLAH, J.T. 1995. Disinfectant test methods for food hygiene, institutional, industrial and
domestic applications. Journal International Biodeterioration y Biodegradation 36: 355-365.
18. I.C.M.S.F. Ecología microbiana de los alimentos. Editorial Acribia. Zaragoza, España.
165págs.
19. OMS. Serie de Informes Técnicos, Comité de Expertos de la OMS en Especificación para
las Preparaciones Farmacéuticas. Organización Mundial de la Salud. Ginebra. 1992
20. JAWETZ, E. 2001. Microbiología médica. Doceava Edición. Editorial El Manual Moderno
S.A. México. 165págs.
21. JOKLINK, W.; WILLETT, H. 1986. Zinsser Microbiología. 18ª Edición. Editorial Médica
Panamericana S.A. Buenos Aires, Argentina.302 págs.
22. KETCHUM, P. 1988. Concepts and applications. Jhon wiley and sons.
23. LEVEAU, J. Y . 2002. Manual Técnico de Higiene, limpieza y desinfección. Editorial
MundiPrensa. Madrid, España. 623págs.
24. LUPPENS, S.; REIJ, M.W. Development of a standard test to asses the resistance of
Staphylococcus aureus biofilms cells to disinfectant. Applied and Enviromental Microbiology
68 (9):4194-4200.
25. MALAGON, L. 1999. Infecciones Hospitalarias. Editorial Médica Internacional Ltda.
Bogotá-Colombia. Pág. 215-283.
26. MANRING, E. 1997. Toxiti of and intravenous infutions ysopropil alcohol. J.toxicol clin
Taxicol. 35; 503.
128
27. MARTINDALE, W. 1993. The Extra Pharmacopoeia. 30 edition. The Pharmaceutical
Press. London.
28. McDONNELL, T.; RUSSELL, L. 1999. Antiseptics and Desinfectants: Activity, Action and
Resistance. Clinical Microbiology Reviews 12: 147-179.
29. MOSSEI, B. 1985. Microbiología de Alimentos. Editorial Acribia. Zaragoza España, 236
págs.
30. NTC 2455 del Icontec. 2000. Desinfectantes limpiadores líquidos, desinfectantes para
uso domestico.
31. OMS. Serie de Informes Técnicos, Comité de Expertos de la OMS en Especificación para
las Preparaciones Farmacéuticas. Organización Mundial de la Salud. Ginebra. 1992.
32. PELCZAR, M.; CHAN, E. 1994. Microbiología. Segunda edición. Editorial MacGraw Hill.
México. 250 págs.
33. RONNER, A.; WONG, A. 1993. Biofilms development and sanitizer inactivation of E.coli
on stainless and buna-n rubber. Journal of Food Proteccion 56(6): 750-758.
34. ROSSI, L. 1998. Áreas limpias de trabajo en el laboratorio de química. Pregrado.
Universidad Central de Venezuela. Facultad de Ciencias. Departamento de farmacia.
Caracas, Venezuela.
35. ROSSONI, M. M.; GAYLARDE, C. C. 2002. Comparision of Sodium hypochlorie and
peracetic acid as sanitising agents for stainless steel food processing surfaces using
epifluorescence microscopy. International Journal of Food Microbiology 61 (1): 81-85.
36. SIKES, G. 1965. Desinfection and Sterilization. Second Edition. Chapman and hall.
London. 122 págs.
37. TEGO? 51. 1996. Desinfectante anfótero para una higiene óptima. Goldschrridtatrasse.
Alemania.
38. TORTORA G.J.; FUNKE, B.R. 2001. Microbiology An Introduction. Seventh Edition. The
Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc. 564 págs.
39. UREGO, G.; BENITEZ, G. 1994. Consideraciones generales a las normas sobre el uso
de desinfectantes en la industria de alimentos y medicamentos, desinfectantes, aspectos
químicos, técnicas de valoración y el uso de desinfectantes. Bogotá, Colombia.
40. VELÁZQUEZ, D. 2000. Estudio de hidrólisis alcalina de ß- Lactámicos. Rev. Cubana de
Farmacia 15 (2):35-42.
129
41. WILDBRELT, G. 2000. Limpieza y desinfección en la industria alimentaría. Editorial
Acribia S.A. Zaragoza, España 349 págs.
RECURSOS ELECTRÓNICOS
42. INSEC. Control de plagas. 2007. [ E n l í n e a ] < h t t p : //
www.Insec.Es/fram_desinfeccion.html> [Consulta: 3 Abril 2007].
43. Concepto POES. 2007. [ E n l í n e a ]
<http;//www.alimentosargentinos.gov.ar/programa_calidad/marco_regulatorio/ CONAL/
reunión_ Septiembre 05/ recomendaciones/boletPOES_ recomendaciones. Pdf> [Consulta:
3 abril 2007].
130
ANEXO A.
AGENTES QUIMICOS ANTIMICROBIANOS.
131
Grupo Desinfectante Ejemplos Bacteria Esporas
bacterianas Hongos Virus Usos Modo de acción
Fenoles y
compuestos
fenólicos
Fenol
Cresol
Ácidos de
alquitran
Clorocresol
Hexaclorofano
Triclosan
Bacteriostático
y bactericida
Poca o
ninguna Fungicida
Virucida
Virus
lipolíticos
Antisépticos
Desinfectante
Desnaturalización de
proteínas
Alcoholes
Alcohol
Alcohol
isopropílico
Alcohol
metilado
Bactericida Poça o
ninguna Fungicida Virucida
Antiséptico
Desinfectante
Desorganización de la
estructura lipídica
Desnaturalización de
proteínas
Deshidratante
Yodo
Cloraminas
Hipoclorito de
sodio
Bactericida Baja Fungicida Virucida Agua
Halogenación de las
unidades de tirosina
de las enzimas y otras
proteínas celulares
que necesitan tirosina
132
Halógenos (Cloros y
compuestos
clorados)
Cal clorada
Oxycloroseno
para su actividad.
Lisis celular debido al
desprendimiento de O2
al reaccionar el cloro
con el agua.
Grupo Desinfectante Ejemplos Bacteria Esporas
bacterianas Hongos Virus Usos Modo de acción
Metales pesados y
sus compuestos
(Mercuriales)
Mercuricromo
Thiomersal
Nitromersol
Plata
Cobre
Bacteriostático
Más efectivo
frente a
bacterias
Gram positivas
Inactivo Fungistátic
o Inactivo Antiséptico
Desnaturalización de
proteínas
Colorantes
Derivados de
la acridina.
Verde
brillante.
Cristal violeta.
Bacteriostático.
Más efectivo
contra
bacterias Gram
positivas.
Inactivo Fungicida
Poca
virulencia
variable
Antiséptico
Interfieren con la
síntesis de ácidos
nucleicos y proteínas
133
Magenta.
Verde
malaquita.
Compuestos de
Amonio
Cuaternarios
(Surfactantes
catiónicos)
Cetrimide
Cloro de
benzalconio
Compuestos
pirimidicos.
Cloro
cetilpirimidico.
Compuestos
quinolinicos:
Bisdequalinum
diacetate
Deaqualinium
chloride
Bactericida.
Más efectivo
contra
bacterias Gram
positivas.
Inactivo Fungistátic
o variable
Virucida
Virus
lipolíticos
Antiséptico Desnaturalización de
proteínas.
Ácidos y Álcalis
(agentes oxidantes)
Peróxido de
hidrógeno
Permanganato
de potasio
Bactericida Esporicida Fungicida Virucida Antiséptico
Desinfectante
Lisis celular por la
acción de H+
y OH-
libres alternando el pH
del medio.
134
Acido
peracético
Grupo Desinfectante Ejemplos Bacteria Esporas
bacterianas Hongos Virus Usos Modo de acción
Aldehídos
Forladehído
Glutaraldehído Bactericida Baja Fungicida Virucida Desinfectante
Lisis celular por
cambios de pH en el
ambiente.
El formaldehído se
combina con los
grupos amino libres de
las proteínas
protoplasmáticas,
daña el núcleo y
coagulan las
proteínas.
Quimiestabilizadores
Gaseosos (Gases y
vapores)
Oxido de
etileno
Formaldehído
Beta-
propialactona
Bactericida Esporicida Fungicida Virucida
Desinfectante
Industria textiles
y alimentos
Bloqueo de grupos
activos sobre
proteínas por
reacciones de
alquilación y
esterificación.
135
ANEXO B.
136
DETERMINACIÓN DE CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA CMI
ANEXO C
EVIDENCIA FOTOGRAFICA DE LA DETERMINACION DE CMI NORMA 2455 ICONTEC
HIPOCLORITO DE SODIO
NUMERO DE TUBO
Concentración (%) de desinfectante
utilizado
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0.1% 100 50 25 12,5 6,25 3,12 1,56 0,78 0,39 0,19 0,09 0,05 0.5% 500 250 125 62,50 31,25 15,62 7,81 3,90 1,95 0,98 0,49 0,245 1% 1000 500 250 125 62,50 31,25 15,62 7.80 3,91 1,95 0,98 0,49
1.5% 1500 750 375 187,5 93,75 46,87 23,43 11,72 5,86 2,93 1,46 0,73 2% 2000 1000 500 250 125 62,50 31,25 15,62 7,80 3,91 1,95 0,98 5% 5000 2500 1250 625 312,5 156,25 78,12 39,06 19,53 9,76 4,88 2,44
10% 10.000 5000 2500 1250 625 312,5 156,25 78,12 39,06 19,53 9,76 4,88 20% 20.000 10.000 5000 2500 1250 625 312,5 156,25 78,12 39,06 19,53 9,76 50% 50.000 25.000 12500 6250 3125 1562,5 781,25 390,62 195,31 97,66 48,83 24,41
70% 70.000 35.000 17500 8750 4375 2187,5 1093,75 546,87 273,44 136,72 68,36 34,18
100% 100.000 50.000 25000 12500 6250 3125 1562,5 781,25 390,62 195,31 97,66 48,83
137
TEGO 51
R
138
CLORURO DE BENZALCONIO
139
ALCOHOL AL 70%
140
ANEXO D.
CARTILLA INSTRUCTIVA: CAPACITACION DE OPERARIOS. ANEXO E. CERTIFICADO PRUEBA DE API 2OA