Resistencia genResistencia genéética a tica a enfermedades en pollos.enfermedades en pollos.

Un marcador molecular mUn marcador molecular máás para s para el mejoramiento genel mejoramiento genéético.tico.

Gabriela Iglesias, MDV, Gabriela Iglesias, MDV, MSciMSci..

¿¿QuQuéé es la resistencia genes la resistencia genéética?tica?

Es la habilidad que poseen ciertos Es la habilidad que poseen ciertos individuos a responder mejor frente a una individuos a responder mejor frente a una infecciinfeccióón provocada por un patn provocada por un patóógeno. geno. EjEj: : Animales resistentes al virus de Animales resistentes al virus de MarekMarek..Es Es poligpoligéénicanica, ya que intervienen casi , ya que intervienen casi todas las moltodas las molééculas que participan en la culas que participan en la respuesta inmune, entre ellas las del respuesta inmune, entre ellas las del Complejo Mayor de Histocompatibilidad. Complejo Mayor de Histocompatibilidad.

¿¿Por quPor quéé Pollos?Pollos?Porque es una especie con bajo intervalo Porque es una especie con bajo intervalo generacional y alta tasa reproductiva.generacional y alta tasa reproductiva.Porque nadie habPorque nadie habíía trabajado en este tema en a trabajado en este tema en el pael paíís.s.Porque el consumo o demanda es cada vez Porque el consumo o demanda es cada vez mmáás alto.s alto.Por que no se sabPor que no se sabíía casi nada sobre el a casi nada sobre el Complejo Mayor de Histocompatibilidad hasta Complejo Mayor de Histocompatibilidad hasta ese momento (1992), en especial sobre los ese momento (1992), en especial sobre los genes Bgenes B--G los mG los máás polims polimóórficos.rficos.

Tendencia del consumo en EEUU Tendencia del consumo en EEUU en los en los úúltimos altimos aññosos

SAGyA, 2000

Complejo Mayor de Complejo Mayor de HistocompatibilidadHistocompatibilidad

Genes Mayores en relaciGenes Mayores en relacióón directa con la n directa con la resistencia genresistencia genéética.tica.Esto se debe a que son genes que codifican Esto se debe a que son genes que codifican molmolééculas que presentan antculas que presentan antíígenos a las genos a las ccéélulas defensoras del organismo. LT CD4 y lulas defensoras del organismo. LT CD4 y CD8.CD8.El complejo es mEl complejo es máás compacto que en s compacto que en mammamííferos y menos polimferos y menos polimóórfico.rfico.Existen ademExisten ademáás los genes de clase IV, propios s los genes de clase IV, propios de las galliformes. de las galliformes.

CMH en avesCMH en aves

El Complejo Mayor de Histocompatibilidad El Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH) en aves se denomina sistema B (CMH) en aves se denomina sistema B (se cre(se creíía el segundo grupo sangua el segundo grupo sanguííneo).neo).Genes de clase I BGenes de clase I B--FFGenes de clase II BGenes de clase II B--LLGenes de clase IV BGenes de clase IV B--GGGenes de clase I y II AtGenes de clase I y II Atíípicos picos RfpRfp--YY

Esquema del CMH en humanosEsquema del CMH en humanos

IMGT/HLA Database

MolMolééculas de Clase I y II humanasculas de Clase I y II humanas

Faimboim y col.

Primer esquema de todo el CMH Primer esquema de todo el CMH en avesen aves

Kaufman y col, 1985.

Primer mapa de la regiPrimer mapa de la regióón clase I y n clase I y II del CMHII del CMH

Iglesias, G-M y col.

Moléculas de clase IV o B-G

Miller, M.M., y col. 1994.

Primera estructura conocida de un Primera estructura conocida de un gen Bgen B--GG

Iglesias, G.M. e Iglesias J.M.

Patrones diferentes hallados por Patrones diferentes hallados por SouthernSouthern blotblot con la sonda G412con la sonda G412

Iglesias,G.M y col. Anim Genetics, 2003, Vol 34

Conclusiones del Conclusiones del SouthernSouthern blotblotG4.1.2 permitiG4.1.2 permitióó distinguir 50 patrones de distinguir 50 patrones de restriccirestriccióón diferentes.n diferentes.9 entre los animales control, un genotipo m9 entre los animales control, un genotipo máás s que la sonda bg28 (SPF38/39). que la sonda bg28 (SPF38/39). 41 entre los Camperos, dos genotipos m41 entre los Camperos, dos genotipos máás que s que con la sonda bg28.con la sonda bg28.Existen discrepancias entre esta sonda y la Existen discrepancias entre esta sonda y la bg28. Probablemente porque bg28. Probablemente porque hibridizanhibridizan con con regiones diferentes del gen.regiones diferentes del gen.NingNingúún genotipo de los animales control se n genotipo de los animales control se observa en los Camperosobserva en los Camperos

Sonda 32.1 utilizada previamente Sonda 32.1 utilizada previamente en todos los trabajos publicadosen todos los trabajos publicadosEsta es la Esta es la úúnica utilizada hasta el nica utilizada hasta el presente en pollos de carne. presente en pollos de carne.

Solo se observan 44 genotipos Solo se observan 44 genotipos diferentes , 8 entre los animales diferentes , 8 entre los animales control y 36 entre los Camperoscontrol y 36 entre los Camperos

Alineamiento entre diferentes secuencias de genes B-G, incluyendo los 13 clones secuenciados por nosotros

Iglesias, G y col.

Arbolfilogenético de las secuencias alineadas

Iglesias y col.

Gallus gallus" FT /chromosome="16" FT /isolate="#256" FT /mol_type="genomicDNA" FT /sex="female" FT /note="breed: Red Jungle Fowl, inbred line UCD001" FT /db_xref="taxon:9031" XX CO join(AADN01095083.1:1..935,gap(237),AADN01095084.1:1..2004,gap(235), CO AADN01095085.1:1..13931,gap(159),AADN01095086.1:1..1183,gap(10000), CO AADN01048005.1:1..1521,gap(600),AADN01048006.1:1..1833,gap(112), CO AADN01048007.1:1..6366,gap(168),AADN01048008.1:1..14183,gap(10000), CO AADN01069065.1:1..1324,gap(297),AADN01069066.1:1..897,gap(10000), CO AADN01083140.1:1..1601,gap(293),AADN01083141.1:1..1047,gap(600), CO AADN01083142.1:1..12081,gap(221),AADN01083143.1:1..2726,gap(175), CO AADN01083144.1:1..11957,gap(157),AADN01083145.1:1..1112,gap(189), CO AADN01083146.1:1..21225,gap(189),AADN01083147.1:1..2631,gap(227), CO AADN01083148.1:1..6867,gap(198),AADN01083149.1:1..18279,gap(97), CO AADN01083150.1:1..12893,gap(133),AADN01083151.1:1..3450,gap(600), CO AADN01083152.1:1..1010,gap(69),AADN01083153.1:1..4593,gap(98), CO AADN01083154.1:1..1076,gap(600),AADN01083155.1:1..2814,gap(139), CO AADN01083156.1:1..3679,gap(172),AADN01083157.1:1..10609,gap(207), CO AADN01083158.1:1..1743,gap(246),AADN01083159.1:1..1439,gap(298), CO AADN01083160.1:1..2003,gap(208),AADN01083161.1:1..1248,gap(600), CO AADN01083162.1:1..1327,gap(600),AADN01083163.1:1..10145,gap(127), CO AADN01083164.1:1..5918,gap(600),AADN01083165.1:1..669,gap(10000), CO AADN01098021.1:1..779,gap(347),AADN01098022.1:1..1161) //

Numero de secuencias identificadas en el GenBank

Secuencias diferentes del genoma Secuencias diferentes del genoma con genes Bcon genes B--G G

14 Secuencias que se parecen a un Gen BG

Sequences producing significant alignments: (Bits) Valueref|NW_060541.1|Gga16_WGA350_1 1273Gallus gallus chromosome 16 ge... 0.0 ref|NW_066819.1|GgaUn_WGA6627_1 1105Gallus gallus chromosome Un g... 0.0 ref|NW_068390.1|GgaUn_WGA8198_1 1101Gallus gallus chromosome Un g... 0.0 ref|NW_073203.1|GgaUn_WGA13011_1 1085Gallus gallus chromosome Un ... 0.0 ref|NW_081718.1|GgaUn_WGA21526_1 1077Gallus gallus chromosome Un ... 0.0 ref|NW_060538.1|Gga16_WGA347_1 1077Gallus gallus chromosome 16 ge... 0.0 ref|NW_069588.1|GgaUn_WGA9396_1 1074Gallus gallus chromosome Un g... 0.0 ref|NW_060539.1|Gga16_WGA348_1 1059Gallus gallus chromosome 16 ge... 0.0 ref|NW_093753.1|GgaUn_WGA33561_1 1027Gallus gallus chromosome Un ... 0.0 ref|NW_095249.1|GgaUn_WGA35057_1 1014Gallus gallus chromosome Un ... 0.0 ref|NW_089077.1|GgaUn_WGA28885_1 918Gallus gallus chromosome Un ... 0.0 ref|NW_096754.1|GgaUn_WGA36562_1 771Gallus gallus chromosome Un ... 0.0 ref|NW_066915.1|GgaUn_WGA6723_1 628Gallus gallus chromosome Un g... 4e-178 ref|NW_067379.1|GgaUn_WGA7187_1 590Gallus gallus chromosome Un g... 2e-166

Alineamiento de uno de nuestros clones (DQ174444 ) con 14 secuencias del genoma de pollos todas en cromosoma 16 y en localización aún no conocida

Alineamiento de otro de nuestros clones (DQ176443) con 15 secuencias una de ellas en cromosoma 2

Localización en el Cariotipo de las copias de genes B-G

AgradecimientosAgradecimientosA la Universidad de Buenos Aires.A la Universidad de Buenos Aires.Los proyectos BID 802Los proyectos BID 802--OCOC--ARAR--PMTPMT--PICT 0360 PICT 0360 CONICET, FONCyT: Proyecto CONICET, FONCyT: Proyecto NN°°: PICT 08: PICT 08--04693, 04693, UBACyTUBACyT V405V405 y V007.y V007.Al INTA PergaminoAl INTA PergaminoA la Dra. Marcia M. Miller, Dra. A la Dra. Marcia M. Miller, Dra. M.C.MiquelM.C.Miquel y el y el Dr. Dr. LopezLopez, , O.JO.J..Colaboradores: Liliana Soria, Miguel Colaboradores: Liliana Soria, Miguel HuguetHuguet, , Carolina Carolina SilvestroSilvestro y Alejandra y Alejandra FeldFeld..A la SAG por invitarme a este encuentro.A la SAG por invitarme a este encuentro.