CETIS 62

PRÁCTICA NO. 4

IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS

MATERIA

BIOQUÍMICA

DOCENTE

IBQ Marta Gabriela Aceves Morales

ESPECIALIDAD

LABORATORIO CLÍNICO

GRADO: 6° SEMESTRE GRUPO: “E”

EQUIPO

NUM.7

INTEGRANTES

Isaías Ojeda Arlette Guadalupe

Muñoz Gutiérrez Abigail del Rosario

Silva Lerma Sanjuana Ivette

Vázquez Celio Andrea

OBJETIVO: Realizar pruebas de identificación de lípidos y grasas. Así como algunas de las principales reacciones de las grasas.

FUNDAMENTO: Se llama lípidos a un conjunto de moléculas orgánicas, la mayoría biomoléculas, compuestas principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida oxígeno, aunque también pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno. Tienen como característica principal ser insolubles en agua y sí en disolventes orgánicos como el benceno. A los lípidos se les llama incorrectamente grasas, cuando las grasas son sólo un tipo de lípidos, aunque el más conocido.

Los lípidos forman un grupo de sustancias de estructura química muy heterogénea, siendo la clasificación más aceptada la siguiente:

Lípidos saponificables: Los lípidos saponificables son los lípidos que contienen ácidos grasos en su molécula y producen reacciones químicas de saponificación. A su vez los lípidos saponificables se dividen en:

Lípidos simples: Son aquellos lípidos que sólo contienen carbono, hidrógeno y oxígeno. Estos lípidos simples se subdividen a su vez en: Acilglicéridos o grasas (cuando los acilglicéridos son sólidos se les llama grasas y cuando son líquidos a temperatura ambiente se llaman aceites) y Céridos o ceras.

Lípidos complejos: Son los lípidos que además de contener en su molécula carbono, hidrógeno y oxígeno, también contienen otros elementos como nitrógeno, fósforo, azufre u otra biomolécula como un glúcido. A los lípidos complejos también se les llama lípidos de membrana pues son las principales moléculas que forman las membranas celulares: Fosfolípidos y Glicolípidos.

Lípidos insaponificables: Son los lípidos que no poseen ácidos grasos en su estructura y no producen reacciones de saponificación. Entre los lípidos insaponificables encontramos a: Terpenos, Esteroides y Prostaglandinas.

¿Qué función desempeñan los lípidos en el organismo? Principalmente las tres siguientes:

Función de reserva energética: Los lípidos son la principal fuente de energía de los animales ya que un gramo de grasa produce 9,4 kilocalorías en las reacciones metabólicas de oxidación, mientras que las proteínas y los glúcidos sólo producen 4,1 kilocalorías por gramo.

Función estructural: Los lípidos forman las bicapas lipídicas de las membranas celulares. Además, recubren y proporcionan consistencia a los órganos y protegen mecánicamente estructuras o son aislantes térmicos como el tejido adiposo.

Función catalizadora, hormonal o de mensajeros químicos: Los lípidos facilitan determinadas reacciones químicas y los esteroides cumplen funciones hormonales.

¿Qué tipos de grasas intervienen en la alimentación?Recordemos, las grasas son lípidos saponificables simples, sólidos a temperatura ambiente o líquidos en cuyo caso se llaman aceites. Puede ser:

Grasas saturadas: Son aquellas grasas que están formadas por ácidos grasos saturados (tienen todos los enlaces completos por H). Aparecen por ejemplo en el tocino, en el sebo, etcétera. Este tipo de grasas es sólido a temperatura ambiente. Son las grasas más perjudiciales para el organismo.

Grasas insaturadas: Son grasas formadas por ácidos grasos insaturados (tienen uno o más enlaces sin completar con H) como el oleico o el palmítico. Son líquidas a temperatura ambiente y comúnmente se les conoce como aceites. Pueden ser por ejemplo el aceite de oliva o el de girasol. Son las más beneficiosas para el cuerpo humano.

Existe una regla en la dieta para el consumo de las grasas: “Las de origen vegetal son más beneficiosas que las de origen animal, y las poliinsaturadas son más beneficiosas que las saturadas”. Hay unas grasas beneficiosas para el organismo porque disminuyen el nivel del llamado “colesterol malo”. El colesterol es un lípido presente en el plasma sanguíneo y en los tejidos de los vertebrados, su exceso se asocia con enfermedades cardiovasculares. Es transportado por dos proteínas LDL (Lipoproteína de baja densidad) y HDL (Lipoproteína de alta densidad). Nos referimos a los aceites llamados “omega-3” y “omega-6”. El efecto beneficioso es debido a que con su ingesta disminuye la concentración de LDL y aumenta la de HDL (con las grasas saturadas se produce el efecto contrario). Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) pueden retirar el colesterol de las arterias y transportarlo al hígado para su excreción. Las lipoproteínas de baja densidad (LDL) transportan el colesterol a las arterias, si su nivel es más alto que el de HDL el colesterol tenderá a fijarse en las arterias, de ahí que se les conozca como “colesterol bueno” al HDL y “colesterol malo” al LDL.

SOLUBILIDAD

Solubilidad es una medida de la capacidad de disolverse de una determinada sustancia (soluto) en un determinado medio (disolvente). Implícitamente se corresponde con la máxima cantidad de soluto que se puede disolver en una cantidad determinada de disolvente, a determinadas condiciones de temperatura, e incluso presión (en caso de un soluto gaseoso).

PROCEDIMIENTO

Coloque en cada tubo de ensayo 0.5 ml de aceite ó grasa.Añadir 1ml de las sustancias indicadas arriba (una sustancia diferente a cada tubo)Evítese inflamación de los solventes.Hágase en frío y caliente.

OBTENCIÓN DE LÍPIDOS A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVO

La yema de huevo es una fuente importante de lípidos, además de grasas simples contiene esteroles y fosfolípidos estas sustancias pueden ser separadas unas de otras por su diferencia de solubilidad y es relativamente sencillo obtener colesterol en forma de cristales en una de las fracciones.

PROCEDIMIENTO

Separar con mucho cuidado la yema de la clara. Colocar 2 gramos de la yema en un vaso de precipitado

Añadir 2 ml de alcohol metílico y 2 ml de éter.Colocar la muestra en un matraz, taparlo y agitarlo por 1 minuto.Dejar reposar la mezcla por 10 minutos y después filtrar (usar papel filtro).Lavar el residuo con 2 ml de la solución de éter – etanol.

ACIDEZ

El índice de acidez se define como el número de miligramos de hidróxido de potasio necesarios para neutralizar los ácidos libres de un gramo de grasa. Su fórmula es:

I.A= n x 28 P

Dónde: n = No. de ml de solución 0.5 N de KOH gastados en la titulación P = peso de la muestra

PROCEDIMIENTO1.- Colocar 5 g de muestra en un matraz Erlenmeyer y agregar 3 gotas de fenolftaleína (si es necesario disuelva la muestra en un poco de etanol).2.- Titular con solución de KOH 0.5 N hasta obtener neutralización2.- Calcular el índice de acidez.

RANCIDEZ

El enranciamiento es un proceso por el cual un alimento con alto contenido en grasas o aceites se altera con el tiempo adquiriendo un sabor desagradable.

PROCEDIMIENTOColocar 5ml de aceite de olivo en buen estado en un tubo de ensayo y en el otro 5ml de aceite rancio.A los dos tubos añadir 1 ml de alcohol y calentar.Enfriar y colocar una gota de solución en el papel indicador de pH.

Los valores normales son:Aceite rancio: pH = 6.7 Aceite de Olivo (Oleico): pH = 6.1

SAPONIFICACIÓN

La saponificación es un proceso químico por el cual un cuerpo graso, unido a un álcali y agua, da como resultado jabón y glicerina.

grasa + sosa cáustica → jabón + glicerina

Este proceso químico igualmente es utilizado como un parámetro de medición de la composición y calidad de los ácidos grasos presentes en los aceites y grasas de origen animal o vegetal, denominándose este análisis como Índice de saponificación; el cual es un método de medida para calcular el peso molecular promedio de todos los ácidos grasos presentes. Igualmente, este parámetro es utilizado para determinar el porcentaje de materias insaponificables en los cuerpos grasos.Un método de saponificación común en el aspecto industrial consiste en hervir la grasa en grandes calderas, añadir lentamente hidróxido de sodio (NaOH) y agitarlo continuamente hasta que la mezcla comienza a ponerse pastosa.

PROCEDIMIENTOEn dos matraces respectivamente colocar 1.5 mg de grasa o aceite Añadir 25ml de solución de potasa alcohólica Colocar en el matraz un tapón con un tubo de vidrio que actué como refrigeranteCalentar a baño maría de 15 a 30 minutos hasta que haya sido totalmente saponificada (apariencia de clara uniforme)También utilizar un blanco el aceite problema, usar 25ml de potasa alcohólica y calentar no usar aceite. Enfriar los matraces y titular usando una solución estándar (HCl 5N). Usar 3 gotas de fenolftaleína hasta cambio de color y después agregar dos más.

COLORACIÓN

Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III.

PROCEDIMIENTO1. Disponer en una gradilla con tubos de ensayo colocando en ambos

2ml de diferentes aceites2. Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán

III.3. A los otros tubos añadir 4-5 gotas de tinta roja.4. Agitar ambos tubos y dejar reposar5. Observar los resultados: en el tubo con Sudan III todo el aceite tiene

que aparecer teñido, mientras que, en el tubo con tinta, esta se irá al fondo y el aceite no estará teñido.

SOLUBILIDAD

MATERIAL

5 tubos de ensayo 5 pipetas de 1ml

1 baño maría

REACTIVOS

Alcohol etílico Cloroformo

Tetracloruro de Carbono Benceno

Aceite de olivo Aceite rancio

Aceite de almendras

OBTENCIÓN DE LÍPIDOS A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVO

MATERIAL

2 vasos de precipitado 1 matraz con tapón

1 embudo 1 papel filtro

REACTIVOS

Alcohol metílico Éter – etanol

ACIDEZ

MATERIAL

2 matraz Erlenmeyer 250 1 soporte universal

1 bureta 1 pinzas para bureta

REACTIVOS

Fenolftaleína KOH 0.5 N

RANCIDEZ

MATERIAL

2 tubos de ensayo 1 baño maría

1 bureta 2 matraz erlenmeyer 250 ml

1 soporte universal 1 pinzas para bureta

REACTIVOS

HCl 5N Potasa alcohólica

Fenolftaleína

SAPONIFICACIÓN

MATERIAL

3 matraces 1 baño maría

1 bureta

REACTIVOS

HCl 5N Potasa alcohólica

Fenolftaleína

COLORACIÓN

MATERIAL

1 Gradilla 10 tubos de ensayo

5 pipetas

REACTIVOS

Colorante Sudán III Tinta roja

RESULTADOS

SOLUBILIDAD

SOLUBILIDAD EN CALOR

TIPO DE GRASA O ACEITE

ALCOHOL ETÍLICO

CLOROFORMO TETRACLORURO DE CARBONO

BENCENO

MANTEQUILLA Separación Separación Separación SeparaciónMANTECA VEGETAL

Separación No Separación Separación

ACEITE DE ALMENDRAS

Separación No No No

ACEITE DE OLIVA Separación No Separación SeparaciónACEITE RANCÍO separación No Separación Separación

SOLUBILIDAD EN frío

TIPO DE GRASA O ACEITE

ALCOHOL ETÍLICO

CLOROFORMO TETRACLORURO DE CARBONO

BENCENO

MANTEQUILLA Separación Separación Separación SeparaciónMANTECA VEGETAL

Separación No Separación Separación

ACEITE DE ALMENDRAS

Separación No No No

ACEITE DE OLIVA Separación No Separación SeparaciónACEITE RANCÍO separación No Separación Separación

Durante el proceso de esta práctica se observó que si hay separación de materia al reaccionar con un determinado reactivo es todo se debe a su composición química y también a la diferente densidad que contiene, también identificamos que tanto en caliente para después pasar a frio va permanecer separada.Imágenes anexadas:

OBTENCIÓN DE LÍPIDOS A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVOYEMA DE HUEVO

Se formaron cristales en las paredes, esto se debe a que el colesterol se separó de la yema de huevo esto gracias a la diferencia de solubilidad

De la yema de huevo se obtuvo tanto la lecitina como la separación de colesterol debido a la diferencia de solubilidades, la lecitina es de gran importancia para el metabolismo celular de los animales en este caso en la gallina.Imágenes anexadas

ACIDEZ

ÁCIDO/GRASA

VOLUMEN ML PESO DE MUESTRA

PESO TOTAL

PROMEDIO

MANTECA 0.2 15GR. 15GR 0.20.3 2

0.1 3ACEITE DE OLIVA

1.1 1 5GR.5GR. 0.56660.3 2

0.3 3

INDICE DE ACIDEZ MANTECA:I.A = n x 28 P

I.A = 0.2 X 28 = 0.3733 15GR

INDICE DE ACIDEZ DEL ACEITE DE OLIVAI.A = n x 28 P

I.A = 0.5666 X 28 = 3.17296 5GR

ACEITE O GRASA INDICE DE ACIDEZ

MANTECA 0.3733

ACEITE DE OLIVA 3.17296

En la realización de esta técnica aprendimos e identificamos que la acidez es aquella que se define del número de miligramos de hidróxido de potasio y que la obtenemos de una formula, es muy importante tener cuidado al momento de hacer la titulación ya que en este paso se debe tener mucho cuidado y sobre todo paciencia, ya que se toma en cuenta los mililitros y si nos excedemos con un poco nuestro índice de pH será erróneo.

IMÁGENES ANEXADAS

RANCIDEZ

ACEITE O GRASA VALOR OBTENIDO DE PH

VALOR DE REFERENCIA

ACEITE DE OLIVA 6.0 6.1

ACEITE RANCÍO 6.5 6.7

Los valores obtenidos en esta técnica casi fueron proporcionales a los de valores de referencia, a lo mejor lo que pudo haber disminuido el factor de pH fue al momento de tomar las concentraciones, pues debemos tener mucho cuidado y sobre todo ser precisos al momento de hacerlo en cuanto a cantidades nos refiramos.

IMÁGENES ANEXADAS

COLORACIÓN

ACEITE O GRASA SUDAN III COLORANTE DETINTA ROJA

ACEITE DE OLIVA Anaranjado rojizoSe formaron burbujas al Reaccionar el aceite con el reactivo de Sudan III

Anulado

ACEITE RANCÍO Anulado Coloración rojo intensoAl reaccionar se formaron grumos en toda la superficie

ACEITE DE ALMENDRA

Anulado Coloración roja a naranjadoSe formó en la parte de abajo un precipitado en forma de grumo

En la elaboración de esta técnica es muy importante que al momento de realizar cada muestra en cada tuvo seamos lo más exacto en cuanto a cantidades a utilizar porque un exceso de estas puede alterar nuestra coloración arrojándonos un resultado erróneo.Hay que ser muy observadores en cuento a la coloración que vaya a tomar porque muchas de las veces no hay mucho cambio. IMÁGENES ANEXADAS

OBSERVACIONES

Durante la realización de la práctica se pudieron observar diferentes comportamientos que se presentaba en los lípidos utilizados que fueron la mantequilla, la grasa vegetal, el aceite de oliva, de almendras y el aceite rancio a través de las siguientes técnica denotamos algunas separaciones y otras no ya que unos son insolubles y otros solubles en diferentes medios o disolventes orgánicos.

También se observó que con diferentes reactivos al mezclarlos presentaban un cambio de color y aspecto.

Observamos también la composición química de los diferentes lípidos que consumimos frecuentemente.

También observamos que la yema de huevo la pudimos sepáralo gracias a las diferentes solubilidades y porque este contiene esterol y fosfolípido así pudimos obtener el colesterol.

Por ultimo también pudimos observar el pH de algunas grasas.

CONCLUSIONES

Conocer las principales características de los lípidos y las reacciones que pueden sufrir es de mucha importancia para la carrera de biotecnología, y como conocimiento general de la química. Reacciones como la esterificación, saponificación y acidez, ocurren comúnmente en los lípidos y ácidos grasos, y es vital conocer qué producto se obtiene de cada reacción.

A partir de las reacciones orgánicas podemos obtener compuestos necesarios en la industria, así como otros procesos químicos. Los compuestos que no se encuentran de manera natural, pueden ser sintetizados en laboratorio si se conocen todas las condiciones necesarias para su síntesis.

Los experimentos realizados en esta práctica requirieron de mucho cuidado y tiempo ya que se utilizaron dos sesiones para llevarla a cabo. Mediante las distintas pruebas, se comprobaron las propiedades de los lípidos, específicamente del aceite de oliva y la mantequilla.

Se presentaron dificultades en la primera titulación, pero se reafirmó la técnica adecuada para realizar esta acción. Se espera que, en prácticas futuras, se realicen las titulaciones de manera correcta para así garantizar resultados confiables.

CUESTIONARIO

1. ¿Qué son los jabones?Los jabones son sales de ácidos grasos.

2. ¿Cómo se pueden obtener los jabones?

Mediante la saponificación, en el proceso de hidrólisis

3. Porque en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?Porque en la saponificación, se utilizan grasas y éstas están compuestas por ácidos grasos y glicerina. Como resultado se obtiene una fase semisólida que es la sal de sodio de los ácidos grasos (el jabón), por lo tanto, en la fase acuosa quedará el alcohol (glicerina) como subproducto de la elaboración del jabón puesto que es parcialmente soluble en agua, por lo que no hay razón para que no esté presente en esta forma

4. ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrolisis de las grasas?En el estómago la enzima lipasa gástrica y en el intestino delgado la lipasa pancreática-colipasa.

5. Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudán III y aceite-tinta y explica a que se debe la diferencia entre ambos resultados.Cuando se mezcla el aceite con el Sudán III, todo el aceite se tiñe de rojo puesto que es un colorante lipofilo (soluble en grasas) y debido a esa afinidad se utiliza para revelar la presencia de grasas. Pero la tinta roja no es soluble en grasas, por esa razón, el aceite no se tiñe de rojo con la tinta china roja puesto que no se mezclan, y la tinta se deposita en el fondo.

6. ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo? ¿Y con la de bencenos y aceite? ¿A qué se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?-Al pasar unos minutos de reposo, esa emulsión desaparece por la reagrupación de las gotitas de grasa en una capa, que por ser menos densa, se sitúa sobre el agua, de mayor densidad.-Aparece una disolución homogénea, puesto que el aceite se disuelve en el benceno, sustancia orgánica y apolar al igual que el aceite.

-Simplemente por la solubilidad de las grasas: insolubles en agua y por tanto no se mezcla con ella, y solubles en disolventes apolares como él, por eso si se mezclan.

7. Escribe las fórmulas de los lípidos utilizados en la prácticaTriglicéridos

Ácido graso monoinsaturado

BIBLIOGRAFIA MONOGRAFIAS: LIPIDOS:

http://www.monografias.com/trabajos16/lipidos/lipidos.shtml

DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA; LIPIDOS;http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/tipos%20lipidos.html

PORFESOR EN LINEA; LIPIDOShttp://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/lipidos.htm

ZONA DIET; LÍPIDOS, GRASAS EN LA NUTRICIÓNhttp://www.zonadiet.com/nutricion/grasas.htm

UNAM; DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA; LIPIDOShttp://laguna.fmedic.unam.mx/~3dmolvis/lipido/index.html

AULA VIRTUAL DE BIOLOGÍA; FUNCIONES DE LOS LÍPIODOShttp://www.um.es/molecula/lipi07.htm

AULA TECNOLOGICA SIGLO XXIhttp://www.aula21.net/nutricion/grasas.htm