UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.Alumno: Geovanny Ramón JapónCurso: Quinto Paralelo: A Grupo N° 5

Fecha de Elaboración de la Práctica: Lunes 16 de junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: Lunes 23 de Junio del 2014

PRÁCTICA N° 3

Título de la Práctica: Intoxicación por metanol.Animal de Experimentación: Cobayo.Vía de Administración: Intraperitonial

Tiempos:

o Inicio de la práctica: 8:20am

o Hora de administración del toxico al cobayo: 8:25 am

o Deceso del animal: 9: 45 am

o Inicio de la destilación: 10:30 am

o Finalización de la destilación: 11:00 am

o Final de la práctica: 11:30 am

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por metanol.2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el

toxico.3. Adquirir la destreza para realizar las reacciones de identificación, mediante la

transformación del metanol a metanal.4. Reconocer mediante la observación de los colores características, la presencia de

metanal indicativo de la presencia del metanol.

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1

MATERIALES

o Jeringa de 5 cc

o Varilla

o Espátula

o Probeta

o Campana

o Panema

o Perlas de vidrio

o Bureta

o Soporte universal

o Cinta plástica

o Lámpara de alcohol

o Fosforo

o Pinzas

o Cocineta

o Porta tubo

o Tabla de disección

o Cronómetro

o Equipo de disección

o Bisturí

o Vasos de precipitación 200 y

500 ml.

o Erlenmeyer

o Equipo de destilación.

o Tubos de ensayo

o Pipetas

o Guantes de látex

o Mascarilla

o Mandil

o Gorro

o Zapatones en caso de usar

sandalias

SUSTANCIAS

Metanol. Acido tartárico. Coluro de Fenilhidracina al 4%. Nitroprusiato de sodio al 2.5 %. Hidróxido de Sodio 0.1 N Ferricianuro de potasio. Hidróxido de potasio 12%. Ácido cromotrópico. Agua destilada. Ácido sulfúrico concentrado. Leche. Cloruro férrico

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 2

PROCEDIMIENTO

1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo.2. Colocamos el cobayo en el panema.3. Tener todos los materiales a utilizar listos.4. Administramos al cobayo, 5 ml de metanol por vía intraperitoneal y anotamos

el tiempo.5. Observamos los efectos que produce en el cobayo.6. Luego inyectamos 15 ml del toxico en tres dosis durante el lapso de 35 minutos

hasta la muerte del animal.7. Procedimos a la apertura del cobayo con la ayuda del bisturí.8. Observamos el estado de las vísceras. 9. En un vaso de precipitación recolectamos la sangre y colocando las vísceras

(picadas lo más finas posibles).10. El contenido del vaso anterior lo pasamos al balón para proceder a la destilación.11. Armamos correctamente el equipo de destilación (método de soxhleth),

asegurando que no existan fugas que conlleven a pérdidas del destilado.12. Adicionamos a las vísceras acido tartárico (25 ml) y calentamos con la lámpara

de alcohol esto con movimiento circular.13. Al producto de la destilación (destilado), le colocamos una lámina de cobre al

rojo vivo hasta que se observe el desprendimiento de partículas de color gris, con esto convertimos el metanol a metanal y procedimos a realizar las reacciones de identificación.

14. Una vez terminada la práctica se limpia todo el material y el área utilizada.

REACCIONES DE REACIONES DE RECONICIMIENTO

1. REACCIÓN DE SCHIFF: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.

2. REACCIÓN DE RIMINI: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.

3. CON LA FENILHIDRACINA: En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.

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4. CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO: Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.

5. REACCIÓN DE HEHNER: Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.

GRÁFICOS:

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

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Animal de experimentación cobayo

Extraer las vísceras del cobayo

Inyectar 10 ml el toxico (metanol)

Preparar el equipo de destilación

Triturar las vísceras

Observar los síntomas del cobayo luego de la administración del toxico

Obtener el destilado para realizar el análisis

Colocar al cobayo en la tabla de disección

1

4

852

7

3

6

9

Transformación del metanol en metanal para su identificación

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS

REACCIÓN DE SHIFF: Reacción positivo no característico cambio de coloración

REACCIÓN DE RIMIDI Reacción positivo no característico cambio de coloración

CON LA FENIL HIDRACINAReacción positivo se observó el color rojo grosella.

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Antes Después

Antes Después

Antes Después

CON ÁCIDO CROMOTRÓPICOReacción negativo no se observó la coloración roja.

REACCIÓN DE HEHNER

Reacción negativo no se formó el anillo violeta.

OBSERVACIONES

Hemos observado que al administrar el toxico (metanol) por vía intraperitoneal el cobayo presentó cierta inmovilidad, depresión del SNC, a los 3 minutos se le cayeron las orejas pero permanecía estable, a los 7 minutos el ritmo respiratorio disminuyo, a los 11 minutos no responde a estímulos oculares, con la sobredosis que se le fue administrado murió inmediatamente a los 70 minutos. Presentó necropsia de las vísceras.

CONCLUSIONES

Al término de esta práctica podemos concluir que el veneno utilizado (metanol) es muy tóxico debido a las manifestaciones como la poca movilidad, convulsiones y coma que se presentaron en el animal, en primera instancia no se logró la muerte ya que la dosis fue muy baja pero al administrarle un total de 20 ml del toxico el deceso fue inmediato y mediante las reacciones para el reconocimiento de éste podemos concluir que si hubo presencia de metanol.

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DespuésAntes

Antes Después

RECOMENDACIONES

Realizar la asepsia del área a trabajar. Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,

mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así

intoxicaciones. Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado y

que no esté alguna persona en esa dirección, ya que puede haber salpicadura del toxico.

CUESTIONARIO

¿QUE ES EL METANOL?

El compuesto químico metanol, también conocido como alcohol de madera o alcohol metílico (o raramente alcohol de quemar), es el alcohol más sencillo. A temperatura ambiente se presenta como un líquido ligero (de baja densidad), incoloro, inflamable y tóxico que se emplea como anticongelante, disolvente y combustible. Su fórmula química es CH3OH (CH4O).

¿DÓNDE SE ENCUENTRA?

Anticongelante Fuentes de calentamiento enlatadas Líquidos para copiadoras Líquido descongelante Aditivos para combustibles (mejoradores del octanaje) Removedor o disolvente de pintura Goma laca Barniz Líquido limpiador de parabrisas

¿CUÁLES SONLOS SINTOMAS ANTE UNA INTOXICACION?

Los síntomas pueden abarcar:Pulmones y vías respiratorias Dificultad respiratoria, paro respiratorio Ojos Ceguera, visión borrosa y dilatación de las pupilasCorazón y vasos sanguíneos Convulsiones y presión arterial bajaSistema nervioso: Comportamiento agitado, coma, dolor de cabeza y epiléptica

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Piel y uñas Uñas y labios azulados Estómago e intestinos Dolor abdominal (fuerte), diarrea, problemas con la función hepática, náuseas, pancreatitis y vómitos.

¿TOXICIDAD DEL METANOL?

El metanol es extremadamente tóxico. Tan solo dos cucharadas pueden ser mortales para un niño y alrededor de 2 a 8 onzas pueden ser mortales para un adulto. La ceguera es común y a menudo permanente a pesar de los cuidados médicos. El pronóstico para la persona depende de la cantidad de tóxico ingerida y de la prontitud con que se reciba el tratamiento.

COMPRACIONES

USOSEl metanol tiene varios usos. Es un disolvente industrial y se emplea como materia prima en la fabricación de formaldehído. El metanol también se emplea como anticongelante en vehículos, combustible de estufetas de acampada, solvente de tintas, tintes, resinas, adhesivos, biocombustibles y aspartame. El metanol puede ser también añadido al etanol para hacer que éste no sea apto para el consumo humano (el metanol es altamente tóxico) y para vehículos de modelismo con motores de combustión interna.

BIBLIOGRAFÍA

Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial Científico-Médico. Madrid. España. 2010.

WEBGRAFÍA

https://www.google.com.ec/?gfe_rd=cr&ei=I72nU8_2Ca_Q8gfx7IDgBQ&gws_rd=ssl#q=metanolhttp://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002680.htmhttp://es.wikipedia.org/wiki/Metanol

AUTORIA

Bioq. Farm. Carlos García MSc.

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FIRMAS DE LOS INTEGRANTES

__________________ __________________Elizabeth Guzmán Geovanny Ramón

_________________________Gisela Fernández

GLOSARIO

Embalsamamiento.- es una práctica que utiliza generalmente sustancias químicas, en especial resinas o bálsamos, y cuyo objetivo es preservar de la putrefacción la integridad de los cadáveres.

Aspartame.- es un edulcorante no calórico descubierto en 1965 por la multinacional farmacéutica G.D. Searl and Company. Que se emplea en numerosos alimentos en todo el mundo bajo varias marcas como Natreen y Canderel, además de NutraSweet, y que corresponde al código E 951 en Europa.

Emanaciones: Desprendimiento o emisión de sustancias volátiles de un cuerpo hacia su alrededor.

Mosto.- es el zumo de la uva que contiene diversos elementos de la uva como pueden ser la piel, las semillas, etc. Se considera una de las primeras etapas de la elaboración del vino.

Acidosis.- Es una dolencia en la cual hay demasiado ácido en los líquidos del cuerpo. Es lo opuesto a alcalosis (una afección en la cual hay exceso de base en los líquidos corporales).

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ANEXOS:

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