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 Practica No. 16 “USO Y ACCIÓN DE LOS DESINFECTANTES” OBJETIVO:  Probar algunos desinfectantes comerciales y conocer la acción de estos sobre los microorganismos. FUNDAMENTO: Los desinfectantes son agentes químicos que se utilizan con la finalidad de destruir los microorganismos o reducir su cantidad, generalmente se emplean en los objetos inanimados. Algunos son bactericidas cuando destruyen a los microorganismos y bacteriostáticos cuando inhiben el crecimiento. GENERALIDADES: La acción de este tipo de sustancias se considera inespecífica o de tipo general.  Actúan dañando la membrana celular, inactivando las proteínas o dañando los ácidos nucleicos. La eficiencia de estos agentes depende de diversas variables, como el tiempo de contacto, temperatura, concentración, cantidad y naturaleza de los microorganismos presentes y tipo de material por desinfectar.  Algunos principales agentes antimicrobianos son: a)  COMPUESTOS FENOLICOS: Son bactericidas o bacteriostáticos dependiendo de la concentración en la que se usen, actúan dañando la membrana celular con pérdida de los componentes celulares. Es muy eficaz para matar todas las células vegetativas aunque no lo es tanto con las esporas o los virus carentes de membrana. En la actualidad el fenol es muy poco usado debido a sus propiedades tóxicas; aunque existen derivados fenólicos con mayor actividad antimicrobiana sin ser tóxicos. b)  DESINFECTANTES TENSOACTIVOS: Los depresores de la tensión superficial o agentes humectantes empleados principalmente para la limpieza de superficies se llaman detergentes. Muchos jabones y detergentes son bactericidas pero para el lavado de la piel la destrucción de los microorganismos no es muy significativa ya que el tiempo de acción es muy corto. Se han desarrollado muchos agentes limpiadores más eficaces que el jabón, como los surfactantes o detergentes sintéticos, pues no forman precipitados con las aguas alcalinas o ácidas, ni producen depósitos con los minerales de las aguas duras. Químicamente los detergentes se clasifican en: 1.- Detergentes aniónicos.- Son los que poseen una carga negativa en su molécula, presentan una rápida actividad bactericida en especial a pH bajo y son eficaces contra la mayor parte de las bacterias Gramnegativas. 2.- Detergentes catiónicos.- La capacidad de desintegrar la membrana celular de estos compuestos aumenta probablemente por la atracción entre la carga positiva de la

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Practica No. 16 “USO Y ACCIÓN DE LOS DESINFECTANTES” 

OBJETIVO:

  Probar algunos desinfectantes comerciales y conocer la acción de estos sobrelos microorganismos.

FUNDAMENTO:Los desinfectantes son agentes químicos que se utilizan con la finalidad dedestruir los microorganismos o reducir su cantidad, generalmente se emplean en losobjetos inanimados. Algunos son bactericidas cuando destruyen a los microorganismosy bacteriostáticos cuando inhiben el crecimiento.

GENERALIDADES:

La acción de este tipo de sustancias se considera inespecífica o de tipo general. Actúan dañando la membrana celular, inactivando las proteínas o dañando los ácidosnucleicos. La eficiencia de estos agentes depende de diversas variables, como el tiempo

de contacto, temperatura, concentración, cantidad y naturaleza de los microorganismospresentes y tipo de material por desinfectar.

 Algunos principales agentes antimicrobianos son:

a)  COMPUESTOS FENOLICOS: Son bactericidas o bacteriostáticos dependiendode la concentración en la que se usen, actúan dañando la membrana celular conpérdida de los componentes celulares. Es muy eficaz para matar todas lascélulas vegetativas aunque no lo es tanto con las esporas o los virus carentes demembrana. En la actualidad el fenol es muy poco usado debido a sus

propiedades tóxicas; aunque existen derivados fenólicos con mayor actividadantimicrobiana sin ser tóxicos.

b)  DESINFECTANTES TENSOACTIVOS: Los depresores de la tensión superficialo agentes humectantes empleados principalmente para la limpieza desuperficies se llaman detergentes. Muchos jabones y detergentes sonbactericidas pero para el lavado de la piel la destrucción de los microorganismosno es muy significativa ya que el tiempo de acción es muy corto.

Se han desarrollado muchos agentes limpiadores más eficaces que el jabón, como lossurfactantes o detergentes sintéticos, pues no forman precipitados con las aguas

alcalinas o ácidas, ni producen depósitos con los minerales de las aguas duras.

Químicamente los detergentes se clasifican en:

1.- Detergentes aniónicos.- Son los que poseen una carga negativa en su molécula,presentan una rápida actividad bactericida en especial a pH bajo y son eficaces contrala mayor parte de las bacterias Gramnegativas.2.- Detergentes catiónicos.- La capacidad de desintegrar la membrana celular de estoscompuestos aumenta probablemente por la atracción entre la carga positiva de la

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molécula del detergente y la carga negativa de la membrana citoplasmática, su eficaciaaumenta en un pH alcalino. Estas sustancias actúan más contra bacteriasGrampositivas.

3.- Detergentes no iónicos.- No son muy útiles como desinfectantes pero algunosdetergentes iónicos bipolares pueden ser tan eficaces y menos tóxicos que los

detergentes catiónicos. Se sabe que los detergentes catiónicos son más germicidas quelos compuestos aniónicos. Entre los agentes bactericidades tensoactivos, losdetergentes de amonio cuaternario son los más importantes.

ALCOHOLES: Los alcoholes son sustancias que se utilizan también comodesinfectantes ya que se desintegran las membranas celulares. El etanol es muyutilizado a una concentración del 70% y destruye todas las células vegetativas, siempreque el tiempo de contacto sea suficiente. Los alcoholes desnaturalizan las proteínas yesta propiedad puede contar para su actividad antimicrobiana, aunque no son muyútiles para inactivar las esporas y no son confiables para una buena esterilización. Elalcohol isopropílico y benzílico tienen mayor poder germicida pero son más tóxicos parael ser humano que el etanol.

HALÓGENOS:  Algunos halógenos son utilizados como agentes desinfectantes,tal es el caso de el Yodo y el cloro. Ambos son bactericidas y actúan probablementecomo oxidantes. El yodo se oxida formando especies reactivas que reaccionan a la vezcon las tirosinas y otros aminoácidos en las proteínas. Su utilización es principalmenteen la medicina como desinfectante de la piel y en heridas. El cloro y sus derivados comoes el hipoclorito y las cloraminas reaccionan con el agua y forman ácido hipocloroso quees un agente oxidante fuerte y desinfectante eficaz. Se ha utilizado como bactericida enel agua y para la limpieza de objetos.

PEROXIDO DE HIDROGENO: Es un antiséptico débil no tóxico, cuando seutiliza al 3%. Actúa como agente oxidante, pero su duración en los tejidos es reducidoya que la enzima catalasa lo convierte en oxígeno y agua.

COLORANTES: El trifenilmetano y algunos derivados de la acridina soncompuestos colorantes que utilizados a concentraciones sirven como antimicrobianos,ya que pueden inhibir la síntesis de la pared celular como es el caso del trifenilmetanoo insertarse en las bases de los ácidos nucleicos como es el caso de la acridina.

OXIDO DE ETILENO: Este compuesto es utilizado en fase gaseosa, es muy

eficaz en la destrucción de todas las células vegetativas, esporas y virus. Posee unanillo de óxido muy reactivo que se abre en presencia de grupos amino, carboxilo,sulfhídrico o hidroxilo de las proteínas, a las que se une por enlace covalente, tambiénreacciona con los ácidos nucleicos y es mutagénico a dosis letales.

MATERIAL Y EQUIPO

   Asa de inoculación  Mechero Bunsen

  Discos de papel filtro estériles

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REACTIVOS:

  2 tubos con agar soya tripticasa(15-20 ml)

  2 cajas Petri estériles  4 antisépticos comerciales

MATERIAL BIOLÓGICO:

  Cepas: Escherichia coli y 

Pseudomona aeruginosa. 

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METODOLOGÍA:

1.- Derretir y enfriar el agar nutritivo a una temperatura de 45  – 50ºC.2.- Inocular un tubo con dos asas llenas de Spseudomona aeruginosa  y el otrotubo con la misma cantidad de Escherichia coli ., verter inmediatamente a las

cajas Petri evitando que se formen grumos o que se solidifique antes de verter.3.- Dejar solidificar en una superficie plana, marcar cada caja con el nombrecorrespondiente de cada bacteria.4.- De la manera más aséptica impregnar un disco con uno de los antisépticos(no demasiado para no estropear el experimento) y colocarlo con cuidado en elmedio.Repetir la operación con los antisépticos restantes, y con la siguiente caja,colocar las cajas ya tapadas boca arriba y dejar reposar 5 minutos.6.- Inocular las cajas a 37ºC por 24 horas. Al acabo de este tiempo se deberánobservar zonas de inhibición transparentes alrededor de los discos si eldesinfectante actuó en el microorganismo.

ACTIVIDADES:

I.- Contestar el siguiente cuestionario:

1.- ¿Cuáles son las principales condiciones que influyen en la actividad de losdesinfectantes?

Concentración del agente y tiempo de actuación

 pH: El pH afecta tanto a la carga superficial neta de la bacteria como al grado deionización del agente. En general, las formas ionizadas de los agentes disociables

pasan mejor a través de las membranas biológicas, y por lo tanto son más efectivos.

Los agentes aniónicos suelen ser más efectivos a pH ácidos.

Los agentes catiónicos muestran más eficacia a pH alcalinos.

  Temperatura. Normalmente, al aumentar la temperatura aumenta la potencia de los

desinfectantes. Para muchos agentes la subida de 10 grados supone duplicar la tasa

de muerte.

  Naturaleza del microorganismo y otros factores asociados a la poblaciónmicrobianasegún la especie empleada: p. ej., el bacilo tuberculoso resiste los hipocloritos mejor

que otras bacterias;según la fase de cultivo;

dependiendo de la presencia de cápsulas o de esporas (suelen conferir más

resistencia);

dependiendo del número de microorganismos iniciales.

  Presencia de materiales extraños: La existencia de materia orgánica en el material

a tratar (p. ej., sangre, suero, pus) afecta negativamente a la potencia de los

desinfectantes de tipo oxidante (como los hipocloritos) y de tipo desnaturalizante de

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proteínas, hasta el punto que pueden llegar a hacerlos inactivos en cuanto a su poder

desinfectante o esterilizante. Por lo tanto, para el empleo eficaz de muchos

desinfectantes hay que contar con este factor, determinando previamente el gasto de

materia orgánica inerte, o calculando la potencia neta del desinfectante en presencia

de la materia orgánica

2.- ¿Cómo actúan los desinfectantes en los microorganismos para su inhibicióno destrucción?

Lo desinfectantes actúan como desnaturalizantes o precipitantes de proteínas, inhiben

enzimas y causan muerte celular. Son más potentes , más rápidos y termoestables que los

antisépticos. Algunos son más tóxicos.

3.- ¿Qué es detergente?

Son moléculas orgánicas que actúan como agentes humectantes y

emulsionantes, son capaces de solubilizar residuos que son insolubles en agua,por lo que les considera agentes limpiadores muy eficaces.  

4.- ¿Cómo se clasifican los detergentes?

Detergentes catiónicos

Son los detergentes más potentes en cuanto a su actividad desinfectante, siendo activos

contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. Los principales son los llamados

compuestos de amonio cuaternario:

Sales de amonio cuaternario, sobre todo aquellas que van como cloruros o bromuros. Su

fórmula general se puede representar así:

Los cuatro sustituyentes (R1 a R4) del N son cadenas de hidrocarburos variados. Las sales

de amonio cuaternario más activas son aquellas que tienen tres grupos alquílicos cortos y

un grupo alquílico largo: cloruro de cetilpiridinio, cloruro de benzalconio

Mecanismo de acción: La porción hidrófoba penetra en las membranas, mientras que el

grupo polar catiónico se asocia con los fosfatos de los fosfolípidos, provocando alteraciones

en dichas membranas, reflejadas en la pérdida de su semipermeabilidad, con salida de

metabolitos de N y P desde el citosol. Es entonces cuando el detergente puede entrar alinterior celular, con un efecto secundario de desnaturalización de proteínas. Su actividad se

mejora a pH alcalino.

Son rápidamente bactericidas a concentraciones muy bajas (del orden de una parte por

millón, 1 ppm), siempre que en el material a tratar no exista materia orgánica.

Usos, ventajas e inconvenientes: Tienen baja toxicidad, por lo que se pueden emplear

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como desinfectantes y antisépticos de la piel. Se emplean igualmente en la desinfección de

material de industrias alimentarias.Su actividad se ve neutralizada por jabones y

fosfolípidos, precipitando en su presencia.

Detergentes aniónicos

Con grupos carboxilo como porción hidrófila:

   jabones 

  saponinas 

  sales biliares 

  ácidos grasos disociables 

Con grupos sulfato como porción hidrófila:

  dodecilsulfato sódico (SDS), también llamado laurilsulfato sódico 

  sulfonato de alquilbenceno 

Mecanismo: Provocan una gran disrupción de membranas, con efectos de lisis. Son activos

sobre todo a pH ácido, prefentemente sobre bacterias Gram-positivas, pero poco sobre

Gram-negativas, ya que éstas quedan más protegidas por la barrera del lipopolisacárido de

la membrana externa.

Usos: Cuando los detergentes aniónicos se combinan con ácidos, se logran desinfectantes

sanitarios muy potentes (debido al efecto sinérgico de ambos componentes) y de rápida

actuación (unos 30 segundos).

Detergentes no iónicos

No tienen actividad antimicrobiana, pero algunos tienen empleo en otros campos de la

Microbiología: los ésteres del ácido oleico (bajo nombres comerciales como CarbowaxJ,

Tween-80J) pueden adicionarse a medios de cultivo para evitar la formación de grumos y

favorecer el crecimiento disperso de ciertas bacterias (como  Mycobacterium tuberculosis);

además el oleico puede estimular el crecimiento.

5.- ¿En qué casos es recomendable el óxido de etileno como desinfectante?

El óxido de etileno (OE) es un tanto microbicida como esporicida; destruye losmicroorganismos al combinarse con las proteínas celulares. Es particularmenteeficaz como agente esterilizante porque penetra rápidamente a través de

materiales embalados, incluso envolturas de plástico. 

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II.-RESULTADOS de las Mediciones de los halos de inhibicióncepa Desinfectante

benzal pinol H2O2 cloro ajax lysol pinol H2O2 

Sthaphylococcus

aureusNo

creció

No

creció

No

creció

No

creció

No

creció

No

creció

No

creció

No

creció

Escherichia coli  1.1 cm

( S )

1.6 cm

( I )

1.7 cm

( I )

1.3 cm

( S

2.1 cm

( R)

1.3 cm

( S )

1.3 cm

( S)

1.9 cm

( R)

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CONCLUSIÓN:

Podemos decir que la importancia que tienen los desinfectantes dentro de la

microbiología es que difieren de los antimicrobianos activos por vía general en que poseen

poca toxicidad selectiva: no sólo son tóxicos para los parásitos microbianos si no también

para las células huéspedes. Por lo tanto, pueden ser usados solamente para inactivarmicroorganismos en el medio inanimado o hasta cierto grado sobre la superficie cutánea,

pero no pueden administrarse por vía general y no son activos en los tejidos. La acción

antimicrobiana de los desinfectantes está determinada por su concentración , tiempo y

temperatura y la valoración de su efecto puede ser complejo.

BIBLIOGRAFÍA:

Introducción a la microbiología

Ingraham John, Ingraham Catherine.

Reverte, 1998

ANEXO:

CONTROL DE MICROORGANISMOS POR AGENTES FISICOS YQUIMICOS.

1.  Defina los sig. Términos:  Esterilización: Es el proceso por el que todas las células vivas,

esporas viables, virus y viroides son destruidos o eliminados de un

objeto o hábitat.  Esterilizante: Es un agente químico con el cual se realiza laesterilización.

  Desinfección: Consiste en la destrucción, inhibición o eliminaciónde, al menos, los microorganismos que pueden causar enfermedad.

  Desinfectante: Son agentes, normalmente químicos, empleadospara desinfectar, se emplean sobre objetos inanimados.

  Saneamiento: Con este sistema, la población microbiana se reducea niveles que se consideran seguros según las normas de saludpública.

  Antisepsia: Es la prevención de una infección o sepsis y se realiza

con antisépticos.  Antiséptico: Son agentes químicos que se aplican sobre los tejidos

para prevenir una infección, destruyendo o inhibiendo elcrecimiento de agentes patógenos.

  Germicida: Destruye agentes patógenos y muchos no patógenos,pero no necesariamente endosporas.

  Bactericida: Sustancias químicas no destruyen, sino que previenenel crecimiento.

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  Bacteriostático: Destruyen o inhiben el crecimiento de organismosno patógenos.

2.  Describa el modelo de muerte microbiana y como se sabe si losmicroorganismos están realmente muertos.

La muerte de una población, es generalmente exponencial o logarítmica.Si se representa el logaritmo del número de microorganismos quepermanece viable frente al tiempo de exposición del agente, se obtiene unalínea recta. Cuando la población se ha reducido notablemente la velocidadde destrucción puede disminuir debido a la supervivencia de algunasvariantes más resistentes de los microorganismos expuesto.

Una bacteria se considera muerta si no crece ni se multiplica cuando seinocula en un medio de cultivo adecuado para su crecimiento.

 Análogamente, consideraremos que un virus está inactivo cuando no escapaz de multiplicarse en un huésped apropiado. 

3.  Explique brevemente como varia la eficacia de los agentesantimicrobianos respecto del tamaño de la población, la composición dela población, la concentración o intensidad de un agente, la duración deltratamiento y las condiciones ambientales locales.

  Tamaño de la población: En cada intervalo de tiempo se destruye unafracción igual de población microbiana, por tanto, una poblaciónmayor necesitara más tiempo para morir que una más pequeña.

  Composición de la población: La eficiencia de una agente varía

considerablemente con la naturaleza de los organismos que se van atratar porque estos difieren sustancialmente en cuanto asuceptibilidad.

  Concentración o intensidad de un agente antimicrobiano:    A menudo, pero no siempre, cuando más concentrado este un agente

químico o más intenso sea un físico, más rápidamente se destruyenlos microorganismos. La eficiencia de un agente no está normalmenterelacionada directamente con la concentración o intensidad. Así unaumento pequeño de la concertación puede ocasionar un incrementoexponencial de la eficacia, pero, por encima de este punto, puede quelos aumentos no incrementen en absoluto la velocidad de destrucción.

 A veces, un agente es más eficaz en concentraciones más bajas.  Duración de la exposición: cuanto más tiempo se ponga una población

a un agente microbicida, mas organismos se destruirán.  Temperatura: La actividad de los agentes químicos aumenta con la

temperatura. Con frecuencia concentraciones bajas de undesinfectante puede ser eficaces a temperaturas más altas.

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  Ambiente: La población microbiana que debe ser controlada no estáaislada, sino en el contexto de una serie de factores ambientales quepueden ofrecerle protección o facilitar su destrucción.

4.  Defina el punto de muerte térmica (PMT), tiempo de muerte térmica

(TMT), tiempo de reducción decimal (o valor D), valor z y valor f.PUNTO DE MUERTE TERMICA (PMT): La temperatura más baja a la queuna suspensión microbiana se disminuye en 10 minutos.

TIEMPO DE MUERTE TERMICA (TMT): El tiempo más corto necesariopara destruir todos los organismos de una suspensión microbiana, a unatemperatura específica y en condiciones definidas.

 VALOR z: Este valor es el aumento de temperatura necesario para reducirD a 1/10 de su valor o en un logaritmo.

 VALOR F: Es el tiempo, en minutos, y a una temperatura determinada(normalmente, 12°C), necesario para disminuir un población de células oesporas.

5.  Describa el funcionamiento del autoclave.Se hierve agua para producir vapor, que pasa a través de una cubierta al

interior de la cámara del autoclave. Se expulsa el aire que inicialmente seencuentra en la cámara hasta que esta queda llena de vapor saturado y secierran las salidas. El vapor saturado y caliente continua entrando en lacámara hasta que alcanza la temperatura y la presión deseadas normalmente,121°C y 6.8 kg de presión. A esta temperatura, el vapor saturado puededestruir en 10-12min todas las células vegetativas y endosporas presentes. Eltratamiento se continúa durante 15 min para conseguir un margen de

seguridad.

6.  ¿Qué condiciones se requieren para esterilizar con calor húmedo? CON CALOR HUMEDO: Debe realizarse a temperaturas superiores a

100°C para destruir las endosporas bacterianas; esto requiere la utilización devapor saturado bajo presión.

7.  ¿Cuáles son las 3 fases que hay que realizar cuando se trabaja con unautoclave, con el fin de garantizar un resultado positivo?   Si no se extrae todo el aire de la cámara no se alcanzara la temperatura

d 121°C.  Los contenedores o recipientes no veden compactarse demasiado porque

el vapor tiene que circular libremente y entrar en contacto con todo loque este dentro del autoclave

  Las endosporas bacterianas se destruirán solamente si se mantiene unatemperatura de 121°C durante 10 a 12 min.

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8.  ¿Cómo se realizan la pasteurización, pasteurización rápida,esterilización con temperatura ultra elevada y esterilización por calorseco? De algunas aplicaciones prácticas de cada uno de estos métodos. 

  PASTEURIZACION: Este método no esteriliza una bebida, perodestruye cualquier agente patógeno que contenga y disminuye en

gran medida la putrefacción, al reducir el nivel demicroorganismos alterantes no patógenos.  PASTEURIZACION RAPIDA: Consiste en calentar rápidamente a

72°C durante 15 min.  ESTERULIZACION CON TEMPERATURA ULTRAELEVADA:

La leche y los derivados lácteos se calientan a una temperatura d140 °C a 150°C durante 1 a 3 seg. La leche tratada con UHT nonecesita refrigeración y puede almacenarse a temperaturaambiente durante casi 2 meses sin que se produzcan cambios en elsabor.

9.  ¿De qué manera se pueden emplear las bajas temperaturas para elcontrol microbiano?La técnica de control más conveniente es inhibir su multiplicación

mediante el empleo de la refrigeración o congelación. Una de las causas por laque, en general, los microorganismos no se multiplican a las temperaturas decongelación es la ausencia de agua líquida libre.Pero también la congelación es un buen procedimiento para la conservación demicroorganismos por largos periodos de tiempo si se realiza apropiadamente,numerosos laboratorios disponen de congeladores de -30 o -70 para laconservación de colecciones de cultivos microbiana.

10. ¿Qué son los filtros de profundidad y filtros de membrana y como seemplean para esterilizar líquidos?

  FILTROS DE PROFUNDIDAD: Consisten en materiales fibrosos ogranulosos o granulosos que forman una capa gruesa rellena de canalesretorcidos de un diámetro pequeño. La solución que contiene losmicroorganismos se aspira a través de esta capa, quedando las célulasmicrobianas retenidas, absorbidas en el filtro. 

  FILTROS DE MEMBRANA: Estos filtros circulares son membranasporosas, con un grosor de aproximadamente 0.1mm. de acetato de

celulosa, nitrato de celulosa, etc. Las membranas con poros de unos 0.2um de diámetro se emplean para eliminar las células vegetativas,aunque no virus, de soluciones con un volumen de 1 ml a varios litros.

11. Describa el funcionamiento de una cabina de seguridad biológica. Son uno de los sistemas de filtración de aire más importantes, capaces de

eliminar el 99.97% de las partículas de 0.3 um, fuerzan al aire a través de

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filtros HEPA, creciendo una cortina vertical de aire estéril en el frontal de lacabina.

12. Exponga las ventajas e inconvenientes de la luz ultravioleta y de laradiación ionizante como agentes esterilizantes. Indique algunos

ejemplos de cómo se esteriliza cada una con ese propósito.  LA RADIACIÓN ULTRAVIOLETA (UV): De aproximadamente 260 nm,

es bastante letal, pero no atraviesa eficazmente el cristal, las películasde suciedad, el agua ni otras sustancias. La radiación UV se empleacomo agente esterilizante en muy pocas situaciones. Las lámparas de UVse colocan a veces en los techos de las habitaciones o en cabinas deseguridad biológica para esterilizar el aire y cualquier superficieexpuesta. Como la radiación UV quema la piel y lesiona los ojos, laspersonas que trabajan deben asegurarse de que estas lámparas esténapagadas cuando trabajen allí.

  LA RADIACION IONIZANTE: Es un agente esterilizante excelente ypenetra en los objetos. Destruirá endosporas bacterianas y célulasvegetativas, no es siempre tan efectiva frente a virus.

13. ¿Qué características generales se deberían tener en cuenta en relacióncon un desinfectante?El paradigma de los desinfectantes debe ser eficaz frente a una amplia

variedad de agentes infecciosos tanto en diluciones elevadas como enpresencia de materia orgánica. El producto químico debe ser toxico para losagentes infecciosos, no debe serlo para personas ni corrosivo para losmateriales comunes.

14. Describa cada uno de los siguientes agentes, según su naturalezaquímica, mecanismo de acción, modo de aplicación, usos comunes,eficacia, ventajas e inconvenientes: fenoles, alcoholes, halogenuros (yodoy cloro), metales pesados, compuestos de amonio cuaternario, aldehídos yóxido de etileno.

  FENOLES: Estos productos actúan desnaturalizando las proteínas yalterando las membranas celulares. Sus ventajas son comodesinfectantes: son tuberculocidas, eficaces en superficies después demucho tiempo de su aplicación. Sin embargo tienen un olor desagradable

y pueden causar irritación cutánea.    ALCOHOLES: Son bactericidas y fungicidas, pero no esporicidas;

destruyen también algunos virus con envoltura lipídica. Los alcoholesgermicidas mas comunes son el etanol y el isopropanol, empleados enuna concentración del 70-80% desnaturalizan las proteínas y disuelvenlos lípidos de la membrana.

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  HOLOGENOS: Pertenecen al grupo VIIA de la tabla periódica, existenen forma de moléculas diatónicas en estado libre, y forman sales consodio y la mayoría del resto de metales. Un ejemplo es el yodo que seutiliza como antiséptico cutáneo, y destruye los microorganismos aloxidar los constituyentes celulares y formar compuestos de yodo con

proteínas celulares. Aunque es un antiséptico, puede lesionar la piel,deja manchas y se pueden desarrollar alergias al yodo. El cloro es eldesinfectante habitual del agua municipal y de las pisinas, el resultadoes la oxidación de materiales celulares y la destrucción de bacteriasvegetativas y hongos aunque no de esporas.

  METALES PESADOS: Los iones de metales pesados como mercurio,plata, arsénico, cinc y cobre se han empleado como germicidas. Unasolución del 1% de nitrato de plata se aplica a menudo en los ojos de losniños para prevenir gonorrea oftálmica. El sulfato de cobre es un algicidapotente muy utilizado en lagos y pscinas.

  DETERGENTES: son moléculas orgánicas que actúan como agenteshumectantes y emulsionantes, son capaces de solubilizar residuos queson insolubles en agua, por lo que les considera agentes limpiadores muyeficaces. Los detergentes catiónicos se emplean a menudo comodesinfectantes de utensilios de alimentación y pequeños instrumentos, yson antisépticos cutáneos.

   ALDEHIDOS: Son esporicidas y pueden emplearse como esterilizantesquímicos. El formaldehido se disuelve normalmente en agua o alcohol,antes de su uso. Una solución tapona al 2% de glutaraldehido es undesinfectante eficaz y se utiliza para desinfectar material en hospitales ylaboratorios.

  GASES ESTERILIZANTES: El óxido de etileno (OE) es un tantomicrobicida como esporicida; destruye los microorganismos alcombinarse con las proteínas celulares. Es particularmente eficaz comoagente esterilizante porque penetra rápidamente a través de materialesembalados, incluso envolturas de plástico.Betapropiolactona (BPL) se emplea a veces como gas esterilizante. Enforma líquida se ha empleado para esterilizar vacunas y sueros y puedeser cancerígeno.

15. Describa brevemente la prueba del coeficiente fenólico.Es el que se compara la eficacia de un desinfectante  con la del fenol. Se

prepara una serie de diluciones de fenol y del desinfectante experimental y seinoculan con las bacterias del ensayo. La prueba del coeficiente fenólico es unmétodo muy útil para el cribado inicial de un potencial desinfectante, esto sedebe a que el coeficiente fenólico se determina en condiciones rigurosamentecontroladas con cultivos puros bacterianos, mientras que los desinfectantes seutilizan normalmente en poblaciones mixtas, en presencia de materia orgánica

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y en variadas condiciones ambientales, como pH, temperatura y presencia desales.

16. ¿Por qué puede ser necesario utilizar técnicas como la dilución de uso ylas pruebas de uso real.

Para estimar con mayor precisión la eficacia de un desinfectante, seemplean a menudo otras pruebas. Se pueden determinar y comparar lavelocidad de destrucción de bacterias seleccionadas en presencia de diferentesagentes químicos, para determinar la concentración más apropiada del agentequímico para su utilización en unas condiciones determinadas de uso.