pimienta negra (piper nigrum)

Click here to load reader

Post on 05-Feb-2016

27 views

Category:

Documents

0 download

Embed Size (px)

DESCRIPTION

Fito químicaTamizajeExtracción

TRANSCRIPT

1. MARCO TEORICO

Nombre cientfico: Piper nigrumNombre comn: pimentero, pimienta negra, rbol de la pimienta.Familia: PiperaceaeOrigen: es de la originaria de Colombia

La pimienta es un producto que pertenece al grupo de las especies que son plantas que poseen propiedades aromticas, medicinales y culinarias.La pimienta ha sido cultivada desde la antigedad, originalmente en laIndia.Este fruto lo puedes conseguir siempre ya que no tiene un poca especial al ao, La pimienta negra es una de las cosas que ms se comercian en el mundo, esta especie tiene muchos beneficios para nuestra salud.1

Beneficios de la pimienta negra

Prdida de pesoLa pimienta negra tiene una corteza la cual es muy buena para eliminar las clulas grasas, entonces si la consums frecuentemente lograras mantener un muy buen peso corporal.1

EstmagoUna de las propiedades de la pimienta negra es que aumenta las secreciones de nuestro estomago, esto ayuda a nuestra digestin, ya que al digerir bien los alimentos evitas clicos, constipados y hasta diarreas, tambin esta especie nos ayuda a prevenir los gases intestinales, si consume pimienta negra tambin vas a favorecer a la orina y a tu transpiracin.1

PielAyuda a sanar el vitligo, la cual es una enfermedad que causa despigmentacin en algunas partes de nuestra piel. Ya que segn los estudios dicen que la piperina que tiene este tipo de pimienta, incrementa la produccin de pigmentos en nuestra piel.1

Catarros y gripesOtra de las propiedades de la pimienta negra es que se puede agregar en algunos tnicos, para hacer frente a gripes y a catarros, ya que calma la sinusitis y las congestiones nasales.1

Propiedades antibacterianasLa pimienta negra tambin posee propiedades antibacterianas, y esto es muy bueno para enfrentar infecciones, como as tambin picaduras de insectos, etc. Al consumir frecuentemente la pimienta hacer que limpies las arterias de tu cuerpo.1

AntioxidantePosee antioxidantes que se encargan de reparar y prevenir daos que fueron causados por los radicales libres, esto hace que prevenga el cncer, algunos problemas en el hgado y enfermedades cardiovasculares.1

BiodisponibilidadOtro de los beneficios de la pimienta es que se encarga de transmitir, los beneficios que poseen otras hierbas a diferentes partes de nuestro cuerpo.1

Otros usosTambin se usan mucho para combatir problemas respiratorios, tales as como el asma, la tos aguda, etc. Tambin es buena contra las caries tambin calma los dolores de muela, hace un tiempo tambin era usado para curar algunos problemas en los ojos.

La pimienta negra adems de ser buena para condimentar los alimentos es muy buena para fortalecer nuestro organismo para hacer frente a ciertas amenazas o trastornos, as que nosotros te recomendamos que siempre acudas a ella en cualquier tipo de enfermedad y la incorpores en tu dieta.1

2. MATERIALES Y METODOS

1. METODOS DE EXTRACCION DE SUSTANCIAS NATURALES

Recipiente de vidrio o acero inoxidable con tapa. Papel de filtracin mediana. Recipiente de color mbar. Balanza tcnica. Droga. Menstruo seleccionado.

2. METODOS FISICO QUIMICOS APLICADOS AL ANALISIS DE EXTRACTOS Y TINTURAS

Materiales y reactivos (Determinacin de la densidad relativa). Picnmetro de al menos 10 mL de capacidad. Balanza analtica vD 0,1 mg LSP 200g. Materiales y reactivos (Determinacin del ndice de refraccin). Refractmetro de Abbe. Varilla de vidrio. Solucin mezcla de alcohol etlico-ter dietlico (1:1) para la limpieza del equipo. Materiales y reactivos (Determinacin del pH de extractos y tinturas). Medidor del pH con electrodo de vidrio combinado. Solucin reguladora de pH, para rango de 0-7, preparada de la siguiente forma: 2,5g de bitartrato de potasio para 250 mL de agua (pH=3,5). Materiales y reactivos (Determinacin de los slidos totales). Capsula de porcelana, platino o cristal. Bao de agua. Balanza analtica de LSP 220 g y vD 0.1 mg. Desecadora conteniendo silica gel. Estufa con temperatura controlada (105 2). Pipeta aforada de 5 mL. Materiales y reactivos (Anlisis Capilar). Beaker Pyrex de 100 mL de aproximadamente 5 cm de dimetro 70 cm de alto. Bandas de papel de filtro de 4 cm x 20 cm. Cmara protectora de la luz. Probeta o copa graduada de 25 mL. Lmpara de luz UV de 366 nm.

3. MTODOS CUALITATIVOS PARA EL ANLISIS DE EXTRACTOSMATERIAL

1 Reverbero

20 Tubos de Ensayo

1 Gradilla

2 Vasos de Precipitacin de 500mL

2 Pipetas de 5mL

REACTIVOS

Reactivo de Sudan

Reactivo de dragendorf

Reactivo de Mayer

Reactivo de Wagner

Reactivo de Baljet

Reactivo de Lieberman Buchard

Reactivo para Catequinas

Reactivo para resinas

Reactivo de Fehling

Reactivo de FeCl3

Reactivo de Ninhidrina

Reactivo de Borntrager

Reactivo de Shinoda

Reactivo de Antocianidinas

4. DETERMINACIN COLORIMTRICA DE COMPUESTOS FENLICOS EN AGUA MEDIANTE EL REACTIVO DE FOLIN-CIOCALTEUPipeta de 1,5 y 10 ml

Baln aforado

Vaso de precipitacin

Pizeta

Soporte y pinza para bureta

Bureta de 25 ml

ReactivoFolin-Ciocalteu

Reactivo Carbonato tartrato

5. DETERMINACIN DE FLAVONOIDES MATERIALES

Erlenmeyer 500 mLTubos de Ensayo

ReverberoVarilla de Vidrio

Malla MetlicaPapel FiltroVaso de PrecipitacinEmbudo

Capilares de VidrioPipeta 1mLPipeta 10 mLPipetas Pasteur

REACTIVOS

Etanolcido Sulfricocido ClorhdricoReactivo de Fheling

Cloruro FrricoMg Metlicocido Clorhdrico 5 %Acetona-etanol

METODOLOGA:

1. MTODOS DE EXTRACCIN DE SUSTANCIAS NATURALES Obtencin de tinturas por maceracin

2. MTODOS FSICO-QUMICOS APLICADOS AL ANLISIS DE EXTRACTOS Y TINTURAS. Determinacin de los requisitos organolpticos

Determinacin de la densidad relativa

Determinacin del ndice de refraccin.

Determinacin del pH de extractos y tinturas.

Determinacin de los slidos totales

Anlisis capilar. 3. MTODOS CUALITATIVOS PARA EL ANLISIS DE EXTRACTOSENSAYO DE SUDAN

ENSAYO DE DRAGENDORFENSAYO DE MAYER

ENSAYO DE WAGNER

ENSAYO DE BALJET

ENSAYO DE BORNTRAGUER

ENSAYO DE LIEBERMAN-BURCHARD

ENSAYO DE CATEQUINAS

ENSAYO DE FEHLING

ENSAYO DE ESPUMA

ENSAYO DE RESINAS ENSAYO DE ESPUMA

ENSAYO DE CLORURO FERRICO

ENSAYO DE NINHIDRINA

ENSAYO DE SHINODASi la alcuota del extracto se encuentra en alcohol, se diluye con 1 mL de cido clorhdrico concentrado y un pedacito de cinta de magnesio metlico. Despus de la reaccin se espera 5 minutos, se aade 1 mL de alcohol amlico, se mezclan las fases y se deja reposar hasta que se separen.

Si la alcuota del extracto se encuentra en agua, se procede de igual forma, a partir de la adicin del cido clorhdrico concentrado. El ensayo se considera positivo, cuando el alcohol amlico se colorea de amarillo, naranja, carmelita o rojo; intensos en todos los casos

ENSAYO DE ANTOCIANIDINAS

ENSAYO DE MUCILAGOSPara ello una alcuota del extracto en agua se enfra a 0-5 C y si la solucin toma una consistencia gelatinosa el ensayo es positivo

ENSAYO DE PRINCIPIOS AMARGOS Y ASTRINGENTESEl ensayo se realiza saboreando 1 gota del extracto acuoso o del vegetal y reconociendo el sabor de cada uno de estos principios, bien diferenciados al paladar4. METODOLOGA DETERMINACIN COLORIMTRICA DE COMPUESTOS FENLICOS EN AGUA MEDIANTE EL REACTIVO DE FOLIN-CIOCALTEU

BIIIIIIIVVVIVII

Solucin patrn de fenol de 50mg/L00.20.511.52510

Agua destilada2524.824.52423.5232015

Reactivo Folin-Ciocalteu1.51.51.51.51.51.51.51.5

Reactivo Carbonato-tartrato22222222

Correspondencia en mg/L de fenol012.557.5102550

5. METODOLOGA DETERMINACIN DE FLAVONOIDES

3. RESULTADOS Y DISCUSIN

1-2. MTODOS DE EXTRACCIN DE SUSTANCIAS NATURALES, FSICO-QUMICAS APLICADOS AL ANLISIS DE EXTRACTOS TOTALES Y TINTURAS.

CALCULOS:Rendimiento de extraccinRendimiento de extraccin = x 100 =Rendimiento de extraccin = x 100 = 92%Densidad Relativa

Dnde:M1:peso del picnmetro con la muestra (g)M2:peso del picnmetro con el agua (g)M:peso el picnmetro vaco (g).D25== 0.823 gndice De RefraccinNd25 =Ndt + 0.00044 (t-25)Dnde:Nd25=ndice de refraccin a 25 CNdt=valor ledo en la escala del aparato a la temperatura t. t =valor de la temperatura a que se realiza la medicin (C)0.00044 =factor de correccin por grado Celcior.

Nd25 = 22.2 + 0.00044 (25) = 22.2pH De Extractos pH= -log a[H+]a[H +] = actividad de los iones hidrgenopH= 5.89Slidos Totales

Dnde:Pr=masa de la cpsula ms el residuo (g) P=masa de la cpsula vaca (g) V=volumen de la porcin de ensayo. 100=factor matemtico para el clculo.

St = x 100 = 1.062 gRESULTADOS

PARMETRORESULTADO

Caractersticas OrganolpticasOlor: caractersticoColor: verde oscuroTransparencia : (-)Presencia de Partculas: (-)

Densidad relativa0.823 g

ndice de refraccin22.2

pH5.89

Solidos totales1.062 %

Contenido alcohlicoNo se realiz

Anlisis CapilarColor: verde claroAltura: Mediana (7 cm)Anlisis de Imagen: FranjaForma de la Franja: regularmente dentada

DISCUSION

Mediante los requisitos organolpticos se establecieron las caractersticas propias del extracto, como son un color de tonalidad verde oscura por su paso por el etanol, no presento transparencia debido a lo mencionado anteriormente, no se observ adems la presencia de partculas en dicho extracto.

La Densidad relativa es de 0.823 obtenida al realizarse una comparacin entre la densidad del agua con respecto al extracto de referencia, establecindose que la densidad relativa es el cociente de las densidades.

El ndice de Refraccin es igual a 22.2 indicativo dela determinacin del ngulo lmite el cual presenta en el campo visual un contraste claro y otro oscuro, la lnea de separacin entre ambos campos establece el ngulo lmite de la luz incidente.

El pH del extracto fue 5.89 indicativo de la cercana a la neutralidad, debido a su interaccin con el solvente utilizado y a la posible presencia de metabolitos secundarios que podrn tener un valor aproximado como es el caso del alcaloide piperina contenido esta nuestra planta.

El resultado de los slidos totales fue de 1.062 siendo estos los residuos que quedaron despus de la evaporacin de la muestra y su consecutivo secado en estufa.

Mediante el anlisis capilar se establecieron las caractersticas propias del extracto.

3. MTODOS CUALITATIVOS PARA EL ANLISIS DE EXTRACTOS

Cuadro 3-1 Tamizaje fitoqumico del extracto etreo1.Ensayo de Sudan:Positiva

2.Ensayo de Dragendorf:Negativa

3.Ensayo de Mayer:Negativa

4.Ensayo de Wagner:Positiva

5.Ensayo de Baljet:Negativa

6.Ensayo de Lieberman Buchard:Positiva

Cuadro 3- 2 Tamizaje fitoqumico del extracto alcohlicoEXTRACTO ALCOHLICO (ETANOL AL 96%)

1.Ensayo de Catequinas: Positiva

2.Ensayo de Espuma:Positiva

3.Ensayo de Fehling:Positiva

4.Ensayo de Baljet:Negativa

5.Ensayo de Lieberman-Buchard:Positiva

6.Ensayo de Espuma:Positiva

7.Ensayo de Cl3Fe:Positiva

8.Ensayo de Bortrager:Negativa

9.Ensayo de Shinoda:Negativa

10.Ensayo de Antocianidinas:Positiva

11.Ensayo de Dragendorf:Negativa

12.Ensayo de Mayer:Negativa

13.Ensayo de Wagner:Positiva

Cuadro 3- 3 Tamizaje fitoqumico del extracto acuosoEXTRACTO ACUOSO

1.Ensayo de Dragendorf:Negativa

2.Ensayo de Mayer:Negativa

3.Ensayo de Wagner:Positiva

4.Ensayo de Cl3FePositiva rojo vino

5.Ensayo de ShinodaPositiva amarillo intenso

6.Ensayo de FehlingPositiva

7.Ensayo de EspumaPositiva

8.Ensayo de MucilagosNegativa

9..Ensayo de Principios amargosPositiva

DISCUSIONES: El ensayo de Sudan nos dio positivo confirmando la presencia de compuestos grasos. Los ensayos de Dragendorff y Mayer dan negativo en los extractos etreo, alcohlico y acuoso, sin embargo en el ensayo de Wagner dio positivo en los tres extractos indicando la presencia de alcaloides, segn (Martnez A. y otros 2008) Para fines de comparacin realizar el ensayo con 0,5 ml de una solucin patrn de sulfato de quinina. Presencia de triterpenos y/o esteroides nos indic el ensayo de Lieberman-Burchard en los dos extractos etreo y alcohlico. Obtuvimos la presencia de Catequinas y azcares reductores, segn los ensayos realizados de Catequinas y Fehling respectivamente. El ensayo de espuma positivo indica la presencia de saponinas, esto en el ectracto alcohlico. En el ensayo de Cloruro Frrico nos dio positivo en el extracto alcohlico y acuoso, indicando que la muestra tiene compuestos fenlicos como taninos. En el acuoso dio color rojo vino indicando compuestos fenlicos en general, segn (Martnez A. y otros 2008) Para fines de comparacin realizar la prueba con 0,5 ml de solucin patrn de cido tnico. En el extracto acuoso da positivo la presencia de flavonoides con el ensayo de Shinoda con un color amarillo intenso, y con el ensayo de Antocianidinas se confirma la presencia de flavonoides en la secuencia C6-C3-C6 del grupo de los flavonoides, segn (Martnez A. y otros 2008) Para fines de comparacin realizar la prueba con 0,5 ml de una solucin patrn de Morina. Los principios amargos dio levemente positivo al paladar.

4. DETERMINACIN COLORIMTRICA DE COMPUESTOS FENLICOS EN AGUA MEDIANTE EL REACTIVO DE FOLIN-CIOCALTEU

Concentracin (mg/L)Absorbancia

10.05

2.50.055

50.065

7.50.081

100.086

250.090

500.126

PlantaAbsorbancia = YConcentracin del extracto en ppm o (mg/L)Y= 0.0014X + 0.0592

Pimienta negra (Piper nigrum)0.0654.143

Cardo santo (Cnicus benedictus L)0.08014.867

Malva blanca (Malva sylvestris)0.08115.571

Pata de vaca (Bauhinia grandiflora Juss)0.09928.428

Uvilla (Physalis peruviana L)0.15165.571

CURVA DE CALIBRACIN CON LAS CONCENTRACIONES OBTENIDAS MEDIANTE LA ECUACIN DE LA RECTA Y SU RESPECTIVA INTERPOLACIN.Concentracin en ppm o (mg/L)(X)Absorbancia(Y)

10.05

2.50.055

50.065

4.1430.065

14.8670.08

100.081

15.5710.081

250.09

28.4280.099

500.126

65.5710.151

En el anlisis de compuestos fenlicos que se realiz en la prctica nos indican que todos los extractos contienen compuestos fenlicos, a su vez relacionada con la actividad antioxidante, en cada extracto de cada planta es el sostn sobre el cual se fundamenta su uso medicinal y farmacolgico que contenga. (Martnez F, Fernando.2002)PIMIENTA NEGRALas hojas de la especie Piper nigrum han mostrado prueba positiva frente a pruebas fotoqumicas para compuestos fenlicos los cuales se caracterizan por su actividad antioxidante.En otros estudios se los realiza a la planta Piper nigrum lo realizan con ensayos de DPPH que este ensayo se basa para determinar la actividad antioxidante se utiliza el mtodo de barrido de radicales libres difenilpicrilhidrazilo (DPPH). (Puertas M., 2009.)El DPPH (1,1-difenil-2-picril-hidrazil) se caracteriza por ser un radical estable gracias a la deslocalizacin de su electrn libre y su color violeta oscuro que posee una banda de absorcin de 520nm aproximadamente cuando se encuentra disuelto en etano. (Molyneux, 2004.)La partes areas (hojas, flores y madera) de la especie Piper nigrum estn constituidas por compuestos fenlicos como el cido glico, la catequina, epicatequina, cido ferlico, resveratrol y quercetina, adems han mostrado un elevada actividad antioxidantes en ensayos de DPPH. (Diaz, L., 2012. 17)5. FLAVONOIDES DE LA PIMIENTA NEGRAENSAYORESULTADO

A) Cromatografa de capa fina.Positivo

B) Ensayo del cloruro frrico.Positivo

C) Ensayo de Fehling.Positivo

D) Ensayo de ShinodaPositivo

E) Ensayo de la Hesperidina.Negativo

Al realizar la extraccin con Etanol (extracto alcohlico) tenemos en la muestra (glicsidos o agliconas hidroxiladas) pueden ser extrados inicialmente con solventes alcohlicos sin perder sus propiedades estructurales, y son muy estables al calor y a las reacciones de oxidacin, resistiendo la mayora a los tratamientos trmicos.A) Cromatografa capa fina.Discusin: Tanto en el papel y revelado cromatografico se observ una coloracin intensa debido a la que los flavonoides son solubles en alcohol y cidos fuertes por el carcter bsico que les confieren los tomos de oxigeno del ncleo de la pirona formando asi sales de oxonio (sales de pirilio o sales de flavilio) y son muy estables al calor sin perder sus propiedades estructurales (ELSEVIER 2014).Los flavonoides en acetona - etanol, presentan bandas caractersticas debidas a los sistemas conjugados de los anillos aromticos.Las flavonas y flavonoles muestran dos bandas definidas debido a sus dobles enlaces entre C2 y C3: 1) La banda I, 300-390 nm asociada con la funcionalidad cinamolo,2) la banda II, 250-280 nm debida al anillo aromtico A (funcionalidad benzolo), La posicin de la banda I depende del tipo de flavonoide: las flavonas la muestran en 310-350 nm, los flavonoles 3-O-sustituidos en 330-360 nm, y los flavonoles en 350-385 nm (ELSEVIER 2014).B) Ensayo de cloruro frrico.Discusin: En la muestra que obtuvimos, contienen agentes quelantes y grupo fenlicos como las geninas que son solubles en cloruro frrico (FeCl3) dndonos as una coloracin azul verdoso (Alarcn A, Navarro C. 2012).C) Ensayo de Fehling.Discusin: Al reaccionar el extracto alcohlico con el reactivo de fehling genera una ionizacin en medio bsico y en presencia de calor obtenemos un tipo de flavonoides como las antocianidinas ya que se logr observar una precipitacin de coloracin roja verde intenso (Alarcn A, Navarro C. 2012).D) Ensayo de Shinoda.Discusin: En este ensayo se da la reaccin de Cianidina el cual el medio extracto alcohlico presenta una coloracin (amarillo incoloro) y al aadir un reactivo como HCL + Mg2 se observ una coloracin rojo intensa lo que nos indica que hay la presencia de Flavonas (Alarcn A, Navarro C. 2012).

E) Ensayo de la Hesperidina.Discusin: No se logr observar el precipitado por lo que deducimos que nuestra muestra alcohlica no contiene hesperidina un compuesto importante que suele encontrase en cantidades abundantes, la cual es un tipo de flavononas glicosiladas presentndose usualmente como digliconas la cual da el sabor caracterstico amargo a la planta. Como producto del proceso de separacin de flavonoides se obtuvo un extracto alcohlico, de naturaleza polar, los cuales fueron confirmados positivamente mediante los ensayos de Cromatografa capa fina, Cloruro Frrico, Fehling, Shinoda y confirmado negativamente el ensayo de Hesperidina (ELSEVIER 2014).BIBLIOGRAFIA:

Jos Oriel R.V. Propiedades medicianales de las plantas:gua teraputicas. 2 ed. Madrid: Elsevier; 2005.