Introducción

Lactobacilo, Lactobacillus o bacteria del ácido láctico es un género de bacterias Gram positivas anaerobias facultativas, denominadas así debido a que la mayoría de sus miembros convierte lactosa y otros monosacáridos en ácido láctico. Normalmente son benignas e incluso necesarias, habitan en el cuerpo humano y en el de otros animales, por ejemplo, están presentes en el tracto gastrointestinal y en la vagina.

Y por ser bacterias que se proliferan en medio ácido no permite que ninguna otra bacteria dañina crezca en dicho medio, lo que hace más fácil poder realizar siembras de este tipo de bacterias, que son de gran utilidad para la industria. Son usadas en este ramo para la producción de yogur y otros alimentos fermentados. Algunas bebidas de yogur contienen Lactobacillus como suplemento dietético. Muchos Lactobacillus son los únicos seres vivos que no requieren hierro para vivir y tienen una tolerancia extremadamente alta al peróxido de hidrógeno.

Muchos lactobacilli son inusuales en que ellos operan usando un metabolismo homofermentativo (es decir, sólo producen ácido láctico a partir de azúcares) y son aero tolerantes a pesar de la ausencia de cadena respiratoria. Esta aero tolerancia es dependiente del manganeso y ha sido estudiada y explicada en Lactobacillus plantarum.

Por otra parte, tiene un rol fundamental una vez que se inicia la caries dental y durante su etapa de desarrollo.

Los lactobacilos no son perjudiciales, al contrario, muchas veces inhibe el desarrollo de los gérmenes nocivos, como el Escherichia Coli y Staphylococcus Aureus, y tienen capacidad de producir sustancias como la proteinosa y la peptidosa, y con respecto a la acidificación se encarga de regularlo, rebajando el pH, por todas estas características y las señaladas en el desarrollo, los lactobacilos forman la parte esencial de la flora bacteriana tanto del queso como en la leche.

Objetivos

Conocer algunos tipos de siembra, empleados en la microbiología así como, aprender a hacer siembra de microorganismos en medio sólido.

Marco teórico

Para el presente laboratorio, la base teórica que se detalla a continuación fue de vital importancia para la mejor comprensión de la práctica.

Lactobacillus acidophilus

Es una bacteria del género Lactobacillus. El término Lactobacillus es la unión de un prefijo y una raíz: lacto que significa leche y bacillus que quiere decir en forma de barra o vara. Por otro lado, acidophilus quiere decir con afinidad por los ácidos. Esta bacteria crece, fácilmente, en medios mucho más ácidos que los ideales para otros microorganismos (pH 4-5 o menores) y crece en condiciones óptimas a unos 45 ºC.

Agar

Es una sustancia gelatinosa derivada de algas marinas este medio de cultivo es un polisacárido sin ramificaciones obtenido de la pared celular de varias especies de algas rojas de los géneros Gelidium, Euchema y Gracilaria entre otros actuando como pigmento que da un color característico a cada una. El agar químicamente es un polímero de subunidades de galactosa; en realidad es una mezcla heterogénea de dos clases de polisacáridos: agaropectina y agarosa.

El agar nutritivo es usado como medio de cultivo para el crecimiento de bacterias y hongos, pero no para virus (aunque los virus bacteriófagos crecen frecuentemente en bacterias cultivadas en agar).

Medios selectivos

Los medios de agar selectivos son utilizados para aplicar una presión selectiva a los organismos que crecen en ellos, por ejemplo para seleccionar solamente bacterias gram-negativas se usa el agar Mac Conkey, que a su vez tiene un colorante que indica si la bacteria es fermentadora de lactosa o no.

Observaciones y discusiones

Siembra en tubos de ensayo por estrías

Se procedió a realizar la siembra de las bacterias acidolácticas (lactobacilus) producto de fermentación de vegetales. Se tomó un asa, la cual se esterilizó con calor del mechero hasta que estuviese al rojo vivo, posteriormente se tomó la muestra de lactobacilus de un tubo de ensayo sumergiendo en este el asa de siembra, flameando el tubo para evitar potencial contaminación. Se sembró la bacteria en un medio de cultivo MRS de superficie inclinada en forma estrillada; este procedimiento se repitió dos veces más.

Siembra en placas por estrías

La siembra se realizó en placas que contenían el mismo medio de cultivo con la diferencia en que estas eran en esta ocasión en placas planas, el procedimiento de esterilización del asa de siembra y toma de la muestra es el mismo; la diferencia radica en el momento en que se realizará la siembra, se realizaron los rallados que muestra la guía de laboratorio con la diferencia que se realizaron cuatro tipos de rallado; obteniendo en el último un cultivo puro, debido a que las colonias aislada que se tenían en el cuarto rallado solo pueden proliferarse de un solo tipo de bacterias.

Pasadas 48 horas en cultivo, se observó un crecimiento bacteriano bastante satisfactorio tanto en los tubos de ensayo como en las placas, debido a simple vista se apreciaba dicho crecimiento y como la teoría lo dice que la única manera de observar microorganismos es mediante el gran crecimiento y proliferación de los mismos.

Nota: para poder lograr una siembra bacteriana libre de contaminación o al realizar cualquier trabajo de microbiología, se debe tener las manos limpias y el radio de trabajo en que se realiza la siembra es de aproximadamente 20 cm de la flama para que se pueda mantener el medio de esterilidad tanto del asa como de la muestra.