Técnicas a través de las cuales células procariontes o eucariontes crecen en condiciones de laboratorio controladas.

Cultivos Celulares Primarios: cultivos celulares obtenidos a partir de tejidos normales o patológicos mediante disgregación o explantes de tejidos u órganos.

Cultivos Celulares Secundarios: Las células suelen crecer hasta cubrir la superficie del recipiente de cultivo.-Contacto entre las células se detiene temporalmente su proliferación.

Cultivos celulares estables CONTINUOS:Cultivos celulares obtenidos a partir de líneas celulares primarias, que hayan sufrido un fenómeno de transformación.

Células humanas o animales, derivadas de un cultivo primario que se utilizan para estudiar sus propiedades y respuestas a estímulos.

Cuando se pueden propagar de forma indefinida en sub-cultivos in vitro, se denominan líneas establecidas.

Presentan una capacidad indefinida de crecimiento.

Son un excelente material para estudiar diferentes aspectos de la biología celular.

HeLa (cáncer cervical)Hep-G2 (cáncer de hígado)DU145 (cáncer de próstata)Lncap (cáncer de próstata)MCF-7 (cáncer de mama)MDA-MB-438 (cáncer de mama)PC3 (cáncer de próstata)T47D (cáncer de mama)THP-1 (leucemia mieloide aguda)

Líneas Celulares Humanas

Virus HeLa

Líneas celulares de Primates

•Vero (células epiteliales de riñón de mono verde Africano Chlorocebus.

Líneas celulares de tumor de Rata

•GH3 (tumor de hipófisis)•PC12 (feocromocitoma)

Líneas celulares de ratón

•MC3T3 (embrionaria craneal)

Es posible incorporar ADN a las células en un cultivo, para que ocurra el proceso de transfección.

Electroporación: Formación de poros en superficie celular.

Biobalística: Disparo de micro proyectiles recubiertos de ADN dentro de la célula.

Transfección Viral: Incorporación de ADN a través de virus.

Bacteriófago

Biobalistica…

Las células cultivadas en laboratorio también pueden utilizarse para generar hibridomas.

Esta fusión se estimula por compuestos que aumentan la permeabilidad de las membranas plasmáticas.

Los hibridomas son muy útiles en la generación de anticuerpos monoclonales.

Son anticuerpos homogéneos, producido por una célula híbrida, producto de la fusión de un clon de linfocitos B, descendiente de una sola y única célula madre y una célula plasmática tumoral.

Se utilizan anticuerpos para localizar proteínas dentro de un tejido o célula.

Una técnica usada ampliamente para localizar una proteína corresponde a la inmunolocalización.

Se utilizan anticuerpos monoclonales por su especificidad , al reconocer un único lugar antígeno.

1.- Inmunización: Se inyecta la proteína a estudiar en el organismo.Se activan linfocitos B.

2.- Producción de hibridomas: Se fusionan células plasmáticas con células tumorales de mieloma.

Hibridomas resultantes tienen la capacidad de producir anticuerpos requeridos y multiplicarse rápidamente.

3.- Selección de células híbridas: Los hibridomas son cultivados en un medio especial denominado HAT.

Se eliminan las células tumorales y las células plasmáticas no fusionadas.

4.- Identificación de célula productoras de anticuerpos: No todas la células sobrevivientes producen anticuerpos contra la proteína en cuestión.

Se utilizan pruebas bioquimicas.Se aíslan las células y se mantienen en condiciones que

les permitan dividirse y generar clones de hibridomas que producen todos el mismo anticuerpo.

Así, es posible usar los hibridomas para producir los anticuerpos contra la proteína en estudio.

Los anticuerpos son aíslados y marcados para poder ser detectados en la proteína buscada.