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Centro Nacional de Transfusión Sanguínea- MSP y BS
BBUENAS PRACTICAS EN LA PREPARACION Y CONTROL DE
CALIDAD DE HEMOCOMPONENTES Mg Dra. Elsi Vargas de Salinas
Centro Nacional de Transfusión Sanguínea- MSP y BS
LA SANGRE Y SUS COMPONENTES
La sangre es un órgano líquido con las siguientes funciones :
Transporte de nutrientesTransporte de gases de la respiracion O2 y CO2
Transporte de substancias a ser excretadasTransporte de hormonasRegulacion de la concentracion de electrolitosSistema imunológico y fagocitosisCoagulación
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O sangue e seus componentes
LA SANGRE CONTIENE COMPONENTES SÓLIDOS Y LÍQUIDOS:
Sangre
Células Plasma
Eri
tró
cito
s
Leu
cóci
tos
Tro
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ócito
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Ag
ua
Pro
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Plasma Un litro de plasma normalmente contiene:900 ml de água65 a 80 g de proteínas (albumina e globulinas)9 g de eletrólitosAdicionalmente gorduras, carboidratos, vitaminas, hormônios, etc. Funciones del plasma:Transporte de células sanguíneas y nutrientesControl del balance hidro-eletrolíticoSoporte del sistema imunológico (anticuerpos)Suplemento de factores de coagulación necesários para el processo de hemostasia
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Propiedades de los eritrócitos - Discos biconcavos, redondeados y sin núcleo - Producidos en la médula ósea - Vida media de 120 días - Coloración roja resultante del contenido de hemoglobina
Funciones -Transporte de oxigeno (y dióxido de carbono). - Controle del nível de pH de la sangre
Hematócrito = volume de eritrócitos en relación al volumen de sangre totalValor médio para hombres 47 % y mujeres 40 %
ERITROCITOS (Glóbulos Rojos)
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Leucocitos (glóbulos blancos) Propiedades de los leucocitos Células nucleadas Diferenciación en linfócitos (L)granulócitos (G), monócitos (M) Vida media: algunos dias a varios años Funciones de los leucocitos: Protección contra agentes infecciosos – fagocitosis y producción
de anticuerpos (inmunización) Remoción de las células muertasLos leucocitos son los transportadores del sistema HLAresponsable de la incompatibilidad de la transfusión o transplante.
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Trombocitos (plaquetas)
Propiedades de las plaquetas: Células discóides y sin núcleos Producidas en la médula ósea Vida media de 8 a 14 días
Funciones de las plaquetas: Coagulación de la sangre
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Factores que influencian en la calidad de los hemocomponentes
1- LA COLECTA Homogenización de la sangre con el anticoagulante Estandarización del volumen y el tiempo de colecta 2- REFRIGERACION DE LA SANGRE
Pre-almacenamiento y antes de la separación de los hemocomponentes
3- PREPARACION Tipo de bolsa – convencional o TAB Separación manual o automatizada Remoçión de los leucocitos por filtración Congelamiento del plasma
4-ALMACENAMIENTO
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1- LA COLETA DE SANGRE La colecta de sangre total de un donante debe ser realizada en 12 minutos
A-Tiempo de donación < 12 1/2 minutosIndicada para todos los componentesB-Tiempo de donación > 12 1/2 minutos y < 20 minutosNo es indicada para separación de plaquetas% de FVIII en el plasma es menor que lo normalC-Tiempo de donación > 20 minutosNo es indicada para la separación de componentes
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Homegeneización de la sangre durante la colecta Prevenir a la formación de trombina Consumo de factores de la coagulación Activación de plaquetas Tipos de agitación Manual Mecánica *Control del volumen *Control del tiempo y flujo -Tiempo de colecta < 12 minutos Homogeneizar la sangre contenida en el plato de coleta con el
contenido de la bolsa manualmente .
1- LA COLETA DE SANGRE
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Tiempo y temperatura de almacenamiento pre-procesamiento
Procedimiento 1: Enfriar la sangre total a 4 °C lo mas rápido posible .
– Crioprecipitación de Factor VIII y sedimentación con los hematíes– Activación de las plaquetas
Procedimiento 2: Enfriar la sangre total a 20-24 °C después de la colecta
– Enfriamiento con agua fría o butano-1,4-diol (2 horas)
Tiempo de almacenamiento– Procesamiento inmediato: activación de las plaquetas y baja
estabilidad de los hemocomponentes. Problema logístico para unidades externas
– 4 a 6 horas: no afecta el almacenamiento de los hematíes (nivel de 2,3-DPG). Leucócitos presentes actúan como agentes bactericidas en este periodo (reducción de la contaminación bacteriana)
– > 8 horas: deplección de 2,3-DPG y Factor VIII
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Sistemas de bolsas de sangre ((T&T) Bolsa simplesColecta de sangre total con agente preservante (CPDA-1).
Bolsa doblesSeparación de plasma y hematíes (contiene buffy coat).
Bolsas triplesPreparación de plasma, hematíes y plaquetas de plasma rico en
plaquetas ( PRP).
Bolsas cuadruplesPreparación de plasma,hematíes y plaquetas de buffy coat
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Sistemas Top and Bottom (T&B) Diferente a los sistemas convencionales (T&T),los sistemas T&B
contienen tubos de salida en la parte superior e inferior de la bolsa principal.
Despúes de la centrifugación , el plasma es extraído por el tubo superior y los hematíes son trasferidos para una bolsa satélite por el tubo inferior.
El buffy coat permanece en la bolsa. Consecuentemente el número de leucocitos en el concentrado de hematíes es menor que del sistema T&T.
E
LT
P
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Soluciones artificiales para conservación de células
Tipos de Soluciones SAGM (Salina, Adenina, Glucosa y Manitol) PAGGSM (Fosfato, Adenina, Glucosa, Glutamina, Sorbitol y Manitol)(SAG-M)Ventagas Prolonga el tiempo de almacenamiento a 42 días. Reduce la viscosidad mejor fluidez durante la transfusión. Disminuye la contaminación del CGR por plasma disminuyendo asi la
incidencia de reacciones alergicas. Permite mayor libertad en la selección de GRC para la transfusión,
evitando los problemas de transmisión de anticuerpos anti-A y anti-B a receptores que poseen los respectivos antígenos en sus hematíes.
Aumenta el rendimiento del plasma, sin contaminación con nutrientes para hematíes .
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INFLUENCIA DE LA PERMEABILIDAD DEL PLÁSTICO SOBRE LAS PLAQUETAS
GLUCOSA
DIOXIDO DE CARBONO
CO2
CO2
CO2
CO2
O2O2
BOLSA PERMEABLE: ADECUADO FORTALECIMIENTO DE OXIGENO
BOLSA PERMEABLE: ADECUADO FORTALECIMIENTO DE OXIGENO
MANTENIMIENTO DE LA CONC. DELBICARBONATO Y DEL PH
MANTENIMIENTO DE LA CONC. DELBICARBONATO Y DEL PH
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Desafios da Sorologia
GLUCOSA
ACÍDO LÁCTICO
BOLSA IMPERMEABLE EL NUMERO EXCESIVODE CÉLULAS: DISPONIBILIDAD DE OXIGENO
BOLSA IMPERMEABLE EL NUMERO EXCESIVODE CÉLULAS: DISPONIBILIDAD DE OXIGENO
CONSUMO DE BICARBONATO Y REDUCCIÓN DEL pH
CONSUMO DE BICARBONATO Y REDUCCIÓN DEL pH
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¿Porqué la sangre se centrifuga? Es posible transfundir la sangre a los pacientes como sangre total .
Pero hay muchas buenas razones para transfundir solamente hemocomponentes
Los componentes son transfundidos de acuerdo a la necesidad de los pacientes.
Se evita la transferencia de sustancias innecesarias y perjudiciales reducción de riesgo de reacciones transfusionales
El almacenamiento de componentes individuales puede ser optimizada
Hematiés: 2 a 6°C, Plaquetas: 20 a 24°C,Factores da coagulación y proteínas plasmáticas: 18°C
La separación de la sangre nos da la posibilidad de usar una única donación para atender diversos pacientes
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Centrifugación -principio VSEDIMENTACIÓN ~ r2 (dcélula -dplasma)
n
r = radio de la célula, n= viscosidad del medio y d =densidad
PLAQUETA HEMATÍE GRANULOCITO
VELOCIDAD DE SEDIMENTACION
FUERZA DE SEPARACIÓN DEL PLASMA
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El proceso de centrifugación Los componentes de la sangre pueden ser separados
porque ellos difieren en tamaño y densidad.
P T
L E
x gP
T
L
E
x g
E
LT
P
Buffycoat
P = plasma; T = trombócitos; L = leucocitos; E = eritrócitos
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CentrifugaciónLos problemas con las bolsas de sangre en las centrífugas
resultan de su flexibilidad, del volumen y del manoseo de las bolsas satélites.
Una serie de combinaciones de factores que influencian la centrifugación torna imposible contar con reglas generales.
El tipo de centrífuga y sus accesorios Parámetros de centrifugación Tipo de bolsa de sangre Volumen de sangre Técnica de empaque en llos vasos de la centrifuga Balanceamiento
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Arranjos na caçapa
Diferentes radios en bolsas acomodadas en un vaso doble, a baja velocidad de centrifugación.
Bolsas quedan acomodadas en el medio y las bolsas satélites en la parte externa.
Alta velocidad Baja velocidad
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Balanceamiento de los vasos Una centrifugación suave depende del balanceamiento de peso
en los vasos localizados en posición opuesta. Cuanto mayor es la diferencia, mayor es la vibración.
La diferencia de peso no debe pasar más de 5 a 6 g.
Número ímpar de bolsas usar bolsas llenas de agua para contra-balancear.
Es útil la pre-selección de bolsasde sangre en grupos de pesos similares.
Usar laminados de bolsas que no fueron utilizadas como pesos.
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Consejos para el empaquetado
Las etiquetas deben ser colocadas contra las paredes del vaso. Los sellos de las bolsas no deben ser doblados hacia abajo,
evitando así la apertura de la misma. Los sellos no deben estar situado en la parte inferior del vaso. Los tubos no deben exceder el límite del vaso, ya que se
pueden romper. No se debe envolver los tubos alrededor de las bolsas debido
a posibles derramamientos , se los debe posicionar entre las bolsas.
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Empaquetamiento – sistema de bolsa triple (1)
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Empaquetamiento – sistema de bolsa triple (2)
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Centrifugaçión pesadaCentrifugaçión pesada para la preparación de plasma,
buffy coat y hematíes:
Aceleración: média Desaceleración: baja – media RCF: 2900 – 4000 xg Tiempo: 10 – 15 min Temperatura: + 22 °C
1a. Etapa en la preparación de plaquetas de buffy coat.
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Centrifugación leveCentrifugación leve para a preparación de plasma rico
en plaquetas (PRP)
Aceleración: media Desaceleración: baja RCF: 380 - 450 x g Tiempo: 5 - 10 min Temperatura: + 22 °C
2a. Etapa en la preparación de plaquetas de buffy coat.
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Recomendaciones La centrifugación es un stress para todas las células.
Por lo tanto, si es posible...
...es mejor tiempos de centrifugación más largos y menos fuerza de centrifugación.
...deje las plaquetas en reposo como mínimo una hora después de cada centrifugación.
Cuanto más estable es el posicionamiento de las blosas en el vaso , mejor el resultado de sedimentación.
Cuando el empaquetamiento es muy apretado puede causar turbulencias en la capa sedimentada al retirar las bolsas del vaso.
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Sistemas para la preparación de hemocomponentes
SANGRE TOTALPARA METODO PRP
CENTRIFUGACION LEVE
PRP CH
CENTRIFUGACION PESADA
PPPCP
POOL DE 4 - 6 CPs
CH-BC
BC INDIVIDUAL
TAB CUADRUPLEa
CENTRIFUGACION PESADA
BC PPP
CENTRIFUGACION LEVE
CP BC residual
SANGRE TOTALPARA METODO BC
CENTRIFUGACION PESADA
TAB TRIPLE
CH-BC BC PPP
Pool 4 - 5 BC
CENTRIFUGACION LEVE
CP BC residual
POOL BC
PRP = plasma rico em plaquetas; CH = concentrado de hematies; CH-BC = conc. de hematies depletado de buffy-coat; BC = buffy-coat; CP = concentrado de plaquetas
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Procesos de fraccionamiento
Colecta Almacenamiento
Acomodacion
SeparacionCentrifugacion
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CALIDAD DE LOS C. PLAQUETAS
Método Plasma extra (ml)
Recuperação plaquetas
(%)
Plaquetas / unidade
Leucócitos / quantidade de plaqueta
PRP 0 60-75 > 5,5 x 1010 em 100%
1-2/1000
CP single BC
30 40-60 > 5,5 x 1010 em 75%
1-2/10.000
CP pool BC 75 60-75 > 2,5 x 1011 <1-2/100.000
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CALIDAD DE LOS HEMATIESMétodo Volume (ml) Hematócrito
(%)Leucócitos / unidade (%
da contagem inicial)
Validade
PRP (tripla CPDA-1)
280 50 65 – 75 > 90% 35 dias
Buffy-coat (tripla ou quádrupla TAB)
280 50 50 – 70 < 30% 42 dias
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Los bancos de sangre de todo el mundo estan cada vez más empeñados en mejorar su eficiencia y calidad con la automatización total de sus procesos de producción y flujo de información.
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Muchas gracias !