UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS CAMPUS IV EXT. OCOZOCOAUTLA

LIC. EN QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO

PRÁCTICAS 3:

“MICROSCOPIA”

LABORATORIO BIOLOGÍA CELULAR

DRA. ANA OLIVIA CAÑAS URBINA

Integrantes Calificación de previo

Gonzales Olivera Guadalupe 25

Lara Coutiño Danira de Yulissa 25

Luna Ruiz Vanessa del Carmen 60

Ruiz Santos Rubicela A. 60

Torrez Ovando Kaory Jazmin 25

Vazquez Roque Antonhy santiago

60

Gonzalez Ramos Joari Hadid 85

2° SEM.

INTRODUCCIÓN La humanidad se ha caracterizado por, siempre estar en constantes

cuestionamientos, esto ha llevado a que el ser humano tenga cada vez más

nuevas tecnologías e innovación, lo cual ha dado grandes beneficios a la

sociedad. Gracias a los avances tecnológicos, hoy día contamos con un

instrumento llamado microscopio, su invención fue parte fundamental al inicio de

las grandes investigaciones.

El instrumento que fue empleado por los primeros biólogos para estudiar la célula

y los tejidos, es el microscopio. El nombre deriva etimológicamente de dos raíces

griegas: mikrós, que significa pequeño y skopéoo, que significa observar. Es decir

el microscopio es un instrumento que sirve para observar objetos o estructuras

pequeñas. (Montalvo, 2010).

Es de vital importancia recalcar el impacto que tiene la microscopia en las ciencias

de la salud, la invención del microscopio no solo se ha quedado en el hecho de

descubrir nuevas enfermedades que atacan a la sociedad, sino que, también ha

sido el instrumento que ha logrado que el ser humano sea capaz de ver cosas que

el ojo humano no logra percibir a simple vista. Para un Químico Farmacobiologo el

uso del microscopio es esencial, dado que es la base en el campo laboral, no

quedándose simplemente en el ámbito clínico sino, en el gran mundo de la

investigación. Es increíble hasta dónde puede llegar una simple duda llena de

curiosidad.

“La ciencia es más que un conjunto de conocimientos; es una forma de pensar; una manera de interrogar al universo con escepticismo” Sagan.

Imagen 1. Microscopio, LG G3 Style, 13mxp. Foto tomada por Luna Vanessa

Antecedentes Fue hasta el siglo XVII cuando se iniciaron las primeras experiencias con artefactos de

vidrio en forma de lenteja, dándoles por ello el nombre de lentes. Con éstos observaban

un aumento en la imagen de los objetos, fenómeno que fue muy apreciado por diversos

comerciantes, tales como joyeros y mercaderes de tejido con la finalidad de observar la

calidad de los productos. Fue Galileo Galilei (1564-1662) al primero a quien se le acreditó

el uso científico de las lentes al hacer observaciones astronómicas

Entre los años de 1591 y 1608, el físico holandés Zacharias Jensen construyó el primer

microscopio compuesto, constituido por varias lentes que permitieron corregir las

aberraciones esférica y cromática. Este microscopio consistía de un lente objetivo convexo

y un ocular cóncavo (fig. 1).

Fig. 1 Microscopio compuesto, de 25 cm. de longitud.

Fabricado por Zacharias Janssen

Otros grandes científicos que aportaron mucho a la humanidad gracias a sus

observaciones en el microscopio, fueron: Jan Swammerdam (reportó que la sangre no es

un líquido uniforme y que estaba compuesta de corpúsculos que dan su color rojo);

Marcelo Malpighy (descubrió que las arterias y las venas se hallaban unidas por una red de

vasos, conocidos ahora como capilares). Todo esto pudo llevarse cabo con la ayuda de un

microscopio dándose en el ámbito biológico y médica.

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723), trabajando con tejidos, le llamó la

atención el aspecto que estos tenían cuando eran vistos bajo aumento, lo cual lo

llevo a trabajar en el tallado de los vidrios para mejorar las imágenes que

observaba, logrando amplificar hasta 270 veces. Diversos tipos de materiales

pasaron por sus microscopios (musgos, leche, agua, abejas, etc.), siendo el

primero en observar (1675) los infusorios (microorganismos observados en aguas

estancadas). (Arenas , 2005)

COMPONENTES DEL MICROSCOPIO FOTÓNICO. El microscopio fotónico compuesto está integrado por tres tipos de componentes:

a) COMPONENTES MECÁNICOS: Son aquellos que sirven de sostén,

movimiento y sujeción de los sistemas ópticos y de iluminación así como de los

objetos.

Base o pié. Es un soporte metálico, en donde se apoyan y sostienen los otros

componentes del microscopio.

Brazo, estativo o columna. Permite la sujeción y traslado del microscopio.

Soporta al tubo óptico, a la platina y el revolver.

Platina. Superficie plana de posición horizontal que posee una perforación

circular central. En ella se apoya la preparación (lámina portaobjetos que

contiene a la muestra que se va a examinar), mediante mandos especiales

facilitan el movimiento de la preparación de derecha a izquierda y de adelante

hacia atrás.

Tubo óptico. Consiste en un cilindro metálico que suele medir 160mm o 170

mm de longitud.

Revolver o porta objetivos. Es un componente que gira alrededor de un eje

con la finalidad que los objetivos que sostiene coincidan de manera

perpendicular con la perforación central de la platina.

Tornillos macrométrico y micrométrico. Generalmente están situados en la parte inferior del brazo o columna.

b) COMPONENTES ÓPTICOS: Son los objetivos, los oculares, el

condensador y los prismas. Los tres primeros están constituidos por sistemas

de lentes positivos y negativos.

Condensador: Es el componente óptico que tiene como función principal

concentrar y regular los rayos luminosos que provienen de la fuente

luminosa.

Objetivos. Los objetivos están considerados los elementos más importantes

en la formación de la imagen microscópica, ya que estos sistemas de

lentes establecen la calidad de la imagen en cuanto a su nitidez y la

capacidad que tiene para captar los detalles de la misma (poder de

resolución).

Los objetivos se fabrican para ampliar las imágenes de los objetos

observados en diversos aumentos; así se tienen objetivos con aumentos

propios de 4x, 10x, 40x, y 100x. Algunos objetivos tienen alrededor de

ellos una línea coloreada que indica a simple vista el aumento propio. Fig.

2

C) COMPONENTES DE ILUMINACIÓN: Se consideran dentro de este grupo a

los instrumentos que proporcionan energía luminosa al microscopio. Las fuentes

de energía luminosa son de dos tipos natural y artificial.

Escala nanometrica.

La complejidad de fabricar, observar y manipular nano estructuras, así como su

potencial aplicación, demanda de la colaboración de varias disciplinas. Por lo que

la llamada NANOCIENCIA se puede definir como el estudio de la materia a escala

nanometrica desde el punto de vista de la Física, Química y Biología. (Volke &

Miramontes , 2013) (Fig. 3)

Fig. 3. Nanomundo (escala nanometrica). Tomado de: Wikipedia. (2014)

Se denomina espectro visible a una determinada región del espectro

electromagnético que el ojo humano es capaz de percibir. La radiación

electromagnética en este rango de longitudes de onda es llamado luz visible o

simplemente luz. No hay un límite exacto en el espectro visible; un típico ojo

humano responderá a longitudes de onda desde 400 a 700 nm aunque algunas

personas pueden ser capaces de percibir longitudes de onda desde 380 a 780 nm .

(Hernández, 2013). (Fig. 4)

Fig. 4 escala nanometrica, visible por el ojo humano.

Conversiones:

1m = 100cm

100cm = 1000mm

1000mm = 1000,000micras

1micra = 1000nm

1000,000micras = 1x109

Cabello humano

El cabello humano tiene aproximadamente un diámetro de 100 micras que equivale a 100,000 nm.

Apertura numérica

Objetivo Que el alumno identifique las diferentes partes que componen el microscopio y aprenda a usarlo correctamente.

Practica N° “microscopia”

En equipo solicitar al encargado del laboratorio un microscopio

óptico

Realizar la observación del microscopio para identificar sus partes y las funciones de ellas

Solicitar al encargado del laboratorio los porta y cubre objetos en caso de que el laboratorio

no tenga cada equipo debe contar con propios

Uso de microscopio

Activar la fuente de poder (botón de encendido y regular la fuente de luz y el condensador

Colocar el portaobjeto en la platina y asegurar con las pinzas para sujetarlo

de tal manera que no se mueva

Colocar el objetivo en el menor (4x) para comenzar a enfocar

Una vez enfocado en 4x cambiar el objetivo gradualmente a 10x y así sucesivamente hasta llegar a 100x

Para enfocar en 100x se

necesita utilizar aceite de inmersión

MATERIALES. - Microscopio óptico

- Portaobjetos

- Cubreobjetos

- Papel seda

- Pedazo de cabello

- Cronometro

METODOLOGÍA.

Cada integrante del equipo deberá preparar su muestra y anotar los siguientes

datos.

Medida ocular, tiempo transcurrido en el cual se enfoca en el objetivo de 4X,

tiempo transcurrido en que tarda en enfocar al cambio a el objetivo de 10X, y

coordenadas de la muestra.

1.- Colocar el cabello sobre el portaobjetos y sobre el colocar el cubreobjetos.

2.- Verificar que el microscopio este bien conectado y que sus partes estén en

buen funcionamiento. Poner en enfoque al objetivo de 4X y la platina en la parte

baja.

3.- Colocar la muestra (portaobjetos con cabello), sobre la platina y sujetarlas con

las pinzas.

4.- Mover la platina de modo que la muestra quede en el centro de la luz,

procurando que el cabello sea traspasada por la misma.

5.- Enfocar con el objetivo de 4X, al mismo momento iniciar la cuenta del tiempo

transcurrido en que se tarda para enfocar la muestra y anotar el resultado.

6.- Enfocar con el objetivo de 10X, nuevamente tomar el tiempo y anotar el

resultado.

7.- Anotar las coordenadas en la cual se ha enfocado la muestra.

8.- Colocar el objetivo de 4X, bajar la platina y retirar la muestra.

9.- Hacer el mismo procedimiento con las muestras y sus respectivos responsables.

10.- Limpiar el microscopio.

RESULTADOSDespués de que cada integrante del equipo realizara el procedimiento, se

obtuvieron los siguientes resultados, donde se dan a conocer las imágenes

enfocadas de una muestra de cabello en los objetivos del microscopio 4x, y 10x

(Tabla 1), así como los tiempos de cada integrante para enfocar una muestra de

cabello así como las coordenadas donde la muestra pudo ser enfocada. (Tabla 2)

Tabla 1. Observaciones de la muestra de cabello

Foto 1.Muestra de cabello observada en el microscopio de luz

fotonica Nikon E100 con el objetivo 4x

Fotografías tomadas por Ramírez A. (2016) cámara iPhone 5

8mpx

Obtenido de:

https://dmluppqfb.wordpress.com/2016/10/03/practica-3-

microscopia/

Foto 2. Muestra de cabello observada en el microscopio de

luz fotonica Nikon E100 con el objetivo 10x

Fotografías tomadas por Ramírez A. (2016) cámara iPhone 5

8mpx

Obtenido de:

https://dmluppqfb.wordpress.com/2016/10/03/practica-3-

microscopia/

Tabla 2. Resultados por alumnoNOMBRE ANGULO CORDENADAS TIEMPO EN 4X TIEMPO EN 10X

ANTONY 67 X= 42.5 Y=13 2.56 SEGUNDOS 0.98 SEGUNDOSJOARI 55 X=42 Y=0.5 8 SEGUNDOS 7 SEGUNDOSKAORY 63 X=44 Y=18 15 SEGUNDOS 33 SEGUNDOSDANIRA 49 X=37 Y=11 1 MINUTO 20 SEGUNDOS

RUBISELA 49 X=38 Y=16 8 SEGUNDOS 1 MINUTOVANESA 49 X=38 Y=11.5 2.20 MINUTOS 9 SEGUNDOSGUADALUPE 67 X=35 Y=22 3 MINUTOS 2 MINUTOS

Discusión de resultados El microscopio es una herramienta muy fundamental que es utilizado por el

Químico Farmacobiologo y por otras áreas de investigaciones, ya que, nos permite

la facilidad de observar de forma clara diferentes tipos de microorganismos, para

ello existen tipos de microscopios que poseen características diferentes

dependiendo del microorganismo a observar. Durante esta práctica se utilizó el

microscopio óptico o fotonica que utiliza una resolución de hasta 500 nanómetros,

este microscopio trabaja con una fuente de luz normal es decir mediante fotones a

diferencia del microscopio electrónico que tiene una resolución de hasta 10

nanómetros y trabaja con una fuente de luz de electrones. Es muy importante

conocer la resolución de cada tipo de microscopio y así mismo las medidas

exactas de microrganismos que posteriormente serán observados y así obtener

una imagen con enfoque requerido, así mismo poder reconocer con gran facilidad

cada una de las partes del microscopio es muy importante, saber que el macro y

micrométrico nos ayudan al enfoque, el revolver con cada una de las resoluciones

de los objetivos para una mejor vista y así entre muchas otras partes de este.

Cabe mencionar que el químico Farmacobiologo aparte de saber enfocar cada

microorganismo de manera rápida tiene que saber medir las coordenadas de

posición al que logro ser observado cada microorganismo.

CONCLUSION

Identificamos de forma sencilla las partes del microscopio al igual que la

función que tiene cada una de ellas y su uso apropiado, además de

practicar con el manejo adecuado y el enfoque correcto de los objetos a

observar de manera inmediata.

Aprendimos a darle un buen funcionamiento al microscopio, ya que la

existencia de un aparato como lo es el microscopio, es de gran importancia

y utilidad para el laboratorio.

Se comprendió que sin este aparato sería imposible visualizar los

microorganismos a simple vista ya que el microscopio puede observar todo

un mundo ignorado por muchos.

ReferenciasHernandez, E. (Agosto de 2013). Espectro visible. UNAM Facultad de Artes y Diseño. Recuperado

de http://blogs.fad.unam.mx/asignatura/elva_hernandez/wp-content/uploads/2013/08/teoria-de-los-colores-luz-y-tipos-de-luz-e.pdf

Jesús, A. (10 de julio de 2005). Contribuciones de la física en la historia de la microscopía. Revista Digital Universitaria. Recuperado de http://www.revista.unam.mx/vol.6/num7/art70/jul_art70.pdf

Montalvo, C. (Agosto de 2010). Microscopía. Departamento de Biología Celular y Tisular. Recuperado de http://histologiaunam.mx/descargas/ensenanza/portal_recursos_linea/apuntes/2_microscopia.pdf

Noguez, C. (2013). Física a la escala nanométrica. Complex Systems Department. Recuperado de http://scifunam.fisica.unam.mx/mir/copit/TS0011ES/Noguez.pdf

CUESTIONARIO

Defina longitud de onda, espectro visible, resolución y apertura numérica? Longitud de onda: Es la distancia que hay entre dos crestas consecutivas de una onda.

Espectro visible: Se conoce como la región del espectro electromagnético que es perceptible por el ojo humano.

Apertura Numérica: Capacidad de la recolección de luz y poder de resolución (a una distancia fija) de un objetivo

¿Cuál es la importancia del uso del condensador? Permite regular la mayor parte de los rayos luminosos.

¿Qué diferencia hay entre el ojo humano, microscopio óptico y microscopio electrónico? Resolución del ojo humano es de 450 a 700 nm, mientras el microscopio óptico alcanza a ver más de 0.2 micra., microscopio óptico su resolución es de 10nm También el microscopio óptico efectúa la luz por medio de electrones mientras el óptico es por fotones

¿Para qué se emplea el microscopio de campo oscuro, el microscopio de contraste de fases y el microscopio de fluorescencia? Microscopio oscuro: Se emplea para ver celular vivas, en las cuales no se les ha aplicado ningún tipo de tinción o fijación.

Microscopio de fases: Es usado para la observación de objetos y estructuras sin ningún tipo de tinción o que son transparentes, se pueden ver celular vivas y distinguir sus componentes morfológicos.

Microscopio de fluorescencia: Se emplea para la observación de celular con un tipo de tinción en específico, es un tinte fluorescente

¿Qué es microscopia led? Es la iluminación con mayor resolución ya que su iluminación es nítida y natural

¿Por qué existen objetivos con diferentes aumentos? ¿Le sirvieron en la presente práctica? Explique sus respuestas. Los diferentes objetivos nos ayuda a que la resolución sea más clara. En 10x nos amplía el campo de la imagen. Mientras del 4x al 100x podemos observas con más detalles la muestra

¿Qué dificultades se presentarían si se iniciara un enfoque de muestra con la lente de mayor aumento? Algunas veces al cambiar al objetivo mayor se perdía nuestra muestra.

¿Por qué debe emplearse aceite de inmersión con el objetivo de 100X? para que podamos observar mejor la muestra, ya que si no lo tenia se veía un poco borrosa.