MICROSCOPIA DE LUZ

Lic. Ingrid Berganza

¿ QUE ES UN MICROSCOPIO

Es un instrumento que se utiliza para ver lo no visible a los ojos humanos.

Permite aumentar las imágenes de las células hasta 1000 veces y tiene acceso a detalles de hasta 0.2 micras.

PRIMEROS MICROSCOPISTAS

Antonio van Leewenhoek: Se le suele atribuir el desarrollo de este aparato Constaban de una lente pequeña y convexa,

montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espécimen).

Este uso de una única lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos ópticos.

Microscopio simple de Leewenhoek

HISTORIA DEL MICROSCOPIO 1608: ZACARIAS JANSESN: construye un

microscopio con dos lentes convergentes 1611: KEPLER: sugiere la fabrica de microscopio

compuesto 1665: HOOKE: estudia cortes de corcho y describe

poros como cajas que el llama “células”. Describe hongos filamentosos.

1674: LEEWENHOEK: Descubre protozoarios y los denomina “animáculos”. En 1683 observa bacterias por primera vez.

Leewenhoek dibuja las bacterias y las publica en 1684

Se distinguen varios tipos morfológicos de bacterias comunes

A,C,F y G: forma de bastón E: forma esférica o cocoide H: paquetes de cocos

Microscopio usado por Robert Hooke El lente objetivo fue adaptado al final de un

mecanismo de fuelle Un foco de iluminación sobre el especímen y

un único lente

HISTORIA DEL MICROSCOPIO 1828: W. NICOL: Desarrolla la microscopía con

luz polarizada. 1838: SCLEIDEN y SCHWANN: Proponen teoria

celular y declaran a la celula como unidad estructural y funcional en plantas y animales.

1876: ABBÉ: Perfecciona el diseño del microscopio por efectos de la difracción en la formación de la imagen.

1881: RETZIUS: Describe diferentes tejidos y lego con otros colaboradores desarrollan nuevas tinciones y proponen fundamentos de anatomía microscópica.

1886: ZEISS: Fabrica serie de lentes, permitiendo ver estructuras en límites teóricos de la luz visible.

HISTORIA DEL MICROSCOPIO 1908: KÖKLER y SIEDENTOPF: DesarrollaN el

microscopio de fluorescencia. 1930: LEBEDEFF: Diseña y construye el primer

microscopio de interferencia. 1932: ZERNIKE: Microscopio electrónico de

contraste de fases. 1937: ERNST RUSKA Y MAX KNOLL: Primer

Microscopio electrónico. 1952: NOMARSKI: Inventa el contraste de

interferencia diferencial para microscopio de luz. 1981: Aparece el microscopio de efecto túnel o

microscopio electrónico de Transmisión (MET).

Microscopio de luz Microscopio de campo claro Microscopio de campo oscuro Microscopio de fluorescencia Microscopio de contraste de fases Microscopio de luz polarizada Microscopio electrónico Microscopio de transmisión electrónica Microscopio de transmisión electrónica de

barrido

TIPOS DE MICROSCOPIO

Microscopio de campo claro Rango de aumentos generalmente entre 40

y 1000. Es el normalmente utilizado para estudiar los cortes en parafina o metacrilato (histológicos), las extensiones citológicas, tinciones normales y exámenes directos

Microscopio de campo oscuro

Es el mismo microscopio de campo claro, usando un condensador que bloquea los rayos de luz directos y desvía en un ángulo oblicuo la luz proveniente de un espejo, solo se observan los bordes iluminados de los objetos.

Microscopio de Fluorescencia Microscopio que permite estudiar la

fluorescencia propia de algunos tejidos o la fluorescencia que nosotros podemos inducir en ellos, mediante sustancias llamadas fluorocromos

Microscopio de Contraste de Fases

Las ondas luminosas pasan a través de objetos transparentes, y salen en fases diferentes según las propiedades de los materiales por los que pasan, por lo tanto unas estructuras son más oscuras que otras

Microscopio de Luz Polarizada

Consiste en un microscopio óptico común al que se añade una óptica especial (prismas de Nicol) que permite identificar las características de birrefringencia de algunos tejidos.

Microscopio Electrónico de TransmisiónMET: es el habitualmente utilizado para diagnóstico

anatomopatológico. Utilizan haces de electrones proyectados desde un cañón y enfocado por una lente electromagnética sobre el objeto. Resolución de 0.001μm

Microscopio Electrónico de Barrido

Tiene menor resolución que el MET. Es útil para dar imágenes tridimensionales con sombreado, usando una delgada capa de metal pesado (platino) sobre el objeto

PARTES DEL MICROSCOPIO OPTICO Sistema óptico

OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.

OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.

CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.

DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.

FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

PARTES DEL MICROSCOPIO OPTICO

Sistema mecánico SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes:

el pie o base y el brazo. PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación. CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares.

Puede ser monocular, binocular, ….. REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes

objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos. TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que

aproxima el enfoque y micrométrico que consigue el enfoque correcto.

TORNILLO MACROMETRICO

TORNILLOMICROMETRICO

BRAZO

OCULAR

REVOLVER

OBJETIVO DE MAYOR AUM.

OBJETIVO DE MENOR AUM. PRESILLA O PINZAPATINA DIAFRAGMA

ESPEJO

BASE o SOPORTE

CABEZAL