validación y verificacion de metodos de examen cuantitativos

7/29/2019 Validacin y verificacion de metodos de examen cuantitativos

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Validacinyverificacindemtodosdeexamencuantitativos

IgnacioReyesRamrez

entidad mexicana de acreditacin, a.c.

TemasselectosdeCalidadenSerologa

(aplicacinen

el

banco

de

sangre)


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Introduccin

Sedescribirnlospuntosaconsiderarparalavalidacinyverificacindelos

procedimientosdeexamencuantitativos,paraelcumplimientoyevaluacindelpunto

5.5.2 delanormaNMXEC151892008.


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Conformealasdirectricesestablecidasenla

Gua

para

la

validacin

y

la

verificacin

de

los

procedimientosdeexamencuantitativosempleadosporellaboratorioclnico.


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AlcancedelaGua

Ladebenaplicarloslaboratoriosclnicosqueseencuentranenalgunaetapadelprocesode

acreditacinantelaentidadmexicanadeacreditacin,a.c. atodoslosprocedimientosdeexamencuantitativosdelalcancedelaacreditacin


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Descripcin

Yaqueexistendiversostipodemtodosanalticos

disponiblesenelmercado.

Esimportantequeellaboratorioevale losdiferentesmtodosyseleccioneaquelquemejorseadecuealasnecesidadesyrecursos.


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Validacin

Sedefinecomo:

LaConfirmacinmedianteelsuministrode

evidenciaobjetivadequesehancumplidolosrequisitosdelmtodoparaunautilizacinoaplicacinespecificaprevista.

(NMXCH152IMNC2005)


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Losdatosdelavalidacindelmtodolosinformaelfabricanteensusinstructivosyestospuedencomprenderporsuaplicacin:

Linealidad.

Precisin. Veracidad.

Limitededeteccin.

Selectividad. Sensibilidadanaltica.

Intervalo

de

trabajo. Especificidadanaltica.

Incertidumbre.


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Siseutilizanmtodosdesarrolladosporellaboratoriooalgunofuemodificado,sedeberealizarlavalidacincompletaypresentarlasevidencias

correspondientes.

Linealidad.


Limitededeteccin.

Selectividad. Sensibilidadanaltica.

Intervalodetrabajo.

Especificidadanaltica.

Incertidumbre.


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Lavalidacin compruebalaaptituddelosprocedimientos

de

examen yreflejalascondicionesrealesdelaaplicacindelosmismos.


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Verificacin

Laconfirmacinmediantelaaportacindeevidenciaobjetivadequesehancumplidolos

requisitosespecificadosparaunmtodo.

(NMXCC9000IMNC2005)


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Laverificacinconsisteenevaluareldesempeodelmtodo

parademostrarque

cumpleconlosrequisitosparaelusoprevisto,quefueronespecificadoscomoresultadode

suvalidacin.(NMXCH152IMNC2005)


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VE= Valor Esperado del Reactivo.

VO= Valor Observado del Reactivo.


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Parmetrosdedesempeo

Ellaboratoriodebe

realizar

la

verificacin

delosmtodosyevidenciarsicumplen

conlascaractersticasdedesempeoenlascondicionesdel

laboratorio.

Linealidad.


Incertidumbre.


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EvaluacindelosParmetros

Linealidad Evaluarelintervalo

analtico

del

mtodo

enellaboratorio.

Elcomportamiento

lineal. Laverificacindebe

tomarencuentalospuntosdedecisinclnica.


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Precisin.

Valordelamagnitud. Estimacindelvalor

delmensurando.

Errordemedida(aleatorioy

sistemtico).

Veracidad.

Concordanciaentrelamediaaritmticayelvalorverdaderoo

aceptadocomoreferencia.

Errorsistemtico(sesgo).


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Errorsistemtico. Mediaqueresultadeunnmeroinfinitodemedicionesdelmismomensurando,efectuadobajocondicionesderepetibilidad,menosunvalorverdaderodelmensurando.

(NMXZ055IMNC)


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Exactituddemedicin. proximidaddelaconcordancia

entre

el

resultado

de

una

medicin yunvalorverdaderodelmensurando.(NMXCH152IMNC2005)


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EjemplodeExactituddemedicin.


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EXACTITUD

ERROR DE MEDIDA

PRECISIN VERACIDAD

ERROR ALEATORIO ERROR SISTEMATICO

Relacin entre los distintos tipos de error y los correspondientesconceptos cualitativos


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Incertidumbre. Intervalodentrodelcualseesperaqueseencuentrelacantidad

medida,teniendoencuentatodaslasfuentesdeerror.

Incertidumbreestndar(u).

1DS

Incertidumbreexpandida(U).

U=u

xk

IncertidumbreCombinada(Uc).

Errorcuadrticomedio(ECM).


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Incertidumbredemedicin. Parmetroasociadoalresultadodeunamedicinquecaracterizaladispersindelosvaloresquepodranrazonablemente,seratribuidosalmensurando.(NMXCH152IMNC2005)


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Incertidumbre

de

medicin.

media

VRS

VRI

O

O

O

O

OO O

O O O O OO


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Aplicacindelaverificacin

Objetivo

Verificareldesempeodelmtodoanaltico

paralacuantificacindeAc.rico enunequipoautomatizadoconformealoestablecidoenlaGuadeValidacinde

mtodoscuantitativos.


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Caractersticasdelreactivo

IntervaloBiolgicodeReferencia:

2,0

a

7,0

mg/dL (hombre).2,0a5,0mg/dL (mujeres).Reproducibilidad:Nivel:3,7mg/dL,DS: 0,23mg/dL,CV%:0,61Nivel:6,2mg/dL,DS: 0,37mg/dL,CV%:0,60Nivel:10,0mg/dL, DS: 1,60mg/dL,CV%:1,60

Recuperacin:Entre97a101%paraunniveldeUricemia de10mg/dL.


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Lmitededeteccin:

Enespectrofotmetroelestndarde10,0mg/dL

proporcionaunalecturaaproximadade0,290D.O.

Loquesignificaqueelcambiomnimodeconcentracindetectableenesascondicionespara0,001D.O.ser aproximadamentede0,03mg/dL.Linealidad:

Lareaccineslinealhasta20mg/dL


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Linealidad

VERIFICACION DE LA LINEALIDAD DEL

AC. URICO

No. Dilucin %

Concentracin

minima y

maxima

(mg/dL)

Valor

obtenido

mg/dL

Valor

Teorico (X)

mg/ dL Sesgo % Error

1 0 20 17.83 20 2.17 0.11

2 25 8.66 10 1.34 0.13

3 50 4.57 5 0.43 0.09

4 75 2.28 2.5 0.22 0.09

5 100 1.25 1.21 1.25 0.04 0.03

Promedio 0.08


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Grafico de Linealidad

1.21 2.284.57

8.66

17.83

0.00

5.00

10.00

15.00

20.00

0 20 40 60 80 100 120

Dilucin

[]mg/dL

Ac.

Urico

Ensayo de Linealidad


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DatosdelaCorrelacinLineal Regresion Lineal

Valor obtenido

mg/dL

Constante [A] 0.060

coeficiente de

regresion [b] 0.884

coeficiente de

correlacin [r] 0.999

coeficiente critico

de correlacion [r2] 0.999

Ecuacin de la

recta y = (0.884)x + (0.60)

r2 = 0.999


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Grafico de Linealidad

0.00

5.00

10.00

15.00

20.00

0 5 10 15 20 25

Valor asignado [ ] mg/dL Ac. Urico

Valorobtenido[]mg/dL

Ac.

Urico

Ensayo de Linealidad

y = (0.884)x + (0.60)

r2 = 0.999


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Criteriosdeaceptabilidad

Calcularlapendiente(1)ylaordenadaalorigen(0).

Compararelsesgooelporcentajede

errorparacadadilucinycompararconelfabricante.

Tomarladecisindeaceptarorechazar.


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Decisin

Elmtodoanalticoenlascondicionesdeloptimasdellaboratoriopresentaunrangolinealconfiablede1,12a17,83mg/dL.

Elcoeficientedecorrelacinlineal(r2)de0,999

loqueindicaqueelintervalo

evaluado,lafuncindecalibracineslineal.


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VERIFICACION DE LA LINEALIDAD DEL AC. URICO

No.Dilucin

% Valor 1 Valor 2 Valor 3 Media DS

1 0 17.50 18.00 18.00 17.83 0.24

2 25 8.50 9.00 8.50 8.66 0.24

3 50 4.50 4.70 4.50 4.57 0.09

4 75 2.30 2.25 2.30 2.28 0.02

5 100 1.25 1.20 1.17 1.21 0.03

Promedi

o 0.08


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Alcompararladesviacinestndardecada

dilucinseobservaunpromediode0,08. El%Errornosuperael0,08%.

Por

lo

que

el

rango

evaluado

para

el

mtodo

eslinealsegnloestablecidoporelfabricante,yaqueaconcentracionesbajas

permiteunadesviacinde 0,23mg/dLyaltasa 1,60mg/dL.


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Precisin

SueroControldeAc.ricode5,25y9,01

mg/dL. 20datoscorrida

intrada.

Secalcula:media

desviacinestndar

%delcoeficientedevariacin

No. de Lectura

Ac. Urico

(mg/dL)

Normal

Ac. Urico

(mg/dL)

Patologico

Valor Asignado 5.25 0.91

x 5.1587756 8.98855357

DS 0.082078268 0.11357817

CV% 1.591041645 1.26358669

%Error relativo 1.737607617 0.23802924

%Recobro 98.26239238 99.7619708


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DeacuerdoconCLIAparaimprecisin

intraserialointrada,laDSobtenidadebeserigualomenora delErrorTotalpermitido.

ParaAc.ricoelerrortotalpermitido 5%.

DSIntrada 0,25ET, 1,25% SustituyendoSueroNormal: 0,082 1,25%SueroPatolgico: 0,113 1,25%

V id d


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Veracidad

Laveracidaddelmtodosepuedeestimarpormediodel

error

relativo.

%deErrorrelativo=[Valorreal Valordelamedicin

]x100

Valorreal

Criterio:Elvalordelerrorrelativoseamenoroigualalreportado.

Resultados:SueroNormal: 1,73%SueroPatolgico: 0,23%


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La veracidad del mtodo se puede estimar por medio del

calculo del porcentaje de recuperacin.

% Recuperacin = [___Valor obtenido___] x 100Valor de referencia

Criterio:

El % de recuperacin sean menor o igual alreportado por el fabricante.

Resultados:

Intervalo del fabricante de 97 al 101 %

Suero Normal: 98,26 %

Suero Patolgico: 99,76 %

b


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Incertidumbre

Mtodoenzimticoparalacuantificacindecidoricoespectrofotomtricoconuricasa.

Empleandouncalibradorconunvalorde10 0.005mg/dLconunfactordecoberturak=2para

un

nivel

de

confianza

del

95%.

C t d l i tid b


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Componentesdelaincertidumbre

Variabilidadpremetrolgica.

Incertidumbredelvalordelcalibrador.

Magnitudesinfluyentesendgenas.

Imprecisininterdiaria.


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Variabilidadpremetrolgica

Elconjuntodeactividadesrealizadasdesdelatomadelamuestrahastaquelamuestradesueroestalistaparalamedicinprovocaun

coeficientedevariacinpremetrolgicade0,8%.Estavariabilidadaplicadaalresultado

obtenido

(5,25

mg/dL)

corresponde

a

una

incertidumbreestandarde0,04mg/dL.

d b d l l d l l b d


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Incertidumbredelvalordelcalibrador

Elvalordelcalibradoresde10mg/dLylaincertidumbreexpandidaesde0,005mg/dL.Porlotanto,laincertidumbreestndar

relativadelvalorasignadoalcalibradores0.05%,queaplicadoalresultadoobtenido

(5,25

mg/dL)

corresponde

a

una

incertidumbreestndarde0,002mg/dL.

i d i fl d


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Magnitudesinfluyentesendgenas

Segnelfabricantedelosreactivoselcriterioparaaceptarqueunaconcentracindebilirrubinas,cidoascrbicoobromurodehioscinaenelplasmaproduzcaunainterferencia

significativa

es

que

no

altere

el

valor

del

mensurandoen 10%.

Losposiblescambiosdelvalorverdaderodel

mensurandoestarnenelintervalo[0%;10%] [10%;0%],aunqueesmsprobablequeest mscercade0%quedel10% del 0%.


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Considerandounadistribucintriangularrectangular:u=[(ba)2/18]0,5

dondeaybson,respectivamente,loslimitesinferiorysuperiordelintervalo;enestecaso:

u=[(100)2/18]0,5

=2,4%

queaplicadoalresultadode5,25mg/dL,correspondea0,126mg/dL;ycomoestoes

aplicableatresmagnitudesinfluyentes:Uc

=[3X(0,126mg/dL)2

]0,5=0,027mg/dL

I i i i t di i


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Imprecisininterdiaria

Esteprocedimientodemedidatieneun

comportamiento

heterocedstico

con

un

coeficientedevariacinmetrolgico,aproximadamenteconstantealolargodel

intervalodemedida,igualal1,6%.Estaimprecisininterdiariaaplicadaalresultado

5,25mg/dLy expresadacomoincertidumbreestndar,correspondea0,08mg/dL.

E ti i d l i tid b


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Estimacindelaincertidumbre

uc

=(0,042

+0,0022+0,0272

+0,082)0,5=

0,047

mg/dL U=uc

xk=0,047mg/dLx2=0,094mg/dL

Resultado:

5,25

0,094mg/dL

Intervalo:

5,15 a5,34 mg/dL

Datos de la verificacin


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Datosdelaverificacin

VerificacindelMtodoenzimticodeuricasaparaladeterminacindecidorico.

Linealidad:

Elmtodoeslinealde1,2a17.8mg/dL Precisin:

SueroNormal:DS=0,08;CV=1,59%SueroPatolgico:DS=0,11;CV=1,26%


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Veracidad:

ErrorRelativo

SueroNormal:1,73%

SueroPatolgico:0,230

%Recuperacin

SueroNormal:98,26%

SueroPatolgico:99,76%

Incertidumbre:

U=0,094mg/dL

Resultadodelamuestra:

5,25 0,094mg/dLIntervalo:5,15a5,34mg/dL


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Criteriosdeevaluacindela

normaNMX

EC

15189

IMNC

2008/ISO15189:2007MP-FE009-00

Entrada en vigor 2009-05-08

Requisitos tcnicos


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Requisitos tcnicos


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Requisitos tcnicos


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Requisitos tcnicos


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MUCHASGRACIAS

validación y verificacion de metodos de examen cuantitativos

Documents