universidad agraria del ecuador tesis mariana

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UNIVERSIDAD AGRARIA DEL ECUADOR FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA TEMA: “DETERMINACION DE ESCHERICHIA COLI EN PRESAS DE POLLO SELECCIONADAS (PECHUGAS) QUE SE COMERCIALIZAN EN LA CIUDAD DE GUAYAQUIL. AUTORA: MARIANA DE LAS MERCEDES CORELLA GARCIA. TESIS DE GRADO SOMETIDA AL HONORABLE CONSEJO DIRECTIVO COMO REQUISITO PREVIO A LA OBTENCÍON DEL TITULO DE MEDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA DIRECTORA DE TESIS: Dra. GLENDA LLAGUNO LAZO

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Page 1: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

UNIVERSIDAD AGRARIA DEL ECUADOR

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA

Y ZOOTECNIA

TEMA:

“DETERMINACION DE ESCHERICHIA COLI EN PRESAS DE POLLO

SELECCIONADAS (PECHUGAS) QUE SE COMERCIALIZAN EN LA

CIUDAD DE GUAYAQUIL.

AUTORA:

MARIANA DE LAS MERCEDES CORELLA GARCIA.

TESIS DE GRADO

SOMETIDA AL HONORABLE CONSEJO DIRECTIVO

COMO REQUISITO PREVIO A LA OBTENCÍON DEL TITULO DE

MEDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

DIRECTORA DE TESIS:

Dra. GLENDA LLAGUNO LAZO

AÑO:

2009 - 2010

Page 2: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

AGRADECIMIENTO

A la Universidad Agraria de Guayaquil

Por haberme alimentado de conocimiento

Valioso para poder representar a la Institución

de la mejor manera ; a todas las personas que

me apoyaron para la realización de la tesis,

especialmente a mis maestros, amigos por su

invalorable ayuda y comprensión.

Page 3: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

DEDICATORIA.

A Dios por haberme dado la fuerza para seguir

adelante en mis estudios.

A mi madre a quien siempre le dedicaré mis

triunfos, por el apoyo continuo, por

el aliento de superación que en todo momento

me dió ya que sin su influencia no sería lo que

soy.

Mariana de las Mercedes Corella García.

Page 4: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

RESUMEN.

En la ciudad de Guayaquil se realizó un muestreo de pechugas de pollo en

los expendios con el fin de determinar la presencia de Escherichia coli.

Las pruebas fueron realizadas en su totalidad en el laboratorio de

Microbiología de la Universidad Agraria del Ecuador; se utilizó el método de

petrifilm.

De un total de número de muestras analizadas se detecto que de 150 solo

21 muestras estaban contaminadas con Escherichia coli, es decir, 100 % de

las muestras recolectadas solo el 14% de estas fueron positivas a la

presencia de Escherichia coli.

Siendo el de mayor incidencia los mercados municipales con el 26%,

avícolas con 10%, supermercados 6%.

De mayor contaminación la presentación al granel con 22,22%, seguido por

la presentación de fundas plásticas con 13,15% y de 4,08% en los

empaques termosellados.

Además de Escherichia coli se encontró en dos placas la presencia de

crecimiento de bacterias no coliformes (Pseudomonas).

Page 5: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

General Summary

In Guayaquil city it was made and study on chicken breast

samples at premises markets with the go all of determine

the presence of Escherichia coli.

 

All the   studies were maden totally at the University Agrarian of

Ecuador in the Microbiology laboratory . Method use Petrifilm.

 

Altogether number of analized samples it was detected on 150

only 21 samples were contaminated with E. coli, therefore over

100% of the samples only 14% were positive for E. coli contamination.

 

The highest incidence were found it at the public markets with 26%,

chicken farms 10% and supermarkets 6%.

 

You got it contamination was at fairgrounds 22.22% folllowed

by plastics bags sealed presentation with 13,15% and 4.08% on

thermosealed packing.

 

Futhermore of E.coli we found on two plaques Pseudomones bacterie.

INDICE

CAPITULO I

Introducción……………………………………………….……..….….1

Importancia………....……………………………..………..…..2

Page 6: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

Objetivos…………………………………………………...…....3

CAPITULO II

1. Revisión de literatura………….………………………..……….……..4

2.1. Enterobacterias…………….………………………….……….....4

2.1.1. Morfología y características generales……………………….5

2.1.2. Características culturales………………………...….……..... 5

2.1.3. Pared celular de las enteobacterias…………….……………5

2.2. Coliformes …………………………………………….…….…….6

2.3. Escherichia coli………………………………….……….……….7

2.3.1. Morfología y características generales……………….….……7

2.3.2. Habitad…………………………………………………..……......7

2.3.3. Factores de virulencia…………………………………..…..…..8

2.3.4. Enterotoxinas……….………………………………………........8

2.5. Patogénesis………………………………….……………….…….9

CAPITULO III

2. Materiales y métodos……………………………..…………….….….10

3.1.1. Estudio de campo…………………………………………..… .10

3.1.2. Análisis de laboratorio……………………………………….. ..10

3.2. Materiales y equipo de campo…………………………...……....10

3.2.1. Materiales y equipos de laboratorio…………………….……..10

Page 7: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

3.3. Método de análisis…………………………………..…….………11

3.3.1. Preparación de agua pectonada………………………………11

3.4. Técnica para la determinación de Escherichia coli por medio

de placas petrifilm…………………………………………….………...12

3.5. Casuística………………………...……………………..……..…...13

3.6. Diseño experimental y análisis estadístico…………………….14

3.7. Cronograma de toma de muestras…………………………….…14

CAPITULO IV

4.Resultados………………………………………………….……………... 15

4.1 Grafico 1 prevalencia de muestras recolectadas vs muestras

contaminadas…………………………………………………………….15

4.2 Grafico 2 prevalencia de Escherichia coli según expendios........16

4.3 Grafico 3 prevalencia de Escherichia coli según tipo de em-

paque………………………………………………………………………17

CAPITULO V

5. Conclusiones………………………………………………….……………18

CAPITULO VI

6. Recomendaciones….…………………………………………………..………..19

CAPITULO VII

Page 8: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

7. Anexos…………………………………………………………………...…20

7.1. Materiales de campo…………………………………….…….……20

7.2. Materiales de laboratorio…………………………………….…21- 23

7.3. Varios…………………………………………………….………. 24-38

7.4. Registros de datos de la investigación en zona de muestreo….39

7.4.1 Primera semana de recolección de muestras…………...…39

7.4.2. Segunda semana de recolección de muestras……..……..40

7.4.3. Tercera semana de recolección de muestras…………......41

7.4.4. Cuarta semana de recolección de muestras………….......42

7.4.5. Quinta semana de recolección de muestras………..….....43

7.4.6. Sexta semana de recolección de muestras…………..…...44

CAPITULO VIII

4. Bibliografía…………………………………………………..…….…..….45

Page 9: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO I

INTRODUCCION.

La carne de pollo es de alto consumo en la ciudad de Guayaquil debido a

sus propiedades nutritivas, fácil preparación, diversidad de platos y bajo

costo en comparación con la carne de res y de cerdo.

Debido a las exigencias del mercado la industria avícola ha visto la

necesidad de ofrecer nuevas alternativas entre ellas la comercialización de

presas seleccionadas, para de esta manera satisfacer a los consumidores.

La selección que se realiza en las canales de pollo conlleva un proceso de

mayor manipulación, haciendo que estas presas queden expuestas a una

mayor contaminación bacteriana especialmente del grupo de las Escherichia

coli.

El propósito de este trabajo es determinar la existencia de Escherichia coli

en las presas seleccionadas de las canales de pollo que se comercializan en

los diferentes expendios de la ciudad de Guayaquil.

Para esto se monitorearán las bacterias Escherichia coli que son las

principales causantes de producir enfermedades a través de este producto.

Es importante conocer estos parámetros para que tanto el productor como el

consumidor puedan determinar si el producto es apto para el consumo.

1

Page 10: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

IMPORTANCIA.

Es importante conocer si existe Escherichia coli o no en este tipo de

producto ya que por su presentación su precio de venta es más alto y por lo

tanto debe ofrecer una mayor calidad cumpliendo los parámetros

establecidos para así evitar problemas de enfermedades en los

consumidores.

2

Page 11: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

OBJETIVOS.

1. Determinar la presencia de Escherichia coli en presas

seleccionadas de pollo (pechugas) mediante el método de

Petrifilm.

2. Determinar a qué nivel de expendios existe mayor

contaminación de Escherichia coli.

3

Page 12: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO II

REVISIÓN DE LITERATURA.

Bacteria (del griego, bakteria, ‘bastón’), nombre que reciben los organismos

unicelulares y microscópicos, que carecen de núcleo diferenciado y se

reproducen por división celular sencilla. (1)

Las bacterias son microorganismos de vida libre. (1)

Son pocos los lugares del mundo sin bacterias. Las hay hasta 5 metros de

profundidad de la tierra, en el agua dulce, salada y aun en el hielo de los

glaciares. (1)

Abundan en el aire, en líquidos como la leche y el interior y exterior de los

cuerpos de vegetales y animales, ya sean estos vivos como muertos. (8)

Las células bacterianas son muy pequeñas su medida se da en micras y las

podemos encontrar en formas bacilares (bastones), cocos, gonococos,

estreptococos, estafilococos (esféricos), espirales: espirilos, espiroquetas.

(8)

2.1Enterobacterias.

Son consideradas bacterias medianas, bacilares gram negativo, que no

forman esporas, su habitad es el intestino de los animales y el hombre. (3)

Algunas especies forman parte de la flora intestinal normal, mientras que

otras son patógenas. Estas bacterias fermentan una gran variedad de

carbohidratos, crecen bien en medio de cultivos artificiales. (5)

4

Page 13: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO II

2.1.1Morfología y características generales:

Son bacilos gram negativo, miden 2 - 4 µm x 0,4-0,6 µm, no forman

esporas, son catalasa positiva, oxidasa negativa, móviles por flagelos

perítricos o inmóviles, crecen en medios con peptona, extracto de carne,

agar Mac Conkey. (7)

Fermentan la glucosa con producción de gas, algunos poseen cápsulas,

temperatura óptima de crecimiento es de 37 0c. (7)

2.1.2 Características culturales:

Agar: colonias lisas y regulares, miden 2mm de diámetro excepto la Yersinia

(mas pequeñas), Proteus (swarming) y Klebsiella (colonias mucosas y

grandes). (7)

Caldo: enturbiamiento uniforme. (7)

2.1.3 Pared celular de las enterobacterias.

Membrana externa.- delgada de peptidoglucano y espacio periplásmico

que recubre la membrana citoplasmática, protege a las enterobacterias de la

acción de las sales biliares, fermentos digestivos, constituida por una doble

capa lipídica, en la cual se encuentran moléculas de lipopolisacáridos que

comprenden tres partes: Lípido A constituye la endotoxina; Core central

formado por el polisacárido de base que forma el antígeno R; Poliósidos de

cadenas laterales que forman los antígenos O, también se encuentran

proteínas (porinas) que forman canales en la membrana externa para el

pasaje de las moléculas hidrófilas. (7)

5

Page 14: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

Peptiglucano.- capa rígida de cadenas lineales de poliósidas unidas por

péptidos. (7)

CAPITULO II

Espacio periplásmico.- enzimas (metabolismo bacteriano). (7)

Membrana citoplasmática.- doble capa fosfolipídica, hidrófoba, con

proteínas denominadas permeasa (permeabilidad selectiva). (7)

2.2 COLIFORMES.

Las coliformes son enterobacterias habitantes habituales del intestino de los

animales y en ciertos casos son causantes de patologías graves. Las

bacterias de este grupo pueden contaminar con facilidad alimentos; carne

contaminada por heridas causadas en el intestino durante la evisceración del

animal sacrificado o durante el procesamiento (contaminación del alimento

por el operados o por el agua, superficies, etc.) (3)

Por consiguiente la detección y eliminación de los microorganismos

patógenos de este grupo es muy importante en higiene alimenticia. (3)

Las coliformes son un grupo de bacterias que se encuentran comúnmente

en las plantas, el suelo y los animales, incluyendo en los humanos. La

presencia de bacterias coliformes en el suministro de agua es un indicio de

que estas pueden estar contaminadas con aguas servidas u otro tipo de

desecho en descomposición. Generalmente las bacterias coliformes se

encuentran en mayor abundancia en la capa superficial del agua o en los

sedimentos del fondo. (4)

Los coliformes fecales se encuentran en el intestino de los humanos y otros

animales de sangre caliente. (4)

6

Page 15: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

Las coliformes son indicadores de contaminación de los alimentos por

materia fecal. (4)

CAPITULO II

Entre las más comunes y una de las mas importantes tenemos a la

Escherichia coli. (4)

2.3 Escherichia coli.

Fue aislada por el pediatra alemán Theodor Escherich, en las heces de un

niño (1985).Es de distribución universal. Se la conoce también como Bacilus

coli, Bacterium coli y Bacilo del colon (7)

2.3.1 Morfología y características generales.

Son bacilos gruesos (1,5 *4 micras) gram negativo, pertenecen a la familia

Enterobacteriaceae; están clasificadas por su tamaño como bacterias

medianas, se tiñen de rojo o rosa en laboratorio por medio de la safranina.

(2)

La mayoría de las cepas son móviles por poseer los flagelos perítricos, hay

también cepas inmóviles. (2)

Son aerobios y anaerobios facultativos, catalasa positivo, oxidasa negativo,

no esporógenos, fermentador, crecen a temperaturas desde 7 – 10 0C hasta

50 0C. Su factor de adhesión son las fimbrias. (6)

Posee antígeno O (somático) o de la pared celular; antígeno K (capsular);

antígeno H (flagelares); antígeno F (fimbriales). (7)

2.3.2 Hábitat.

Se considera que el habitad normal del E. coli es el colon de organismos de

sangre caliente (aves y mamíferos), se pueden localizar estas bacterias en el

7

Page 16: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

medio externo; se considera que su presencia representaba contaminación

fecal. (4)

CAPITULO II

Existe E. coli que vive en otras partes del tracto digestivo, como las E. coli

patógenas que pueden habitar en la sangre y en el tracto urogenital. (4)

Adicionalmente es posible encontrar poblaciones de E. coli en vertebrados

de sangre fría , también se han encontrado cepas particulares en ambientes

acuáticos, especialmente los que son ricos en compuestos orgánicos como

en el desagüe; se ha demostrado que estas poblaciones ambientales

pueden incrementar de densidad poblacional en el tiempo indicado que

crecen y sobreviven en estos ambientes externos. (4)

2.3.3 FACTORES DE VIRULENCIA.

La patogenecidad de E. coli se manifiesta mediante diversos factores de

virulencia dependientes del estado patológico. (6)

Fimbrias facilitan la adhesión al epitelio. (6)

2.3.4 ENTEROTOXINAS.

Ejercen su acción directamente sobre el epitelio intestinal, ocasionan graves

trastornos en el transporte de electrolitos y agua. (6)

Enterotoxina termoestable (ST).Diarrea relativamente leve. (7)

Enterotoxinas termolábiles (LT).Intensa diarrea de larga duración. (7)

Verotoxinas, efectos citopatogénicos. (7)

8

Page 17: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO II

2.5 PATOGENESIS.

Infecciones intestinales producidas por E. Coli, ocasionan diarreas en niños

susceptibles a E. Coli porque tienen el sistema inmunitario menos

desarrollado. (6)

En adultos afectados en viajes a países subdesarrollados porque no están

inmunizados contra ellos. (6)

La severidad dependerá de la cepa invasora, teniendo en cuenta los factores

de virulencia, las podemos clasificar en: (6)

E. coli patógena.- Diarrea en lactantes en meses de verano. Es muy poco

frecuente en países desarrollados, los factores de virulencia, adhesina y

posible enterotoxina. (6)

Serotipos O55, O111, son los más frecuentes. (6)

E. coli enteroinvasiva.- Produce diarrea por colonización intestino delgado,

invade las células de la mucosa intestinal. Produce gastroenteritis similar al

de la Shigella. (6)

Síntomas fiebre, diarrea sanguinolenta con gran cantidad de leucos (pus)

igual que en la shigelosis. (6)

9

Page 18: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO III

MATERIALES Y METODOS.

3.1Lugar de investigación:

3.1.1 Estudio de campo.

Se realizó en la ciudad de Guayaquil en los diferentes sitios de expendios a

nivel de supermercados, avícolas y mercados municipales.

Las muestras recolectadas fueron debidamente etiquetadas y transportadas

manteniendo la cadena de frio hasta llegar al laboratorio donde fueron

analizadas.

3.1.2 Análisis de laboratorio.

El diagnostico correspondiente se realizó en el laboratorio de Microbiología

de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad

Agraria del Ecuador en la ciudad de Guayaquil.

3.2 Materiales y equipos de campo.

o Recipiente térmico para el transporte de las muestras.

o Fundas térmicas e impermeables.

o Marcador para identificar las muestras.

o Bolígrafo.

o Hoja con tabla de control y registro.

3.2.1 Materiales y equipos de laboratorio.

o Muestras: Presas de pollo seleccionadas (pechugas).

o Autoclave.

10

Page 19: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

o Estufa.

CAPITULO III

o Balanza.

o Mechero de bunsen.

o Refrigeradora.

o Hornilla eléctrica.

o Tubos de ensayo con tapón.

o Vaso de precipitación.

o Pipetas.

o Espátula.

o Gradilla.

o Guantes.

o Lapicera.

o Pilón y mortero.

o Hoja con tabla de control y registro.

o Agua peptonada.

o Agua destilada.

o Alcohol.

o Placas petrifilm.

3.3 Método de análisis.

El método que se empleó fue el de placas de conteo de Petrifilm para el

recuento de Escherichia coli. Utilizó agua peptonada para realizar las

diluciones.

3.3.1 Preparación del agua peptonada.

1) Se pesan 15g de peptona bacteriológica.

11

Page 20: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

2) En un matraz se coloca 1000cc de agua destilada.

CAPITULO III

3) Se mezcla el agua destilada con la peptona bacteriológica.

4) Se calienta la mezcla hasta su ebullición.

5) Se colocan 9cc de agua peptonada en tubos de ensayo.

6) Se pone a esterilizar a 121º C con 15 lb de presión los tubos de

ensayo con agua peptonada.

7) Se deja enfriar.

8) Se deja en refrigeración.

3.4 Técnica para la determinación de Escherichia coli por

medio de placas petrifim.

1. Poner en mortero una pequeña porción de la muestra a analizar.

2. Triturar con pilón y mortero hasta que las partes queden

homogenizadas - molidas.

3. Pesar 1 gramo en la balanza de precisión.

4. Diluir 1 gramo en 10cc de agua destilada.

12

Page 21: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

5. Con pipeta pasteur llevar 1cc de la dilución con 9cc de peptona

bacteriológica estéril, marcado como -1 y de este llevar 1cc al tubo

marcado como -2.

CAPITULO III

6. Con pipeta se toma 1cc de la segunda dilución y se siembra en la

placa petrifilm, se la identifica con lápiz de cera.

7. Se coloca en la estufa por 24 horas a 37º C.

8. Se realiza la lectura de las colonias que encontramos en el petrifilm.

9. Se realizan los registros correspondientes.

3.5 Casuística.

Se recolectaron 150 muestras de presas seleccionadas (pechugas), las

muestras fueron obtenidas en los diferentes expendios de la ciudad de

Guayaquil.

Zonas de Muestreo Expendios que comprenden.Número de Muestras

totales por Zona

Número de muestras por

semana

Semana de recolección

A SurSupermercados, avícolas y

mercados municipales. 5025 3

25 6

B CentroSupermercados, avícolas y

mercados municipales. 5025 1

25 4

C NorteSupermercados, avícolas y

mercados municipales. 50 25 2

25 5

13

Page 22: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO III

3.6 Diseño experimental y análisis estadístico.

Se monitorearon 25 muestras semanales por seis semanas, en los

diferentes expendios de la ciudad de Guayaquil.

Se utilizó la estadística descriptiva, mediante el cálculo de porcentajes para

determinar la prevalencia de Escherichia coli en las muestras recolectadas y

analizadas mediante las siguientes relaciones:

Prevalencia de muestras recolectadas (vs) muestras contaminadas con

Escherichia coli.

Prevalencia de Escherichia coli según expendios de la ciudad de Guayaquil.

Prevalencia de Escherichia coli por tipo de empaque del producto.

3.7 Cronograma de toma de muestras.

Fecha de Recolección.

Semana de Recolección.

Zona de Muestreo

Expendios. Número de Muestra.

A B C 1 2 3

14/12/2009 1     x  x  x x 25

28/12/2009 2    x    x  x x 25

04/01/2010 3  x      x  x x 25

11/01/2010 4      x  x  x x 25

18/01/2010 5    x    x  x x 25

25/01/2010 6  x      x  x x 25

A = Sur B = Centro C = Norte

14

Page 23: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

1 =Supermercados

2 = Avícolas

3 = Mercados municipales

CAPITULO IV

RESULTADOS.

4.1. Grafico 1. Prevalencia de muestras recolectadas vs. muestras contaminadas.

15

Page 24: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

De las 150 muestras recolectadas solo 21 muestras dieron positivo a la

presencia de Escherichia coli; porcentualmente solo el 14 % estaban

contaminadas.

CAPITULO IV

16

4.2. Grafico 2. Prevalencia de Escherichia coli según expendios.

Page 25: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

Ojo verificar estos datos ya que se menciona en otro lado q las muestras al granel fueron de 63, 38 y 49 respectivamenteLa prevalencia de Escherichia coli según los expendios determinó:

Mercados municipales de 50 muestras 13 fueron positivos a Escherichia

coli,las cuales representa el 26 %.

Las avícolas de 50 muestras 5 dieron positivas a Escherichia coli

representando el 10%.

Supermercados 50 muestras 3 positivos a Escherichia coli representando

el 6%.

CAPITULO IV

17

4.3. Grafico 3. Prevalencia de EScherichia coli según tipo de empaque.

Page 26: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

Según el tipo de empaque que se comercializa en la cuidad se encontró:

Al granel de 63 muestras 14 positivas a Escherichia coli representado por

el 22,22 %.

Fundas plásticas de 38 muestras 5 positivas a Escherichia coli,

representando 13,15 %.

Termo sellados de 49 muestras 2 positivos a Escherichia coli, representando

el 4,08%.

CAPITULO V

CONCLUSIONES.

Los hallazgos encontrados en esta investigación en términos de la

inocuidad microbiológica de los alimentos (pechugas de pollo) que se

comercializan en la ciudad de Guayaquil demostraron:

El nivel de contaminación es mayor a nivel de expendio de los mercados

municipales que registra un 26%, seguido por los avícolas con el 10% y

supermercados con el 6 %.

De las 150 muestras analizadas, el 14% resultaron positivas a Eschericha

coli.

La contaminación bacteriana guarda relación directa con la forma de

manipular el producto, ya que las más contaminadas son las que se

venden al granel.

18

Page 27: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

La contaminación de las canales también tiene una relación directa con la

forma de procesamiento de las aves.

CAPITULO VI

RECOMENDACIONES.

Referente a lo encontrado en el presente estudio se realizan las siguientes

recomendaciones para investigaciones futuras:

Utilizar estos datos actuales para observar la relación que existe entre

otras variables de interés que pudieron no tomarse en cuenta en el

presente estudio.

Mejorar las condiciones higiénicas en el procesamiento de las aves para

obtener un producto de mejor calidad bacteriológica.

El personal de control de calidad debe ofrecer un plan de entrenamiento a

sus empleados sobre las buenas prácticas de manufactura en el

19

Page 28: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

procesamiento del producto para minimizar la carga microbiana en la

canal.

Evitar la contaminación fecal de las aves, efectuando un verdadero ayuno

antes del sacrificio.

Evitar la contaminación fecal directa debido a la relación de higiene

personal especialmente por la manipulación del producto.

Reducir el posible riesgo de contaminación indirecta en primer lugar

evitando las aguas residuales contaminadas de las plantas,

especialmente en el área de escaldado.

.

20

Page 29: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO VII

7. ANEXOS

7.1 Materiales de campo.

1. Bolso térmico con muestras.

2. Muestras de supermercados.

Page 30: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO VII

3. Muestras de avícolas.

7.2 Materiales de laboratorio.

4. Balanza analítica y vaso de precipitación.

CAPITULO VII

Page 31: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

5. Estufa eléctrica; preparación del agua peptonada.

6. Autoclave.

CAPITULO VII

Page 32: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

7. Incubadora.

8. Gradilla, pipetas, mechero.

CAPITULO VII

Page 33: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

9. Pilón y mortero.

7.3 Varios.

10. Tubos de ensayo con peptona.

CAPITULO VII

Page 34: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

11. Toma de muestra.

12. Un gramo de la muestra.

CAPITULO VII

Page 35: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

13. Homogenización de la muestra.

14. Tubos de ensayo con peptona estéril.

Page 36: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO VII

15. Prepraciòn de la primera dilución 1:10.

16. Primera dilución 1:10.

Page 37: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO VII

17. Segunda dilución 1:100.

18. Toma 1cc de la segunda dilución.

Page 38: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULOVII

19. Placas petrifilm enumeradas.

20. Placa petrifilm sin sembrar.

Page 39: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO VII

21. Siembra de segunda dilución en petrifilm.

22. Placas petrifilm del 1 - 25.

Page 40: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO VII

23. Placas petrifilm del 26 - 50.

24. Placas petrifilm del 51 - 75.

Page 41: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO VII

25. Placas petrifilm del 76 - 100.

26. Placas petrifilm del 111 - 125CAPITULO VII

Page 42: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

27. Placas petrifilm del 126 - 150.

28. Recuento de E. coli = 20.

CAPITULO VII

Page 43: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

29. Recuento de E. coli = 0.

30. Recuento de E. coli = 40.

CAPITULO VII

Page 44: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

31. Recuento de E. coli = 20.

32. Recuento de E coli = 60.

CAPITULO VII

Page 45: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

33. Recuento de E. coli = 20.

34. Recuento de E. coli = 20. CAPITULO VII

Page 46: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

35. Presencia de pseudomonas

(Gel de la placa amarillo)

36. Recuento de E coli = 80.CAPITULO VII

Page 47: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

37. Recuento de E. coli = 60.

Page 48: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana
Page 49: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO VII

7.4 REGISTROS DE DATOS DE LA INVESTIGACION EN ZONA DE MUESTREO

7.4.1. PRIMERA SEMANA DE RECOLECCION DE MUESTRA

Fecha de Recolección.

Semana de Recolección.

Zona de Muestreo

Expendios. Número de Muestra.

Peso de Muestra en gramos.

Número de Presentación. ColoniasA B C 1 2 3 lote E. Coli

14/12/2009 1 x x 1 1 336094 termosellado congeladox 2 1 340091 termosellado congeladox 3 1 323095 termosellado congeladox 4 1 323095 termosellado congeladox 5 1 233509 termosellado congeladox 6 1 233509 termosellado congeladox 7 1 337095 termosellado congelado

x 8 1 337095 termosellado congelado

x 9 1 Granel refrigerado 20

x 10 1 337095 termosellado congelado

x 11 1 337095 termosellado congelado

x 12 1 133509 termosellado condelado

x 13 1 133509 termosellado congelado

x 14 1 329094 termosellado condgelado

x 15 1 329094 termosellado congelado

x 16 1 granel ambiente

x 17 1 granel ambiente

x 18 1 granel ambiente 40

x 19 1 funda plástica congelada

x 20 1 funda plástica congelada

x 21 1 funda plástica congelada

x 22 1 funda plástica congelada

x 23 1 granel ambiente

x 24 1 granel ambiente

x 25 1 granel. ambiente

Page 50: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO VII

7.4.2. SEGUNDA SEMANA DE RECOLECCION DE MUESTRA

Fecha de Recolección.

Semana de Recolección.

Zona de Muestreo

Expendios. Número de Muestra.

Peso de Muestra en gramos.

Número de Presentación. ColoniasA B C 1 2 3 lote E. coli

28/12/2009 2 x x 26 1 4351 termosellado refrigeradox 27 1 4351 termosellado refrigeradox 28 1 347091 termosellado refrigeradox 29 1 347091 termosellado refrigerado

x 30 1 341092 termosellado refrigerado

x 31 1 341092 termosellado refrigerado

x 32 1 2348 termosellado refrigerado

x 33 1 2348 termosellado refrigerado

x 34 1 3543 termosellado refrigerado

x 35 1 3543 termosellado refrigerado

x 36 1 granel refrigerado

x 37 1 granel ambiente

x 38 1 granel ambiente

x 39 1 granel refrigerada 20

x 40 1 granel ambiente 20

x 41 1 granel ambiente

x 42 1 funda plástica congelado

x 43 1 granel ambiente

x 44 1 granel ambiente

x 45 1 granel refrigerada 20

x 46 1 funda plástica congelado

x 47 1 funda plástica congelado

48 1 funda plástica congelado 20

x 49 1 3350 termosellado refrigerado

x 50 1 3350 termosellado refrigerado

CAPITULO VII

Page 51: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

Fecha de Recolección.

Semana de Recolección.

Zona de Muestreo

Expendios. Número de Muestra.

Peso de Muestra en gramos.

Número de Presentación. ColoniasA B C 1 2 3 lote E. coli

04/01/2010 3 x x 51 1 granel refrigerado

x 52 1 granel refrigerado

x 53 1 granel ambiente

x 54 1 granel ambiente

x 55 1 granel refrigerado

x 56 1 granel ambiente

x 57 1 granel ambiente

x 58 1 granel ambiente 20

x 59 1 granel ambiente 60

x 60 1 granel ambiente

x 61 1 granel ambiente

x 62 1 granel ambiente 20

x 63 1 granel ambiente 60

x 64 1 funda plástica congelado

x 65 1 funda plástica congelado

x 66 1 funda plástica congelado

x 67 1 funda plástica congelado

x 68 1 granel refrigerado

x 69 1 granel refrigerado

x 70 1 granel refrigerado

x 71 1 granel refrigerado

x 72 1 236209 termosellado refrigerado

x 73 1 236209 termosellado refrigerado

x 74 1 347201 termosellado refrigerado

x 75 1 347201 termosellado refrigerado

7.4.3. TERCERA SEMANA DE RECOLECCION DE MUESTRA

CAPITULO VII

Page 52: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

7.4.4. CUARTA SEMANA DE RECOLECCION

Fecha de Recolección.

Semana de Recolección.

Zona de Muestreo

Expendios. Número de Muestra.

Peso de Muestra en gramos.

Número de Presentación. ColoniasA B C 1 2 3 lote E. coli

11/01/2010 4 x x 76 1 100610 termosellado refrigeradox 77 1 100610 termosellado refrigeradox 78 1 5103 termosellado refrigerado 20x 79 1 5103 termosellado refrigeradox 80 1 3101 termosellado refrigeradox 81 1 3101 termosellado refrigeradox 82 1 3101 termosellado refrigeradox 83 1 3101 termosellado refrigerado 20x 84 1 3101 termosellado refrigeradox 85 1 3101 termosellado refrigeradox 86 1 3101 termosellado refrigeradox 87 1 3101 termosellado refrigeradox 88 1 3101 termosellado refrigeradox 89 1 364094 termosellado refrigeradox 90 1 364094 termosellado refrigerado

x 91 1 granel ambientex 92 1 granel ambientex 93 1 granel ambientex 94 1 granel ambiente 20x 95 1 granel ambiente 20x 96 1 granel ambiente 40x 97 1 granel ambientex 98 1 granel ambientex 99 1 granel congeladox 100 1 granel congelado

CAPITULO VII

Page 53: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

Fecha de Recolección.

Semana de Recolección.

Zona de Muestreo

Expendios. Número de Muestra.

Peso de Muestra en gramos.

Número de Presentación. ColoniasA B C 1 2 3 lote E. coli

18/01/2010 5 x x 101 1 4014 termosellado refrigeradox 102 1 4014 termosellado refrigerado

x 103 1 granel refrigeradox 104 1 granel refrigeradox 105 1 funda plástica congelada

x 1106 1 granel refrigerado

x 107 1 funda plástica congelada

x 108 1 funda plástica congelada

x 109 1 funda plástica congelada

x 110 1 funda plástica congelada

x 111 1 funda plástica congelada

x 112 1 funda plástica congelada

x 113 1 funda plástica congelada

x 114 1 funda plástica congelada

x 115 1 funda plástica congelada

x 116 1 funda plástica congelada

x 117 1 funda plástica congelada

x 118 1 granel refrigerado

x 119 1 funda plástica congelada

x 120 1 granel ambiente

x 121 1 granel ambiente

x 122 1 granel ambiente

x 123 1 granel ambiente

x 124 1 granel ambiente

x 125 1 granel ambiente

7.4.5. QUINTA SEMANA DE RECOLECCION DE MUESTRA

CAPITULO VII

Page 54: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

7.4.6. SEXTA SEMANA DE RECOLECCION DE MUESTRAFecha de

Recolección.Semana de

Recolección.

Zona de Muestreo

Expendios. Número de Muestra.

Peso de Muestra en gramos.

Número de Presentación. ColoniasA B C 1 2 3 lote E. coli

25/01/2010 6 x x 126 1 2019 termosellado refrigerado

x 127 1 2019 termosellado refrigerado

x 128 1 funda plástica refrigerado

x 129 1 funda plástica refrigerado

x 130 1 funda plástica refrigerado

x 131 1 funda plástica refrigerado

x 132 1 funda plástica refrigerado

x 133 1 funda plástica refrigerado

x 134 1 funda plástica refrigerado

x 135 1 granel refrigerado

x 136 1 granel refrigerado

x 137 1 granel refrigerado

x 138 granel refrigerado

x 139 1 granel refrigerado

x 140 1 granel refrigerado

x 141 1 granel refrigerado

x 142 1 granel refrigerado

x 143 1 granel refrigerado

x 144 1 granel refrigerado 40

x 145 1 funda plástica ambiente

x 146 1 funda plástica ambiente 80

x 147 1 funda plástica ambiente 60

x 148 1 funda plástica ambiente 20

x 149 1 funda plástica ambiente 40

x 150 1 funda plástica congelado

Page 55: Universidad Agraria Del Ecuador Tesis Mariana

CAPITULO VIII

8. BIBLIOGRAFIA.

1.- Barek F.J. “Manual de técnica bacteriológica” segunda edición Acribia

España 1970 pág. 13, 15.

2.- Carter. G.r. D.V.M; DV.JC. “Bacteriología y micología veterinaria aspectos

esenciales” Manual moderno. pág. 3, 4, 5,6, 7, 8.

3.- Intriago, Dr. Luis Moreira “Determinación de Escheriachia

coli “Tesis Doctoral. 2003.

4.- Llona L. Dr. Jesús “Tratado de carne y charcutería “Tomo 2. Hegar –

Monsa 1998 .pág. 287.

5.- Mossel D.D.A.A. /B Moreno García “Micología de alimentos“ ,segunda

edición, Acribia España, pág. 53-54.

6.- Nicolet Jacques “Compendio de Bacteriología” Acrabia España 1985.

Pág.4- 15.

7.- Stanchi Néstor Oscar “Microbiología veterinaria” Inter-medico 2007,

Buenos Aires- Argentina, pág. 195-202

8.- Ville Claude A. “Biología” Séptima edición. Mc. Graw-Hill Interamericaa

México, S.A. de C.V. pág. 121, 122.

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