REACCIONES

FEBRILES

• SON PRUEBAS DONDE SE DETECTAN ANTICUERPOS EN EL SUERO DEL PACIENTE, ESTÁN DISEÑADAS PARA DETECTAR AQUELLOS ANTÍGENOS QUE PRODUCEN CUADROS QUE CURSAN CON FIEBRE

OBJETIVOIdentificar Ab, Ag si es que estos

se conocen

Observar su cantidad

Contacto con huésped en el pasado

IMPORTANCIA: DETECCIÓN DE LOS ANTICUERPOS ESPECÍFICOS PRODUCIDOS EN EL CURSO DE CADA UNA DE ESTAS PATOLOGÍAS:

Salmonella

Brucella

Rickettsia

SALMONELOSIS • LAS SALMONELLAS SE CONSIDERAN PATÓGENOS

ENTÉRICOS OBLIGADOS. LOS ALIMENTOS Y EL AGUA CONTAMINADOS SON LOS MECANISMOS DE TRANSMISIÓN. LA ENFERMEDAD PUEDE PRESENTARSE COMO GASTROENTERITIS, SEPTICEMIA CON LESIONES EN DIVERSOS ÓRGANOS O FIEBRE TIFOIDEA

BRUCELOSIS • LA BRUCELOSIS SE PRESENTA EN LA MAYORÍA DE LOS CASOS CON ANOREXIA, FIEBRE, DECAIMIENTO Y ESCALOFRÍOS, PUDIENDO APARECER LUEGO COMPLICACIONES IMPORTANTES COMO SON LAS ÓSEAS Y NEUROPSÍQUICAS

RICKETTSIA

• AMPLIA GAMA DE PADECIMIENTOS TRANSMITIDOS POR VECTORES COMO PIOJOS, PULGAS Y GARRAPATAS, CUYO CUADRO CLÍNICO SE CARACTERIZA POR FIEBRE ELEVADA, EXANTEMA Y VASCULITIS.

FUNDAMENTO DEL MÉTODO

EL SUERO DEL PACIENTE SE PONE EN CONTACTO CON ANTÍGENOS ESPECÍFICOS. EN ESTE CASO SE UTILIZAN SUSPENSIONES DE SALMONELLAS O BRUCELLAS MUERTOS. SI LA MUESTRA CONTIENE LOS ANTICUERPOS CORRESPONDIENTES SE PRODUCIRÁ UNA AGLUTINACIÓN VISIBLE MACROSCÓPICAMENTE

REACTIVOS PROVISTOS• ANTÍGENOS FEBRILES SALMONELLA: SUSPENSIÓN EN SOLUCIÓN

SALINA CON CONSERVANTES APROPIADOS, CONTENIENDO LOS SIGUIENTES ANTÍGENOS BACTERIANOS: • - ANTÍGENOS PARATYPHOID A (SALMONELLA, ANTÍGENO FLAGELAR A).• - ANTÍGENOS PARATYPHOID B (SALMONELLA, ANTÍGENO FLAGELAR B). • - ANTÍGENOS TYPHOID H (SALMONELLA, ANTÍGENO FLAGELAR D). • - ANTÍGENOS TYPHOID O (SALMONELLA, ANTÍGENO SOMÁTICO D).

Para detección de fiebre tifoidea es la REACCIÓN DE WIDAL.

• SUSPENSIÓN DE ANTÍGENOS BACTERIANOS (BRUCELLA ABORTUS, CEPA 1119-3) EN SOLUCIÓN FISIOLÓGICA CON CONSERVANTES APROPIADOS. LA CONCENTRACIÓN CELULAR DE LOS ANTÍGENOS SE ENCUENTRA ENTRE EL 4 Y EL 6%. LAS BACTERIAS UTILIZADAS SE ENCUENTRAN EN FASE LISA.

Para detección de fiebre ondulante es la REACCIÓN DE HUDDLESON. 

Antígenos Febriles Brucella:

ANTÍGENOS FEBRILES CONTROLES:

• - CONTROL POSITIVO: DILUCIÓN DE SUERO HUMANO INACTIVADO POSITIVO. • - CONTROL NEGATIVO: DILUCIÓN DE SUERO HUMANO NEGATIVO.

REACTIVOS NO

PROVISTOS• SOLUCIÓN FISIOLÓGICA.REACCIÓN DE WEIL-FELIXSe basa en la capacidad del suero del paciente infectado por Rickettsias para aglutinar ciertas

cepas de Proteus

INSTRUCCIONES PARA SU USO

Agitar vigorosamente antes de su

empleo

Llevar a temperatura

ambiente

Los reactivos se proveen listos para

usar

Los reactivos son para uso diagnóstico

“in vitro”

Utilizar los

reactivos guardand

o las precaucio

nes habituale

s

PRECAUCIONES

ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO

• REACTIVOS PROVISTOS: ESTABLES EN REFRIGERADOR (2-10° ), HASTA LA FECHA DE VENCIMIENTO INDICADA EN LA CAJA.

Suero

Recolección

Aditivos

Sustancias

interferentes

conocidas

Estabilidad e instrucciones

de almacenamie

nto

Muestra

Placa de vidrio y

micropiopetas

Varilla y cronómetro

MATERIAL REQUERIDO

Tubos de hemólisis

PROCEDIMIENTO(EN PLACA Y TUBO)

TÉCNICA RÁPIDA EN PLACA

Colocar en una placa:

50 μl de suero + 50 μl de

suspensión de Ag.

Mezclar y agitar en forma circular

durante 2 minutos

Observar la presencia o ausencia de aglutinación.

TITULACIÓN RÁPIDA EN PLACA

Dividir una placa

en sectores y rotular

Colocar 80, 40, 20, 10 y 5 μl de suero

(0.04ml)Repetir para

control positivo y negativo.

Colocar 1 gota de

Ag previamen

te homogene

izado.

TITULACIÓN RÁPIDA EN PLACA

Mezclar utilizand

o una varilla

distinta.

Agitar la placa

durante 2 minutos en

forma circular

Observar la

aglutinación.

MÉTODO DE AGLUTINACIÓN EN TUBO

1) NUMERAR SIETE TUBOS DEL UNO AL SEIS Y UN TESTIGO (T) PARA CADA ANTÍGENO.

2) ADICIONAR 0.9 ML DE SOLUCIÓN SALINA AL TUBO 1 Y 0.5 A LOS RESTANTES

3) AGREGAR 0.1 ML DE SUERO PROBLEMA AL TUBO 1. MEZCLAR Y PASAR 0.5 ML AL TUBO DOS Y ASÍ SUCESIVAMENTE HASTA EL 6 ELIMINANDO 0.5ML DE ESTA ULTIMA DILUCIÓN. OBTENEMOS DILUCIONES 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160 Y 1:320.

MÉTODO DE AGLUTINACIÓN EN TUBO

4) ADICIONAR 0.3 ML DE ANTÍGENO DILUIDO PREVIAMENTE 1:20 CON SOLUCIÓN SALINA EN CADA TUBO.

5) AGITAR E INCUBAR EN BAÑO MARÍA.6) TOMAR DOS O TRES TUBOS A LA VEZ, AGITARLOS

LIGERAMENTE FRENTE UNA FUENTE DE LUZ QUE ILUMINE LAS PARTÍCULAS BUSCANDO SEDIMENTACIÓN DE GRUMOS.

VALORES DE REFERENCIA

1:40 – 1:80 Sospechosos

de Enfermedad

Mayor de 1:80

acompañados de

sintomatología clínica:

Considerarse probatorios

Mayores 1:320

Concluyentes

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

• SUSTANCIAS INTERFERENTES:

Individuos Inmunizados por vacuna tifoidea

Reacciones inespecíficas para pacientes con

influenza, enfermedad hepática crónica y consumidores de

narcóticos

Antígenos de Brucella pueden dar reacciones cruzadas en individuos

vacunados contra cólera