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REACCIONES DE AGLUTINACIN Dr. Juan Carlos Aldave Mdico Especialista en Inmunologa Clnica y Alergologa Comit de Inmunodeficiencias Primarias Asociacin Latinoamericana de Inmunologa

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Objetivos de la prctica: Repasar los fundamentos de la respuesta inmunitaria de anticuerpos Conocer mtodos de diagnstico mediante reacciones de aglutinacin

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SISTEMA INMUNITARIO INMUNIDAD INNATA INMUNIDAD ADAPTATIVA Linfocitos T Linfocitos B ANTICUERPOS: inmunidad humoral LINFOCITO B

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Cmo se activan los linfocitos B? 1.Entrada del antgeno 2.Reconocimiento del antgeno: linfocitos B con gran variedad de receptores para antgenos 3.Activacin del linfocito B Independiente de linfocitos T Dependiente de linfocitos T 4.Diferenciacin, secrecin de anticuerpos

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RECONOCIMIENTO DEL ANTGENO Receptor del linfocito B: inmunoglobulina M/D de superficie

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Aglutinacin Agrupamiento de partculas o clulas provistas de antgeno luego de una reaccin antgeno/anticuerpo (aglutinina) Aplicacin: Determinacin de grupo sanguneo (lo vimos en la prctica anterior) Diagnstico de ciertas enfermedades infecciosas

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No aglutinaAglutina

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Prctica - materiales Antgeno O Antgeno H Paratyphico A Paratyphico B Antgeno Brucella en placa Placa de vidrio Palillos mondadientes Pipeta de 5, 10, 20, 40, 100 L Solucin fisiolgica Gradilla y tubos de vidrio 13x100

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Prctica - procedimiento 1.Limpiar con algodn y alcohol, obtener sangre 2.Colocar 40 L de la muestra dentro de los crculos de la placa de vidrio, preparar controles 3.Aadir sobre: Primer crculo 1 gota de antgeno O Segundo crculo 1 gota de antgeno H Tercer crculo 1 gota de paratyphico A Cuarto crculo 1 gota de paratyphico B Quinto crculo 1 gota de antgeno Brucella

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Prctica - procedimiento 5.Rotar cuidadosamente la placa de vidrio, evitando que se mezclen las muestras, por un aproximado de 4 minutos 6.Leer en el aglutinoscopio buscando la aglutinacin producida en cualquiera de los antgenos

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Prctica - procedimiento 7.Aglutinacin cuantitativa: Dispensar 40, 20, 10, 5 L de la muestra en los crculos de la placa de vidrio, tantas veces como antgenos a usar Luego proceder a agregar el antgeno que ha aglutinado en la prueba cualitativa a todos los crculos que contiene las diferentes cantidades de muestras Proceder como en la prueba anterior en la bsqueda de aglutinacin

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Prctica - resultados POSITIVO: presencia de aglutinacin NEGATIVO: ausencia de aglutinacin Volumen de sueroTtulo 40 L + 1 gota de antgeno 1:40 20 L1:80 10 L1:160 5 L1:320 El ttulo ser la mxima dilucin donde ocurra la aglutinacin

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Salmonella induce produccin de anticuerpos frente a sus antgenos (Ej. anti-H) Prctica - fundamento Anti-H

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Prctica - fundamento Los anticuerpos en el suero del paciente aglutinarn el reactivo del antgeno H H H H H H H Anti-H

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GRACIAS Que Dios los cuide mucho y bendiga su familia y trabajo