REACCIONES DE AGLUTINACIÓN EN PLACA REACCIONES FEBRILES

Dra. Patricia Gómez Ruelas

Práctica #4

Laboratorio de Inmunología

Reacciones febrilesSon un conjunto de reacciones de aglutinación directa útiles en el diagnostico de fiebres entéricas.

Salmonella, Brucella & Rickettsias

Reacciones Windal Huddleson Weil-Félix

Existen dos tipos de fiebres entéricas: Paratíficas Fiebre tifoidea Salmonella paratiphy (A,B,C) Salmonela tiphy

Rickettsiosis Proteus vulgaris (OX-19, OX-K)

FALSOS POSITIVOS

Vacunación previaEfecto de antibióticos

Detalles clínicosEstadios de la enfermedad

TITULOS MINIMOS PARA DIAGNOSTICO:

Mayores a 1:160

Fundamento: Los antígenos bacterianos suspendidos en solución fisiológica interactúan con los Acs específicamente inducidos durante el contacto de la bacteria con el sistema inmunológico. En este caso se demostrará la presencia o ausencia de aglutininas in vitro, lo cual será fácilmente detectable:

Granular Somática Gramos tenues Flagelar

Preparación de la muestra:1. Se colocan 5ml de sangre obtenida por punción venosa en un

tubo de ensayo limpio y seco sin anticoagulante.2. Se deja coagular la sangre, se desprende el coagulo, se

centrifuga la muestra a 2000rpm durante 10 min, se extrae el suero y lo colocamos en otro tubo seco.

Reacción de widal:Antígeno tífico “O”Antígenos tífico “H”

Antígeno paratífico “A”Antígeno paratífico “B”

Reacción de Weil-Félix:Antígeno Proteus OX-19

Reacción de Huddleson:Antígeno Brucella abortus

Prueba cualitativa Se utiliza una placa de vidrio con excavaciones, que se marcan adecuadamente según el antígeno que se vaya a estudiar en cada espacio.Con una pipeta serológica 0.2ml se colocan en cada una de las excavaciones de la placa 0.04 ml del suero problema (una gota).A cada excavación con suero se le agrega una gota de cada uno de los ags febriles.Mezclar en cada excavación el suero y el Ag con un aplicador de madera.Oscilar la placa durante 4 minutos y observar.

O H A B

OX-19 Bp

Resultados

• Positivo: dan aparición de grumos. Significa paciente con infección actual, reciente o pasada.

• Negativo: Paciente en estado muy temprano de la infección o no infectado.

Prueba cuantitativaCuando el suero problema presenta reacciones positivas con algún antígeno, se repite la técnica descrita empleando el antígeno correspondiente, frente a una serie de diluciones del suero.Con pipeta graduada de 0.1 ml, medir respectivamente en la

excavaciones de la placa: 0.02, 0.01, 0.005 ml de suero.Agregar una gota de Ag frente al cual presento aglutinación y proseguir de mismo modo que para la prueba cualitativa.Anotar la cantidad mínima de suero (dilución) que manifiesta aglutinación franca.

Resultados

Las cantidades empleadas de suero corresponden a las siguientes diluciones:

Milititros de suero Dilución 0.08 1:20 0.04 1:40 0.02 1:80 0.01 1:1600.005 1:320

El titulo de suero para el antígeno utilizado corresponde a la dilución mas alta en la que se observa la reacción positiva franca

GRACIAS