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Nuevos Marcadores Moleculares en Carcinoma
de Próstata
Timothy Thomson
Institut de Biologia Molecular de BarcelonaCSIC
Evolución del cáncer de próstata
Abate-Shen et al., Gens & Dev. 2000
HormonoresistenciaEpitelio normal Tumor localizado Metástasis
Lesión precursora
(HG-PIN)
Tumor localizadoPróstata normal
Pérdida de células
basalesPérdida de lámina
basal
Andrógeno-independencia
HG-
PIN
Progresión Tumoral en Cáncer de Próstata
Cáncer de Próstata
� Primera causa de cáncer masculino en Occidente
� Diagnóstico: clínica, examen físico, PSA
¿Porqué buscar nuevos marcadores de CP?
� Mejora de la especificidad diagnóstica
� Predicción de comportamiento: indolente vs agresivo
� Comprensión de la biología del CP
���� Identificación nuevas dianas terapéuticas
Tissue MicroarraysImmunohistochemistry
Real-timeRT-PCR
Expression Microarrays
Bxxxa Bxxxb Bxxxc
11 22
33
44
PCR en tiempo real en formato de alto rendimiento(tarjetas microfluíicas / Low Density Arrays)
ABI PRISM® 7900HT Sequence Detection System
Identificación de genes que discriminan significativamente entre CP y próstata normal
HPN
AMACR
HOXC6
PYCR1
FOXA1
ATP5G1
POLD2
NME2
NME1
PP3111
P4HB
RAP1GA1
SIM2
MYO6
GSTP1
GSTM4
TGFBR3
TGFB3
COL13A1
FGFR1
CAV1
CAV2
ANXA2
GAS1
KRT15
KRT5
KRT17
ITGA5
GJA1
CLU
CX3CL1
BPAG1
TP73L
FOXO1A
FOXF1
Genessobreexpresados
Genesinfraeexpresados
N TE C
N S T C
Stromal
Non-tumoral
Basal
Tumoral(luminal)
Tumoral(proliferative)
Los genes que discriminan significativamente entre CP y próstata normal identifican distintos tipos celulares
Una signatura de 14 genes es suficiente para discriminar con alta significación estadística entre tejido prostático
normal y tumoral
T
T
T
N
UP 83,60% 41/49 80,90% 17/21
DOWN 0% 0/49 0% 0/21
NO-CHANGE 16,40% 18/49 19,10% 4/21
T PIN
Sobreexpresión de MYO6 en CaP: Validación inmunohistoquímica
Aplicación: Detección de Signaturas Diagnósticas
� RNA: Real-time RT-PCR (Tarjetas LDA)
� Proteína: Inmunoensayos en formato multiplex� ELISA (QuantumDot)� SPR
Desarrollo (buscamos colaboraciones)
� Identificación de nuevos marcadores de malignidad
� Generación de anticuerpos monoclonales
� Cuantificación de múltipes clases de RNA enmuestras humanas
� Cuantificación de múltiples clases de proteínas
� Diagnóstico in vivo: Bioimagen