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SEREMI DE SALUD DE LOS LAGOS Manual Procedimiento toma de

muestra PCR

17 de julio 2020 Version 01

1

Manual Procedimiento toma

de muestra PCR

Creado por:

Licenciada en Enfermeria Catalina Bañares Maldonado Viernes 17 de julio 2020


muestra PCR


2

Contenido

Contenido .............................................................................................................. 2

Introducción .......................................................................................................... 3

Importancia del Testeo ......................................................................................... 5

Definición PCR ........................................................................................................ 6

Procedimiento toma de muestra PCR .................................................................... 9

Elementos de protección personal .................................................................... 9

Preparación del ambiente ................................................................................. 10

toma de datos a testeado ............................................................................... 11

Insumos: ........................................................................................................... 13

Técnica PCR: ..................................................................................................... 14

Embalaje de la muestra (sobres y etiquetado) ................................................. 15

eliminación de elementos de protección personal ............................................ 17

Bibliografía .......................................................................................................... 23


muestra PCR


3

Introducción

La COVID-19 es la enfermedad infecciosa causada por el

coronavirus que se ha descubierto más recientemente. Tanto

este nuevo virus como la enfermedad que provoca eran

desconocidos antes de que estallara el brote en Wuhan (China)

en diciembre de 2019. Actualmente la COVID-19 es una pandemia que afecta a

muchos países de todo el mundo.(1)

COVID-19, además de ser altamente contagioso, podría presentar hasta un 20 a

50 por ciento de portadores asintomáticos capaces de transmitirlo, dificultando

su identificación y control. Contar con un método diagnóstico que reúna ciertos

atributos es de fundamental importancia para guiar las decisiones sanitarias.(2)

Una persona puede contraer la COVID-19 por contacto con otra que esté

infectada por el virus. La enfermedad se propaga principalmente de persona a

persona a través de las gotículas que salen despedidas de la nariz o la boca de una

persona infectada al toser, estornudar o hablar. Estas gotículas son relativamente

pesadas, no llegan muy lejos y caen rápidamente al suelo. Una persona puede

contraer la COVID-19 si inhala las gotículas procedentes de una persona infectada

por el virus. Por eso es importante mantenerse al menos a un metro de distancia

de los demás. Estas gotículas pueden caer sobre los objetos y superficies que

rodean a la persona, como mesas, pomos y barandillas, de modo que otras


muestra PCR


4

personas pueden infectarse si tocan esos

objetos o superficies y luego se tocan los

ojos, la nariz o la boca. Por ello es

importante lavarse las manos

frecuentemente con agua y jabón o con

un desinfectante a base de alcohol. (1)

La OMS está estudiando las

investigaciones en curso sobre las formas

de propagación de la COVID-19 y seguirá

informando sobre las conclusiones que se vayan obteniendo.(1)

La principal forma de propagación de la COVID-19 es a través de las gotículas respiratorias expelidas por alguien que tose o que tiene otros síntomas como fiebre o cansancio. Muchas personas con COVID-19 presentan solo síntomas leves. Esto es particularmente cierto en las primeras etapas de la enfermedad. Es posible contagiarse de alguien que solamente tenga una tos leve y no se sienta enfermo. (1)

Según algunas informaciones, las personas sin

síntomas pueden transmitir el virus. Aún no se sabe

con qué frecuencia ocurre. La OMS está estudiando

las investigaciones en curso sobre esta cuestión y seguirá informando sobre las

conclusiones que se vayan obteniendo.(1)


muestra PCR


5

Importancia del Testeo

Se ha documentado la transmisión de SARS-CoV-2 desde individuos asintomáticos,

individuos dentro del período de incubación, y también desde personas infectadas,

pero con muy poca sintomatología, llamados oligosintomáticos. Esto

inevitablemente expone a los trabajadores de la salud a un mayor riesgo de

infección. (3)

Las muestras deben ser tomadas por personal capacitado y teniendo en cuenta

todas las instrucciones de bioseguridad, incluido el uso de los equipos de

protección personal adecuado para virus respiratorios. Los hisopos para el

torulado nasofaríngeo deben colocarse y transportarse en un mismo tubo con

medio de transporte viral). Aunque no se recomienda el muestreo de contactos

asintomáticos de forma rutinaria, si se considera necesario de acuerdo con las

guías nacionales, se deben considerar la toma muestras de las vías respiratorias

superiores para este tipo de muestreo. Las muestras deben mantenerse

refrigeradas (4-8°C) y enviarse al laboratorio (central, nacional o de referencia)

donde se procesarán dentro de las 24-72 horas de la toma.(4)


muestra PCR


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Definición PCR

PCR, Es un examen molecular que detecta

pequeños fragmentos de material genético SARS-

Cov2 definido como el examen gold-standard

para la detección de COVID-19.

objetivo: detectar a las personas que presentan la enfermedad, por

lo que sería el examen más sensible y específico para su diagnóstico.

Muestra requerida: se requiere una muestra de secreciones respiratorias (hisopado

nasofaríngeo, orofaríngeo, esputo, lavado broncoalveolar) que se procesan en

laboratorios especializados

Tiempo en obtención de resultados: se obtienen en al menos 24 horas en su proceso

completo (desde la toma de muestra hasta tener el resultado disponible), pudiendo

extenderse dependiendo de factores asociados a los laboratorios

Limitaciones:

- Tiene entre un 10 a un 30% de resultados falsos negativos, los que pueden darse debido a errores en la técnica o baja carga viral al momento de toma

de examen.


muestra PCR


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- Resultado positivo tras varias semanas de transcurrida la infección, por restos de virus circulante, por lo que no se debe utilizar como examen de

egreso.

Aplicación y usos del estudio con RT-PCR

• para realizar el diagnóstico de COVID-19 • para realizar vigilancia activa en grupos críticos con la finalidad de tomar

conductas preventivas.

• grupos a testear - personas con factores de riesgo a contraer la infección (hogares de

personas mayores, paciente con enfermedades crónicas)

- personal de salud - trabajadores en áreas claves para la continuidad operacional del país

(transporte, bomberos, fuerzas de seguridad, minería, energía, agua)


muestra PCR


8

Pruebas serológicas

• son exámenes que detectan los anticuerpos creados por el sistema inmune de cada persona como mecanismo de defensa ante la presencia de COVID-

19, que por lo que, en una persona infectada por el virus permitiría

confirmar la presencia de anticuerpos IgM y/o IgG contra el COVID-19.

• La IgM se eleva en los primeros 3 y 7 días del proceso infeccioso con un peak de los 14 días de la enfermedad, por su parte, la IgG comienza a

aparecer después de los 8 días de enfermedad, con un peak a los 21 días. Así,

el estudio con TEST de anticuerpos de diferencia entre IgM e IgG permitiría

establecer si el paciente se encuentra en una fase aguda o tardía de la

enfermedad.

Muestra requerida: muestra sanguínea.

Tiempo de resultado: entre 8 y 15 minutos

Limitación: debido a que la formación de los anticuerpos se inicia alrededor del

3er día post exposición al virus, no sería útil en el diagnóstico precoz de la

enfermedad y los test actualmente disponibles reportan bajos niveles de

sensibilidad, que bordean el 50% cuando son realizados en etapas tempranas. dado

el aumento progresivo en los niveles de anticuerpos, esta sensibilidad aumenta

progresivamente si la prueba se aplica desde el 6to a 7mo dia del contagio. (5)


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Procedimiento toma de muestra PCR

Elementos de protección personal

implementos EPP

a. mameluco con gorra (tyber) b. mascarilla n95 c. pechera plástica d. guantes de procedimiento e. cofia f. pantalla facial o antiparras.


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Preparación del ambiente

Es importante la distribución del lugar de trabajo, disponer de

un lugar amplio que permita la preparación de 2 ambientes

a. Primer ambiente donde se soliciten datos de persona testeada.

b. Según ambiente donde se realizará el procedimiento. 2. Se debe realizar limpieza de la superficie con una solución clorada con una

concentración al 5% al 6% Los hipocloritos son los compuestos más

ampliamente usados y vienen en forma líquida (hipoclorito de sodio),

compuesto de espectro amplio, precio bajo y acción rápida. Su uso está

limitado por su efecto corrosivo, su inactivación por materiales

orgánicos y su inestabilidad relativa. El compuesto activo que se

libera es el ácido hipocloroso

Prepare una solución de blanqueador con cloro al mezclar:

5 cucharadas (1/3 de taza) de blanqueador con cloro por galón

de agua a temperatura ambiente o 4 cucharaditas de blanqueador con cloro por

cuarto de galón de agua a temperatura ambiente

Las soluciones de blanqueador con cloro serán efectivas para desinfectar por

hasta 24 horas.

o con desinfectante entregado por laboratorio que cumpla las normas EPA. (6)

Colocar toalla de papel en la superficie.

Colocar silla para el testeo: debe ser firme, sin ruedas para evitar movimiento.


muestra PCR


11

toma de datos a testeado

Llenar planilla de IRA GRAVE, es importante mantener el distanciamiento durante

esta etapa. debe ser llenada por el personal asignado para esta etapa con el fin de

evitar manipulación masiva de documentos.


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Insumos:

Kit de toma de muestra médica y transporte de SARS-CoV-2.

Elementos de Protección Personal (EPP) desechables:

- Bata desechable. - Guantes. - Mascarilla médica o pantalla facial. - Protección ocular: gafas de seguridad, visor o pantalla facial. - Gorro desechable.

Pañuelos de papel.

Bolsa de bioseguridad

5. Agua y jabón o alcohol gel para lavarse las manos.

6. Lápiz permanente para rotular la muestra.

7. Gasa o toallita con alcohol al 70%


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14

Técnica PCR:

1. Lavado de manos. 2. Preparar material. 3. Explicar procedimiento a testeado

“es un procedimiento que no duele, pero si es incomodo, ya que va una tórula de

algodón seca por ambos orificios nasales, es importante que se mantenga

tranquilo/a, cierre los ojos e intente no moverse”

4. Solicitar al paciente que se suene la nariz con un pañuelo y que lo deseche en bolsa de bioseguridad (es importante este paso ya que si la muestra está

con demasiada mucosidad puede resultar indeterminada.

5. Solicitar que coloque la cabeza del paciente en un ángulo de 70 grados. 6. Introducir hisopo en la fosa nasal. Deslizar el

hisopo por la mucosa del piso de la fosa nasal

hasta tocar la pared posterior de la faringe (no

introducir el hisopo hacia arriba siguiendo la

forma de la nariz, sino hacia atrás siguiendo el

piso de la nariz), hasta tocar la nasofaringe, que

se identifica al encontrar resistencia o avanzar lo correspondiente a la

distancia entre la oreja y el orificio nasal.

7. Frotar el hisopo en la nasofaringe, girando para obtener una buena calidad de muestra.

8. Repetir el procedimiento con el mismo hisopo en la otra fosa nasal.


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Embalaje de la muestra (sobres y etiquetado)

1. colocar el hisopo en tubo con medio de transporte, cuidando que quede sumergido en el líquido.

2. Cortar la tórula mediante un doblez del mango. Sujete firmemente el tubo para evitar que se caiga. Cuidar que la punta de la tórula no

esté tocando el fondo del tubo al momento de cortarla, porque

podría quedar muy larga y dificultar el cierre de la tapa.

3. Cerrar el tubo con la tapa con la tórula adentro.

4. Agitar suavemente el tubo por inversión, girando de tal forma que la tapa quede mirando hacia abajo y hacia arriba por lo menos 5 veces.

5. colocar la etiqueta con datos del testeado en el tubo

6. Guardar el tubo dentro de la bolsa de cierre hermético y cerrarla.

7. Guardar la bolsa de cierre hermético dentro de la bolsa de transporte (bolsa blanca con burbujas de aire).

8. colocar segunda etiqueta con datos de testeado en bolsa blanca.


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9. colocar muestras en un cooler o recipiente: si la marca del kit permite el traslado a temperatura ambiente no es necesaria la refrigeración.

si necesita refrigeración se requiere mantener a una temperatura

entre 4 y 8°C.


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eliminación de elementos de protección personal

1. primero quitarse la bata agarrándola desde un hombro con la mano contralateral y tirando hacia la mano,

procurando quitarse el guante de esa mano en el momento

de terminar de sacar la manga.

2. Con la mano sin guante, agarrar la bata por el lado interior, el que está en contacto con usted, y realizar la

misma maniobra para retirar la manga y el guante.

3. Eliminar la bata junto con los guantes en la bolsa de bioseguridad.

4. Retirar el gorro, las gafas y la mascarilla, en ese orden. 5. Desechar los EPP en la bolsa de bioseguridad y cerrarla. 6. realizar lavado de manos. 7. traslado de muestras a laboratorio 8. Llenar planilla EXCEL con datos requeridos en laboratorio


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RUN Nombre Sexo Edad Tipo muestra Resultado

Fecha de

toma de

muestra

Fecha de recepción

de la muestra

Fecha de resultado

Hospital o establecimiento de origen (lugar donde se toma

la muestra)

Región de establecimiento

de origen

Laboratorio de

referencia (lugar

donde se procesa la muestra)

Región de laboratorio donde se procesa la muestra

Teléfono de

contacto de

paciente

Correo de

contacto de

paciente

Dirección de

contacto de

paciente


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9. Colocar formularios IRA grave en cooler donde se transportarán las muestras.

10. Enviar planilla excel al laboratorio. 11. En cooler colocar la siguiente identificación:

i. cantidad de muestras ii. laboratorio de destino iii. lugar de origen


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12. pegar identificación en cooler y sellarlo.

13. realizar traslado de muestras a laboratorio correspondiente.


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Pasos si no

1. Reconocí ambiente donde se realizará procedimiento con 2 ambientes:

a. 1 toma de datos paciente b. 2 lugar para procedimiento

2. lavado de manos 3. me coloqué correctamente elementos de protección personal

4. realice la limpieza, desinfección y orden de la superficie donde se trabajará

5. realicé toma de datos a testeado, llenando formulario IRA grave y etiquetas de datos de paciente. (recomendable que lo realice otra persona)

6. expliqué procedimiento a testeado 7. instruí a paciente que se sonara la nariz 8. coloque al paciente en posición, con cabeza inclinada a 70°

9. realice hisopado correctamente, sintiendo la resistencia y girando torula suavemente

10. deposite torula dentro del tubo, cerrando la tapa sin derramar líquido y girándola suavemente.

11. coloque etiqueta en tubo con los datos del paciente 12. coloque tubo en bolsa hermética 13. coloque tubo con bolsa hermética en bolsa de transporte


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14. coloque etiqueta en bolsa de transporte con datos del paciente.

15. deseche lo sobrante en bolsa de bioseguridad 16. me quite los EPP de acuerdo al protocolo establecido, sin tocarme

la cara.

17. eliminé los EPP en bolsa de bioseguridad 18. cerré bolsa de bioseguridad 19. realice lavado de manos 20. llene planilla excel con datos de testeados y envíe al laboratorio de

destino

21. coloqué muestras y formularios IRA grave en cooler con su respectiva identificación de IRA grave, cantidad de muestras, laboratorio de destino, establecimiento de origen.

22. Se realizó traslado de muestras a laboratorio


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Bibliografía

1. Preguntas y respuestas sobre la enfermedad por coronavirus (COVID-19) [Internet]. [citado 16 de julio de 2020]. Disponible en: https://www.who.int/es/emergencies/diseases/novel-coronavirus-2019/advice-for-public/q-a-coronaviruses

2. Sanitarias RAP de E de T. Diferentes tipos de tests y estrategias diagnósticas en el contexto de pandemia por COVID-19. 2020 [citado 16 de julio de 2020]; Disponible en: https://fi-admin.bvsalud.org/document/view/vjv96

3. Sanitaria I de EC y. Test diagnóstico COVID-19 en trabajadores de la salud asintomáticos. 2020 [citado 16 de julio de 2020]; Disponible en: https://fi-admin.bvsalud.org/document/view/8cvgn

4. Directrices de Laboratorio para la Detección y Diagnóstico de la Infección con el Nuevo Coronavirus 2019 (2019-nCoV) - OPS/OMS | Organización Panamericana de la Salud [Internet]. [citado 16 de julio de 2020]. Disponible en: https://www.paho.org/es/documentos/directrices-laboratorio-para-deteccion-diagnostico-infeccion-con-nuevo-coronavirus-2019

5. ACHS. PCR y Test Rapido en Contexto COVID-19 Empresas. [Internet]. [citado 16 de julio de 2020]. Disponible en: https://coronavirus.achs.cl/docs/default-source/default-document-library/ficha-rol-del-pcrvf92c7f4e2b1dc477bbe26fc5455716c54.pdf?sfvrsn=df1bb3cd_4

6. CDC. Enfermedad del coronavirus 2019 (COVID-19) - Recomendaciones para la limpieza y desinfección ambiental [Internet]. Centers for Disease Control and Prevention. 2020 [citado 16 de julio de 2020]. Disponible en: https://espanol.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/prevent-getting-sick/cleaning-disinfection.html

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