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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE

MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLAN

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

SECCIÓN DE BIOQUÍMICA Y FISIOLOGÍA AGROPECUARIA

MANUAL DE PRÁCTICAS DE

LABORATORIO DE

FISICOQUÍMICA FISIOLÓGICA

CLAVE DE LA CARRERA: 116

CLAVE DE LA ASIGNATURA: 1105

PROFESORES QUE PARTICIPARON EN LA REVISIÓN DE ESTA EDICIÓN

MVZ. JUAN RAÚL AGUILAR TOVARMVZ. MARÍA DEL CONSUELO ÁLVAREZ RODRÍGUEZ MVZ. SILVIA LETICIA BONILLA OROZCOMVZ. PATROCINIO CRUZ ARELLANO MVZ MARCO ANTONIO FAJARDO ROMÁN MC. JAVIER FROYLÁN LAZCANO REYES MVZ. EMILIO LÓPEZ RODRÍGUEZMVZ. JUAN LUIS MONTIEL MEJÍA MC. JORGE MUÑOZ MUÑOZMC. JUANA ORTEGA MONDRAGÓN MVZ. FABIOLA PINEDA RAMÍREZ MC. RUBÉN ARTURO TORRES LEÓN MVZ. RUBÉN TREJO RODRÍGUEZ

6ª EDICIÓN, JULIO DE 2014

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Introducción 3

Objetivo general de la asignatura 4

Objetivos del curso experimental 4

CONTENIDO

Práctica 1: Energía y metabolismo 5

Práctica 2: Tensión superficial 17

Practica 3: Viscosidad 39

Práctica 4: Difusión y ósmosis 59

Práctica 5: Disociación electrolítica 73

Práctica 6: Estado gaseoso 90

Condiciones mínimas de seguridad 103

Instrucciones para elaborar reportes 104

Reglamento general para los laboratorios 106

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INTRODUCCIÓN

La fisiología es una rama de la biología cuyo propósito esencial es el estudio y análisis de

los procesos funcionales de los seres vivos.

El área de fisiología de la carrera de Medicina Veterinaria y Zootecnia en la FES-

CUAUTITLAN, está integrada por las asignaturas de Fisicoquímica Fisiológica, Fisiología

General y Fisiología Veterinaria, las que se imparten durante el primer, segundo y tercer

semestre, respectivamente.

El programa de estudios de la asignatura de Fisicoquímica Fisiológica está integrado por

diez unidades de aprendizaje cuyo índice temático abarca los conceptos básicos

inherentes a los elementos que conforman el organismo animal, los procesos energéticos y

su importancia en la producción animal, las propiedades del agua como el principal

sustrato de la vida, las propiedades de la fase líquida y de las disoluciones, los fenómenos

pasivos de intercambio a través de la membrana celular, la importancia biológica de los

electrolitos, los mecanismos fisiológicos que participan en el equilibrio ácido básico, las

propiedades e importancia biológica de estado coloidal, así como las propiedades del

estado gaseoso y su vinculación con los procesos respiratorios.

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OBJETIVO GENERAL DE LA ASIGNATURA

Conocer, comprender y aplicar los conceptos básicos fisicoquímicos y moleculares

que sustentan los procesos fisiológicos en el organismo animal.

OBJETIVOS DEL CURSO EXPERIMENTAL

Fomentar el empleo del método científico en diseños experimentales

Propiciar un ambiente de enseñanza-aprendizaje activo y participativo

Estimular el desarrollo de una actitud crítica en los alumnos.

Aprender a manejar diversos instrumentos y aparatos.

Desarrollar habilidades y destrezas.

Aprender el manejo de técnicas estadísticas elementales.

Promover la interacción constante entre los profesores y los alumnos.

Fomentar el trabajo en equipo.

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PRÁCTICA No.1

ENERGÍA Y METABOLISMO

Vínculo con el programa de estudios: unidad de aprendizaje No.2

Cuestionario de prerrequisitos

1) Menciona los diferentes tipos de energía que emplean las células incluyendo un

ejemplo de cada una de ellas.

2) ¿Qué es el lactato y cuál es su papel en el metabolismo energético?

3) ¿Qué es el piruvato y cuál es su papel en el metabolismo energético?

4) ¿Qué es la fructosa y cuál es su papel en el metabolismo del espermatozoide?

5) ¿Cómo realiza el espermatozoide el cambio de energía química en energía

mecánica?

6) Haz un esquema de los componentes de un espermatozoide.

Objetivos

Conocer qué es la observación científica, las variables y los parámetros.

Observar los efectos que desencadenan diferentes compuestos químicos sobre la

motilidad espermática e integrar este conocimiento en la comprensión del

mecanismo de obtención de energía en las células.

Introducción

La observación científica es la primera etapa del método científico experimental. Debemos

entender por observación científica “toda percepción refinada de uno o más hechos, con la

intención de integrar un fenómeno determinado”.

Las observaciones que se realizan, difieren en calidad, por lo que a continuación se

exponen diversas cualidades que debe tener esta actividad, con el propósito de que la

calidad de ésta, siempre sea la mejor y se considere como observación científica.

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Actitud positiva.- Es la disposición favorable hacia el tema que se desea escudriñar

descubriendo en cualquier momento y en cualquier circunstancia un dato útil.

Esmero en la atención.- Es atender con cariño y dedicación el tema elegido

descubriendo elementos que pasan desapercibidos al común de la gente.

Objetividad.- Es la descripción fiel del objeto de estudio dejando a un lado la

exageración o la disminución (minimizar) de las características del fenómeno que se

estudia.

Selectividad.- Al registrar datos (características) unos se recogen y otros se desechan,

el objetivo planteado es el criterio que determina esto. Los datos serán empleados

posteriormente para darle sentido a la actividad.

Orden.- Se pretende darles acomodo lógico a las características que se descubren de

un objeto.

Registro.- Es el almacén de la información (datos), no en la memoria, sino en

documentos (papeles y/o informáticos) que posibilitan la recuperación de ellos en

cualquier momento y sin que pierdan fidelidad.

Precisión.- La capacidad de percepción del ser humano tiene limitantes, por lo que los

científicos emplean instrumentos que aumentan su percepción sensorial.

Actitud contemplativa.- Es el comportamiento pasivo, abierto y acogedor que sigue el

investigador cuando desea captar con amplitud y profundidad, todo lo nuevo,

inesperado y extraño del fenómeno.

Admiración.- Ante las innumerables facetas que presenta un fenómeno, el observador

puede adoptar curiosidad, asombro y al descubrir nuevos valores se emociona. En

el proceso de la observación científica hay tres pasos a seguir y son:

1.-Toma de Conciencia.- En este momento se requiere una atención esmerada y un

amplio campo de percepción por parte de los órganos de los sentidos, lo que permite

recibir los datos procedentes del fenómeno elegido, de tal manera que nos damos cuenta

del mismo.

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Cuando la mente está preocupada por otros asuntos, no tomamos conciencia de los

fenómenos que están sucediendo enfrente de nosotros.

2.- Ejecución de la interpretación.- Una vez que los órganos de los sentidos han

transmitido los diversos datos procedentes del fenómeno que se está estudiando, casi

inmediatamente se produce una expresión interna, con la cual queda identificado ese dato

(forma, tamaño, peso, color, ruido, olor, textura, etc.).

Cada persona produce una expresión interna característica de sus experiencias

personales, en cambio el científico ante el mismo fenómeno, toma conciencia de este y lo

relaciona con otros datos, construyendo toda una interpretación de ese dato.

3.-Realización de la descripción.- El científico al lograr la expresión interna o idea acerca

del fenómeno que está estudiando, intenta escoger las palabras adecuadas para poder

describirlo, ya sea de manera oral o escrita y poder comunicar fielmente la idea generada.

Es muy importante comentar que el observador debe en la medida de lo posible, eliminar la

posible desviación, exageración o cualquier otra cosa como el tiempo y el espacio, que

altere el dato que se desea captar. Para estos casos los instrumentos de medición son muy

útiles para eliminar apreciaciones subjetivas, además se recomienda hacer múltiples

repeticiones de un experimento en ocasiones y circunstancias diversas pero manteniendo

una de ellas constante, logrando así una garantía en la disminución de esos factores que

contaminan las observaciones realizadas.

Por lo tanto la uniformidad del dato en circunstancias y momentos diferentes nos establece

que los datos empíricos obtenidos manifiestan un alto grado de verdad.

En un fenómeno o experimento confluyen diversos factores, invariablemente alguno de

ellos puede modificar a otros factores dentro del mismo fenómeno. A los factores

susceptibles a ser modificados se les denomina variables.

La persona que realiza un experimento determina cual es el factor que se va a modificar y

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la medida en que será modificado, por lo que a este factor se le denominará como variable

independiente o libre.

Es libre porque depende del criterio del experimentador y es independiente del objeto de

estudio.

La variable independiente provoca en el fenómeno estudiado un cambio que recibe el

nombre de variable dependiente. Es decir la variable independiente equivale a un

estímulo y la variable dependiente corresponde a la respuesta.

Los parámetros sirven para cuantificar a la variable independiente y los efectos que sobre

el fenómeno se producen como variable dependiente.

La experimentación ideal es aquella en la cual los cambios en todas las variables

presentes se reducen a cero, con excepción de una sola que corresponde a la variable

independiente, para determinar su efecto sobre la variable dependiente, que se estudia.

Células y energía

Las células son estructuras extraordinarias que poseen un programa genético. Son

capaces de autoduplicarse dando origen a dos células progenie. Se diferencian y

especializan en el desempeño de funciones específicas. Desarrollan muy diversos

procesos bioquímicos que constituyen el metabolismo celular. Tienen la propiedad de

reaccionar ante los estímulos del medio y funcionan como transductores de energía; es

decir transforman un tipo de energía en otro.

Las células como sistemas abiertos que son, intercambian constantemente materia y

energía con el medio ambiente. Las células que integran el organismo animal emplean la

energía derivada de los nutrientes para sintetizar otro tipo de energía química bajo la forma

de ATP (trifosfato de adenosina) a través de un ciclo vital denominado de Krebs, o bien del

ácido cítrico o de los ácidos tricarboxílicos y de una cadena de reacciones bioquímicas

denominada fosforilación oxidativa.

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Tanto el ciclo de Krebs como la fosforilación oxidativa tienen lugar en organelos celulares

especializados llamados mitocondrias las cuales constituyen las centrales eléctricas de las

células. En las crestas y bordes libres de la membrana interna de dichos organelos se

localizan proteínas de transporte (translocasas) y unidades fosforilativas ordenadas

secuencialmente. Cada unidad fosforilativa está conformada por una cadena de transporte

de electrones (cadena respiratoria) y la enzima encargada de la síntesis de ATP llamada

ATPsintasa.

Los elementos que integran la cadena respiratoria están organizados en complejos que

contienen flavoproteínas, coenzima Q, proteínas de hierro-azufre y citocromos: b, c1, c, a y

a3.

La síntesis de ATP a partir de ADP y Pi (fosfato inorgánico) que lleva a cabo la ATP

sintasa, esta acoplada a las reacciones de óxido-reducción que ocurren en la cadena

respiratoria. El ATP es un nucleótido compuesto por una base nitrogenada púrica

denominada adenina, un azúcar especial llamado ribosa y tres radicales fosfato. Los dos

últimos radicales de fosfato están unidos al resto de la molécula mediante enlaces

químicos de alto contenido energético; considerados por esta razón como macroérgicos.

En el caso de las células espermáticas, podemos señalar que están dotadas de una

estructura altamente especializada, el flagelo, que sustenta su capacidad de movimiento y

su poder fecundante. El movimiento constituye un factor clave para el ascenso de dichas

células en el tracto genital de la hembra y su posterior encuentro en el oviducto con el

óvulo para llevar a cabo el proceso de la fecundación.

Los espermatozoides poseen un abundante sistema mitocondrial (hélice mitocondrial),

localizado en la pieza intermedia, que provee la energía necesaria para su movimiento.

Así, la célula convierte energía química (ATP) en energía mecánica.

La ultraestructura flagelar posee un citoesqueleto llamado axonema. Elflagelo

espermático tiene un movimiento pausado y de tipo ondulatorio, que resulta del

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deslizamiento microtubular.

La estructura del axonema del flagelo involucra nueve dobletes (pares) de túbulos

arreglados simétricamente alrededor de 2 túbulos centrales. Su organización tubular es 9 +

2. Los túbulos son llamados microtúbulos y están constituidos por la proteína tubulina. El

sistema microtubular está encerrado por la membrana plasmática. El flagelo está unido a

un pequeño cuerpo basal que está embebido en el citoplasma. Tiene 9 tripletes de túbulos

y ningún par central, su patrón de organización es 9 + 0. El movimiento flagelar es

probablemente el resultado de un deslizamiento de los microtúbulos.

Algunos de los dobletes de un lado se deslizan unos sobre otros, flexionando un lado del

flagelo provocando un movimiento ondulatorio. El movimiento de los túbulos del lado

opuesto provoca una rápida extensión del flagelo. La energía química necesaria para

generar la energía mecánica de este movimiento proviene del ATP.

Material que proporciona el laboratorio

Biológico

Espermatozoides de rata, de bovino o cerdo en suspensión en medio de TALP con

concentración mínima de 20 millones por ml.

Reactivos y soluciones

500 ml de solución salina fisiológica.

Medio de cultivo TALP solo, pH 7.4, preparar 50 ml por grupo.

Solución A: medio de cultivo TALP base adicionado con piruvato, 10 ml por grupo, (10 ml

de TALP + 0.1 ml de piruvato de sodio al 0.2 M).

Solución B: medio de cultivo TALP base adicionado con piruvato de sodio + lactato de

sodio, 10 ml por grupo, (10 ml de TALP + 0.1 ml piruvato 0.2 M + 0.1 ml de Lactato 60%).

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Solución C: medio de cultivo TALP base adicionado con piruvato de sodio + glucosa, 10

ml por grupo (10 ml de TALP + 0.1 ml piruvato 0.2 M + 0.2 ml glucosa al 0.5 m).

Solución de piruvato de sodio 1 M, preparar 5 ml por grupo, adicionar 0.5 ml a cada uno

de los medios de TALP (10 ml).

Solución de lactato de sodio al 6%, preparar 5 ml por grupo, adicionar 0.5 ml a cada uno de

los medios de TALP (10 ml).

Solución de fructosa o glucosa al 0.5 M, 10 ml por grupo, adicionar 0.1 ml de esta solución

a cada uno de los medios TALP requeridos.

Anestésicos: Acepromacina (Calmivet) y Tiletamina –Zolacepam (Zoletil).

Material y útiles diversos

4 Pipetas Pasteur.

2 Gradillas metálicas.

2 Cajas de Petri.

4 Portaobjetos.

4 Cubreobjetos. 1

Tabla para rata.

Equipo

Parrilla eléctrica de temperatura graduable.

Microscopio compuesto de campo claro.

Contador de células para biometría de 2 teclas.

Baño María con termómetro.

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Material que debe traer el alumno

Estuche de disección.

Guantes desechables.

Jeringa para insulina.

Desarrollo

Una rata macho se anestesiará con una mezcla de 0.1 ml de Acepromacina (Calmivet) +

1.2 ml de Tiletamina -Zolacepam (Zoletil 50), administrada por vía intramuscular.

Una vez anestesiada, se sujeta la rata a una tabla en posición decúbito dorsal y se hace la

disección del testículo, obteniéndolo con parte del conducto deferente.

Se coloca el testículo en una caja de Petri y se lava con solución salina fisiológica para

quitarle todo rastro de sangre.

En otra caja se coloca el testículo lavado y se inyecta un máximo de 0.2 ml de solución de

TALP solo en el epidídimo. Luego se hace una incisión sobre el epidídimo y se recupera el

contenido del epidídimo con una jeringa de insulina sin aguja, dicho contenido (de

preferencia 0.5 ml) se coloca en el tubo con 2 ml de medio TALP, y se mantiene a 37 º C

en el baño maría.

A partir de este tubo se prepara un frotis con una gota de la solución de espermatozoides,

colocando un cubre objetos sobre la gota. El portaobjetos, cubreobjetos y pipetas deben

estar a temperatura de 37º C en la plancha.

Se observa en el microscopio compuesto de campo claro, primero con el objetivo de 10X

enfocando con el botón macrométrico y luego con el botón micrométrico, enseguida cambia

al objetivo de 40X. Nota el rápido movimiento de los espermatozoides. Ajusta la

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iluminación del microscopio para dar el máximo contraste. Describe el aspecto general de

los espermatozoides que observes:

Observa el flagelo único de estas células, semejante a un látigo, está situado en el polo

caudal de la cabeza espermática. Describe su aspecto general y la motilidad que

desarrolla.

Describe ahora el movimiento individual de cada flagelo, observando cuidadosamente

algunos de ellos. ¿El flagelo empuja o jala a la célula?

1

Ahora cuenta 20 espermatozoides, determinando el número de espermatozoides con

movimiento y sin él.

Prepara nuevamente un frotis con una gota de la solución con espermatozoides

colocándole un cubre objetos. De la solución A (medio de TALP + Piruvato), mantenida a

37°C, desliza 0.1 ml de esta solución por debajo del cubreobjetos.

Observa en el microscopio compuesto de campo claro con el objetivo de 40x. Nota el

rápido movimiento de los espermatozoides. Ajusta la iluminación del microscopio para dar

el máximo contraste.

Cuenta 20 espermatozoides determinando el porcentaje de los que están en movimiento.

Prepara nuevamente un frotis con una gota de la solución con espermatozoides

colocándole un cubre objetos. De la solución B (medio de TALP + Piruvato + Lactato),

mantenido a 37°C, desliza con una jeringa de insulina 0.1 ml de esta solución por debajo

del cubreobjetos.

Nuevamente cuenta 20 espermatozoides y determina el % de movimiento de ellos.

1. Prepara por último un frotis con una gota de la solución con espermatozoides

colocándole un cubre objetos. De la solución C (medio de TALP + Piruvato +

Glucosa), mantenido a 37° C, desliza con una jeringa de insulina 0.1 ml de esta

solución por debajo del cubreobjetos.

Cuenta 20 espermatozoides y determina el % de movimiento de ellos.

Construye una gráfica mostrando los diferentes porcentajes obtenidos de motilidad

espermática con las tres diferentes soluciones empleadas.

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Cuadro de resultados

Número de frotis Número de espermatozoides % de motilidad

con movimiento progresivo

Espermatozoides + TALP

Espermatozoides + solución A

Espermatozoides + solución B

Espermatozoides + solución C

Cuestionario de Evaluación

1. ¿Cuáles son los factores que determinan una buena motilidad en los

espermatozoides (+ del 80%)?

2. ¿Qué ocurre con el movimiento espermático cuando se le adicionan reactivos como

piruvato y lactato?

3. ¿Por qué al adicionar la solución de glucosa ocurre un cambio en la motilidad de los

espermatozoides?

4. ¿Cuáles son tus conclusiones? ¿Qué observaste en el movimiento espermático al

incluir diferentes sustratos? ¿Cómo explicas esto?

Medidas de seguridad y riesgos

El manejo de la rata estará a cargo del profesor el cual observara la manipulación

adecuada para evitar mordeduras del animal o lesiones a éste.

Para el manejo de semen se requiere uso de guantes y de cubre boca.

1

Disposición de desechos biológicos y no biológicos

Según la norma NOM-087- ECOL- SSA1-2002, el cadáver de la rata será depositado en

una bolsa de color amarillo y llevada al horno crematorio para su incineración. Los residuos

químicos por tratarse de medios de cultivo en cantidad muy pequeña se depositarán en un

recipiente rojo para su tratamiento al igual que la muestra de semen.

Los guantes y cubre bocas se depositan en la bolsa de color amarillo para su incineración.

Bibliografía

Silbernagl S. Despopoulos A. 2001: Atlas de bolsillo de Fisiología. 5ª ed. Editorial Harcourt

Madrid.

Stryer L. 2008: Bioquímica. 6ª ed. Editorial Reverté España.

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P R Á C T I C A No.2

TENSIÓN SUPERFICIAL

Vínculo con el programa de estudios: unidad de aprendizaje No.4

Cuestionario de Prerrequisitos

1) Menciona las características generales de la fase líquida.

2) ¿Explica que es la cohesión molecular?

3) ¿Qué es Adhesión?

4) ¿Qué es una interfase?

5) Describe el efecto de la temperatura sobre la cohesión molecular.

6) ¿Menciona cuales interfases forman los líquidos?

7) Menciona las diferencias existentes entre una sustancia hipsótona y una batótona.

Objetivos

Entender las causas que predisponen a cometer errores al medir las variables de

un fenómeno.

Comprender como influyen las fuerzas de cohesión en los líquidos, así como la

manifestación de la tensión superficial en diferentes líquidos.

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Introducción

La experimentación ideal es aquella en la cual los cambios en todas las variables

presentes se reducen a cero, con excepción de una sola que corresponde a la variable

independiente, para determinar su efecto sobre la variable dependiente, que se estudia.

La primera apreciación que se tiene de un fenómeno es de tipo cualitativo ó sea el análisis

de las cualidades que lo caracterizan.

Posteriormente para distinguir dos categorías de una misma propiedad o cualidad, es

indispensable realizar un análisis de tipo cuantitativo que significa comparar las magnitudes

de esta propiedad con un patrón de medición que está representado por un instrumento o

aparato que consta de una escala de unidades con el propósito de expresar

numéricamente la magnitud con que dicha propiedad se manifiesta en un fenómeno.

El instrumento de medición nos permite cuantificar, tanto la variable independiente o de

estimulación, como la variable dependiente o de respuesta.

La medición no nos garantiza un conocimiento que tenga el valor de la verdad, ya que el

acto de medir está acompañado de una serie de limitantes como las siguientes:

1.- Error Humano

El descuido o mal manejo de los instrumentos de medición, puede ser la causa de lecturas

erróneas, por lo cual siempre es recomendable hacer mediciones en forma repetida.

2.- Instrumentos precisos y accesibles

El instrumento de medición debe ser preciso y accesible en forma simultánea, lo cual en la

práctica es difícil de cumplir, ya que invariablemente se afecta una de las cualidades en

beneficio de la otra, de acuerdo a las necesidades del momento.

Por ejemplo una balanza analítica es más exacta en sus mediciones que una granataria,

sin embargo esta última es más accesible y tiene una mayor capacidad.

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La alternativa de utilizar alguna de la dos dependerá del volumen que se necesite pesar y

la precisión que se requiera.

3.- Limitaciones instrumentales

Todos los instrumentos de medición tienen algunas limitaciones, como se podrá comprobar

al medir la tensión superficial con los instrumentos disponibles, ya que será muy difícil que

coincidan los valores obtenidos de la tensión superficial para un mismo líquido, realizando

la medición con diferentes métodos.

En la mayoría de los casos aunque existe el instrumento óptimo no se tiene acceso al

mismo, por lo cual debemos aprender a valorar la exactitud de las mediciones efectuadas

con los instrumentos disponibles

4.- Influencias extrañas durante la medición

Si medimos el volumen de un líquido en un recipiente de cristal como una probeta, matraz

aforado o pipeta graduada, encontraremos que estos instrumentos de medición han sido

calibrados a una temperatura específica, considerando el coeficiente de dilatación y si

nosotros medimos el volumen de un líquido a una temperatura diferente, el volumen del

recipiente ya no corresponderá a las condiciones ideales u originales, por lo que habrá una

modificación en el volumen de nuestro líquido.

5.- Error por muestras no significativas

Las mediciones pueden realizarse con todo cuidado, pero si la muestra analizada no es

representativa de la población total a la que pertenece, los resultados no tendrán validez

alguna.

Una población a estudiar, en términos generales se describe como un conjunto de objetos,

eventos o seres vivos que comparten por lo menos una característica común.

Cuando la población es demasiado grande, como para obtener datos de todos los

elementos que la integran, se elige un cierto número de ellos para formar un grupo

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reducido llamado muestra.

Una muestra para que sea representativa debe contener las mismas características

relevantes que definen a la población.

Para que las muestras sean representativas la selección debe hacerse de tal modo que

todos los elementos de la población tengan la misma probabilidad de ser incluidos, de esta

forma se obtendrá la muestra al azar y será representativa al reflejar las características

reales de su población.

6.- Error por un tamaño inadecuado de la muestra

Ahora bien, si la muestra es tomada al azar pero de un tamaño muy reducido, el promedio

que se obtenga no reflejaría la realidad.

La forma de evitar éste error consiste en aumentar el tamaño de la muestra.

7.- Alteraciones causadas por el proceso de la observación o medición

La introducción de un termómetro “frío” en un vaso de precipitados con un líquido a mayor

temperatura, hace que disminuya ligeramente la temperatura del líquido, de esta manera

se alterará la temperatura real.

En la realización de estudios del comportamiento de algún animal en condiciones

controladas, la sola presencia del observador puede alterar sustancialmente los resultados.

Tensión Superficial

Los sólidos tienen una forma fija mientras que los líquidos se adaptan a la forma del

recipiente que los contiene. Los sólidos actúan "en una sola pieza". Es decir, cada parte de

un sólido se agarra firmemente de los fragmentos adyacentes de manera tal que si

tratamos de desplazar una cuchara, podemos mover toda la cuchara. Esta propiedad se

llama cohesión.

2

En contraste, los líquidos no tienen exactamente este tipo de cohesión. Si uno sumerge la

mano en agua y trata de levantarla como haría con una roca, lo único que logra es mojarse

los dedos. Sin embargo, esto no implica que no existan fuerzas de interacción dentro de un

líquido. Por el contrario, existe la fuerza de cohesión también en los líquidos. En la mayoría

de los líquidos, esta fuerza es mucho más débil que en los sólidos pero no es enteramente

nula. Esto puede observarse claramente en la superficie de los líquidos.

En el centro del líquido cualquier porción está sometida a iguales fuerzas de cohesión en

todas las direcciones. No hay una fuerza neta no balanceada en ninguna dirección. Esta

situación cambia en la superficie (Figura 2.1). Allí, líquido (generalmente rodeado por aire

arriba) sólo recibe fuerzas cohesivas hacia el interior ya que las fuerzas ejercidas por el

aire son despreciables. La resultante de estas fuerzas es perpendicular a la superficie del

líquido.

Fig. 2.1 Esquema de la tensión superficial en la superficie libre de un líquido.

¿Qué forma tienen los líquidos?

La observación diaria sugiere que un líquido se adapta a la forma de su recipiente o se

extiende formando una capa delgada como ocurre al volcarlo en una mesa. ¿Pero qué

ocurriría en ausencia de las fuerzas gravitatorias? De la misma forma que los cuerpos se

dirigen hacia un mínimo de energía potencial gravitatoria al caer, una pequeña cantidad de

líquido suspendida en el aire tratará de minimizar la tensión de la superficie debido a estas

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fuerzas de cohesión. Por lo tanto, adquirirá la estructura de una esfera que es la forma de

menor superficie externa para un volumen fijo. Al caer las gotas de lluvia por ejemplo, éstas

adquieren una forma casi esférica. Esta esfera es distorsionada hacia una forma alargada

debido a la resistencia atmosférica y a la gravedad. Cuánto más pequeña es la cantidad de

agua, el efecto relativo de la gravedad y resistencia es menor y la gota resulta más

esférica. Más aún, si el agua cae desde una altura más o menos apreciable, la resistencia

del aire aumenta con la velocidad hasta llegar a un punto en que las gotas caen con una

velocidad casi constante donde el peso y la resistencia se cancelan. Bajo estas

condiciones, la gota será prácticamente esférica. Esto ocurre también en el caso de las

burbujas de jabón; las fuerzas gravitatorias y de resistencia prácticamente se cancelan y la

burbuja adquiere una forma casi esférica.

El mismo efecto puede lograrse al suspender un líquido dentro de otro. Por ejemplo, el

aceite de oliva no se mezcla con el agua ni con el alcohol. Flota en el agua pero se hunde

en el alcohol. Se puede preparar por lo tanto una mezcla de alcohol y agua en la cual el

aceite ni flote ni se hunda. ¿Qué forma adquirirá el aceite bajo estas condiciones? El peso

es compensado por el empuje que ejerce el líquido. Al igual que una gota de agua en el

aire, el aceite toma una forma esférica. Este experimento fue realizado por primera vez por

Platón.

Caminando sobre el agua

Pararse sobre el agua de una pileta o caminar sobre la misma puede parecer muy

complicado y lo es para los humanos. Pero hay algunos insectos que son capaces de

permanecer y descansar sobre la superficie del agua. Esto no es debido a que su densidad

haga que floten. Por el contrario, de acuerdo a su densidad, si se ubica al mismo insecto

en el medio del líquido, éste se hundiría. Pero los insectos son capaces de aprovechar la

tensión existente en la superficie para reposar sobre ella. Otros insectos que son más

pesados no pueden darse semejante lujo. Sin embargo, mediante habilidosas maniobras

son capaces de corretear sobre la superficie del líquido sin hundirse (Figura 2.2).

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Fig.2.2 Tensión superficial

Fuerzas entre líquidos y sólidos

El mismo tipo de fuerzas puede actuar entre un líquido y el sólido que lo contiene (por

ejemplo un vaso.) Estas fuerzas pueden ser tan grandes como (o incluso mayor) que las

fuerzas cohesivas internas del líquido. Este es el caso en la atracción del agua por un vaso

limpio de vidrio. El agua prefiere estar más cerca del vidrio y "se eleva" en los bordes. El

agua no puede, sin embargo, subir a lo largo del vaso hasta el tope ya que también

interviene la fuerza de la gravedad en sentido contrario. El agua se eleva hasta que el peso

de la porción del agua elevada se balancea exactamente con las fuerzas de unión con el

vidrio. Esto puede observarse en el menisco que forma el agua con el vidrio en los bordes.

El efecto es mayor cuanto menor es el diámetro del tubo. Los tubos de diámetro muy

pequeño se conocen con el nombre de capilares. Es debido a la acción capilar que el agua

sube por los intersticios de un terrón de azúcar o sobre un trozo de papel secante. Es en

parte también gracias a este efecto que el agua puede subir a través de los conductos de

una planta para transportar nutrientes.

En otros líquidos, la fuerza de cohesión dentro del líquido puede ser mayor que la fuerza

con el vidrio y por lo tanto el menisco parecerá invertido. Este es el caso del mercurio

líquido. Lo mismo ocurre con el agua en un envase en que las paredes tengan parafina. Si

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se vuelca agua sobre un vidrio, el agua trata de expandirse formando la mayor superficie

posible de contacto. Si la superficie contiene parafina o si se trata de mercurio, el líquido

formará pequeñas gotas semiesféricas que presentan la menor interfase posible con la

superficie.

La tensión superficial del agua destilada a 20 ºC equivale a 72.8 dinas/cm, pero con fines

prácticos de docencia se le asignará un valor de 73 dinas, con el propósito de comparar el

valor de la tensión superficial del agua destilada con la de diversos líquidos problemas que

se utilizarán en el laboratorio.

Materiales que proporciona el laboratorio

Reactivos

Etanol al 96º GL.

Solución de etanol al 50%.

1 Tubo con flor de azufre.

1 Frasco con saponina.

1 Frasco gotero con aceite vegetal

Agua destilada en matraz Erlen Meyer de 1000 ml.

Alquilarilsulfato

Equipo y útiles diversos

1 Caja de Petri.

1 Gotero de cristal.

3 Tubos de ensaye de 10 ml.

6 Tubos de ensaye de 5 ml.

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4 Portaobjetos de

4 Vasos de precipitados de 50 ml.

5 Tubos capilares.

1 Bureta.

1 Tripié.

1 pinza de tres dedos.

1 Soporte universal.

2 Palillos de madera redondos.

1 balanza de arrancamiento.

1 Malla de asbesto.

1 Liga de hule.

1 Gotero.

1 Termómetro.

1 Parrilla eléctrica.

Material que deben traer los alumnos

30 ml de orina (bovino o equino, porcino, ovino, canino)

30 ml de leche entera de vaca.

Guantes de latex y cubre boca.

2

Desarrollo

Métodos Cualitativos

Experimento No.1 Prueba de Hay

Figura 2.3

En una caja de Petri (Figura 2.3), deposita cierta cantidad de agua y sobre la superficie

espolvorea azufre en polvo, y con el gotero de vidrio aplica varias gotas de saponina a la

superficie del líquido en el centro de la caja de Petri, realiza el mismo experimento con

etanol al 96º GL. Observa y explica el evento fisicoquímico. ¿Cómo lo aplicaría en la

práctica veterinaria?

Experimento No.2 Prueba de Plateau

En 3 tubos de ensaye coloca 10 ml de las soluciones de etanol al 50%, 60% y 70%, a cada

tubo agrega una gota de aceite vegetal con un gotero, dicha gota adoptará una forma

esférica y quedará suspendida a una cierta altura.

De acuerdo a la posición que tome la gota de aceite en el tubo de ensaye, (Figura 2.4),

anota al lado de cada tubo el porcentaje de la solución.

2

Observa el nivel de las gotas de aceite (flechas rojas)

Figura 2.4

Experimento No. 3 Prueba de adhesión

Figura 2.5

Toma dos portaobjetos y únelos colocando un palillo de madera entre ambos en uno de los

extremos, y fíjalos mediante una liga de hule.

2

Sumérjalos en agua corriente y sáquelos lentamente, de manera que el borde inferior no

deje de tocar el agua, dibuje en una hoja de papel la curva que se forma. (Figura 2.5).

Repita nuevamente el experimento, pero ahora con una solución alquilarilsulfato o

jabonosa, y trace nuevamente la curva formada y compárelas.

Indique la diferencia y explique a que se debe este efecto fisicoquímicamente y mida la

curva observada.

.

Métodos Cuantitativos

Experimento No. 4 Método Capilar

Figura 2.6

En diferentes vasos de precipitado de 50 ml coloca 3 ml de cada uno de los siguientes

líquidos: agua destilada 60ºC, agua destilada a temperatura ambiente, solución de etanol al

50%, orina y leche entera. Introduce un tubo capilar en cada vaso de precipitado, déjalo

Tabla 2.1

2

dentro del líquido, por espacio de un minuto, posteriormente tapa el extremo libre del tubo

capilar con un dedo y sácalo del vaso.

Mide con una regla la distancia, en mm, que alcanzó a ascender el líquido por el tubo

capilar durante un minuto. Repite el mismo procedimiento para cada uno de los líquidos.

Determina la tensión superficial (T.S.) de cada uno de los líquidos, realizando los cálculos

necesarios, tomando como base la T.S. del agua destilada a temperatura ambiente y

anotándolos en la tabla 2.1.

Realiza una gráfica indicando los valores de T.S. obtenidos con relación a los milímetros

que ascendió cada líquido por el tubo capilar (gráfica 2.1)

Líquidos problema Ascenso en mm T.S. en dinas/cm

Agua destilada a

temperatura ambiental

Solución de etanol al 50%

Agua destilada a 60°C

Orina

Leche entera de vaca

3

Tensión

Superficial en Dinas/cm

Ascenso del líquido problema en el tubo capilar en mm

Gráfica 2.1

Experimento No. 5 Método Estalagmométrico

Figura 2.7

Se puede llevar a cabo la medición de la T.S., cuantificando el número de gotas contenidas

en un volumen determinado, de cualquier líquido, al hacerlo pasar a través de un capilar

(en este caso una bureta).

Mediante este método consideramos que la gota se desprenderá de la bureta cuando su

peso iguale o supere a la T.S.

3

Tabla 2.2

PromedioTensión

1 2 3

en Dinas/cm

Agua destilada

Temperatura ambiente.

Solución de etanol al 50%

Agua destilada a 60 °C

Orina

Leche entera de vaca

Por lo tanto aquellos líquidos con elevada T.S. nos proporcionaran gotas grandes, en un

menor número, mientras que líquidos con baja T.S. proporcionaran gotas pequeñas en un

mayor número.

Coloca los instrumentos de trabajo como se muestra en la figura 2.7. Deja salir 2 ml del

líquido problema en forma de gotas a través de la bureta y realiza el conteo de las mismas.

Para la obtención de los resultados deberás emplear una regla de tres inversa,

considerando que el agua destilada a temperatura ambiente (20°C) tiene una T.S. de 73

dinas/cm, realiza los cálculos necesarios y anótalos en la tabla 2.2.

Regla Normal Regla Inversa

a ------- b a ------- b

c ------- x donde: c • b ÷ a = x c ------- x donde: a • b ÷ c = x

Líquido problema Mediciones

X Superficial

3

Realice la gráfica 2.2 en base a los resultados obtenidos:

Tensión

Superficial

en Dinas/cm

Líquidos problema

Gráfica 2.2

Experimento No. 6 Método de Arrancamiento o Balanza de Du`Nouy

Figura 2.8

En este método se utiliza una balanza de torsión como la mostrada en la figura 2.8.

El anillo se coloca contactando con la superficie del líquido problema, en el otro extremo de

la balanza se aplica una fuerza para separar el anillo del líquido, en este caso la fuerza

3

estará representada por el peso de un determinado número de gotas de agua destilada a

temperatura ambiente, que se depositaran en el tubo de ensaye.

La fórmula para obtener los valores de la T.S. mediante este método es la siguiente:

Donde: P = peso del agua destilada

T.S. = P ( fuerza) x 981cm/seg2

r = radio del anillo

4 x x r

Y se considera la duplicación del perímetro, 4 x x r, ya que hay dos líneas limítrofes

(capas) entre el líquido y el alambre, una en el exterior y otra en el interior del anillo.

Para este ejercicio se utilizarán los líquidos problema del ejercicio anterior. En este caso se

contará el número de gotas de agua destilada que se requieren en cada caso para romper

la T.S. de los diferentes líquidos problema. Anotando dichos valores en el cuadro

correspondiente.

Para la obtención de los resultados considera que:

a) 1 ml de agua destilada a temperatura ambiente proporciona aproximadamente 20

gotas

b) dicho ml de agua pesa aproximadamente 1 g.

Por lo tanto cada gota de agua pesa g.

Realiza los cálculos necesarios y anótalos en la tabla 2.3.

Tabla 2.3

Promedio Tensión

X Superficial

en Dinas/cm

Aguadestilada Temp.

Amb.

Solución de etanol al 50%

Agua destilada a 60 °C

Orina

Leche entera de vaca

3

Líquido problema Mediciones

1 2 3

Realiza una gráfica con los resultados obtenidos

Tensión

Superficial

en Dinas/cm

Líquidos problema

Gráfica 2.3

3

Cuestionario de Evaluación

1.- Menciona en que errores se puede incurrir al realizar las mediciones de un fenómeno.

2.- ¿A qué se le llama muestra no significativa?

3.- ¿De qué forma evitaremos un error por el tamaño de la muestra?

4.- Explica como modifica la sustancia batótona a la tensión superficial.

5.- Explica como la sustancia hipsótona afecta a la tensión superficial.

6.- Menciona algunos ejemplos de sustancias batótonas e hipsótonas.

7.- Menciona qué relación existe entre la tensión superficial y el timpanismo de los

rumiantes.

8.- Explica la importancia de que líquidos insecticidas, antisépticos y desinfectantes, tengan

baja tensión superficial.

9.- Explica cómo actúa la bilis sobre las grasas en el intestino.

Medidas de seguridad

Uso obligatorio de bata, guantes de látex y cubre bocas durante el desarrollo de la práctica.

Evitar contacto directo con el material biológico utilizado.

Disposición de desechos biológicos

El material biológico a utilizar en esta práctica (orina, leche), será inactivado con solución

de hipoclorito al 6% a partes iguales y vertido en la tarja.

El etanol será inactivado por dilución con agua corriente.

Incineración de acuerdo a la NOM-O87-ECOL-1995.- Que establece los requisitos para la

clasificación, separación, envasado, almacenamiento, recolección, transporte, tratamiento y

3

disposición final de los residuos peligrosos biológico infecciosos que se generen en

establecimientos que presten atención médica, tales como hospitales y consultorios

médicos, así como laboratorios clínicos, laboratorios de producción de biológicos, de

enseñanza y de investigación, tanto humanos como veterinarios.

Los residuos biológicos y los biológico infecciosos que se van a incinerar deberán

envasarse de acuerdo a lo indicado en la siguiente tabla.

Tipo de residuos Estado Físico Envasado Color

Sangre, cultivos y cepas Sólidos Bolsas de plástico Rojo

almacenadas de agentes calibre 200

infecciosos, residuos no

anatómicos derivados de la

atención a pacientes y de

los laboratorios.

Cualquier material biológico Líquidos Recipientes herméticos Rojo

no contaminado.de plástico

Objetos punzocortantes Sólidos Recipiente rígido de Rojo

usados y sin usar Plástico

3

Los residuos de material biológico y patológico deberán identificarse con los siguientes

datos:

1. Nombre del profesor responsable

2. Número de Laboratorio

3. Departamento

4. Tipo de residuo

Bibliografía

Jiménez Vargas – Macarulla. 1986. Fisicoquímica Fisiológica. 6ª. Ed. Interamericana

México.

Maron y Prutton. 2002. Fundamentos de Fisicoquímica ,28ª. Reimpresión, Ed. LIMUSA,

México.

Sanz Pedrero P. 2002. Fisicoquímica para Farmacia y Biología. 3ª. Reimpresión, Ed.

Masson, Barcelona 2002.

3

PRÁCTICA No. 3

VISCOSIDAD

Vínculo con el programa de estudios: unidad de aprendizaje No. 4

Cuestionario de Prerrequisitos

1.- Señale el concepto de viscosidad.

2.- ¿Cómo participa la adhesión en la viscosidad?

3.- ¿Cómo influye la cohesión en la viscosidad?

4.- ¿En qué unidades se mide la viscosidad?

5.- ¿Explique cómo se modifica la viscosidad por cambios de temperatura?

6.- ¿Qué efecto tiene el peso molecular sobre la viscosidad?

7.- ¿Al aumentar la concentración de soluto como se afecta la viscosidad?

8.- Señale que elementos constituyen a la sangre.

9.- Mencione la utilidad de la obtención de la desviación estándar en la estadística.

Objetivos

Conocer el valor de los métodos estadísticos más comunes.

Conocer cómo se determina la viscosidad relativa de diversos líquidos utilizando el

viscosímetro de Ostwald.

3

Introducción

En términos generales, el conocimiento tiene su origen en alguna forma de observación.

La observación puede consistir tan solo en comprobar que un fenómeno se presente o no y

en este caso se procede a hacer una enumeración o recuento.

También la observación puede suponer un proceso más complicado, como sería el

determinar la tensión superficial por el método de balanza de torsión, desarrollado en la

práctica anterior, y en este caso se realizará una medición.

Para efectuar un estudio de las observaciones cuantitativas, se requiere recopilar, analizar

y obtener conclusiones de los datos registrados. Para lo cual es necesario en primer lugar,

presentar los datos de una forma ordenada como lo exige un trabajo científico y con este

propósito podemos representar los datos obtenidos en forma de tablas y gráficas como las

siguientes:

Líquido Secuencia de No. de gotas requeridas para

medición romper la Tensión Superficial

Agua destilada 1 18

2 16

3 14

4 16

5 20

4

Etanol al 50% 1 16

2 12

3 17

4 15

5 18

Tabla 3.1

En la tabla 3.1 se presentan los valores registrados en el experimento de la balanza de

torsión, para comparar ambos líquidos en general.

Valores promedio

en gotas

Gráfica 3.1

En la gráfica 3.1 se presentan los valores obtenidos y se presenta la relación entre los

datos del mismo experimento, comparando los datos promedio que se obtuvieron para los

distintos líquidos utilizados en la determinación de la tensión superficial por el método de la

balanza de DuNoy.

4

El método estadístico establece procedimientos que facilitan la comparación y la relación

de los datos entre sí, con el fin de lograr una interpretación más objetiva.

Al considerar los valores de la tabla 3.1 ¿cuál de las cinco mediciones de cada líquido es la

correcta, si todas se efectuaron con la misma precisión?

En estos casos no existe ninguna razón para solo seleccionar alguna en forma parcial,

cuando lo más correcto es obtener el promedio de todas ellas, que se representa como X

.

Para calcular el promedio ó media aritmética se suman todos los datos y se dividen entre el

número total de datos:

La letra griega , sigma es el símbolo matemático utilizado para indicar que deben

sumarse los valores de la variable que le sigue.

X1 + X2 + X3 + X4 + Xn

X = -----------------------------------------

n

y en el caso específico del agua destilada:

18 +16 + 14 + 16 + 20

X = ---------------------------------------- = 16.8

5

4

Así tenemos que 16.8 es la cifra más próxima al valor

El promedio ó media es una medida de tendencia central, pero tiene la desventaja de

verse afectada por los valores extremos y no siempre es el "centro " de los datos, por lo

tanto, se pueden utilizar otras medidas de tendencia central, como la moda que

corresponde al valor que más se repite en la serie de datos recopilados y para nuestro

ejemplo corresponde al número 16.

La mediana equivale al valor del dato central, estos es, cuando acomodamos los datos en

orden progresivo ó de magnitud, el valor que tenga por arriba y por abajo igual número de

datos, se conoce como mediana y representa otra medida de tendencia central.

Ejemplo: 14

16

16 Mediana

18

20

Cuando el número de valores en la muestra es impar, la mediana corresponde al valor que

está en medio, como se observa en el ejemplo anterior. Pero si el número de valores es

par, se tomarán los dos números de valores centrales, se calculará el promedio y este

corresponderá al valor de la mediana.

En ocasiones las muestras observadas se distribuyen simétricamente por lo que coinciden

los tres valores de centralización que se han descrito.

Sin embargo otras veces la distribución de los valores es muy asimétrica, lo que significa

que los valores de la media, moda y mediana son tres valores diferentes, lo que hace

necesario medir el grado de dispersión que tiene nuestra muestra con respecto a un valor

4

2

central.

A medida que los datos se apartan del valor promedio, se afirma que aumenta la

desviación y para calcular el grado de dispersión de los datos obtenidos se aplicará la

prueba estadística denominada desviación típica de la muestra o estándar, que se

representa con la letra "S" (la S2

indica el grado de varianza) y se obtiene por medio de la

siguiente ecuación:

Donde la desviación estándar es la suma de las diferencias de todos los datos con su

promedio (desviaciones), elevadas al cuadrado y divididas entre "n -1", que en este caso

es 5 -1 = 4

Entonces se empieza por calcular la diferencia en valor absoluto, entre los valores de la

muestra y el promedio, lo que se representa por (X - X )

muestra X se le restará el valor promedio X

donde a cada valor de la

A continuación se desarrolla un ejemplo para calcular S

( X - X ) (X - X )

14 - 16.8 = - 2.8 7.84

16 - 16.8 = - 0.8 0.64

16 - 16.8 = - 0.8 0.64

S

S

4

18 - 16.8 = 1.2 1.44

20 - 16.8 = 3.2 10.24

────

20.8

(X - X )2 = 20.8

20.8

2 = ────

4

2 = 5.2

S = 2.28

Por lo tanto la distribución de los datos obtenidos se manifiesta de la siguiente manera:

16.8 2.28, esto es, que la totalidad de los datos de la muestra están comprendidos dentro

de un rango de 14.52 hasta 19.08.

La dinámica de los líquidos corporales cumple una función esencial para el organismo, los

vasos sanguíneos forman un circuito cerrado de conductos que llevan la sangre del

corazón a los tejidos y de estos al corazón.

El flujo de la sangre en los vasos, como el de algún líquido en tubos rígidos y estrechos

4

normalmente es de tipo laminar o perfilado:

Dentro del conducto, una capa infinitamente delgada de líquido hace contacto con la pared

sólida y se fija a ella por efecto de fuerzas de adhesión y avanza muy lentamente porque

experimenta un mayor nivel de fricción con la pared del recipiente. La siguiente capa por

efecto de las fuerzas de cohesión entre las moléculas de la misma naturaleza del líquido,

experimenta una fricción ó rozamiento de menor intensidad al deslizarse una capa de

líquido sobre otra.

La resistencia que ofrecen las moléculas para deslizar una capa sobre otra va

disminuyendo gradualmente hasta alcanzar una velocidad máxima en el centro del

conducto, es decir, que se forman una serie de capas moleculares concéntricas que van de

menor a mayor velocidad.

El flujo por capas ó flujo continuo es silencioso y las capas se deslizan suavemente sin

entremezclarse.

Pero al aumentar el diámetro del conducto, hasta alcanzar una velocidad crítica, el flujo

pasa a ser turbulento, donde las capas de líquido se entremezclan entre sí y generan

ruidos como ocurre en los grandes vasos sanguíneos (Figura 3.1).

a) b)

Esquema de flujo laminar (a) y flujo turbulento (b).

Figura 3.1

4

La viscosidad de cualquier líquido depende del tamaño, forma y naturaleza química de sus

moléculas.

El agua tiene un bajo peso molecular, pero debido al efecto de enlace del hidrógeno,

alcanza una viscosidad relativamente elevada. A 20°C la viscosidad del agua destilada

es de 0.01002 Poises (10.02 Milipoises) y se utiliza como un valor absoluto y constante.

•ή1=Viscosidad relativa• t1=Tiempo del líquido problema•d1=Densidad del líquido problema

•ή2=Viscosidad del agua destilada• t2=Tiempo del agua destilada•d2=Densidad del agua destilada

En la figura 3.2 se muestra el viscosímetro de Ostwald, instrumento mediante el cual se

valora la viscosidad de un volumen determinado de líquido, midiendo el tiempo que

requiere para fluir a través de un tubo capilar.

Este viscosímetro solo es útil para obtener la viscosidad relativa tomando como referencia

al agua destilada a temperatura ambiente; esto debido a que no existe uniformidad en el

diámetro del tubo capilar.

Figura 3.2

(t .d)ή

1=1 1 (ή)(t .d) 22 2

4

Material que proporciona el laboratorioMateriales y útiles diversos

Biológico1 Viscosímetro de Ostwald

Sangre 100 ml aproximadamente para la

obtención de:1 Vaso de precipitados

20 ml de Plasma

20 ml de Paquete celular + solución salina

fisiológica (SSF)

20 ml de Sangre

1 Pipeta de 10 ml

1 Propipeta de perilla

EquipoReactivos y Soluciones

Centrifuga20 ml Agua destilada

Tubos para centrifuga20 ml de Solución Salina Fisiológica (SSF)

Balanza de dos platos20 ml de Agua corriente

Material requerido al alumno

Guantes y 1 cronómetro

Desarrollo

Previo al desarrollo de la sesión práctica se llevara a cabo la obtención del paquete celular

y del plasma mediante el centrifugado de la muestra de sangre.

a) 70ml de sangre será distribuida en cantidades de 7ml en cada tubo.

b) Con la ayuda de la balanza se nivela el peso de los tubos para colocarlos dentro de

la centrífuga.

c) Estos tubos deberán ser colocados uno frente a otro para equilibrar el peso.

d) Una vez que se tienen todos los tubos (6), se cierra la centrifuga y se enciende

a) Por el extremo “A” se

introducen 10 ml del líquido

problema.

4

durante 8 a 10 min a 3000 rpm.

e) Es importante que una vez que el tiempo haya transcurrido se deje que la centrifuga

pare totalmente antes de abrir.

f) A cada tubo se le extrae el plasma (liquido claro), con la ayuda de una pipeta, y

depositarlo en un vaso de precipitado, hasta su utilización.

g) Para extraer el paquete celular es necesario adicionarle SSF, en una cantidad igual

a la del plasma retirado.

Una vez procesada la sangre se procederá a la cuantificación de la viscosidad relativa de

diversos líquidos y demostraremos los factores que influyen en los diferentes valores de

viscosidad. Así mismo nos apoyaremos en el manejo estadístico, para la interpretación de

los resultados.

Siguiendo el procedimiento señalado, lleva a cabo la medición de la viscosidad de los

siguientes líquidos: agua corriente, agua destilada a temperatura ambiente, SSF (solución

salina fisiológica), paquete celular + SSF, plasma y sangre. Anotando los resultados en los

cuadros correspondientes.

b) Por el extremo “E” succionar el

líquido

para hacerlo llegar hasta la mitad de

la

ampolla “D”. Ajustar el nivel del

líquido

hasta la marca 1.

c) Con un cronómetro medir eltiempo que tarda el líquido en fluir de la marca 1, hasta la marca 2.

4

5

RESULTADOS:

AGUA CORRIENTE

No. de Mediciones2

( X - X )

Mediciones (segundos)

( X - X )

1

2

3

4

5

Σ

S=

S=

(n-1)

AGUA DESTILADA (Temperatura ambiente)

2( X - X )

1

2

3

4

5

Σ

5

No. de Mediciones

( X - X )Mediciones (segundos)

S=S=

(n-1)

SOLUCIÓN SALINA FISIOLÓGICA

( X - X ) ( X - X )2

Mediciones(segundos)

1

2

3

4

5

Σ

5

No. de Mediciones

S=

(n-1)

S=

PLASMA

( X - X )Mediciones (segundos)

1

2

3

4

5

Σ

5

No. de Mediciones

( X - X )2

S=

(n-1) S=

PAQUETE CELULAR + SOLUCIÓN SALINA FISIOLÓGICA

2( X - X )

1

2

3

4

5

Σ

5

No. de Mediciones

( X - X )Mediciones (segundos)

S=S=

(n-1)

SANGRE

( X - X )Mediciones(segundos)

1

2

3

4

5

Σ

DENSIDADES (Valores de referencia) grs./cm3

5

No. De Mediciones

( X - X )2

S= S=

(n-1)

Agua Destilada SSF Sangre Plasma Paquete.

Globular + SSF

1 1.009 1.12 1.04 1.11

5

CUADRO GLOBAL DE RESULTADOS

Líquido problema

Tiempo X±S ViscosidadViscosidad relativa

(Segundos) relativa

(Regla de tres)(fórmula)

Agua corriente

Agua destilada (Tº

amb)

SSF

Plasma

Paquete celular +SSF

Sangre

Cuestionario de evaluación

1) ¿Cuál es el valor del de la viscosidad del agua destilada a 20°C?

2) ¿Qué constituyentes de la sangre contribuyen a su viscosidad?

3) ¿A qué se debe que el agua destilada, con un bajo peso molecular, tenga un alto valor

de la viscosidad?

4) ¿Cómo se realiza el flujo continuo ó laminar?

5) ¿De los elementos que contiene la sangre, cuál de ellos es el que contribuye en mayor

proporción a su viscosidad?

5

6) ¿Cómo se obtuvo el plasma sanguíneo?

7) ¿Cómo se afectaría la viscosidad de la sangre en los siguientes casos:

a) Diabetes

b) Deshidratación

c) Desnutrición (hipoproteinemia)

d) Anemia

9) ¿Por qué aumenta la viscosidad sanguínea en los bovinos afectados por el mal de las

alturas?

10) ¿Cómo se calcula el grado de dispersión de los datos obtenidos?

Disposición de desechos biológicos y no biológicos

Es importante establecer las condiciones mínimas de seguridad en el empleo de los

diversos materiales que se utilizan en el desarrollo de las sesiones prácticas del laboratorio

de Fisicoquímica Fisiológica.

El manejo y disposición inadecuados representa un riesgo para la salud, así como

ocasionar el deterioro del medio ambiente por lo que es necesario llevar acabo lo siguiente.

Referencias

-NORMA Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Protección ambiental - Salud

ambiental - Residuos peligrosos biológico-infecciosos, Clasificación y especificaciones de

manejo

Bibliografía

Atkins, P. W. 1991. Fisicoquímica. 3a

Ed. Editorial Addison-Wesley Iberoamericana.

México.

Jiménez Vargas, J. y Macarulla, J. M. 1989. Fisicoquímica Fisiológica. 6a Edición. Editorial

5

Interamericana. México.

Maron, S. H. y Prutton, C. F. 1999. Fundamentos de Fisicoquímica. 26ª. Editorial

Limusa. México.

5

P R Á C T I C A No.4

DIFUSIÓN Y ÓSMOSIS

Vínculo con el programa de estudios: Unidad de aprendizaje No. 6

Prerrequisitos

1) ¿En que nos apoyamos para formular una hipótesis?

2) ¿Que es una predicción?

3) Describa el fenómeno de la difusión.

4) Describa como ocurre el proceso de ósmosis.

5) Mencione la clasificación de las membranas en base a su permeabilidad.

6) ¿Por qué la membrana celular es selectivamente permeable?

7) ¿A qué se refiere la Ley de Fick?

8) ¿Por qué se caracteriza la difusión facilitada?

9) Mencione las características del transporte activo

10) Mencione que es miscibilidad.

Objetivos

Aprender a plantear una hipótesis.

Comprender la difusión y la ósmosis como mecanismos de transporte celular.

Entender la difusión en distintos estados físicos de la materia.

Identificar las diferencias entre la difusión y la ósmosis.

6

Introducción

La ciencia surge de la interacción de la mente humana con el universo, la observación de

los fenómenos que ocurren a nuestro alrededor ó el llevar a cabo un experimento en el

laboratorio, son hechos que obedecen al planteamiento de una pregunta sobre el proceso

observado.

Determinando las variables que participan en los acontecimientos y apoyándonos en lo que

se conoce y en lo que observamos, podemos formular una explicación previa denominada

hipótesis.

Diversas leyes de la naturaleza se manifiestan cuando diferentes moléculas de gases,

líquidos y sólidos son depositados en el mismo recipiente. Estas se desplazaran libremente

dependiendo de la masa y la energía cinética de cada tipo de molécula, aunque el

movimiento inicial se presenta en todas direcciones, la tendencia de desplazamiento de

todos los tipos de moléculas, es pasar de la región de mayor a la de menor concentración.

En la zona de mayor concentración obviamente existe un mayor número de moléculas, las

cuales debido a la agitación térmica generan un aumento en la energía cinética, esto en

combinación con el poco espacio existente entre ellas ocasionan un aumento en el número

de choques entre las paredes del recipiente y entre ellas mismas. Siendo estas colisiones

las que propician el desplazamiento molecular dirigido hacia la zona de menor

concentración, es decir, a favor de un gradiente de concentración, esto obedece a la Ley

de Fick, la cual establece que: "la velocidad de desplazamiento molecular es proporcional

al gradiente de concentración”.

El desplazamiento dirigido continúa hasta lograr una distribución homogénea en todo el

espacio disponible, y éste equilibrio dinámico se reconoce, porque el número de moléculas

que se desplaza en una dirección es igual al número de moléculas que se mueven en

dirección opuesta. En conjunto éste fenómeno recibe el nombre de difusión.

6

La difusión molecular entre sólidos está demostrada por la presencia de partículas de oro

en una barra de plata y partículas de plata en una barra de oro, las cuales han estado en

contacto por varios años.

En un organismo vivo, el fenómeno de difusión se presenta en dos formas:

- Desplazamiento de sustancias suspendidas en un medio acuoso, en el medio celular

interno.

- Intercambio de sustancias nutritivas y de deshecho, gases, hormonas y minerales entre el

medio externo y el medio interno.

Todas las células animales interactúan con el medio que las rodea, a través de un sistema

de barreras biológicas, denominadas membranas. Existen distintos tipos de membranas,

las permeables, semipermeables, dialíticas e impermeables.

El intercambio específico de agua en la célula, se lleva a cabo a través del comportamiento

de las membranas como semipermeables, tal es el caso de las membranas celular,

nuclear, mitocondrial, del retículo endoplásmico y del aparato de Golgi.

Cuando dos soluciones de diferente concentración de soluto, se encuentran separadas por

una membrana semipermeable, ambas soluciones se comunican entre sí a través de los

poros de la membrana, es a través de estos poros que se equilibra su diferencia de

concentraciones mediante un desplazamiento de moléculas de agua, de la zona de mayor

concentración de solvente a la región de menor concentración de solvente. A este proceso

en su conjunto se le denomina ósmosis.

6

Materiales que proporciona el laboratorio

Equipo:

Baño María.

Sacabocados.

Materiales diversos:

Trozo de papel filtro.

1 Soporte universal.

1 Vaso de precipitado de 200.

1 Gradilla metálica.

4 Portaobjetos de vidrio.

1 Pipeta de 1 ml.

1 Embudo de seguridad.

1 Pinza de “tres dedos”.

6 Tubos de ensaye.

1 Tubo de vidrio de 10 cm de long.

Reactivos:

Cristales de sulfato de cobre.

Gel alcalino.

Frasco con azul de metileno.

Aceite vegetal.

Ácido clorhídrico al 12%, 24% y 36%.

Solución de cloruro de sodio al 10%.

Membrana de colodión.

Material que debe traer el alumno:

3 ml de sangre en tubo vacutainer con anticoagulante (canino, bovino, equino, etc.).

Guantes de látex.

6

Ligas e hilo de algodón

Desarrollo

Los experimentos a desarrollar durante la práctica (1 al 3) deberán realizarse de manera

simultánea.

Experimento No. 1 Difusión de sólido en líquido

En dos tubos de ensaye de 15 ml coloque 10 ml de agua corriente y añada a cada uno de

los tubos un cristal de sulfato de cobre. Uno de los tubos será colocado en baño maría a

50°C, en tanto que el otro tubo permanecerá a temperatura ambiente.

Cuantifique el tiempo requerido para que en cada uno de los tubos se observe una difusión

homogénea del colorante, (en un tiempo máximo de 30 minutos), observando

constantemente.

Temp. Ambiente min. 50°C min.

Elabore una hipótesis que explique lo observado.

Experimento No. 2 Difusión de Líquido en Líquido

En dos tubos de ensaye de 15 ml coloque 10 ml de agua corriente y con una pipeta de 1 ml

coloque en la superficie de cada tubo 0.2 ml de una solución de azul de metileno,

deslizándolo por la pared del tubo teniendo cuidado de no agitar los tubos. Uno de los

6

tubos será colocado a 50°C en baño maría, y el otro permanecerá a temperatura ambiente.

Cuantifique el tiempo requerido en cada tubo, para que se observe la difusión homogénea

del colorante. (Este fenómeno se lleva acabo en un corto tiempo, observar

constantemente)

Temp. Ambiente min. 50°C min.

Elabore una hipótesis que explique lo observado.

Experimento No. 3 Difusión en dos líquidos no Miscibles

A dos tubos de ensaye de 15 ml se les agregan 5 ml de agua corriente, posteriormente

agregar a cada tubo 3 ml de aceite vegetal, con una pipeta, de tal forma que el aceite se

deslice por la pared del tubo de ensaye, evitando la mezcla de los líquidos.

Sobre la superficie del aceite, de ambos tubos, deposite un poco de azul de metileno en

polvo.

Uno de los tubos será colocado a baño maría a una temperatura de 50°C y el otro

permanecerá a temperatura ambiente.

Cuantifique el tiempo de difusión del azul de metileno en ambos líquidos, en cada uno de

los tubos (en un tiempo máximo de 30 minutos), observando constantemente.

6

Temp. Ambiente min. 50°C min.

Elabore una hipótesis que explique lo observado.

Experimento No.4 Difusión de líquido a distintas concentraciones, en un medio

sólido.

La fenolftaleína es un indicador de pH alcalino que para este ejercicio se mezcla con

hidróxido de sodio (esta mezcla se torna de color rojo) y gel de grenetina. Esta mezcla se

deposita en una caja de Petri y se deja solidificar.

En la caja de Petri se hacen tres orificios con un sacabocados, y en cada uno de ellos se

depositaran 0.2 ml de una solución de Ácido Clorhídrico al 12%, 24% y 36%,

respectivamente.

A los cinco minutos posteriores a la aplicación del ácido, medir el área decolorada,

repitiendo la medición tres veces más, con intervalos de 5 minutos.

Elabore una gráfica de concentración contra velocidad de difusión.

6

Velocidad

Concentración del ácido

Gráfica 4.1

Elabore una hipótesis que explique lo observado.

Experimento No. 5 Difusión de Gases

En un segmento de tubo de vidrio de 10 cm de longitud y 1 cm de diámetro, coloque en

cada extremo un pedazo de papel filtro, a continuación en uno de los extremos deposite

unas gotas de Amoniaco y en el otro unas gotas de Ácido Sulfúrico, sellando

inmediatamente ambos extremos del tubo con los dedos, previa colocación de guantes. (El

empleo de ácidos en los experimentos requiere el uso obligatorio de guantes).

Dibuje el fenómeno observado.

Elabore una hipótesis que explique lo observado.

6

.

Experimento No. 6 Osmosis con membrana semipermeable artificial

Coloque una membrana semipermeable artificial (colodión) o biológica (buche de pollo) en

la base de un embudo de seguridad (ver Figura 4.1) y sujétela firmemente con un hilo o

liga, coloque este dispositivo en un soporte universal. Proceda a llenar el embudo con una

solución de Cloruro de sodio al 10% teñida con azul de metileno, hasta el sitio donde

termina la ampolla del embudo y empieza el tubo de vidrio, acto seguido sumerja el

embudo en un vaso de precipitados que contenga agua destilada, de tal forma que el nivel

del liquido externo coincida con el nivel del liquido dentro del embudo y observe el

fenómeno que ocurre, anotando cada minuto los mm (de líquido) desplazados hacia el tubo

de vidrio, por efecto del fenómeno de ósmosis.

Fig. 4.1

6

Realice una gráfica

Ascenso del

líquido en ml

Tiempo en minutos

Gráfica 4.2

Elabore una hipótesis que explique lo observado.

Experimento No. 7 Ósmosis a través de una membrana biológica, utilizando eritrocitos.

A) En tres tubos de ensaye deposite un 1 ml de sangre fresca, cuidando que esta se

deslice suavemente por las paredes del tubo, y posteriormente a cada tubo agregue lo

siguiente:

6

Al tubo 1 5 ml de una solución de Na Cl al 0.3% o agua

destilada

Al tubo 2 5 ml de una solución de Na Cl al 0.9%

Al tubo 3 5 ml de una solución de Na Cl al 3% o glucosa al

50%

Elabore una hipótesis que explique el fenómeno que se observará.

Deje reposar los tubos durante 10 minutos; Transcurrido este tiempo observe los tubos en

contra de la luz y anote los cambios que se observan.

Tubo1

Tubo2

Tubo3

7

El empleo de sangre en los experimentos requiere el uso obligatorio de guantes.

B) Tome una gota de cada uno de los tubos anteriores y colóquela en los respectivos

portaobjetos a fin de realizar los frotis correspondientes y observarlos al

microscopio (iniciando con el objetivo 10x y posteriormente con 40x). Anote lo

observado.

Tubo Tonicidad Efecto observado Nombre del efecto

1

2

3

Tabla 4.1

A continuación dibuje los cambios observados en los eritrocitos

Muestra

1

2

3

Tabla 4.2

7

Cuestionario de evaluación

1) ¿Qué elementos constituyen una hipótesis?

2) ¿Que coeficiente térmico tienen la difusión y la ósmosis?

3) ¿A que se le llama convección?

4) ¿Qué efecto tienen sobre la difusión en sólido distintas concentraciones de la misma

solución?

5) Explique, ¿a qué se debe la diferencia de tiempo en la difusión sólido-líquido, líquido-

líquido y entre dos líquidos no miscibles?

6) ¿Que factor te permitió observar la difusión del ácido en el gel?

7) ¿Cuál es el valor de la presión osmótica dentro de los eritrocitos, y que elementos la

determinan?

8) ¿Cómo es una solución hipotónica y que efecto tiene en los eritrocitos?

9) ¿Por qué se caracteriza una solución isotónica?

10) ¿Qué efecto produce en los eritrocitos una solución hipertónica y a que se debe?

7

Manejo de residuos peligrosos biológicos y no biológicos

Residuos Sangre Será depositada en un NOM-087-ECOL-SSA-

BiológicosBuche de

recipiente rígido de color rojo, 2002

pollopara su posterior incineración.

Residuos Soluciones Los geles usados se dispondrán NOM-018-STPS-2000

Químicos deácido en bolsas de plástico.

clorhídricoLos ácidos se recolectaran en

un recipiente específico y se

neutralizaran para su posterior

desecho en la tarja.

Bibliografía.

Jiménez Vargas – Macarulla. 1986. Fisicoquímica Fisiológica. 6ª. Ed. Editorial

Interamericana México.

Maron y Prutton. 2002 Fundamentos de Fisicoquímica. 28ª. Reimpresión, Editorial LIMUSA

México.

Sanz Pedrero P. 2002. Fisicoquímica para Farmacia y Biología. 3ª. Reimpresión, Editorial

Masson, Barcelona.

7

P R Á C T I C A No.5

DISOCIACIÓN ELECTROLITICA y pH

Vínculo con el programa de estudios: unidades de aprendizaje No. 7 y No. 8

Prerrequisitos

1) ¿Qué es un diseño experimental?

2) ¿Cómo se comprueba la validez de una hipótesis?

3) Mencione el concepto de electrolito.

4) ¿Qué tipos de sustancias constituyen a los electrolitos?

5) ¿Qué son los aniones y los cationes?

6) ¿Qué es lo que caracteriza a un ácido?

7) ¿Por qué se distingue una base?

8) Mencione el concepto de pH.

9) Defina disociación electrolítica.

10) ¿Qué factores intervienen en la digestión en el estómago de los monogástricos?

Objetivos

Comprender los principios básicos para elaborar un diseño experimental.

Valorar la importancia de incluir en un diseño un grupo control y un grupo

experimental.

Identificar las ventajas entre el diseño bivalente y el multivalente.

Conocer el mecanismo de la conductividad eléctrica.

Conocer el concepto de pH y métodos para su determinación.

7

Introducción

El conocimiento de cualquier fenómeno, contempla dos etapas bien definidas:

- En la primera etapa se realiza una observación sistematizada, y su importancia radica en

llevarla a cabo manteniendo las condiciones naturales del fenómeno en estudio y de esto

se deducen explicaciones tentativas denominadas Hipótesis, planteadas con el fin de

predecir los resultados que podríamos obtener en determinadas circunstancias

- La segunda etapa corresponde a la experimentación que se lleva a cabo para demostrar

una predicción y comprobar la validez de una hipótesis, y los resultados generados se

comparan con la hipótesis planteada inicialmente.

Un diseño experimental es el plan ó la descripción de algún proceso que se piensa

realizar, con el propósito de descartar ó afirmar la hipótesis propuesta.

Para efectuar el diseño de un experimento se requiere tener un buen conocimiento del

campo de la investigación, además de una buena imaginación, pues ésta etapa del diseño

experimental es la parte más creativa del quehacer científico para realizar el experimento

con los recursos disponibles, ya que con frecuencia se debe sustituir el equipo más

costoso con talento.

El diseño de un experimento debe contemplar, que tanto el análisis de los resultados así

como la interpretación final, sean sencillos, por lo cual en términos generales, se considera

más apropiado el modificar una variable independiente por cada hipótesis y el diseñar un

experimento para cada hipótesis.

Con el propósito de analizar la modificación de la variable dependiente se utiliza un

parámetro de comparación, que no se modifique por causa de la variable independiente, y

a este parámetro se le conoce como grupo control o grupo testigo.

De tal forma que al realizar un experimento debe contemplarse la utilización de al menos

dos grupos ó lotes de trabajo:

7

- Grupo control o testigo.- En este se incluyen todos los factores que pueden modificar a

la variable dependiente, con excepción de la variable independiente.

- Grupo experimental.- Es en el que además de incluir a los factores anteriormente

señalados, se le aplica la variable independiente que se está investigando.

La experimentación tiene la finalidad de encontrar la relación entre las dos variables la

independiente y la dependiente.

El valor de la variable dependiente cambia en función de la variable independiente, y éste

cambio demuestra la relación funcional entre ambas variables.

El diseño experimental puede incluir la utilización de dos ó más variables independientes,

por lo cual existen dos tipos de diseño:

Diseño Simple, Bivalente o Bidimensional

Es cuando se analiza la relación funcional entre una sola variable independiente y su

correspondiente variable dependiente.

Por ejemplo el hecho de agregar una solución hipotónica al 0.5% de NaCl a 0.5 ml de

sangre completa, constituye la variable independiente y la ósmosis que se presenta en los

eritrocitos corresponde a la variable dependiente.

Diseño Multivalente

Es cuando se realiza el análisis de la relación funcional entre dos ó más variables

independientes y sus respectivas variables dependientes.

Cabe señalar que cada variable independiente puede presentar distintos grados ó

variaciones y entonces recibirá el nombre de diseño factorial.

Por ejemplo en la difusión de líquido en sólido (utilizando un gel de grenetina con

7

fenolftaleina como indicador alcalino) el HCl corresponde a la variable independiente, y

ésta presentó tres concentraciones: 12%, 24% y 36%.

Podríamos sumar otra variable independiente como la temperatura y darle también tres

variaciones, preparando tres geles, cada uno con dos concentraciones de HCl: 12 y 36%, y

colocándolos de la siguiente manera:

- Un gel en una estufa bacteriológica a 40ºC

- Un gel a temperatura ambiente 20ºC aprox.

- Un gel dentro del refrigerador a 4ºC

Todos durante un tiempo determinado. De esta forma se manejarían en total dos variables

independientes, una con dos variaciones y otra con tres variaciones:

- Primera variable independiente: Ácido clorhídrico (HCl)

a) 12%

b) 36%

- Segunda variable independiente: Temperatura

a) 4ºC

b) 20ºC

c) 40ºC

En este caso el tipo de diseño factorial es de 2 x 3 = 6, es decir, 6 tratamientos diferentes y

la variable dependiente sujeta a medición, en este experimento es la magnitud de la

difusión del ácido clorhídrico en el medio alcalino.

Sí colocáramos un gel con las tres concentraciones de HCl a 40ºC, otro gel igual a 20ºC y

7

por último otro a 4ºC, aumentaríamos el número de variables independientes y el diseño

factorial equivaldría a 3 x 3 = 9 , ó sea 9 tratamientos distintos.

También podríamos manejar otra variable independiente, que sería el tiempo de exposición

para los distintos tratamientos, con lo cual aumentaríamos las posibilidades del diseño

factorial.

La complejidad de éstos diseños factoriales en los que se manejan una gran cantidad de

variables independientes, se ve compensada con la enorme cantidad de información que

de ellas se obtiene. Al aumentar el número de valores, aumenta la precisión del diseño

experimental; las conclusiones son más confiables y se reduce el margen de error, para

aceptar ó rechazar la hipótesis que formulamos inicialmente.

El principal medio líquido de la célula es el agua, donde los solutos se encuentran

disueltos, formando parte del protoplasma, donde contribuyen al desarrollo de diversas

reacciones celulares, como los electrólitos que actúan a nivel de la membrana celular para

transmitir impulsos electroquímicos en el nervio y fibras musculares.

Los electrólitos están representados por ácidos, bases y sales, conducen la corriente

eléctrica al fraccionar sus moléculas en la misma cantidad de iones positivos y negativos,

los cuales se desplazan en un campo eléctrico, hacia sus respectivos polos por atracción

de cargas opuestas.

Al disociarse los ácidos liberan iones positivos en forma de iones hidrógeno. La disociación

de las bases libera iones oxhidrilo, que son iones negativos.

La combinación de ácidos y bases generalmente producen agua y sales, como por ejemplo

en la siguiente reacción:

HCl + NaOH H2O + NaCl

7

,

H = 1

La magnitud de la disociación electrolítica del agua equivale a una diezmillonésima, que

también se representa como 10-7

y en este caso se liberan la misma cantidad de iones

positivos, representados por el ión hidrógeno:+ -7

, que de iones negativos

representados por el ión oxhidrilo : OH-7

= 10-7

, manifestando a éste nivel un equilibrio en

la concentración de iones ácidos y alcalinos que determinan una reacción neutra.

Para indicar la concentración de iones hidrógeno, a lo que se conoce como Potencial de

Hidrogeniones - pH -, se estableció una escala logarítmica del 0 al 14 donde la reacción

neutra se ubica en el pH 7.

Las soluciones con un pH menor a 7 se consideran ácidas, en tanto que las de un pH

superior a 7 se clasifican como alcalinas.

Conducción electrolítica.- En los conductores electrolíticos que incluyen soluciones de

electrólitos fuertes y débiles y sales sólidas como el cloruro de sodio, la transferencia

electrónica tiene lugar por la migración iónica positiva y negativa hacia los electrodos.

Esta migración involucra una transferencia de electricidad y el transporte de materia de una

parte a otra del conductor.

Además el flujo de corriente en los conductores electrolíticos va siempre acompañado de

cambios químicos en los electrodos, que son muy característicos y específicos de las

sustancias que componen al conductor y los electrodos.

El mecanismo por el cual una corriente eléctrica pasa por una solución, se explica de

manera simple con el siguiente ejemplo, en el que se usa NaCl (Fig. 5.1)

7

Cationes (Na+, H+), Aniones (Cl-, OH-)

Figura 5.1 Proceso de Electrólisis del NaCl.

El electrodo "A" conectado al polo negativo de la fuente de energía "C", corresponde al

cátodo y se caracteriza por ser la vía de entrada de los electrones a la solución.

El electrodo "B" conectado al polo positivo de la fuente de energía "C", corresponde al

ánodo y se caracteriza por ser la vía de salida de los electrones de la solución.

En la solución tenemos iones de cloro y sodio y también algunos de hidrógeno y oxhidrilo,

debido a la ligera disociación del agua.

Los electrones entran a la solución por el cátodo "A" y al combinarse con los iones H+

forman el elemento monoatómico, de acuerdo a la siguiente reacción donde se combinan 2

átomos de hidrógeno, formando una molécula de gas que escapa del electrodo:

+ -2H + 2e 2H

2H H2 (gas)

Los electrones abandonan la solución a nivel del ánodo "B", por descarga de los iones

cloro y cada uno de estos produce un electrón, formándose un átomo de cloro.

8

Los electrones liberados fluyen por el circuito externo desde el electrodo "B", hasta la

fuente de energía "C", mientras que los átomos de cloro se combinan entre sí, para

formar cloro gaseoso, que escapa del electrodo.

2Cl-

2 Cl-

+ 2e-

2Cl Cl2 (gas)

El resultado neto es una transferencia de dos electrones del cátodo al ánodo. Al estar

cerrado el circuito los iones negativos van hacia el ánodo por lo que genéricamente se les

denomina aniones, en tanto, que los iones positivos van hacia el cátodo por lo que se les

denomina cationes.

Como estas partículas están cargadas eléctricamente, su movimiento constituye una

corriente eléctrica. A todo el proceso en su conjunto se le conoce como Electrólisis.

Materiales que proporciona el laboratorio

Equipo

Dispositivo para electrólisis (vaso de precipitados de 100 ml, juego de electrodos,

foco y fuente de energía - pila de 9 volts o convertidor/eliminador de corriente de 3 -

12 volts).

Balanza.

Baño María con termómetro.

Potenciómetro.

Materiales diversos

3 vasos de precipitados.

20 tubos de ensaye.

Un vidrio de reloj.

Una gradilla.

8

Reactivos

Papel Tornasol.

Frasco gotero con Indicador Universal.

Frascos goteros con diversos Indicadores.

Soluciones a pH 1, 3, 7, 10 y 14.

Solución de pepsina al 0.1%.

Solución de etanol al 5%.

Solución de azúcar al 5%.

Solución de NaCl al 5%.

Solución de acido clorhídrico al 5%.

Solución de hidróxido de sodio al 5%.

Material que debe traer el alumno:

Azúcar granulada.

Sal de mesa.

5 gramos de carne fresca de res molida.

Guantes de látex.

.

Desarrollo

Experimento No. 1

Utilizando el material y el dispositivo mostrado en la figura 5.1, realice el proceso de

electrólisis, utilizando como variables independientes, las siguientes sustancias: (El

manejo de ácidos durante la práctica, requiere de uso obligatorio de guantes).

Orina

Leche

Suero sanguíneo

8

Efecto observado

Solución de ácido clorhídrico al 5 %

Solución de hidróxido de sodio al 5%

Solución de azúcar al 5%

Etanol al 5%

Solución de NaCl al 5%

Experimento No. 2

Determine el valor del pH de las tres soluciones (orina, leche y suero sanguíneo) mediante

el uso de papel tornasol.

Resultados con el papel tornasol

Muestra Color observado pH

Posteriormente se depositará 1 ml en cada una de las soluciones anteriores en un tubo de

8

ensaye junto con 1 gota del indicador para pH, de los indicadores que te proporcionara el

instructor.

Cambio de color

Indicador pK Intervalo de pH Ácido Color neutro Alcalino

Violeta de metilo 1 Amarillo Verde azulado Violeta

Azul de timol 1.52 1.2- 2.8

Anaranjado de metilo 3.7 3.1- 4.4

Azul de bromofenol 3.98 3.0- 4.5

Rojo congo 4.0 3.0- 5.0

Verde de bromocresol 4.67 3.8- 5.4

Rojo de metilo 5.2 4.2- 6.3

Púrpura de bromocresol 6.3 5.2- 6.8

Tornasol 6.8 4.5- 8.3

Azul de bromotimol 7.0 6.0- 7.6

Rojo de fenol 7.2 6.8- 8.4

Rojo neutro 7.3 6.8- 8.0

Rojo cresol 8.3 7.2- 8.8

a-Naftotaleina 8.3 7.3- 8.7

Azul de timol 8.9 8.0- 9.6

Fenoftaleina 8.9 8.3- 10.0 I

Timolftaleina 9.4 9.2- 10.6 I

Amarillo de alizarina -- 10.1 - 12.0 Amarillo

Nitramina -- 11.0 - 13.0 Incoloro

Cuadro 5.1 Intervalos del pH y cambios de color de algunos indicadores

Rojo Anaranjado Amarillo

Rojo Anaranjado Amarillo

Amarillo Verde Azul

Azul Violeta Rojo

Amarillo Verde Verde azulado

Rojo Anaranjado Amarillo

Amarillo Anaranjado Púrpura

Rojo Púrpura Azul

Amarillo Verde Azul

Amarillo Anaranjado Rojo

Rojo Anaranjado Amarillo

Amarillo Anaranjado Rojo

Rojo Púrpura Azul

Amarillo Verde Azul

ncoloro Rosado Rojo

ncoloro Azul claro Azul

Anaranjado Lila

Pardo claro Pardo anaranjado

8

Muestra Indicador Color observado pH

Orina Rojo de

Leche Metilo

Suero sanguíneo

Orina Fenoftaleína

Leche

Suero sanguíneo

Orina Azul de

Leche Bromotimol

Suero sanguíneo

Tabla 5.1 Resultados indicadores.

Orina

Leche

Suero sanguíneo

8

Para verificar los resultados se utilizara el indicador Universal de Kolthoff, comparando el

color obtenido, con los colores que se señalan en la siguiente escala:

pH Color Ph Color

1 – 2 Rojo 7 Amarillo verdoso

3 Rojo anaranjado 8 Verde

4 Anaranjado 9 – 10 Azul verdoso

5 Amarillo 11 – 12 Azul Violáceo

anaranjado

6 Amarillo limón 13 – 14 Violeta

Cuadro 5.2 Intervalos de pH y cambios de color con indicador universal.

Muestra Color observado pH

Tabla 5.2 Resultados indicador universal.

Por último corrobora los resultados obtenidos en el potenciómetro (Fig. 5.2), colocando 3

ml de cada una de las soluciones anteriores en diferentes vasos de precipitado. (Teniendo

cuidado de que el electrodo del potenciómetro sea cubierto por completo por la solución).

Orina

Leche

Suero sanguíneo

8

Fig. 5.2 El potenciómetro

Muestra Color observado pH

Tabla 5.3 Resultados potenciómetro.

Experimento No. 3

A continuación se desarrollará un diseño experimental que simulará el proceso de la

digestión en el estómago. Para lo cual utilizaremos la pepsina, que es una enzima

proteolítica producida en estómago y como sustrato proteico se usara carne molida fresca.

Como medio para la acción enzimática tendremos soluciones con diferentes valores de pH.

Dentro del material que se proporcionará hay soluciones con los siguientes valores de pH:

1, 3, 7,10 y 14. El procedimiento es el siguiente: se usaran dos series de 5 tubos cada una,

se tomarán 7 ml de cada solución, mismos que se irán depositando en sendos tubos de

ensaye, los cuales se enumerarán del 1 al 5.

Posteriormente a cada tubo se agrega 1 gramo de carne y 3 ml de la solución de pepsina

8

al 0.1%. Una vez realizado esto, una serie de tubos se colocara en un baño maría a una

temperatura de 37°C, mientras que la otra serie se dejara a temperatura ambiente, en

ambos casos durante unos 30 minutos.

Después del tiempo indicado observar y anotar los siguientes cambios observados:

Temperatura

pH Coloración Aspecto de la Presencia y Coloración

carne cantidad de de la

burbujas solución

Ambiente

1

3

7

10

14

Baño Maria

1

3

7

10

14

Tabla 5.4

8

Elabore una hipótesis que explique lo observado, señalando además cuales fueron las

variables independientes, las variables dependientes y los parámetros.

Cuestionario de Evaluación

1) ¿Qué objetivo tiene el diseño experimental?

2) ¿Por qué se caracteriza el grupo control?

3) ¿Por qué se caracteriza el grupo experimental?

4) Describa el diseño bivalente o bidimensional

5) Explique las ventajas del diseño multivalente

6) ¿Qué diferencias hay entre ionización y disociación?

7) ¿En un campo eléctrico hacia adonde se desplazan los electrones, y por qué?

8) ¿Que es un electrolito débil y electrolito fuerte?

9) ¿De los métodos utilizados para medir el pH, cual fue el mas preciso y por qué?

10) ¿Qué influencia tienen la temperatura y el pH sobre la acción de la pepsina en la

digestión in vitro?

8

Manejo de residuos peligrosos biológicos y no biológicos

Residuos Carne Será depositada en un NOM-087-ECOL-SSA-

Biológicos molida recipiente rígido de color rojo, 2002

para su posterior incineración.

Residuos Soluciones NOM-018-STPS-2000

Químicos deácidoLos ácidos se recolectarán en

Clorhídricoun recipiente específico y se

neutralizaran para su posterior

desecho en la tarja.

El manejo de ácidos durante la práctica, requiere de uso obligatorio de guantes.

Bibliografía.

Atkins, P. W. 1991 Fisicoquímica. 3a

Edición. Editorial Addison-Wesley Iberoamericana.

México.

Jiménez Vargas – Macarulla. 1986. Fisicoquímica Fisiológica. 6ª. Edición, Editorial

Interamericana, México.

Maron y Prutton. 2002. Fundamentos de Fisicoquímica. 28ª. Reimpresión, Editorial

LIMUSA México.

9

P R Á C T I C A No.6

ESTADO GASEOSO

Vínculo con el programa de estudios: unidad de aprendizaje No. 10

Prerrequisitos

1) Anote el concepto de gas.

2) Describa las características de los gases.

3) Describa las propiedades de los gases.

4) Enuncie las siguientes leyes de los

gases: - Ley de Boyle Mariotte.

- Ley de Gay Lussac.

- Ley de Charles.

- Ley de Avogadro.

- Ley de Dalton.

- Ley de Henry.

- Ley de Graham.

- Ley de Fick.

Objetivos

Integrar los conceptos acerca del método científico adquiridos en prácticas previas.

Comprender en forma experimental las principales leyes de los gases.

Relacionar las leyes de los gases con los procesos fisiológicos del intercambio

gaseoso en el organismo.

9

Introducción

Teoría

Es un sistema lógico compuesto de observaciones, axiomas y postulados que tiene como

objetivo declarar bajo qué condiciones se desarrollaran ciertos supuestos, tomando como

contexto una explicación del medio idóneo para que se desarrollen las predicciones. A raíz

de esta, se pueden especular, deducir y/o postular mediante ciertas reglas o

razonamientos otros posibles hechos.

Ley

Una ley científica es una proposición que afirma una relación constante entre dos más

variables las cuales representan una propiedad de sistemas concretos.

En otras palabras la ley es una hipótesis científica confirmada que afirma una relación

constante entre dos o más variables.

Las hipótesis sobre un mismo fenómeno demostradas por abundantes experimentos;

efectuados en diversas instituciones y por diferentes experimentadores proporcionan las

bases para implementar una teoría.

Al aplicar una teoría en forma eficaz para comprender las causas y efectos del fenómeno

que se comprueba y obedece las leyes universales; entonces pasa a ser considerada

como una ley.

Los seres vivos nos encontramos constituidos por sólidos, líquidos y gas, Incluso estamos

rodeados de una atmósfera compuesta de una mezcla de gases. También encontramos

gases en otras formas como los gases anestésicos, desinfectantes, gases medicinales, etc.

Los gases son manifestaciones de la materia que tienen la característica de presentar

variaciones considerables en el volumen por efecto de cambios en la presión y la

temperatura. Son amorfos, no tienen superficie, posee la propiedad de expansibilidad y

compresibilidad, además de poderse mezclar en el mismo recipiente.

9

Los gases tienen densidad menor que los sólidos y líquidos debido al gran espacio que

existe entre las moléculas. La fuerza de cohesión es mínima entre sus moléculas y

poseen gran energía cinética lo cual ocasiona un movimiento errático.

El aire atmosférico tiene una composición aproximada de 78% de nitrógeno, 21% de

oxigeno, 0.04% de bióxido de carbono y 0.96% de gases raros. La presión total de esta

mezcla, a nivel del mar es de 760 mm Hg, por lo tanto cada gas contribuye a la presión

total en proporción directa de su concentración. Así el nitrógeno contribuye con 592 mm Hg

y el oxigeno con 160 mm Hg; de tal manera la presión total es la suma de las presiones

parciales.

El oxigeno y el bióxido de carbono que intervienen en el fenómeno de la respiración son

moléculas que se mueven disueltas en los líquidos y los tejidos del organismo. La difusión

ocurre por el movimiento cinético de las moléculas y por efectos de gradientes de

concentración.

Material que proporciona el laboratorio

Equipo

1 Manómetro de presión (mm Hg).

1 parrilla eléctrica con rejilla.

Material Diverso

1 Mechero de gas. 1 Pinza Mohor.

1 caja de petri. 1 jeringa de 20 ml.

1 vaso de precipitados de 50 ml. 1 juego de mangueras de hule.

1 Soporte universal. 1 tripié.

1 Malla de asbesto. 1 Matraz Erlenmeyer 1000 ml

1 Barra de sujeción. 1 Termómetro.

1 Conector “T” de vidrio. 1 Probeta de 1000ml.

1 Tubo de vidrio de 30 cm.

9

Reactivos

1 Bolsa con cal sodada.

Material que debe traer alumno

1 Globo de hule.

Ligas.

1 Vela de 7cm de longitud por 0.5 cm de diámetro.

Cerillos.

9

Desarrollo

Experimento No. 1

Tal y como se indica en la figura e imagen anterior, mediante una nuez sujeta la varilla en

el extremo superior del soporte universal; ahora fija el manómetro en la varilla y conéctalo a

la jeringa mediante una manguera de hule. Trata de sincronizar la escala mínima del

manómetro (0 mm de Hg) con el volumen total de la jeringa (20 ml). Presiona lentamente el

émbolo de la jeringa, y anote en el sistema de coordenadas (Gráfica 6.1) los valores

observados.

Traza una gráfica e infiere una conclusión

Volumen

ml

Presión en mm de Hg (Gráfica 6.1)

¿A qué Ley del estado gaseoso se refiere el experimento?

9

¿De acuerdo al experimento, si un organismo es sometido a una presión atmosférica muy

elevada, que alteraciones fisiológicas se pueden presentar?

R.

Experimento No. 2

Fig.6.1 Fig. 6.2

Coloque los instrumentos de trabajo de acuerdo a las figuras 6.1 y 6.2, y proceda de la

siguiente manera: anote la temperatura inicial y encienda el mechero. Anote los valores de

presión observados al ir aumentando la temperatura y regístrelos en un sistema de

coordenadas (Gráfica 6.2) para que finalmente trace la gráfica correspondiente e infiera

una conclusión

9

Temperatura °C

Presión mm de Hg

Gráfica 6.2

¿A qué ley del estado gaseoso se refiere el experimento anterior, cuáles fueron las

variables dependiente e independiente?

R

9

Con base en los resultados anteriores realice la hipótesis correspondiente.

Experimento No. 3

Coloque los instrumentos de trabajo de acuerdo a las figuras 6.3 y 6.4 y proceda de la

siguiente manera: infle el globo desconectando una de las mangueras hasta alcanzar una

presión constante de 20 mm de Hg. Mantenga esta presión exacta regulando el émbolo de

la jeringa (es muy importante evitar la oclusión de alguna de las mangueras).

Fig. 6.3 Fig. 6.4

Comience a introducir el globo al agua y anote, por cada 5 cm de profundidad, el aumento

de presión que corresponde. Trace la gráfica correspondiente y elabore una conclusión.

9

Profundidad

cm

Presión mm de Hg

Gráfica 6.3

¿A qué fenómeno físico se refiere el experimento y que ley de los gases se demuestra?

R.

9

¿Por qué es peligroso el rápido ascenso de un buzo, desde una gran profundidad en el

mar?

R.

Experimento No. 4

En una caja de Petri proceda a verter unas gotas de parafina sobre el centro, por medio de

una vela encendida (Fig.6.5). Enseguida coloque la vela sin apagar sobre la misma.

Posteriormente vierta 20 ml de agua corriente sobre la misma caja de Petri. A continuación

coloque un vaso de precipitados invertido sobre la vela. Anote sus observaciones.

Figura 6.5

Explique lo sucedido dentro del vaso de precipitado, desde un punto de vista fisicoquímico.

R.

1

Experimento No 5

Monta el dispositivo de trabajo de acuerdo a lo mostrado en la siguiente figura:

Fig.6.6 Fig. 6.7

Utilizando la jeringa, introduce aire suficiente para establecer una presión inicial de 40 a 60

mm de Hg

En el matraz se encuentra un ratón, mismo que al estar respirando va a consumir el

oxígeno y a desechar bióxido de carbono. La cal sodada que también se encuentra dentro

del recipiente se encargará de adsorber el bióxido de carbono.

Ambos factores van a determinar la formación de un vacío, debido a la disminución en los

volúmenes y por lo tanto de las presiones correspondientes al oxígeno y al bióxido de

carbono, dentro del recipiente.

Describe lo observado y menciona que ley de los gases se relaciona con dichos

cambios de presión.

1

Realiza un cálculo matemático de las presiones de los gases contenidos en el matraz.

Menciona una aplicación medico-biológica del experimento anterior.

Cuestionario de Evaluación

1.- ¿En qué momento una hipótesis se convierte en teoría?

2.- ¿En qué momento una teoría se acepta como ley?

3.- Explique la teoría cinética de los gases.

4- ¿Qué es la presión atmosférica y como se distribuyen sus porcentajes de gases?

1

3

5.- ¿Qué ocurre con la presión atmosférica a medida que ascendemos sobre el nivel del

mar?

6. ¿Qué cambios experimenta un bovino cuando se somete a cambios de altura muy

rápidos o muy grandes?

7.- ¿Cómo se modifica la presión hidrostática, cuando se desciende bajo el agua?

8.- ¿Qué cambios experimenta un organismo cuando es sometido a inmersiones

profundas?

9.- ¿Qué factores influyen en el intercambio gaseoso entre los alvéolos pulmonares y los

capilares sanguíneos?

10.- Explique un ejemplo de la aplicación de la ley de Dalton dentro de un sistema biológico

Bibliografía

Atkins, P. W. Fisicoquímica. 1991. a

Edición. Editorial Addison-Wesley Iberoamericana.

México.

Jiménez Vargas – Macarulla. 1986. Fisicoquímica Fisiológica. 6ª. Edición, Editorial

Interamericana, México.

Maron y Prutton. 2002. Fundamentos de Fisicoquímica. 28ª. Reimpresión, Editorial Limusa

México.

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CONDICIONES MÍNIMAS DE SEGURIDAD

Es importante establecer las condiciones mínimas de seguridad en el empleo de los

diversos materiales que se utilizan en el desarrollo de las prácticas de Fisicoquímica

fisiológica.

MATERIAL BIOLOGÍCO

Rata de laboratorio (Rattus norvergicus )

El manejo y disposición inadecuados representa un riesgo para la salud, así como

ocasionar el deterioro del medio ambiente por lo que es necesario llevar a cabo lo

siguiente.

El procedimiento que se deberá llevar a cabo con este material biológico (cadáver), es el

siguiente:

1. El cadáver deberá ser introducido en una bolsa de plástico de color amarillo traslúcido,

además deberán estar marcadas con el símbolo universal de riesgo biológico y la leyenda

Residuos Peligrosos Biológico-Infecciosos.

2. Las bolsas se llenarán al 80 por ciento (80%) de su capacidad, cerrándose antes de

ser transportadas al sitio de almacenamiento temporal o su destino final (crematorio), no

podrán ser abiertas o vaciadas.

3. Deberán conservarse a una temperatura no mayor de 4°C (cuatro grados Celsius), en

almacenes temporales con sistemas de refrigeración o en refrigeradores en áreas que

designe el responsable del establecimiento generador dentro del mismo.

10

MATERIAL QUIRURGICO

Estuche de disección esencialmente navaja para bisturí, jeringas para insulina, hoja de

rasurar.

Los recipientes de los residuos peligrosos punzo cortantes deberán ser rígidos, de

polipropileno color rojo, que permitan verificar el volumen ocupado en el mismo, resistentes

a fracturas y pérdidas de contenido al caerse, destructibles por métodos físicos, tener

separador de agujas y abertura para depósito, con tapa(s) de ensamble seguro y cierre

permanente, deberán contar con la leyenda que indique "RESIDUOS PELIGROSOS

PUNZOCORTANTES BIOLOGICO-INFECCIOSOS" y marcados con el símbolo universal

de riesgo biológico

Los recipientes para los residuos peligrosos punzo cortantes y líquidos se llenarán hasta el

80% (ochenta por ciento) de su capacidad, asurándose los dispositivos de cierre y no

deberán ser abiertos o vaciados.

Referencias

-Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Protección

ambiental - Salud ambiental - Residuos peligrosos biológico-infecciosos

Clasificación y especificaciones de manejo

-Ley Federal sobre Metrología y Normalización

-Norma Oficial Mexicana NOM-001-SEDE-1999, Instalaciones eléctricas (utilización).

INSTRUCCIONES PARA ELABORACIÓN DE REPORTES

En una sola hoja, utilizable por ambos lados se elaborará un reporte sintetizado con

los siguientes puntos:

1. Portada, en 2 renglones colocar el nombre del alumno, grupo y número y nombre

de la práctica.

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2. Marco teórico con referencias, entre 100 y 120 palabras

3. Objetivos de la práctica

4. Desarrollo gráfico de la practica con diagramas y esquemas

5. Resultados, anexar tablas y graficas

6. Discusión, entre 100 y 120 palabras con referencias

7. Conclusión: justificar resultados con los objetivos de la práctica

8. Bibliografía: mínimo 3 referencias, omitir páginas web

9. Incluir cuestionario de evaluación contestado que se encuentra al final de

cada práctica.

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