INFORME PRÁCTICA DE LABORATORIO MICOLOGIA

PRESENTADO POR:ANDRES FELIPE GONZALES REYES

JOANA ANDREA REBOLLEDO CASASJULIAN DAVID ZULETA MEJIA

PRESENTADO A:GLORIA LEYTON

UNIDAD CENTRAL DEL VALLE DEL CAUCAFACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

IV SEMESTRE MEDICINANOVIEMBRE 2009

MARCO TEORICO

HONGOS

Grupo diverso de organismos unicelulares o pluricelulares que se alimentan mediante la absorción directa de nutrientes. Los alimentos se disuelven mediante enzimas que secretan los hongos; después se absorben a través de la fina pared de la célula y se distribuyen por difusión simple en el protoplasma. Junto con las bacterias, los hongos son los causantes de la putrefacción y descomposición de toda la materia orgánica. Hay hongos en cualquier parte en que existan otras formas de vida. Algunos son parásitos de organismos vivos y producen graves enfermedades en plantas y animales. La disciplina científica que estudia los hongos se llama micología.

ESTRUCTURALa mayoría de los hongos están constituidos por finas fibras que contienen protoplasma, llamadas hifas. Éstas a menudo están divididas por tabiques llamados septos. En cada hifa hay uno o dos núcleos y el protoplasma se mueve a través de un diminuto poro que ostenta el centro de cada septo. No obstante, hay un filo de hongos, que se asemejan a algas, cuyas hifas generalmente no tienen septos y los numerosos núcleos están esparcidos por todo el protoplasma. Las hifas crecen por alargamiento de las puntas y también por ramificación. La proliferación de hifas, resultante de este crecimiento, se llama micelio. Cuando el micelio se desarrolla puede llegar a formar grandes cuerpos fructíferos, tales como las setas y los pedos o cuescos de lobo. Otros tipos de enormes estructuras de hifas permiten a algunos hongos sobrevivir en condiciones difíciles o ampliar sus fuentes nutricionales. Las fibras, a modo de cuerdas, del micelio de la armilaria color de miel (Armilaria mellea), facilitan la propagación de esta especie de un árbol a otro. Ciertos hongos forman masas de micelio resistentes, con forma más o menos esférica, llamadas esclerocios. Éstos pueden ser pequeños como granos de arena, o grandes como melones.

MICOSIS Enfermedades producidas por la invasión de micromicetos, en los tejidos, es decir las infecciones causadas por hongos.

OBJETIVOS

Obtener conocimiento a partir de la preparación de cultivos caseros, así como la forma adecuada de montar muestras para su posterior observación con los instrumentos de laboratorio (microscopio).

Mediante la observación, determinar la manera correcta en que se deben tomar las muestras de lesiones en pacientes.

De acuerdo al área de toma de muestras en el paciente, junto con el análisis microscópico realizar un diagnostico y tratamiento.

Realizar cada una de las tareas provistas, teniendo en cuenta los implementos y demás normas de bioseguridad.

Gracias a la realización de cultivos caseros, obtener conocimiento sobre los medios en que mejor se desarrolla un hongo.

Comparar la forma de realización de la tinción adecuada para hongos en diferenciación con las antes realizadas para bacterias.

PRE LABORATORIO

1. Defina hifa, levadura, micelio, micelio vegetativo, micelio aéreo o reproductor, macroconidias, micrononidias Hongo filamentoso, hongo levaduriforme, tubo germinal, hongos dimórficos,

Hifas son elementos filamentosos cilíndricos característicos de la mayoría de los hongos. Están constituidos por una fila de células alargadas envueltas por la pared celular que, reunidas, forman el micelio poseen un tubo de longuitud variable formado por una pared celular rígida, en la que fluye protoplasma.

En los hongos verdaderos (reino Fungí) la pared está hecha de quitina. Las células de la hifa pueden formar un citoplasma continuo (un sincitio), en cuyo caso se habla también de hifas sifonales (hongos inferiores), o aparecer separadas por tabiques o septos (hongos superiores), y entonces diremos que son hifas septadas.

Levadura: Las levaduras se han definido como hongos microscópicos, unicelulares, la mayoría se multiplican por gemación y algunas por escisión. Históricamente, los estudios sobre microbiología enológica se han centrado en las levaduras pertenecientes al género Saccharomyces, que son las responsables de la fermentación alcohólica.

Las levaduras son los agentes de la fermentación y se encuentran naturalmente en la superficie de las plantas, el suelo es su principal hábitat.

Micelio: Sistema de hifas que constituye el talo de un hongo. Conjunto o masa de hifas que constituyen el cuerpo de un hongo. Es la fase vegetativa, perenne e hipogea del hongo. Talo de los hongos formado por células sin clorofila llamadas hifas.

Micelio vegetativo: Se encargan de la absorción de nutrientes, crecen hacia abajo, para cumplir su función.

Micelio aéreo o reproductor: Crecen hacia la superficie externa del medio y son los encargados de formar los órganos reproductores (endosporios) para la formación de nuevos micelios.

Macroconidias: Esporas de paredes delgadas, fusiformes, largas, moderadamente curvadas en forma de hoz, con varias células y de 3 a 5 septas transversales, con la célula basal elongada y la célula apical atenuada;

las macroconidias tiene un tamaño de 27 a 46 micras de largo por 3.0 a 4.5 micras de ancho.

Microconidias: Esporas unicelulares, sin septas, hialinas, elipsoidales a cilíndricas, rectas o curvadas; se forman sobre fiálides laterales, cortas, simples o sobre conidióforos poco ramificados. Las microconidias tienen 5-12 micras de largo por 2.5-3.5 micras de ancho.

Hongo filamentoso: Son Hongos Pluricelulares, formados por estructuras tubulares denominadas Hifas; las que se desarrollan, ramifican y entrelazan conformando una estructura llamada micelio. Producen colonias algodonosas o pulverulentas que son muy características. Al microscopio óptico, los hongos filamentosos presentan unas estructuras tubulares, formadas por múltiples células, que se denominan hifas.

Hongo levaduriforme: Producen colonias lisas que recuerdan a las bacterianas en medios de cultivo sólidos. Dichas colonias están formadas por agregados de células individuales denominadas levaduras

Hongo dimorfico: Algunos hongos y especialmente, las especies patógenas, muestran dimorfismo, es decir, dos formas de crecimiento. Estos hongos pueden crecer como moho o como levadura. A menudo, este dimorfismo depende de la temperatura de incubación: a 37ºC el hongo es levaduriforme mientras que a 25ºC es filamentoso.

Tubo germinal: Un tubo germinal se define como una extensión filamentosa de una célula levaduriforme sin estrechamiento en su origen, cuyo ancho suele ser la mitad de la célula progenitora y su longitud tres o cuatro veces mayor que la célula madre.

POST LABORATORIO

1. Haga un esquema representando la clasificación de las micosis superficiales según su etiología.

MICOSIS SUPERFICIALESm,

otr.violaceum, otros

MICOSIS SUPERFICIALESm,

otr.violaceum, otros

NO DERMATOFITICAS

NO DERMATOFITICAS

PIEDRA BLANCA

DERMATOFITICASDERMATOFITICAS

TIÑA NEGRA

PIEDRA NEGRA

TINEA, TIÑA (DERMATOFITOMICOS)

PITIRIASIS VERSICOLOR

MALASSEZIA GLOBOSA, M.SYMPODIALIS M.FURFUR.

TRICHOSPORON BEIGELII

PIEDRAIA HORTAE

HORTAEA WERNECKII

TIÑA CAPITIS

TIÑA CORPORISHERPES

CIRCINADO

TIÑA CRURIS

M.CANIS, M.GYPSEUM, T.VERRUCOSUM, T.MENTAGROPHYTES,T. TONSURANS, T.VIOLACEUM.

TIÑA PEDIS (PIE DE ATLETA)TIÑA UNGIUM (ONICOMICOSIS)

AA

TI

TIÑA FAVICATRICHOPHYTON

SCHONLËINI

T. RUBRUM M. CANIS T. MENTAGROPHYTES.

E.FLOCCOSUM T. RUBRUM

T.RUBRUMT.MENTAGROPHYTESE.FLOCCOSUM

TIÑA BARBAE

SICOSIS TRICOFÍTICA

2. ¿Que son las micosis superficiales dermatofiticas?

Son las micosis superficiales producidas por hongos filamentosos o dermatofitos que son capaces de lesionar la piel, el pelo y las uñas de los seres humanos. Sus características generales son que viven en y a expensas de la queratina; por tanto, provocan lesiones en piel, pelos y uñas, nunca en membranas mucosas ni semimucosas. Las lesiones que producen son secas y escamosas, excepto en las tiñas inflamatorias. Se caracterizan por ser sensibles a las preparaciones fuertemente ácidas, y al examen micológico directo se observan hifas verdaderas o micelios. No provocan lesiones profundas.

Estos hongos son patógenos primarios que poseen queratinizadas lo que les permite utilizar la queratina de esas estructuras como fuente de nitrógeno. Existen tres géneros de dermatofitos: Microsporum, Epidermophyton y Trichophyton, cada uno de ellos con varias especies.

Según su reservorio natural se clasifican en tres grupos: antropofílicas (infecciones crónicas y escasamente inflamatorias), zoofílicas y geofílicas (infecciones agudas e inflamatorias).

3. Mencione las características de las lesiones producidas por dermatofitos según su localización.

Las dermatofitosis se dividen en ciertos tipos dependiendo el área que afecten:

Tiña capitis: esta se subdivide dependiendo la entidad clínica que produzcan.

No inflamatoria: esta puede ser trocifitica o microsporica y sus características son pocas placas o una sola, de mayor tamaño, en la que todos los pelos están afectos y se rompen a pocos mm de su emergencia en la piel.

Inflamatoria o querion de Celso: Se inicia como una foliculitis profunda. En pocos días se forma una placa, generalmente única y dolorosa, sobre elevada, de color rojo vivo e indurada que se cubre de pústulas foliculares. Al presionarla lateralmente aparece abundante supuración por los orificios foliculares (signo de la espumadera). La propia reacción inflamatoria elimina el pelo que se desprende fácilmente con la tracción. Puede curar con alopecia cicatrizal más o menos evidente. Este tipo de tiña puede observarse también en la barba y otras zonas pilosas.

Favus: Producida por T. Schonleinii, excepcional hoy día en España, y caracterizada por el brote de pústulas foliculares que se desecan y solidifican para formar las típicas cazoletas fávicas, de color amarillo, umbilicadas y de consistencia terrosa. Cura con alopecia cicatrizal.

Tiña corporis: llamado también herpes circinado; forma medallones circulares u ovales de borde escamoso o vesiculoso, infiltrado, y centro eritematoescamoso, forma anular: borde rojo con centro curado; iris: placa cuajada de vesículas con tendencia a curar en el centro; placa con dos anillos concéntricos: consecuencia de nuevo brote desde el punto de inoculación; tinea faciei: en cara, que puede confundirse con lupus.

Comienza como una pequeña pápula que crece excéntricamente formando elementos circulares, arciformes con borde activo, microvesiculoso y escamoso con centro aparentemente sano a veces con discreta reacción escamosa. Únicas o múltiples que pueden confluir formando placas arciformes.

Tiña inguinal (cruris) o eczema marginado de Hebra: Se presenta como placas bilaterales, de borde eritematovesiculoso, tipo eczema, y centro castaño-eritematoso, con escamas furfuráceas, poco infiltrado y liquenificado; se localiza periné y región perianal, que llega a invadir zona proximal interna de muslos.

Cuando se demuestra, es preciso comprobar si no existe también una tinea pedís, especialmente en hombres, pues la caída del hongo por el pantalón a pies es la norma.

Tiña de la barba (barbae): Foliculitis tricofítica en barba y bigote, exclusiva de varones, más frecuente en zonas rurales.

Forma superficial: similar a la tinea corporis, muy frecuente en la nuca.

Forma media: es la “sicosis tricofítica”, que recuerda al impétigo, aunque más crónica, con más pústulas y con menos inflamación.

Forma profunda: con pústulas foliculares, abscesos y lesiones “tipo Querion”, que conforman una gran placa blanda, edematosa, eritematopustulosa, cubierta de escamocostra e incluso verrugosidades, que a la presión también emiten pus “en espumadera”, localizadas en regiones maxilares o sólo en el labio superior.

Tiña de los pies (pedís): llamada también tiña pedís o pie de atleta; Se localiza en pliegues interdigitales y plantas de pies, que es más fácil de adquirir por adultos jóvenes deportistas, principalmente en verano, que utilizan calzado oclusivo y, a menudo, andan descalzos por vestuarios públicos. Es infrecuente en la infancia y la vejez. Existen varias formas clínicas:

Forma crónica intertriginosa. Se caracteriza por eritema y descamación de los pliegues interdigitales, a menudo, con fisuración del fondo del pliegue. El cuarto espacio interdigital es el afectado con mayor intensidad y frecuencia, hasta el punto que la afección de los otros espacios interdigitales, con preservación del cuarto, debe hacer pensar en otros diagnósticos. Esta forma, a la que a menudo no se le presta la debida atención, constituye una excelente puerta de entrada a infecciones estreptocócicas que causan brotes repetidos de linfangitis y celulitis en la extremidad correspondiente.

Forma crónica hiperqueratósica: Caracterizada por un discreto eritema e hiperqueratosis que afecta a la planta, los bordes laterales y los talones y que, a veces, se extiende al dorso de los pies, adoptando una forma en mocasín.

Forma aguda dishidrosiforme o vesiculoampollosa En general, unilateral y caracterizada por el brote de vesículas agrupadas sobre base inflamatoria; a menudo, las vesículas se transforman en pústulas por sobreinfección. Las lesiones asientan, por lo general, en el arco plantar y los pulpejos de los dedos.

Tiña de las uñas u onicomicosis: Se observan fundamentalmente en el adulto y con frecuencia asociadas a tiñas de las manos o los pies. Son infecciones crónicas y de difícil tratamiento. Existen diversas formas:

Subungueal distal: Es la más frecuente. En ella no se produce perionixis y la uña empieza a afectarse por su extremo libre distal y los bordes laterales. Aparecen manchas amarillas o blanquecinas que van progresando en sentido proximal. Ello se acompaña de abundante hiperqueratosis subungueal que puede llevar a onicólisis. La lámina se vuelve muy engrosada, frágil y quebradiza.

Subungueal proximal: Es mucho menos frecuente. En ella la infección se inicia en el pliegue proximal y se extiende hacia el distal. Su presencia obliga a pensar en una inmunodeficiencia asociada.

Leuconiquia dermatofítica u onicomicosis blanca superficial Rara en las uñas de las manos. En ella se produce la infección primaria de la tabla externa de la lámina, y dan lugar a un blanqueamiento de la uña.

4. Mencione las micosis superficiales no dermatofíticas y sus respectivos

agentes etiológicos.

PITIRIASIS VERSICOLOR: La especie más frecuente es la

Malassezia globosa, seguida de la Malassezia sympodialis y de

la Malassezia furfur.

Tiña negra: Micosis superficial causada por el hongo

dematiáceo polimórfico denominado Hortae werneckii.

Piedra negra: Producida por un hongo dematiáceo de la clase

Ascomycetos denominado Piedraia hortae.

Piedra blanca: Producida por Trichosporon beigelii (cutaneum),

perteneciente a la familia Cryptococaceae.

5. Mencione las micosis superficiales oportunistas y diga cuáles son los

órganos que pueden afectar.

Las micosis por oportunistas son causadas por los hongos saprobios que se

trasforman en patógenos bajo diferentes condiciones del huésped; algunas

pueden ser:

Candidiasis: La Candidiasis superficial es una enfermedad producida por

Candida albicans, especie relacionada con

mayor frecuencia con esta enfermedad, la cual

forma parte de la flora normal del humano, ante

la presencia de factores predisponentes como

diabetes mellitus, obesidad, mal nutrición, entre

otros aprovecha la oportunidad para producir la

lesión característica que puede afectar tanto piel

como mucosas, pero puede presentarse

también en mucosa oral, tracto digestivo, piel y

tracto vaginal entre otros.

Otomicosis: Es una infección producida por

hongos que aprovechan la presencia de de algunos

factores y nutrientes requeridos por estos agentes

etiológicos en el conducto auditivo externo, para permitirles su crecimiento

como son proteínas, carbohidratos, humedad, temperatura y pH adecuado, que

puede ser aguda, subaguda, o crónica que afecta el epitelio escamoso del

conducto auditivo externo. Agente etiológico Aspergillus

Queratomicosis: Es una enfermedad producida por

hongos generalmente oportunistas (Aspergilus,

Fusarium, Candida), que pueden afectar al globo ocular

y a las partes blandas que lo rodean.

MATERIALES:

Cultivos caseros.

Muestras patológicas.

Caja de petri

Agua destilada

Tinta Parker azul

Microscopio

Laminas y laminillas

Pinzas de laboratorio

PROCEDIMIENTO:

1. Se extrajeron los hongos provenientes de las diferentes muestras y se procedió

a agregar agua destilada +tinta Parker azul.

2. Se agrego KOH al 20%

3. Se calentó al mechero unos minutos.

4. Montar las preparaciones entre lamina y laminilla para proceder a observar al

microscopio en objetivo 40x.

Muestras en laboratorio análisis de resultados:

Se estudiaron muestras de papa, cebolla, piña, piel y uñas humanas además de

las proporcionadas por nuestros compañeros como fue raspado de lesiones.

Muestra de piel de Cristian Lorenzo (área nuca): Se observaron levaduras

escasas debido a que estas bajo tratamiento.

Diagnostico diferencial: Pititiasis versicolor, vitiligio, tiñas.

Diagnostico: Pititiasis versicolor debido a que el paciente refiere demasiado

calor y traspiración excesiva; y se refuerza con la presencia de levaduras

proveniente de las escamas de la lesión.

La tiña versicolor o pitiriasis versicolor es relativamente común y es causada

por el hongo Pityrosporum ovale, un tipo de hongo levaduriforme que

normalmente se encuentra en la piel humana. Sólo causa problemas bajo

ciertas circunstancias.

Tratamiento: clotrimazol, ketoconazol y miconazol. Presentación: tópico.

Muestra de piel de Edwin Tamayo (área brazo, nuca y espalda): Se

observaron abundantes numeró de células epiteliales se descarta micosis ya

que no hay presencia de hongos.

Uña del pie (muestra traída por un estudiante): Se observaron hifas

septadas y levaduras.

Comentada a continuación.

Uña (muestra proporcionada por el docente): Se observaron micelios e hifas

septadas. La infección ha disminuido debido a que el paciente esta en

tratamiento.

La micosis mas frecuente que ataca las uñas es la dermatofitosis mas

específicamente las onicomicosis producidas por levaduras denominadas

dermatofitos entre los que tenemos: Epidermophiton, el Microsporum y el

Tricophyton .Es frecuente encontrar asociado otras infecciones por

dermatofitos como ser tinea pedís, tinea cruris y tinea corporis.

Tratamiento: itraconazol, fluconazol y terbinafina, penetran en la matriz

ungueal rápidamente y presentan efecto terapéutico prolongado. Es importante

destacar que esta micosis es muy difícil de tratar debido a que se necesita

cuidados constantes.

CULTIVOS CASEROS:

Muestra de piña: Se observo cabeza del Aspergillus.

El hongo que afecta la piña ya a otras frutas es el Aspergillus Níger que es un

hongo que produce un moho negro.

Aspergillus es un ejemplo de lo que denominamos "patógeno oportunista".

Puede causar enfermedad alérgica, infección local o ser responsable de

cuadros invasivos de gran gravedad.

Tratamiento: El mas usado en la Asperguillosis es itraconazol; la Anfotericina

B intravenosa el tratamiento de elección para pacientes con aspergilosis

invasiva.

Muestra de papa: Se observaron levaduras e hifas.

La papa se ve afectada principalmente por dos tipos de hongos el Rhizoctonia

solani y Spongospora subterránea, mejor conocidas entre los campesinos

como ‘la costra negra’ y ‘la sarna polvosa’.

Muestra de pan: Se observaron hifas sin tabiques ( esporangio)

El hongo mas común en el pan es un moho llamado RHIZOPUS, generalmente

saprófitos, presenta el aspecto de una suave pelusa grisácea o verdosa que se

desarrolla en la superficie de la materia orgánica en descomposición sobre la

que viven.

Los Rhizopus son hongos que se encuentran en frutas y vegetales en

descomposición, en heces animales y pan añejo. Son bastante comunes y se

dan en todo el mundo.

Algunas spp de Rhizopus son agentes oportunistas de cigomicosis humana

(enfermedad relacionada con el tracto gastrointestinal y la piel). Pueden causar

serias (y con frecuencia fatales) infecciones en humanos y en animales debido

a su rápido crecimiento a relativamente altas temperaturas. Algunas especies

son patógenos vegetales.

Muestra de cebolla: Se observo cabeza de un Risopus sin micelio .Hongo

mencionado anteriormente.

CONCLUSIONES

Se determino la forma correcta en que se deben tomar las muestras de una

lesión.

Se obtuvo conocimiento sobre los exámenes que se deben mandar al paciente

así como la observación clínica para realizar un diagnostico y tratamiento

adecuados.

Se diferenciaron distintas clases de hongos tanto en su forma patógena

(muestras de pacientes) como en su estado saprobio (cultivo casero).

Se observaron características morfológicas propias de diferentes clases de

hongos que ayudaron a determinar mas fácilmente cada diagnostico.

Dadas los medios en que crecieron lo hongos en las muestras caseras, se

pudo determinar que, estos los podemos encontrar de manera habitual en

ambientes comunes.

Se comprendió que dadas las características de los hongos (esporas), se

puede desarrollar una patología muy fácilmente, por ello la importancia de las

normas de bioseguridad para el desarrollo del laboratorio.