PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATLICA DEL ECUADORFACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALESESCUELA DE CIENCIAS QUMICAS

LABORATORIO # 3

DATOS INFORMATIVOSASIGNATURA: BIOQUMICANIVEL: 6NOMBRES: DANIEL BOLAOSJUAN FRANCISCO RODAS

TITULO DE LA PRCTICA: PRUEBAS DE IDENTIFICACIN Y PROPIEDADES DE LOS LPIDOS

FECHA DE REALIZACION DE LA PRCTICA: 18 DE FEBRERO DE 2014

1. Objetivos

Realizar pruebas de identificacin para lpidos utilizando aceite de oliva como muestra. Calcular el ndice de saponificacin del aceite de oliva mediante hidrlisis bsica.

2. Resumen

3. Introduccin

Loslpidosson un conjunto demolculas orgnicas(la mayorabiomolculas) compuestas principalmente porcarbonoehidrgenoy en menor medidaoxgeno, aunque tambin pueden contenerfsforo,azufreynitrgeno. Tienen como caracterstica principal el serhidrfobas(insolubles enagua) y solubles endisolventesorgnicos como labencina, elbencenoy elcloroformo. En el uso coloquial, a los lpidos se les llama incorrectamentegrasas, ya que las grasas son slo un tipo de lpidos procedentes deanimales.Los lpidos cumplen funciones diversas en losorganismos vivientes, entre ellas la de reserva energtica (como lostriglicridos), la estructural (como losfosfolpidosde lasbicapas) y la reguladora (como lashormonasesteroides).Elnmero de saponificacinondice de saponificacines el nmero de miligramos dehidrxido de potasiorequeridos parasaponificar1g degrasabajo condiciones especficas. Es una medida para calcular elpeso molecularpromedio de todos loscidos grasospresentes.ndice de saponificacin: se define como losmiligramosde KOH necesarios para saponificar un gramo delpido.La palabra saponificar significa producirjabn, lahidrlisisalcalina de untriglicridoproduce glicerol y las correspondientes sales de cidos grasos que forman el triglicrido. Por ejemplo: TRIPALMITINA + 3 KOHglicerol+ 3 C15H31COOK JabnPeso molecular de la tripalmitina: 860 g/mol Peso molecular del KOH: 56 g/molPor cada 860 g de tripalmitina se necesitan 168.000 mg de KOHOsea 168.000 mg de KOH / 860 g de tripalmitina = I.S.

Como siempre se requieren 3 moles de KOH para la hidrlisis alcalina, podemos decir que I.S.=168.000/peso molecular del triglicrido. Se puede observar que el ndice de saponificacin es inversamente proporcional al peso molecular del trigicerido.

Parte experimental

Materiales: Tubo de ensayoMechero Centrifuga Varilla de vidrio Pipeta Baln de destilacin Refrigerante Vasos de precipitacin.

Reactivos: Solucin de Sudn III KOH alcohlico 0.5 N ter de petrleo Acetona Cloroformo N-Hexano Aceite de oliva

Procedimiento Solubilidad Ponga en 5 tubos de ensayo 2ml de un aceite cualquiera Aadir a primer tubo 2ml de agua, al segundo 2 mL de ter de petrleo, al tercero 2 mL de cloroformo, al cuarto 2 mL de acetona y al quinto 2ml de n -hexano Agitar fuertemente los tubos y dejar reposarTincin Colocar 2ml de la muestra en 2 tubos de ensayo. Aadir a uno de los tubos 5 mL de solucin alcohlica de Sudn III y al otro tubo aadir 5mL de solucin acuosa de rojo 40 Agitar ambos tubos y dejar reposar 10 minutos Registrar los resultados

Indice de saponificacin Pesar un baln esmerilado de 250 mL vaco y seco y Colocar dentro del baln aproximadamente 2 g. de manteca de cerdo Aadir 40 mL de KOH 0.5 N alcohlico, conectar el refrigerante, calentar a bao mara por 30 minutos, enfriar y desmontar el equipo En el baln poner unas 8 a 10 gotas de fenolftalena y neutralizar el exceso de KOH con HCl 0.5 N desde una bureta, hasta desaparicin del color rosa. Anotar el volumen de HCl utilizado En un Erlenmeyer colocar 40 mL de KOH 0.5 N y unas 8 a 10 gotas de fenolftalena. Neutralizar con HCl 0.5N hasta desaparicin del color rosa. Anotar el volumen consumido de HCl (blanco)

Resultados

Resultados

Muestra: Aceite de Oliva

Tabla 1: Prueba de tincin

Solucin Observacin

Sudn IIILa muestra aceite se tintura al mezclar con esta solucin.

Rojo 40 0,5%Se forma una emulsin, se mezcla muy uniformemente con el aceite

Tabla 2: Prueba de solubilidad

Solvente solubleInsoluble

AguaX

ter de petrleoX

N-hexanoX

CloroformoX

AcetonaX

INDICE DE SAPONIFICACIN

Cuestionario

Indique como se realiza el metabolismo de los lpidos en el ser humano

Las clulas obtienen energa a partir de los cidos grasos. El ser humano obtiene grasas de la dieta, movilizan grasas almacenadas en tejidos especializados (tejido adiposo), y en el hgado convierten en grasas los glcidos que se encuentran en exceso en la dieta para exportarlos a otros tejidos. En promedio, los triacilgliceroles de la dieta suministran el 40% o ms del total de energa requerido diariamente por los seres humanos. Los triacilgliceroles cubren ms de la mitad de las necesidades energticas de algunos rganos, en particular del hgado, corazn y msculo esqueltico en reposo.

Qu enzima logra en el aparato digestivo la hidrlisis de las grasas?

Boca: lipasa bucal Estmago: lipasa gstrica Intestino delgado: lipasa pancretica- colipasa, esterasa del colesterol, lipasa pancretica dependiente de sales biliares.

Indique lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudn III y aceite-tinta y explique a qu se debe la diferencia entre ambos resultados.

En la mezcla de aceite y sudan III: se forman micelas.

Aceite y tinta: la tinta queda pegada en el tubo, ya que esta contiene agua, por lo tanto no hay miscibilidad, no es miscible con el lpido.

Qu ocurre con la emulsin de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo? Y con la de benceno y aceite? A qu se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?

Al pasar unos minutos de reposo, la emulsin con agua desaparece por la reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa, que por ser menos densa, se sita sobre el agua, de mayor densidad.

En el caso de la emulsin con benceno aparece una disolucin homognea por ser afn con este solvente

Las diferencias se basan simplemente en la solubilidad de las grasas ya que son insolubles en agua pero son solubles en disolventes apolares como el benceno.

Conclusiones

Bibliografa Antonio Pea. Bioqumica. 2da Edicin. Pg. 109 Metabolismo de lpidos, lpidos de importancia fisiolgica, tomado de: http://acemucsc.galeon.com/articulos/Bioquimica/metabolismo_de_lipidos.htm; 08-marzo del 2014